工程制图“424”模式考核方法改革

完善考试制度是课程建设必不可少的重要环节,“424”模式的实践对传统工程制图考核方式提出了挑战。通过“424”模式的实践与分析,比较并论证了工程制图的各种考核方式,对工程制图课程教学的改革与完善起到积极的推动作用。

circBFAR调控hsa-miR-424-5p及PI3K-Akt信号通路基因促进胰腺癌进展的机制研究

目的探讨circBFAR在胰腺癌中的差异表达及其作用分子机制。方法在GSE69362数据集中分析circBFAR在胰腺癌和对照组织中的差异表达。利用TCGA数据库鉴定了胰腺癌和对照组织间的差异表达miRNAs(DEmiRs),并与circBFAR的靶标miRNAs进行交集分析。在GSE62452和GSE28735数据集中鉴定了胰腺癌和对照组织间的差异表达mRNAs(DEmRs),并与靶标DEmiRs的靶向调控mRNAs进行交集分析。对circBFAR靶标DEmiRs调控的DEmRs进行富集分析,筛选出参与PI3K-Akt信号通路的基因并绘制生存曲线。收集10例胰腺癌组织及相应的癌旁对照组织样本,进行RT-qPCR和Western blot检测PI3K-Akt信号通路基因的表达。在胰腺癌细胞系PANC-1中敲降circBFAR或hsa-miR-424-5p,将细胞分为五组进行实验:对照组;si-circNC组;si-circBFAR组;si-circBFAR+inhibitor NC组;si-circBFAR+hsa-miR-424-5p inhibitor组。利用CCK-8检测细胞活性,通过划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭,利用RT-qPCR和Western blot检测信号通路基因的表达。结果circBFAR在胰腺癌组织中的表达显著高于对照组(P<0.001)。在鉴定的靶标DEmiRs中,hsa-miR-424-5p在胰腺癌中低表达(P<0.01)。hsa-miR-424-5p调控的靶标DEmRs中,LAMA3、ITGA3、MET和AREG参与PI3K-Akt信号通路,在胰腺癌中高表达时患者预后不良(P<0.001)。RT-qPCR和Western blot检测结果显示,circBFAR、LAMA3、ITGA3、MET和AREG在胰腺癌患者中高表达,而hsa-miR-424-5p则低表达。在PANC-1细胞中转染si-circBFAR显著抑制了细胞增殖、迁移和侵袭,以及LAMA3、ITGA3、MET和AREG的表达。转染hsa-miR-424-5p inhibitor抑制了si-circBFAR对细胞的影响(P<0.01)。结论circBFAR通过调控hsa-miR-424-5p及其靶向基因LAMA3、ITGA3、MET和AREG的表达,参与PI3K-Akt信号通路,促进了胰腺癌的进展。抑制circBFAR可能成为胰腺癌治疗的潜在策略。

