＂外源基因清除＂技术(Gene-Deletor)原理、特点及其潜在应用前景

"外源基因清除"技术(Gene-Deletor)是美国康涅狄格大学华裔教授李义领导的研究小组发展起来的,有望成为解决转基因植物环境安全性和食品安全性问题的有力工具。象计算机"卸载"应用软件一样,"外源基因清除"技术利用器官特异或诱导型启动子、重组酶及融合识别位点构建基因表达元件,能将转基因植物中的全部外源基因在完成其功能作用后自动地从花粉、种子和果实中彻底清除。最近,美国著名"社会技术"公司公布了未来20年对社会最具影响力、最有前景的技术创新领域一系列12个简报,其中第10个专题推介了"外源基因清除"技术。本文综述了"外源基因清除"技术的原理和技术优点,介绍并讨论了李义对该技术在作物有性繁殖中的应用以及在解决食品安全性问题上的应用方略。

重组腺相关病毒载体类体内基因治疗产品临床试验申请药学研究与评价技术指导原则(一)

一、前言体内基因治疗产品一般选用适当的载体或转染方式将外源基因(或基因编辑工具)导入人体,通过替代、补偿、阻断、修正特定基因以达到治疗疾病的目的。重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus,rAAV)载体因其理化性质稳定、致病性弱、整合风险低、外源基因表达持久等结构和生物学方面的优势,已成为体内基因治疗领域研究、应用最为广泛的载体之一。

转基因水稻外源蛋白检测技术研究进展

随着转基因水稻研究及其向产业化的发展,检测转基因水稻中存在的外源蛋白成为该领域的研究热点。阐述了目前检测转基因水稻外源蛋白(EPTR)采用的技术手段,并列举了一些可能用于EPTR检测的潜在蛋白检测技术,初步分析了EPTR检测技术需要解决的问题,并预测了EPTR检测技术的发展趋势。

外源基因导入技术在主要农作物育种上的应用进展

以国内科技期刊上发表的文献研究结果为依据,综述了农杆菌介导技术、基因枪导入技术、花粉管通道技术与激光微束穿刺技术在小麦、水稻、棉花、大豆、油菜等主要农作物育种上的应用进展。同时,还简要介绍了其中主要外源基因导入技术的基本原理,并评价了其优缺点。

植物外源基因直接导入技术及其在禾谷类作物中的应用

外源基因直接导入技术是单子叶植物基因工程研究的核心内容,近年来其发展十分迅速。本文较为系统地介绍了这一技术的各种新方法及其特点,并分析比较了这些方法的优缺点和应用前景,同时还介绍了利用这些方法在禾谷类作物转基因研究中所取得的成果。

外源基因直接转移技术之评价

外源基因直接转移技术有ＰＥＧ法、电击法、基因枪法、微注射法、脂质体法、生殖细胞转化法等．本文对它们进行了比较分析，指出它们各自的优缺点。

基因工程与外源DNA导入技术

基因工程是把目的基因与适当的载体相连接形成重组ＤＮＡ， 并引入到适当的寄主细胞中进行复制和表达； 外源ＤＮＡ 导入技术是将供体总ＤＮＡ的片段， 在自花受粉后一定时期内， 使其沿着花粉管通道或其他方法进入胚囊， 转化受精卵或其前后的细胞． 基因工程方法思路清晰、原理清楚、目的明确， 但操作繁琐， 费用高； 外源ＤＮＡ导入技术简便易行， 费用低， 但目的性不强， 工作量大． 如将两种方法结合使用， 可降低费用， 提高整合率．

用荧光原位杂交技术检测hEPO转基因山羊染色体上外源基因的整合状况

目的 对采用受精卵显微注射方法获得的 3头hEPO转基因山羊进行检测和整合状况分析。方法 用荧光原位杂交的方法 ,以正常羊及正常人染色体标本为对照 ,通过生物素标记的探针与转基因羊染色体标本进行杂交。结果 经信号放大及DAPI染色后 ,3头转基因羊分别在不同染色体上各有一对明显的荧光信号 ,而对照组无信号。结论 hEPO基因在转基因山羊染色体上的整合是单位点整合 。

