伤科接骨片治疗骨折临床效果的Meta分析及其“病-症-方”关联功效机制

目的系统评价伤科接骨片干预骨折的临床疗效,并从“病-症-方”关联角度,探索该中成药品种的作用机制及其各功效组的配伍特点。方法首先检索中文数据库(中国知网、万方数据库、维普数据库)和英文数据库(PubMed、Cochrane Library、EMbase)自建库至2024年1月伤科接骨片干预骨折的临床研究文献,应用风险评价工具对文献研究内容进行质量评价,提取数据并采用Stata 16.0版软件进行分析。利用中医药整合药理学研究平台(TCMIP v2.0)获得骨折临床症状表型相关基因集,再利用GEO数据库获得临床骨折相关的差异表达基因集。同时,从TCMIP v2.0收集伤科接骨片所含化学成分及其候选靶标谱。构建“骨折相关基因-伤科接骨片候选靶标”互作网络,通过计算网络拓扑特征值,筛选核心网络靶标,并通过功能富集分析,解析该中成药品种各功效组的作用机制。结果Meta分析共纳入14篇文献,样本量共计1293例,提示伤科接骨片对骨折的总有效率(RR=1.24,95%CI:1.18~1.31,P<0.001);“病-症-方”关联网络分析结果显示,伤科接骨片候选靶标所参与的通路主要分布于骨损伤的愈合、神经、血液系统调节和“免疫-炎症”调节等功能模块,且方药中不同功效组的作用特点各有侧重。结论伤科接骨片具有良好的促进骨折愈合疗效,并可通过调节血液循环系统和神经系统、矫正“免疫-炎症”失衡、维持骨和能量代谢稳态而发挥其活血化瘀、消肿止痛、续筋接骨、清热解毒的综合功效。相关研究结果为明确伤科接骨片的优势疗效环节和临床定位奠定基础。

从“病-证-症-方”关联网络探索左归丸干预骨关节炎肝肾亏虚证的作用机制

目的从“疾病-证型-症状-方药”关联网络切入,探索左归丸干预骨关节炎肝肾亏虚证的作用机制。方法依托高通量基因表达数据库挖掘骨关节炎疾病基因,利用人类表型本体数据库、疾病基因关联数据库收集肝肾亏虚证基因,通过中药系统药理学数据库与分析平台检索左归丸活性较高的化合物及靶点,并取上述基因集的交集为“病-证-症-方”关联网络基因。将得到的交集基因上传至STRING数据库构建蛋白互作网络,利用Cytoscape软件构建生物分子网络、计算拓扑特征值(介度值、连接度、紧密度)并筛选关键靶点、核心节点。最后采用DAVID分析平台进行对基因进行生物功能注释、富集分析。结果筛选得到骨关节炎疾病基因5394个、肝肾亏虚证基因2073个、左归丸活性成分靶点241个、“病-证-症-方”共同靶点51个、关键靶点17个、核心节点5个(Akt1、EGFR、IL6、TNF、VEGFA)。“病-证-症-方”共同靶点在潮热盗汗、腰膝酸软、耳鸣、关节酸痛、眩晕、精神疲惫、痿软无力等证候基因中占比分别为14.29%、13.04%、6.02%、4.81%、4.41%、3.26%、1.41%。GO富集分析的生物过程包括转录的正向调控、细胞对脂多糖的反应,细胞组分主要作用于细胞外间隙、内质网腔,分子功能主要涵盖蛋白质结合、酶结合等。KEGG通路富集结果包括调节骨、肌肉代谢失调相关,调节免疫、炎症系统失衡相关,活血、止痛相关和调节神经系统相关。结论左归丸治疗骨关节炎肝肾亏虚证具有多成分、多靶点、多通路的特点,与目前骨关节炎的发病机制相符合。