脓毒症并发急性肾损伤患儿血清中miR-93-5p和miR-424-5p的表达及临床意义

目的探讨血清中微小RNA-93-5p(miR-93-5p)和微小RNA-424-5p(miR-424-5p)在脓毒症并发急性肾损伤(S-AKI)患儿中的表达水平及其临床意义。方法选取2019年11月至2021年11月南阳市中心医院综合ICU收治的116例脓毒症患儿作为研究对象,根据脓毒症患儿是否并发AKI分为AKI组60例和非AKI组56例;比较两组患儿的一般资料和血清miR-93-5p、miR-424-5p及肾功能指标[血肌酐(Scr)、胱抑素C(Cys-C)]水平;采用Pearson法分析S-AKI患儿血清miR-93-5p、miR-424-5p与肾功能指标的相关性;采用多因素Logistic回归分析脓毒症患儿并发AKI的影响因素;采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清miR-93-5p、miR-424-5p水平对脓毒症患儿并发AKI的诊断价值。结果AKI组患儿的尿量为(1.52±0.31)mL·kg^(-1)·h^(-1)、血清miR-93-5p表达水平为0.62±0.14,均明显低于非AKI组的(1.87±0.36)mL·kg^(-1)·h^(-1)、(1.02±0.21),急性生理学与慢性健康状况评分(APACHEⅡ评分)、序贯器官衰竭评分(SOFA评分)、血清miR-424-5p表达水平、Scr、Cys-C水平分别为(17.35±5.01)分、(5.77±1.80)分、(2.36±0.51)、(182.84±43.31)μmol/L、(1.63±0.39)mg/L,明显高于非AKI组的(14.96±4.12)分、(5.10±1.41)分、(1.01±0.23)、(91.51±28.34)μmol/L、(0.96±0.28)mg/L,差异均有统计学意义(P<0.05);经Pearson法分析结果显示,S-AKI患儿血清miR-93-5p与Scr、Cys-C呈负相关(r=-0.621、-0.720,P<0.05),miR-424-5p与Scr、Cys-C呈正相关(r=0.503、0.538,P<0.05);经多因素Logistic回归分析结果显示,miR-424-5p、Scr、Cys-C是影响脓毒症患儿并发AKI的危险因素,miR-93-5p是保护因素(P<0.05);经ROC分析结果显示,血清miR-93-5p、miR-424-5p以及两者联合诊断脓毒血症患儿并发AKI的AUC分别为0.856、0.860、0.949,联合诊断的敏感度为90.00%,特异性为91.07%,两者联合优于血清miR-93-5p、miR-424-5p各自单独诊断(Z两者联合-miR-93-5p=2.897、Z两者联合-miR-424-5p=2.706,P=0.004、P=0.007)。结论S-AKI患儿血清miR-93-5p水平显著下调,miR-424-5p水平显著上调,两者联合诊断脓毒血症患儿并发AKI具有更高价值。

子痫前期孕妇血清miR-424、miR-31-5p水平与胎儿生长受限的相关性分析

目的探究子痫前期孕妇血清微小RNA-424(miR-424)、微小RNA-31-5p(miR-31-5p)水平与胎儿生长受限(FGR)的相关性。方法选取2019年9月至2022年9月该院收治的122例子痫前期孕妇作为研究对象,根据是否发生FGR分为FGR组(62例)与非FGR组(60例)。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-424、miR-31-5p的相对表达水平。采用Pearson相关分析子痫前期患者血清miR-424、miR-31-5p表达水平与尿酸、胎儿双顶径、胎儿股骨长度的关系。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-424、miR-31-5p单独及联合检测对子痫前期孕妇发生FGR的诊断价值。采用多因素Logistic回归分析子痫前期孕妇发生FGR的影响因素。结果FGR组尿酸水平明显高于非FGR组,胎儿双顶径、胎儿股骨长度均明显低于非FGR组,差异均有统计学意义(P<0.05)。FGR组血清miR-424、miR-31-5p表达水平均明显高于非FGR组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,子痫前期患者血清miR-424、miR-31-5p表达水平与尿酸水平均呈正相关(P<0.05),与胎儿双顶径、胎儿股骨长度均呈负相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-424、miR-31-5p联合诊断FGR的曲线下面积(AUC)高于各指标单独诊断的AUC(Z_(miR-424 vs.miR-424+miR-31-5p)=2.500,P=0.012;Z_(miR-31-5p vs.miR-424+miR-31-5p)=3.521,P<0.001)。多因素Logistic回归分析结果显示,血清miR-424高表达、miR-31-5p高表达是子痫前期孕妇发生FGR的危险因素(P<0.05)。结论子痫前期发生FGR孕妇血清miR-424、miR-31-5p表达水平明显升高,二者联合诊断FGR发生的效能较单一指标高。

