基于PI3K/AKT信号通路探究红景天-鬼箭羽药对对人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的作用机制及配伍规律

目的:基于高效液相色谱法和体外实验探究红景天-鬼箭羽药对(下称“天羽”药对)抗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的配伍规律及作用机制。方法:通过高效液相色谱法测定“天羽”药对的单煎液以及不同配伍比例的合煎液(2∶1,1∶1,1∶2)中红景天苷的含量。通过体外实验CCK-8、PCR和Western Blot法检测肿瘤坏死因子α诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(human fibroblast-like synoviocyte rheumatoid arthritis,HFLS-RA)增殖、mRNA及蛋白表达。结果:“天羽”药对不同配伍比例(2∶1,1∶1,1∶2)的合煎液中红景天苷的含量均高于红景天单煎液,且配伍比例为1∶1时红景天苷的含量最高。CCK-8实验结果表明,“天羽”药对可对HFLS-RA细胞的增殖起到抑制作用。PCR和Western blot实验结果表明,“天羽”药对可显著降低HFLS-RA细胞中p-PI3K、p-AKT、MMP1、MMP3和MMP9 mRNA和蛋白的表达,增加TIMP1 mRNA和蛋白表达。结论:“天羽”药对可有效抑制HFLS-RA细胞增殖,其最佳的配伍比例为1∶1,作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路,进而调节MMPs/TIMPs平衡有关。