“天-地-人”三才灸法治疗复杂证型感冒发热的探索与经验——关于新型冠状病毒肺炎早中期及康复期患者应用艾灸的思考与建议

“天-地-人”三才灸法是在中医整体观指导下以合理的灸量同时艾灸百会、神阙、涌泉三部穴位区域,并根据证型需要施以补泻的灸疗模式,该法对复杂证型包括外感或内伤(单一因素或者合邪)导致的发热均具有较好疗效。新型冠状病毒肺炎(新冠肺炎)早期寒湿疫毒自口鼻而入,侵袭肺脾胃肠,实施三才灸法可以温阳益气、健脾化湿,最终达到三才通利、邪秽消散、正气通达、正邪两安的治疗效果。本疗法简单易行,在保证合理灸量和正确补泻的前提下,扶正与祛邪并举,既能增强人体自组织能力以防病、抗病,又能提高人体系统开放条件以助疫疠湿毒排出体外,同时还能避免多种辨证体系不统一或者辨证不准造成误治的弊端。鉴于此,建议针对新冠肺炎早中期患者辅助使用“天-地-人”三才灸法以阻断轻中症向危重症转化的途径,对邪去正虚的康复期患者使用本法具有尽快提升免疫力、愈后防复作用。

运用“天-地-人”三部配穴理论探讨针刺治疗前庭神经炎验案

前庭神经炎又称前庭神经元炎,是由于前庭神经发生炎症所导致的一种突发性眩晕疾病。临床上以眩晕、自发性眼球震颤为主要表现,严重者伴恶心呕吐、走路不稳、出汗等症状,但无耳鸣、耳聋等耳部受累症状及中枢神经受损等表现。前庭神经炎属中医“眩晕”范畴,其病位在脑窍,病变脏腑多与肝、脾、肾相关,病机以风、火、痰、瘀扰乱清空为标,以气血不足、肝肾亏虚、脑窍失养为本,临床上常见本虚标实证,以补虚泻实、调整阴阳为治疗总则。杨孝芳教授基于“天-地-人”三部配穴理论,谨守天地人合一思想,治疗时重视标本同治,运用针刺疗法治疗前庭神经炎。现将其具体临床思路整理如下,并附典型医案1例,以期为治疗前庭神经炎提供新的临床治疗思路。

全国名老中医药专家常小荣基于“经脉-脏腑相关”理论辨治脾胃病特色探骊

常小荣教授认为“经脉-脏腑相关”是经络学说的核心理论,对临床工作有重要指导意义。总结常小荣教授基于“经脉-脏腑相关”理论辨治脾胃病的学术经验,在临床诊治脾胃病过程中注重经脉辨证与脏腑辨证相结合,治则以调畅中焦、调和五脏气机为要,辨证严谨,选穴精准,以四白、梁门、足三里为治疗脾胃病的基础用穴,并注重灸法的运用。常小荣教授提倡学习经典与继承创新,坚持研究与临床相结合,为传承发展“经脉-脏腑相关”理论作出了重大贡献。

丝氨酰-天冬氨酰-谷氨酸三肽对低密度脂蛋白吸附性能的研究

目的研究丝氨酰 -天冬氨酰 -谷氨酸 (SDE)负电性三肽仿生吸附剂对低密度脂蛋白 (LDL)的吸附。方法以聚丙烯酰胺微球为载体 ,SDE三肽为配体 ,通过两种方法将配体固定到载体上制成吸附剂。1 )戊二醛法 :通过用戊二醛及氰基硼氢钠活化氨乙基化的聚丙烯酰胺微球载体进而偶联上SDE配体。2 ) 1 -乙基 - 3- ( 3-二甲基氨丙基 ) -碳二亚胺 (EDC)法 :先以EDC为偶联剂将己二胺引入聚丙烯酰胺微球载体的碱水解衍生物中 ,再用EDC将SDE配体偶联到载体上。最后用体外静态吸附法来检测吸附剂的吸附效果。结果用两种方法制备的吸附剂对LDL都有一定的亲和吸附能力 ,在吸附体系中有高浓度的Ca2 +存在时 ,效果更好 ;用戊二醛固定化配体制成的吸附剂的吸附效果较用EDC偶联配体制成的吸附剂好。结论SDE三肽对LDL有一定的亲和吸附能力 。