红花逍遥片的化学成分谱鉴定及其干预经前期综合征“病-证-症-方”关联的功效内涵解析

鉴定红花逍遥片的化学成分谱,从“病-证-症-方”关联角度,探索该中成药品种治疗经前期综合征(premenstrual syndrome,PMS)肝郁气滞血瘀证的作用特点与生物学内涵。采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Q Exactive Orbitrap HRMS)鉴定红花逍遥片的化学成分谱;依据组方原理将其划分为疏肝解郁组、活血调经组和益气健脾组,通过Pharmmapper数据库与中医药整合药理学研究平台(TCMIP v2.0)收集红花逍遥片各功效组所含中药的候选靶标信息;通过中医证候本体及多维定量关联计算平台(SoFDA)数据库、GeneCards、DisGeNET、MalaCards和已发表文献,收集PMS现代医学的临床症状、中医诊疗标准及其临床症状的相关基因集;依据基因间相互作用信息,建立“红花逍遥片候选靶标-PMS肝郁气滞血瘀证相关基因”互作网络,通过计算网络拓扑特征值,筛选核心网络靶标,并基于Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG)数据库开展功能挖掘,进一步探索红花逍遥片组方中各功效组在干预PMS中的优势药效环节,并加以动物实验验证。红花逍遥片中共鉴定获得109个化学成分,其中疏肝解郁组含20个化学成分,主要作用于神经系统、雌激素调节与“免疫-炎症”相关通路而发挥疏肝功效;活血调经组含77个化学成分,主要作用于血液循环系统、“免疫-炎症”与雌激素调节相关通路而发挥补血和气、养血柔肝的功效;益气健脾组含30个化学成分,通过调节“免疫-炎症”、消化系统与激素水平而发挥扶正益气、利水渗湿的功效。疾病靶组织生化指标检测结果表明,与溶剂对照组相比,PMS模型大鼠下丘脑组织中的5-HT与DA水平下降,子宫组织中E2、NO、VEGF、RLN水平下降,OT、PROG、IL-6、IL-1β、TNF-α、ET-1水平上升,红花逍遥片给药后能够缓解或逆转PMS大鼠的上述病理改变,表明红花逍遥片能够通过调节雌激素合成与分泌、干预神经递质合成与信号传导、矫正“免疫-炎症”失衡和调节消化系统功能,发挥其舒肝、理气、活血、健脾的综合功效,有助于改善PMS肝郁气滞血瘀证中机体“神经-内分泌-免疫”系统与血液循环紊乱,为明确红花逍遥片治疗PMS肝郁气滞血瘀证的优势药效环节和探索其作用机制提供参考。本实验获得中国中医科学院中药研究所动物伦理委员会批准(批准号:2023B248)。

基于“病-证-症-方”关联网络分析策略探讨祛风骨痛巴布膏的功效特点与作用机制

祛风骨痛巴布膏具有显著的镇痛效果,但其临床定位与作用机制尚不明确,采用“证症结合”的诊疗模式有利于突出中医药治疗的优势定位及疗效特点。因此,本研究基于“病-证-症-方”关联网络分析策略,整合临床表型组、转录组和生物网络挖掘技术,探析祛风骨痛巴布膏干预骨性关节炎(OA)、神经病理性疼痛(NP)、慢性炎症性疼痛(CIP)和肌筋膜疼痛综合征(MPS)的功效特点和作用机制。网络分析结果表明,祛风骨痛巴布膏所含3个功效组均与其减轻疼痛症状的作用环节相关,祛风散寒组、舒筋活血组与消肿止痛组的作用可分别概括为散寒止痛、活血止痛、消肿止痛,三组共同发挥祛邪止痛之效;在纠正机体代谢水平紊乱方面,祛风散寒组与消肿止痛组的作用分别概括为祛风散寒除湿和行气消肿止痛;在矫正机体“免疫-炎症-血管轴”失衡方面,舒筋活血组的作用概括为疏肝行气、活血化瘀。进一步基于“病-证-症-方”关联网络分析策略,祛风骨痛巴布膏干预OA、NP、CIP与MPS致病基因互作网络的关键网络靶标可能通过矫正疾病发生和进展中的“神经-内分泌-免疫”失衡系统,发挥缓解痛觉过敏和感觉异常等症状的治疗作用。综上所述,祛风骨痛巴布膏可改善风寒湿痹证典型关联疾病的疼痛等相关症状,其作用机制可能与其通过调节机体“神经-内分泌-免疫”系统,发挥中枢镇痛、纠正内分泌紊乱、矫正“免疫-炎症”失衡的药理作用相关。相关结果将为祛风骨痛巴布膏的临床合理定位提供网络分析依据,也为进一步的临床和实验验证提供基础和方向。