血清IL-23 UCH-L1 miR-424与足月新生儿HIE病情程度的关系及预测预后价值

目的:探讨血清白介素-23(IL-23)、泛素羧基末端水解酶-L1(UCH-L1)、微小RNA-424(miR-424)与足月新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)病情程度的关系及预测预后价值。方法:选取2019年1月至2022年12月足月HIE患儿105例作为HIE组,根据HIE分度标准分为轻度患儿(37例)、中度患儿(43例)及重度患儿(25例),另选取同期足月健康新生儿105例作为对照组。于所有受试者入组1d内采集空腹静脉血,采用酶联免疫吸附法检测血清IL-23、UCH-L1水平,实时荧光定量聚合酶联反应(qRT-PCR)法检测miR-424水平,比较HIE组和对照组血清IL-23、UCH-L1、miR-424水平,分析血清IL-23、UCH-L1、miR-424与HIE病情程度的关系。对HIE组随访1年,根据预后情况分为预后良好组与预后不良组,比较两组血清IL-23、UCH-L1、miR-424,分析血清IL-23、UCH-L1、miR-424对预后的预测价值。结果:HIE组血清IL-23(68.67±21.29)ng/L、UCH-L1(1.98±0.63)ng/mL高于对照组(30.06±6.13)ng/L、(0.75±0.24)ng/mL,miR-424(1.98±0.63)低于对照组(1.02±0.11)(P<0.05);重度患儿血清IL-23(95.21±21.08)ng/L、UCH-L1(2.42±0.46)ng/mL高于中度患儿(70.49±18.13)ng/L、(2.01±0.40)ng/mL、轻度患儿(48.62±14.72)ng/L、(1.65±0.34)ng/mL,中度患儿高于轻度患儿,miR-424(0.53±0.10)低于中度患儿(0.70±0.12)、轻度患儿(0.84±0.16),中度患儿低于轻度患儿(P<0.05);血清IL-23、UCH-L1与病情程度呈正相关,miR-424与病情程度呈负相关(P<0.05);随访1年,失访1例。104例患儿中预后良好82例,预后不良22例。预后不良组出生1min Apgar评分、5min Apgar评分、NBNA评分低于预后良好组,病情程度高于预后良好组(P<0.05);预后不良组血清IL-23(94.41±20.35)ng/L、UCH-L1(2.46±0.62)ng/mL高于预后良好组(61.76±18.74)ng/L、(1.84±0.49)ng/mL,miR-424(0.51±0.16)低于预后良好组(0.75±0.20)(P<0.05);偏相关性分析,控制其他因素后,血清IL-23、UCH-L1、miR-424与足月HIE患儿预后情况显著相关(P<0.05);血清IL-23、UCH-L1、miR-424预测足月HIE患儿预后的AUC分别为0.815、0.792、0.806;联合预测的AUC为0.913,敏感度为81.82%,特异度为86.59%,优于各指标单独预测价值。结论:血清IL-23、UCH-L1、miR-424与足月新生儿HIE病情程度显著相关,对预后具有独立预测能力,联合预测价值更可靠。

孕中期胎儿大脑中动脉、孕妇子宫动脉血流参数联合血清miR-424对FGR胎儿预后的评估价值

目的探究孕中期胎儿大脑中动脉(MCA)、孕妇子宫动脉(UtA)血流参数联合血清miR-424对生长受限(FGR)胎儿预后的评估价值。方法选取FGR孕妇87例为观察组,同期产检健康的孕妇124例为对照组。FGR孕妇按照预后分为预后不良组和预后良好组。比较各组胎儿MCA、孕妇UtA血流和血清miR-424情况。采用ROC评估胎儿MCA、孕妇UtA血流和血清miR-424对FGR胎儿预后的评估价值。结果孕妇血清miR-424观察组高于对照组,预后不良组高于预后良好组(P<0.05)。胎儿MCA搏动指数(PI)及血流阻力指数(RI)观察组低于对照组,预后不良组低于预后良好组(P<0.05)。孕妇UtA PI及RI观察组高于对照组,预后不良组高于预后良好组(P<0.05)。胎儿MCA、孕妇UtA血流和血清miR-424联合检测对FGR胎儿预后具有良好的预测价值(P<0.05)。结论胎儿MCA、孕妇UtA血流和血清miR-424联合检测对FGR胎儿预后的预测效果更优,具有更高临床应用价值。