基于“天-地-人”三才医学模式的四川湿热病证易感性成因探讨

近年来湿热致病逐渐引起医家们的重视,同时也是广大中医和中西医结合科技工作者的研究热点。笔者在临床实践中,观察发现湿热邪气是四川地区最重要的致病因素,四川人罹患湿热病证的机率也明显高于其他病证,四川地区对湿热病证具有高度易感性。笔者立足"天-地-人"三才医学模式探索、总结四川人易感湿热病证的成因,为进一步制定四川人湿热病证防治对策提供研究基础。

三磷酸腺苷敏感性钾通道开放剂对大鼠脑缺血再灌注后神经元凋亡及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-8表达的影响

目的 研究三磷酸腺苷敏感性钾通道(KATP)开放剂对大鼠脑缺血再灌注后神经元凋亡和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(caspase)-8 表达的影响.方法 200只Wistar雄性大鼠随机分为假手术组、对照组、KATP开放剂预处理组(开放剂组)及KATP开放剂+阻断剂预处理组(阻断剂组).应用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,应用原位末端标记法(TUNEL)、免疫组化染色、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测脑缺血再灌注后各组脑组织凋亡细胞数和caspase-8 mRNA及蛋白的表达.结果 (1)缺血再灌注12 h、24 h、48 h、72 h各时间点凋亡细胞数,开放剂组较对照组和阻断剂组显著减少(P＜0.05～0.01),阻断剂组与对照组间各时间点差异无统计学意义.(2)缺血再灌注12 h、24 h、48 h、72 h各时间点caspase-8蛋白表达,开放剂组显著低于对照组和阻断剂组(P＜0.05～0.01),阻断剂组与对照组间各时间点差异无统计学意义.(3)缺血再灌注各时间点caspase-8 mRNA表达,开放剂组均显著低于对照组和阻断剂组(均P＜0.01), 阻断剂组与对照组各时间点相比差异无统计学意义.结论 KATP开放剂能显著减少脑缺血再灌注后神经元凋亡和caspase-8 mRNA及蛋白的表达;KATP开放剂可能通过抑制死亡受体通路发挥脑保护作用.

丝氨酰-天冬氨酰-谷氨酸三肽吸附低密度脂蛋白的机理的探讨

以聚丙烯酰胺(PAM)微球为载体,丝氨酰-天冬氨酰-谷氨酸(SDE)三肽为配体,通过两种方法将配体偶联到载体上制成吸附剂。采用体外静态吸附法检测吸附剂的吸附效果,考察SDE三肽仿生吸附剂对低密度脂蛋白(LDL)的吸附并探讨其机理。结果表明:两种方法制备的吸附剂对LDL都有一定的亲和吸附能力,Ca2+可通过桥接LDL所含磷脂极性头部的磷酸基团和吸附微珠配体上的羧基及交联相邻LDL磷脂间的磷酸基团,增大LDL吸附到吸附微珠上的机率,进而提高其吸附率。用戊二醛固定化配体制成的吸附剂因表面含有更多能与LDL相互作用的基团(COOH),更有利于LDL的吸附。

基于“天-地-人三部”配穴理论探讨针灸治疗糖尿病性动眼神经麻痹的可行性

动眼神经麻痹是糖尿病神经系统病变中常见的并发症之一,临床表现为上眼睑下垂、眼球运动不灵活、视物模糊、复视等。杨孝芳教授根据“天-地-人三部”配穴理论,总结出治疗糖尿病性动眼神经麻痹的穴位处方,即睛明、瞳子髎、球后、四白、风池、完骨、天柱、关元、气海、中脘、肝俞、脾俞、肾俞、合谷、足三里、三阴交、太溪、太冲、光明,取得了良好的疗效。现总结杨孝芳教授的临证经验,以期为临床治疗糖尿病性动眼神经麻痹提供新思路。

