中药复方“松友饮”诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

目的:研究中药复方"松友饮"对人肝癌细胞凋亡的影响及可能的分子机制,为临床应用提供理论依据。方法:采用流式细胞术、Caspase-3活性实验及Real Time PCR技术,观察2、4、8、10、20、30及40 mg/mL"松友饮"(c1、c2、c3、c4、c5、c6及c7组)对体外培养的人肝癌细胞MHCC97H凋亡的影响,并探索可能的分子机制。结果:流式细胞仪检测结果显示,同对照组相比,干预组细胞凋亡率呈时间依赖性增加,"松友饮"(c4,10 mg/mL)干预72 h后MHCC97H细胞凋亡率增加超过3倍。干预48 h后Caspase-3显著激活,Caspase-3活化呈时间依赖性。"松友饮"浓度增加,转移抑制基因1(Metastasis suppressor 1,MTSS1)抑制效果越明显,"松友饮"(c4,10mg/mL)干预48 h,MTSS1基因表达抑制率为39.0%。结论:"松友饮"诱导肝癌细胞凋亡可能与MTSS1基因表达抑制、Caspase-3活化相关。

中药复方“松友饮”联用干扰素α影响姑息性肝切除术后残癌生长转移的实验观察

目的研究中药"松友饮"联用干扰素(IFN)α对高转移人肝细胞癌(HCC)裸鼠原位移植瘤姑息性肝切除模型残癌生长、转移和生存期的影响。方法以高转移人肝癌MHCC97H细胞建立裸鼠原位移植瘤姑息性肝切除模型,72只成模裸鼠随机分成对照组、"松友饮"组、IFNα组及"松友饮"+IFNα组(每组18只),姑息性肝切除术后24 h开始每天1次灌胃给药及皮下注射,连续5周测量裸鼠体质量。最后一次处理结束48 h后每组随机处死6只裸鼠,计算肿瘤体积及转移情况;剩余裸鼠用于观察生存期。结果对照组、"松友饮"组、IFNα组及"松友饮"+IFNα组肿瘤体积分别为(1205.2±581.3)、(724.9±337.6)、(507.6±367.0)、(245.3±181.2)mm3(F=6.410,P<0.05);肺转移结节数(n)分别为13.8±3.5、12.1±3.8、7.4±2.8、4.5±1.9(F=22.930,P<0.05);生存期分别为(62.1±2.0)、(76.2±3.2)、(81.1±2.5)、(88.3±2.5)d(Chi-Square=45.704,P<0.05)。联合用药组同单药组比较,疗效差异有统计学意义。结论连续5周联用"松友饮"增强IFNα抑制姑息性肝切除术后残癌生长、转移并延长荷瘤裸鼠生存期,对HCC患者有潜在临床应用价值。

中药复方“松友饮”含药血清体外抑制高转移人肝癌MHCC97H细胞的实验研究

目的:研究中药复方"松友饮"含药血清对体外培养的人肝癌MHCC97H细胞增殖、侵袭潜能的影响。方法:以MHCC97H细胞构建裸鼠原位移植瘤模型,84只成模裸鼠随机平均分成对照组和"松友饮"组,肝脏接种肿瘤24 h内开始1次/天灌胃给药。在第1、4、7、14、21、28、35次灌胃结束后2h,每组分别处死6只裸鼠收集血样。应用含药血清体外干预MHCC97H细胞,检测细胞增殖、侵袭潜能变化。结果:"松友饮"灌胃给药1、4、7天的荷HCC裸鼠含药血清体外抑制HCC作用逐渐增强,给药7、14、21、28、35天的含药血清抑制作用无统计学差异。灌胃7天的"松友饮"含药血清抑制HCC增殖的作用与中剂量卡培他滨作用近似,抑瘤率分别为37.4%、41.1%。给药7天的含药血清抑制HCC侵袭潜能达到最强,"松友饮"组穿膜细胞数明显少于对照组,为26.0±3.6和37.3±2.8。结论:给药7天的含药血清达到稳态血药浓度,对MHCC97H细胞的体外抑制作用达到最强。

优化中药复方“松友饮”的基础研究

目的:研究中药复方"松友饮"的体内药效物质基础并重新配伍设计,为其组方优化提供理论基础。方法:应用高转移人肝细胞癌细胞株MHCC97H构建裸鼠原位移植瘤模型,24只成模裸鼠随机平均分成对照组和"松友饮"组,肝脏接种肿瘤1 d开始1次/d灌胃给药("松友饮"3.6 g/kg,对照组予以等量蒸馏水)。灌胃5周,脱颈处死裸鼠收集血样,用于进一步分析"松友饮"体内药效物质基础,采用均匀设计的实验方法重新设计、配伍、优化"松友饮"。结果:裸鼠模型构建过程顺利,灌胃过程中实验组死亡1只裸鼠,有效获取含药血清。结合参考文献及通过比对发现连续给药5周,"松友饮"吸收入血的主峰来自组方药材成分:黄芪甲苷、槲皮素及隐丹参酮、丹参酮IIA(新组复方主要含4种单体,简称HHYD复方),重新配伍为3种新组方。结论:基于5周给药的含药血清药效物质基础新组方的组分更加明确,更易定量和质量控制。

中药复方“松友饮”体内外药效研究结果的初步总结

目的:分析中药复方"松友饮"体内、外抑癌作用。方法:明确"松友饮"的组方成份,总结前期相关研究结果,提出尚需进一步研究内容。结果:"松友饮"为5味中药提取物,已分析获得高效液相指纹图谱,为"松友饮"提供质控参考。"松友饮"通过抑制MMP2抑制肝癌(HCC)侵袭性;连续7天灌胃给药增强小鼠免疫功能。连续5周灌胃抑制术后残癌组织IL–1β和PCNA表达,抑制裸鼠模型HCC生长、转移,延缓裸鼠体重下降,延长生存期,增强干扰素(抑制HCC。给药7天的含药血清达到稳态血药浓度,对HCC体外抑制作用最强。该复方已开展临床研究,但药效物质基础仍需深入研究。结论:"松友饮"具有体内、外抑制HCC生长、转移作用,具有潜在临床应用价值。

中药复方“松友饮”对高转移人肝癌裸鼠原位移植瘤的抑制作用

目的:研究中药"松友饮"对高转移人肝癌裸鼠原位移植肿瘤生长、转移和生存期的影响。方法:以肝癌细胞(MHCC97H)细胞建立裸鼠移植瘤模型,32只成模裸鼠随机分成对照组C0和"松友饮"剂量递增的C1、C2和C3组,肝脏接种肿瘤24h内开始1次/d灌胃给药,连续5周,每周测体质量。第35d处死裸鼠,计算肿瘤体积及转移情况。另选12只成瘤裸鼠分成对照组和"松友饮"组,选择上述结果中最合适的剂量,观察生存期。结果:C0、C1、C2和C3组肿瘤体积分别为(2072.73±801.23)mm3、(1779.48±969.59)mm3、(976.30±608.01)mm3和(959.99±376.47)mm3,C2、C3与C0相比差别有统计学意义;C2组抑瘤率52.90%,肺转移程度明显下降。按C2组剂量给药,裸鼠生存期(75.00±3.86)d,对照组(52.00±2.34)d(P<0.01)。结论:连续5周"松友饮"灌胃抑制HCC裸鼠模型肿瘤生长、转移,延长荷瘤裸鼠生存期,对HCC病人有潜在的应用价值。