MP感染合并哮喘患儿血清miR-424-5p、MCP-1、TLR4水平联合检测预测预后的效能

目的探讨肺炎支原体(MP)感染合并哮喘患儿血清miR-424-5p、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、Toll样受体4(TLR4)水平联合检测预测预后的效能。方法回顾性选取2021年8月至2023年8月濮阳市人民医院收治的107例MP感染合并哮喘患儿作为研究对象,所有患儿均给予对症治疗,根据6个月预后分为预后良好组86例和预后不良组21例。比较两组患儿的基线资料和血清miR-424-5p、MCP-1、TLR4水平,采用Logistic回归分析各血清指标对预后的影响,绘制受试者工作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)分析血清miR-424-5p、MCP-1、TLR4对预后的预测效能。结果两组患儿的病程、发热天数、呼吸道感染史比较差异均有统计学意义(P<0.05);预后不良组患儿的血清miR-424-5p、MCP-1、TLR4水平分别为1.56±0.41、(84.29±15.19)μg/L、(95.21±13.52)ng/mL,明显高于预后良好组的1.23±0.33、(70.38±11.36)μg/L、(83.10±10.17)ng/mL,差异均有统计学意义(P<0.05);校正前Logistic回归分析结果显示,病程、发热天数、呼吸道感染史、血清miR-424-5p、MCP-1、TLR4均是MP感染合并哮喘患儿预后的独立影响因素(P<0.05),校正后Logistic回归分析结果显示,血清miR-424-5p、MCP-1、TLR4仍是MP感染合并哮喘患儿预后的独立影响因素(P<0.05);ROC曲线结果显示,血清miR-424-5p、MCP-1、TLR4联合检测预测MP感染合并哮喘患儿预后的AUC为0.900,优于各血清指标单独预测。结论MP感染合并哮喘患儿血清mi R-424-5p、MCP-1、TLR4与预后密切相关,三者联合检测预测MP感染合并哮喘患儿预后具有良好的参考价值。

结缔组织病合并肺间质病变患者血清中miR-133a和miR-424表达及与T淋巴细胞亚群关系的研究

目的 探究结缔组织病(connective tissue disease,CTD)合并肺间质病变(interstitial lung disease,ILD)患者血清中miR-133a和miR-424表达及与T淋巴细胞亚群的关系。方法 选取我院2019年12月至2022年12月收治的96例CTD-ILD患者为CTD-ILD组,选择同期我院收治的CTD无ILD患者96例为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清miR-133a和miR-424水平;通过流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群水平。采用Pearson法分析miR-133a、miR-424与T淋巴细胞亚群的关系。结果 与对照组相比,CTD-ILD组血清中miR-133a水平显著降低,miR-424的表达水平显著升高(P<0.05)。不同肺通气障碍程度下,轻度、中度和重度患者血清中miR-133a表达水平依次显著降低,miR-424表达水平依次显著升高(P<0.05)。不同肺弥散功能障碍分级下,轻度、中度和重度患者血清中miR-133a表达水平依次显著降低,miR-424表达水平依次显著升高(P<0.05)。CTD-ILD组CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平与对照组相比显著升高,CD8^(+)、CD3^(+)水平显著降低(P<0.05)。miR-133a与CD4^(+)均呈负相关关系,与CD8^(+)、CD3^(+)呈正相关关系;miR-424与CD4^(+)均呈正相关关系,与CD8^(+)、CD3^(+)呈负相关关系(P<0.05)。结论 CTD-ILD患者血清miR-133a表达水平降低,miR-424表达水平升高,且与患者T淋巴细胞亚群有关。