苦味酸-天狼猩红偏振光法在肝纤维化研究中的应用

目的探讨苦味酸-天狼猩红偏振光法在肝纤维化研究中的应用。方法取肝穿组织石蜡切片分别进行苦味酸-天狼猩红染色和Masson三色染色,检测肝组织中的胶原纤维,比较二者的差异性。结果苦味酸-天狼猩红染色的切片其纤维化部位颜色鲜明,四型胶原呈不同色彩;苦味酸-天狼猩红染色和Masson三色染色对纤维化部位的定位一致,对纤维化面积的检测无显著差异性(P<0.05)。结论应用苦味酸-天狼猩红染色处理的切片能区分四种类型的胶原纤维,且可结合图像分析系统测定肝纤维化面积,评估肝纤维化组织的修复程度,为临床诊断及治疗提供帮助。

PEG-PLA-PGL/RGD涂层支架对冠脉支架置入术后再狭窄的影响

目的探PEG-PLA-PGL/RGD涂层支架置入后对猪冠状动脉内皮化及内膜增生的影响。方法以PEGPLA-PLG聚脂肪酸为载体,通过载体接枝精氨酸-甘-天冬氨酸三肽聚合物(RGD),制成生物可降解高分子载RGD冠脉支架。实验分为裸支架组、紫杉醇涂层支架组、PEG-PLA-PGL/RGD涂层支架组,每组实验小型猪6只,将相应支架分别置入到每组猪的冠状动脉损伤段,分别4周及12周后处死,取出支架段血管行病理学观察及计算机图像分析测定管腔面积(lumen area,LA)、内弹力膜面积(internal elastic membrane area,IEMA),并根据LA及IEMA计算出新生内膜面积(neointima area,NA)及面积狭窄百分数(percentage of area stenosis,%AS)。结果 PEG-PLA-PGL/RGD涂层支架组内膜增生面积较裸支架组明显减低(P<0.05),PEG-PLA-PGL/RGD涂层支架组内膜增生面积与紫杉醇涂层支组无明显差别(P>0.05)。结论 PEG-PLA-PGL/RGD涂层支架较裸支架,可明显加速内皮修复,明显降低再狭窄的发生,是一极具前景研究方向。

HL-60多药抗性细胞抗HT诱导凋亡机制的研究

用 1mg·L-1 三尖杉酯碱 (Harringtoning ,HT)处理人早幼粒急性白血病HL 6 0细胞2h ,诱导细胞出现明显的凋亡 (Apoptosis ,Apo)形态学和生化特征 ,包括染色质凝集、Caspase 3(天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白水解酶 3)活化、DNA断裂等 .来自HL 6 0的多药抗性细胞HR2 0和HT9抗HT诱导的凋亡 ,一般认为是P 糖蛋白 (P GP 170 )对药物的外排作用引起细胞对凋亡的抗性 .但用 2mg·L-1 CsA(CysclosporineA)逆转抗性细胞对药物的外排作用 ,1mg·L-1 HT作用 4 8h仍不能诱导HR2 0和HT9细胞凋亡 ,说明HR2 0和HT9多药抗性细胞抗HT诱导凋亡的机制不仅仅在于细胞膜上的P 糖蛋白对药物的外排作用 ,可能还有凋亡相关因子或其他因素参与作用 .Caspase 3是细胞凋亡通路中的一个中心环节 ,HR2 0和HT9抗HT诱导的Caspase 3活化 ,这可能是HR2 0和HT9不能凋亡的一个重要原因 .