转基因食品中外源基因非预期效应的分子检测技术

转基因食品中外源基因的非预期效应可以引起转基因食品的营养成分含量发生变化 ,甚至产生一些新的毒性物质 ,是转基因植物食品安全性评价的重要内容之一。由于外源基因非预期效应的不可预见性 ,因此用常规的分析技术难以准确测定。利用蛋白质组定量分析技术和基因芯片技术从蛋白质组和mRNA水平上比较转基因植物食品和非转基因植物食品的基因表达差异 ,是检测外源基因非预期效应的有效手段。文中对利用蛋白质组分析技术和基因芯片技术检测转基因食品中外源基因非预期效应的应用进展进行了综述分析。

多重qPCR技术检测幽门螺杆菌及其耐药基因用于精准治疗的初步探讨

目的评估不同来源标本幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)耐药基因检测的准确性及精准用药后的治疗效果。方法411例患者利用^(13)C/^(14)C及多重qPCR技术检测H.pylori及耐药基因,Kappa检验评估试剂盒检测胃黏膜、粪便及唾液等结果与^(13)C/^(14)C检测结果的一致性,统计H.pylori检出率、耐药率。其中试剂盒检测141例H.pylori阳性者为精准治疗组;同时期200例^(13)C/^(14)C检测H.pylori阳性者为传统治疗组,分别统计H.pylori清除率。结果胃黏膜的阳性检出率(34.3%)最高,接近^(13)C/^(14)C的阳性检出率(37.2%),其次是粪便(28.7%),检出率最低是唾液(9.2%)。胃黏膜与^(13)C/^(14)C检测一致性最好(Kappa=0.962,P<0.001),粪便与^(13)C/^(14)C检测一致性较好(Kappa=0.874,P<0.001);唾液与^(13)C/^(14)C检测一致性差(Kappa=-0.010,P=0.662)。胃黏膜检测141例H.pylori阳性者有64例耐药,总耐药率为45.4%。甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林及左氧氟沙星耐药率分别为23.4%、37.6%、2.1%及39.7%。唾液检测38例H.pylori阳性者有9例耐药,总耐药率为23.7%。甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林及左氧氟沙星耐药率分别为13.2%、23.7%、0及18.4%。粪便检测118例H.pylori阳性者有37例耐药,总耐药率为31.4%。甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林及左氧氟沙星耐药率分别为13.6%、20.3%、0.8%及24.6%。精准治疗组清除率优于传统治疗组(P<0.001)。结论基于多重qPCR技术的试剂盒可以用来检测H.pylori及其耐药基因。其中胃黏膜和粪便H.pylori检出率较高,可以作为临床检测H.pylori及其耐药基因的合适样本,从而指导临床用药达到精准治疗。

科学家用基因组技术首次从感染细胞清除HIV

[导读]美国坦普尔大学研究人员21日说，他们利用基因组编辑技术，首次成功地把艾滋病病毒从培养的人类细胞中彻底清除。 新华网华盛顿7月21日电 美国坦普尔大学研究人员21日说，他们利用基因组编辑技术，首次成功地把艾滋病病毒从培养的人类细胞中彻底清除。“这是朝着永久治愈艾滋病方向迈出的重要一步，”参与研究的卡迈勒·哈利利教授在一份声明中说，“这是一项令人激动的发现，但不是说目前就能进入临床应用，它只是概念性地证明，我们走在正确的方向上。”