过表达miRNA-424-5p靶向AKT3对奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡的影响

[目的]本试验通过过表达miRNA-424-5p,明确miRNA-424-5p与其靶基因丝氨酸/苏氨酸激酶3(AKT serine/threonine kinase 3,AKT3)对奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡影响的机制,为阐明miRNA-424-5p在奶牛胎盘分离过程中的作用机制提供试验基础和理论依据。[方法]试验分为3组:空白对照组(Control)、阴性对照组(miRNA-424-5p mimics NC)和过表达组(miRNA-424-5p mimics)。采用茎环法实时荧光定量PCR检测转染miRNA-424-5p mimics后奶牛子宫内膜上皮细胞miRNA-424-5p的表达变化;采用Western blotting及实时荧光定量PCR检测过表达后AKT3和凋亡相关因子的表达变化,采用Annexin V-FITC/PI法检测奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡情况。[结果]与空白对照及阴性对照组相比,转染miRNA-424-5p mimics后子宫内膜上皮细胞miRNA-424-5p mRNA的表达量极显著升高(P<0.01),B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3,Caspase3)和Caspase9的mRNA表达量极显著升高(P<0.01),AKT3和Bcl-2的mRNA表达量极显著降低(P<0.01);Bax和Caspase3蛋白表达量极显著升高(P<0.01),Caspase9蛋白表达量显著升高(P<0.05),AKT3和Bcl-2蛋白表达量极显著降低(P<0.01);细胞凋亡率极显著升高(P<0.01)。[结论]过表达miRNA-424-5p可通过靶向调控AKT3使奶牛子宫内膜上皮细胞凋亡因子Bax、Caspase3和Caspase9的表达量增加,使Bcl-2的表达量降低,进而促进细胞凋亡。

miRNA-424-5p靶向VEGFA对胎衣不下奶牛胎盘胶原蛋白降解的影响

【目的】通过探究miRNA-424-5p对奶牛母体胎盘组织胶原蛋白降解的影响,进而明确miRNA-424-5p对奶牛胎衣不下(retained fetal membranes,RFM)发生的调控作用及机制。【方法】检测胎衣正常排出与胎衣不下奶牛母体胎盘组织miRNA-424-5p表达水平,采用qRT-PCR和Western blot方法进行胎衣正常排出与胎衣不下奶牛的母体胎盘组织VEGFA、MMP-2、MMP-9、COL-IV的表达水平检测。应用生物信息学分析对miRNA-424-5p进行靶基因预测,并通过双荧光素酶试验验证miRNA-424-5p与VEGFA的靶向关系。在奶牛子宫内膜上皮细胞中转染miRNA-424-5p mimics和miRNA-424-5p inhibitor进行过表达和沉默miRNA-424-5p。采用免疫荧光技术观察VEGFA在奶牛子宫内膜上皮细胞的表达变化,qRT-PCR和Western blot检测VEGFA、MMP-2、MMP-9、COL-IV的mRNA与蛋白表达水平的变化。【结果】与健康组相比,RFM组母体胎盘组织中的miRNA-424-5p mRNA表达水平显著升高(P<0.01),VEGFA、MMP-2、MMP-9 mRNA与蛋白表达水平极显著降低(P<0.01),COL-IV mRNA与蛋白表达水平极显著升高(P<0.01)。miRNA-424-5p的潜在靶基因共有152个,并经双荧光素酶试验结果证实VEGFA是miRNA-424-5p的靶基因。过表达和沉默miRNA-424-5p后,免疫荧光结果显示,与对照组相比miRNA-424-5p mimics组VEGFA的表达较低,而miRNA-424-5p inhibitor组VEGFA表达较高;qRT-PCR和Western blot结果显示,过表达miRNA-424-5p,靶基因VEGFA mRNA与蛋白表达水平极显著降低,基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9 mRNA与蛋白表达水平极显著降低(P<0.01),胶原蛋白COL-IV mRNA与蛋白表达水平极显著升高(P<0.01),而沉默miRNA-424-5p时VEGFA、MMP-2、MMP-9 mRNA与蛋白表达显著升高(P<0.01),COL-IV mRNA与蛋白表达水平极显著降低。【结论】miRNA-424-5p可靶向VEGFA调控MMPs表达、胶原蛋白的分解从而引起细胞外胶原降解障碍,是引起胎衣不下发生的重要因素。