SPME-GC-QQQ-MS测定两种婺源名优绿茶香气成分

为研究和比较两种婺源名优绿茶天香云翠和婺源仙枝香气成分,采用固相微萃取方法对其挥发性成分进行提取,并使用GC-QQQ-MS技术对实验数据进行鉴定分析,用峰面积归一化法测定各成分的相对质量分数。结果表明:天香云翠分离鉴定出挥发性成分共48种,醇类最多,其次为烯烃类和烷烃类,婺源仙枝分离鉴定出挥发性成分共49种,烯烃类最多,其次为醇类和醛类。二者组成相似,各组分含量不同。其中芳樟醇、香叶醇含量均很高。推测其差异可能与品种及工艺等因素相关。

艾灸神阙穴对衰老模型小鼠脑组织凋亡相关因子bcl-2、bax、caspase-3和p53表达的影响

目的研究艾灸神阙穴对衰老模型小鼠脑组织凋亡相关因子B淋巴细胞瘤-2基因(bcl-2)、bcl-2相关的X基因(bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-3和p53蛋白表达的影响,探讨艾灸神阙穴延缓衰老的作用机制。方法健康2月龄昆明雄性小鼠,将其随机分为青年组、衰老模型组、艾灸组;青年组不做任何处理,衰老模型组和艾灸组每日颈背部皮下注射D-半乳糖120 mg/kg,连续注射42 d;艾灸组从模型复制的第15天起开始对神阙穴进行施灸,每次灸15 min,每日1次,每周连续施灸5 d后休息2 d再灸,连续4 w。艾灸结束后取出各组小鼠脑组织,采用Western印迹法检测小鼠脑组织bcl-2、bax、caspase-3和p53的蛋白表达。结果与青年组比,衰老模型组bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.001),bax、caspase-3和p53的蛋白表达均显著升高(P<0.001,P<0.05);与衰老模型组比,艾灸组bcl-2蛋白表达显著升高(P<0.001),bax、caspase-3和p53的蛋白表达均显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论艾灸神阙穴能延缓D-半乳糖所致衰老模型小鼠的衰老,其作用机制可能与调节脑组织bcl-2、bax、caspase-3和p53的蛋白表达有关。

陈以国“全息胚-锁骨针”与多经多穴针刺治疗痿证

陈以国教授认为痿证病位在筋脉肌肉,和五脏虚损有关,依据"全息胚学说",锁骨可沟通"天-地-人"三才,乃"三才骨",将中医传统特点、经络学说、脏腑学说、全息胚学说有机结合,独创"锁骨针";治疗宜"滋养先天、补益后天",从"锁骨针"及多经多穴入手,实泻虚补、补益肝肾、健脾益气、益胃养阴、疏肝行气、清阳明热;指出"治痿独取阳明","独取"乃言其重,而非言其孤,不应拘泥。

全保护RGD三肽的合成方法研究

以两条路线、多种偶联试剂 (DCC ,EDCI ,CDI ,EEDQ)合成了全保护三肽Arg Gly Asp (RGD) .Boc Arg(Tos) OH经上述偶联剂短时活化 ,于合适条件下与TsOH·Gly OBzl缩合 ,均获得良好收率 ( 4 3 %～ 97% ) .经Pd(OH) 2 /H2 还原得到的Boc Arg(Tos) Gly OH于 2 2～ 2 7℃与HCl·Asp(OcHex) OBzl偶联得到全保护三肽Boc Arg(Tos) Gly Asp(OcHex) OBzl (TM) ,反应收率分别为 76 4% (DCC/HOSu) ,64 7%～ 78 3 % (DCC/HOBt) ,66 7%～ 77 9% (EDCI/HOBt) .Boc Gly OH和HCl·Asp (OcHex) OBzl经DCC/HOBt或CDI活化 ,可得到碳端二肽Boc Gly Asp(OcHex) OBzl(收率分别为 81 2 % ,89 5 % ) ,该二肽脱Boc后与Boc Arg(Tos) OH反应 ,经DCC/HOBt,EDCI/HOBt,CDI,DCC/HOSu活化 ,均可生成目标分子TM ,其反应收率分别为 40 4% ,73 8% ,67 8% ,84 4% .