外源基因高效检测技术与水稻产量性状功能基因组研究取得阶段进展

近日，由中国科学院遗传与发育研究所承担的“十二五”国家863计划现代农业技术领域“植物分子设计与品种创制技术”主题项目和“外源基因组区段／基因高效转移与检测遗传效应分析”、“水稻产量性状功能基因组”两个课题中期检查会议在北京召开。国家最高科学技术奖获得者、中国科学院院士李振声，科技部农村司、农村中心的相关同志，项目首席专家，相关课题负责人以及合作单位的主要研究人员共计30余人参加了会议。

美利用基因剪辑技术 成功清除潜在的艾滋病病毒

美国坦普尔大学神经科学研究院主任卡迈勒·哈利利教授和他的同事利用基因组编辑技术，首次成功地从人类细胞中彻底清除了潜在HIV-1病毒。该项研究成果发表在美国《国家科学院学报》上。研究人员表示，这是朝着永久治愈艾滋病方向迈出的重要一步。

实时荧光定量PCR技术检测转基因大豆方法的建立

采用实时荧光定量PCR技术 ,通过使用特异的引物和探针 ,对大豆中的内源基因Lectin和转基因大豆中的外源基因EPSPS进行了定量检测 ,建立了Monsanto公司生产的商业化转基因大豆Roundup Ready○R的定量PCR检测方法。该方法的检测灵敏度 <0 0 1% ,是国际上设定的转基因最低限量的 10

外源DNA导入花粉管通道技术的发展和应用

本文综述了花粉管通道法的创立与发展,以及应用此方法所取得的一系列研究成果,对遗传转化中所涉及的机理和分子验证进行了探讨,并且分析了影响花粉管通道法导入外源基因的因素,进一步比较了该方法较其它常用的转化法的优势与局限性。

安全转基因技术研究进展

转基因生物安全性问题已引起了公众的普遍担忧,严重制约了转基因技术成果的推广应用。近年来,研究者探索了不同的技术策略来解决转基因生物的安全性问题,安全转基因技术成为当前转基因研究的热点之一。文章介绍并评价了几种主要的安全转基因技术,包括无选择性标记基因技术、安全标记基因技术、叶绿体转化技术、终止子技术、雄性不育技术、外源基因删除技术。其中,外源基因删除技术为实现转基因生物的安全应用展示了诱人的前景。最后,对探索新的安全转基因技术策略保障转基因生物安全提出了建议。

基因枪转化技术在棉花遗传转化上的应用

将外源基因导入棉花的方法很多,目前,最受瞩目的是农杆菌介导法和基因枪转化法。本文对基因枪转化法的基本原理、发展情况、技术的优缺点、影响转化率的主要因素以及此方法在棉花遗传转化中的研究动态进行了分析。

转基因植物发展状况及外源基因在后代中遗传分离研究进展

转基因植物近年来得到迅猛发展。本文综述了转基因植物 ,特别是转基因林木的的发展现状。并从单基因位点孟德尔遗传 ,多基因位点孟德尔遗传以及非孟德尔式遗传三个方面介绍了外源基因在转基因植物后代中遗传分离的研究进展。并就影响外源基因遗传分离的因素进行了讨论。

农业分子育种──从花粉管通道向棉花导入外源基因

农业分子育种──从花粉管通道向棉花导入外源基因倪万潮，黄驻麒，张震林，陈松，周宝良，徐英俊，顾立美，沈新莲，钱思颖（江苏省农科院经作所南京２１００１４）广义地说，遗传工程是一项综合性的高技术系统工程，包括基因的分离与改造、基因转移，以及转基因产物（品...

转基因技术在动物遗传改良上的应用进展

简要介绍了几种比较常用的转基因方法,包括显微注射法、脂质体介导法、电转染法、胚胎干细胞法、病毒载体法、精子载体法、卵巢直接注射法。传统的转基因方法与基因打靶、体细胞核移植、RNA干扰以及线粒体转移技术相结合,在基因功能研究和疾病治疗中发挥越来越重要的作用。特别是近年来在植物上出现的外源基因清除技术,为我们在动物上彻底去除外源基因的影响提供了新思路。