miR-424靶向FBXW7对多发性骨髓瘤细胞增殖、凋亡的影响

目的探讨miR-424靶向F-box和WD重复结构域7(F-Box and WD repeat domain containing 7,FBXW7)轴对多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞增殖、凋亡的影响。方法以实时荧光定量PCR(RT-qPCR)实验检测人正常骨髓浆细胞与MM细胞系MM.1S、RPMI 8226、U266中miR-424及FBXW7表达。体外培养U266细胞并随机分为对照组、miR-424抑制剂组(转染miR-424抑制剂)、FBXW7过表达组(转染FBXW7过表达质粒)、阴性对照组(转染miR-424阴性对照和空载质粒)、miR-424抑制剂+FBXW7敲低组(转染miR-424抑制剂和FBXW7siRNA)。以RT-qPCR实验检测miR-424及FBXW7表达;以Edu染色、TUNEL染色分别检测增殖、凋亡;以蛋白质印迹实验检测增殖相关蛋白(Cyclin D1、PCNA)、凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2)与FBXW7蛋白表达。在裸鼠右腋皮下接种转染后的各组U266细胞来构建多发性骨髓瘤移植瘤裸鼠模型,检测其移植瘤生长情况并比较其21 d移植瘤体积。以双荧光素酶报告实验验证miR-424对U266细胞FBXW7的靶向调控作用。结果与人正常骨髓浆细胞相比,MM.1S、RPMI 8226、U266细胞miR-424表达升高(P<0.05),FBXW7 mRNA表达降低(P<0.05)。与对照组相比,miR-424抑制剂组、FBXW7过表达组细胞增殖率、Cyclin D1、PCNA及Bcl-2蛋白表达、21 d移植瘤体积降低(P<0.05),FBXW7mRNA表达、凋亡率、FBXW7和Bax蛋白表达升高(P<0.05);阴性对照组细胞各指标无显著差异(P>0.05)。与miR-424抑制剂组相比,miR-424抑制剂+FBXW7敲低组细胞增殖率、Cyclin D1、PCNA及Bcl-2蛋白表达、21 d移植瘤体积增大(P<0.05),FBXW7 mRNA表达、凋亡率、FBXW7和Bax蛋白表达降低(P<0.05)。miR-424可靶向下调U266细胞FBXW7表达。结论下调miR-424可通过上调FBXW7表达而抑制MM细胞增殖及在裸鼠体内生长,促使其凋亡。

食管癌患者血清白介素17、微小核糖核酸424水平与临床病理参数和预后的关系

目的探讨食管癌(EC)患者血清白介素17(IL-17)、微小核糖核酸424(miRNA 424)表达情况及与临床病理参数和预后的关系。方法我院收治的223例EC患者,收集一般临床资料及病理资料,入院后采集空腹静脉血,检测血清IL-17、miRNA 424水平,比较不同病理特征下EC患者血清IL-17、miRNA 424水平,分析血清miRNA 424水平与EC临床病理参数的关系;术后随访3年,根据患者生存状况分为生存组(n=152)和死亡组(n=71),比较两组血清IL-17、miRNA 424水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清IL-17、miRNA 424水平对EC患者预后的预测价值。结果不同年龄、肿瘤直径、TNM分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移患者血清IL-17、miRNA 424水平比较差异有统计学意义(P<0.05);血清IL-7、miRNA 424表达水平与EC TNM分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移呈正相关(P<0.05);生存组IL-17、miRNA 424水平低于死亡组(P<0.05);IL-17、miRNA 424单独及联合预测EC患者预后的敏感度分别为77.46%、74.65%、88.73%,特异度分别为65.13%、62.50%、61.84%,AUC分比为0.755、0.734、0.835,联合诊断价值更高。结论EC患者IL-17、miRNA 424与疾病临床分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移均具有显著相关性,且二者对患者预后具有较高的诊断价值。