聚天冬氨酸衍生物及其复配物的阻垢性能研究

合成了含羟基的聚天冬氨酸衍生物,研究了聚天冬氨酸衍生物及其复配物阻CaCO3、CaSO4和Ca3(PO4)2垢性能,并与聚天冬氨酸和2-膦酰基丁烷-1,2,4-三羧酸水处理剂作了比较,结果表明,质量浓度为12 mg/L时,以上4种药剂阻CaCO3垢率分别为11.1%、86.2%、65.7%、94.8%;阻Ca3(PO4)2垢率分别为100%、95.6%、6.47%、7.23%;阻CaSO4垢率分别为94.1%、99.5%、100%、44.3%。复配物对CaCO3、CaSO4和Ca3(PO4)2具有良好的阻垢性能。

聚天冬氨酸复配物与磁场的协同阻垢效应

采用聚天冬氨酸(PASP)、衣康酸-丙烯酸-丙烯酸酯三组分共聚物(IA-AA-AE)和2-膦酸基丁烷-1,2,4-三羧酸(PBTCA)制备了PASP复配物(PASP/IA-AA-AE/PBTCA);通过静态和动态实验研究了PASP复配物及该复配物与磁场的协同阻垢性能;利用扫描电子显微镜和X射线衍射技术表征了水垢试样中的CaCO3晶型。静态和动态实验结果表明,磁场与PASP复配物的协同作用可提高PASP复配物对Ca2+的螯合作用,在Ca2+质量浓度650m g/L、HCO3-质量浓度1 300m g/L、PASP复配物质量浓度4m g/L的条件下,磁场与PASP复配物协同作用时,静态和动态阻垢率比PASP复配物单独作用时分别提高10%和20%以上;PASP复配物可使CaCO3晶型中的方解石和文石全部转化为球霰石结构。

转染微小RNA125b抑制序列的三阴性乳腺癌细胞增殖和凋亡变化

目的观察转染微小RNA125b(miR-125b)抑制序列的三阴性乳腺癌(TNBC)细胞MDA-MB-468增殖及凋亡情况的变化。方法将MDA-MB-468细胞分为miR-125b抑制序列转染组、无关序列转染组和空白对照组,miR-125b抑制物转染组、无关序列转染组分别转染miR-125b抑制序列和无关序列,空白对照组不转染。转染48 h后采用实时荧光定量PCR法检测3组细胞中的miR-125b;转染后24、48、72、96、120 h分别采用MTT法观察各组细胞增殖情况(以OD570表示);转染72 h后采用流式细胞术测算各组细胞凋亡率;各组细胞长至80%~90%汇合时采用Western blotting法检测NF-κBp65和Caspase-3蛋白。结果转染96、120 h时miR-125b抑制序列转染组细胞OD570低于无关序列转染组和空白对照组(P均<0.05)。转染72 h后miR-125b抑制序列转染组、无关序列转染组和空白对照组细胞凋亡率分别为24.85%±2.21%、1.47%±0.78%和1.32%±0.65%。miR-125b抑制序列转染组细胞凋亡率与无关序列转染组和空白对照组相比,P均<0.05,无关序列转染组和空白对照组细胞凋亡率相比,P>0.05。与无关序列转染组和空白对照组相比,miR-125b抑制序列转染组细胞NF-κBp65相对表达量下降(P均<0.05),Caspase-3相对表达量上升(P均<0.05)。结论转染miR-125b抑制序列的TNBC细胞MDA-MB-468增殖受到抑制、凋亡增强。这可能与转染miR-125b抑制序列下调MDA-MB-468细胞NF-κBp65和上调Caspase-3蛋白表达有关。

基于5-HT通道探讨天灸法治疗内脏高敏性肠易激综合征小鼠的机制

目的:观察天灸法对内脏高敏性肠易激综合征(IBS)小鼠结肠组织5-羟色胺(5-HT)及其受体蛋白表达的影响,探讨天灸法治疗IBS的作用机制。方法:将40只SPF级新生昆明小鼠随机分为正常组、模型组、拮抗组和天灸组,每组10只。造模前拮抗组于侧脑室注射0.2m L对氯苯丙氨酸(PCPA),模型组、拮抗组和天灸组小鼠应用直肠内冰乙酸刺激结合夹尾刺激制备内脏高敏性IBS模型。造模后,天灸组小鼠行天灸法干预,穴取“中脘”“天枢”“足三里”,每周各穴贴药1次,每次贴药2 h,共3周。采用腹壁回缩反射(AWR)评分和腹壁肌电波幅评价小鼠内脏高敏状态;HE法观察小鼠结肠组织形态变化;免疫组化法检测小鼠结肠组织5-HT及其受体蛋白表达。结果:与正常组比较,20、40 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)压力下模型组腹壁肌电波幅升高(P<0.05),60、80 mm Hg压力下模型组AWR评分及腹壁肌电波幅均升高(P<0.05);与模型组比较,20 mm Hg压力下天灸组腹壁肌电波幅降低(P<0.05),40 mm Hg压力下天灸组与拮抗组AWR评分均升高(P<0.05),60、80 mm Hg压力下天灸组与拮抗组AWR评分及腹壁肌电波幅均降低(P<0.05)。与正常组比较,模型组黏膜上层结构轻度紊乱,黏膜下层可见中度炎性细胞;与模型组比较,天灸组与拮抗组黏膜上层固有腺体形状规则,可见少量炎性细胞。与正常组比较,模型组结肠组织5-HT及5-羟色胺受体3(5-HT3R)蛋白平均阳性面积率增加、5-羟色胺受体4(5-HT4R)蛋白平均阳性面积率降低(P<0.05);与模型组比较,天灸组和拮抗组结肠组织5-HT及5-HT3R蛋白平均阳性面积率降低(P<0.05)。结论:天灸法可改善内脏高敏性IBS小鼠内脏高敏状态,可能与5-HT信号通路介导的肠脑轴的调节有关。

天山茶藨茎黄酮苷元提取工艺优化及其生物活性

为了优化天山茶藨茎5种黄酮苷元(木犀草素、槲皮素、山奈酚、异鼠李素、芹菜素)的酸水解提取工艺,评价其体外抗氧化和α-葡萄糖苷酶抑制活性,本文利用UPLC-MS/MS法测定天山茶藨茎5种黄酮苷元的提取率,通过单因素实验和正交试验优化天山茶藨茎黄酮苷元酸水解提取工艺。利用DPPH、ABTS自由基清除实验测定天山茶藨茎提取物及5种黄酮苷元的抗氧化活性,并测定了其α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果表明,5种黄酮苷元的检出限、定量限分别在0.8~1.6、2.9~5.4μg/L,在3.2~207.0μg/L范围内具有良好的线性关系(R 2≥0.9962),方法的稳定性、精密度和重复性良好(RSD≤4.4%)。确定最佳酸水解提取工艺为:90%甲醇溶液(含5%盐酸)、提取温度:70℃、提取时间:100 min,该条件下,总黄酮苷元提取率为4.06 mg/g,RSD<5%,表明正交试验优化的提取条件稳定可行。天山茶藨茎提取物及5种黄酮苷元均具有一定的α-葡萄糖苷酶抑制活性和抗氧化活性,其中甲醇盐酸提取物与5种黄酮苷元的α-葡萄糖苷酶抑制活性均高于阳性对照阿卡波糖(IC 50:53.84±2.41 mg/L),槲皮素对DPPH自由基的清除活性最好(IC 50:(2.94±0.18)mg/L),木犀草素、山奈酚对ABTS自由基清除活性较好(IC 50分别为(5.34±0.10)、(5.55±0.17)mg/L),它们的抗氧化活性高于阳性对照V C。本研究建立的UPLC-MS/MS方法灵敏、精确、高效,可以对天山茶藨茎5种黄酮苷元化合物同时进行定量分析。优化的酸水解提取工艺能有效提高天山茶藨茎黄酮苷元的提取率。