全血miR-106b、miR-769、miR-424预测食管癌三维放疗敏感性的价值及其与预后的关系

目的 探讨全血微小RNA (miR)-106b、miR-769、miR-424预测食管癌三维放疗敏感性的价值及其与预后的关系。方法 前瞻性选取2021年6月至2023年1月驻马店市中心医院收治的100例食管癌患者作为研究对象。所有患者均接受三维放疗,比较患者三维放疗前后的miR-106b、miR-769、miR-424表达水平。根据三维放疗效果分为敏感组60例和抵抗组40例,比较两组患者的miR-106b、miR-769、miR-424表达水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)、净重新分类指数(NRI)、整体鉴别指数(IDI)分析miRNAs预测三维放疗敏感性的价值,绘制卡普兰-迈耶生存曲线(K-M),分析miRNAs与食管癌患者生存预后之间关系。结果 放疗前和放疗4周、12周后食管癌患者miR-106b表达分别为4.42±1.30、4.00±1.01、3.05±0.94,miR-769表达分别为3.34±1.01、2.89±0.83、2.40±0.70,miR-424表达分别为0.30±0.09、0.24±0.06、0.19±0.05,放疗4周、12周后各指标较放疗前逐渐降低,差异均有统计学意义(P<0.05);放疗4周和12周后,放疗敏感组患者的miR-106b、miR-769、miR-424明显低于抵抗组,差异均有统计学意义(P<0.05);ROC分析结果显示,放疗12周后miR-106b、miR-769、miR-424联合预测食管癌患者三维放疗敏感性的AUC为0.938 (95%CI:0.872~0.977),均优于放疗4周后三者联合0.924 (95%CI:0.853~0.967);NRI和IDI分析显示,放疗12周后miR-106b、miR-769、miR-424联合评估食管癌患者三维放疗敏感性的IDI为0.075 (95%CI:0.022~0.125),NRI为0.720 (95%CI:0.450~0.965),明显优于放疗4周后三者联合的IDI[0.070 (95%CI:0.020~0.138)]、NRI [0.701 (95%CI:0.462~0.991)];采用放疗12周后全血中miR-106b、miR-769、miR-424的临界值将食管癌患者分为miR-106b、miR-769、miR-424高表达患者和低表达患者。miR-106b、miR-769、miR-424高表达患者1年生存率77.97%、74.00%、75.47%,明显低于低表达患者的94.44%、95.56%、93.02%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 食管癌患者miR-106b、miR-769、miR-424与三维放疗敏感性、预后密切相关,放疗12周后miRNAs联合预测食管癌患者三维放疗敏感性价值更高。

子宫内膜异位症患者血清LncRNA NEAT1,miR-424-5p水平表达与临床分期及不孕诊断的相关研究

目的探讨长链非编码RNA核富含丰富的转录本1(long non-coding RNA nuclear-enriched abundant transcript1,LncRNA NEAT1),微小RNA(microRNA,miR)-424-5p对子宫内膜异位症(endometriosis,EM)并发不孕的诊断及对疾病分期的应用价值。方法将2021年10月~2023年10月在石家庄市妇幼保健院就诊的232例EM患者作为研究对象,其中120例为EM并发不孕患者作为不孕组,另外112例为单纯EM患者作为对照组,不孕组根据美国r-AFS分期标准将患者分为r-AFSⅠ~Ⅱ期(n=27)、r-AFSⅢ期(n=45)和r-AFSⅣ期(n=48);采用qRT-PCR法检测血清LncRNA NEAT1,miR-424-5p的表达水平;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清LncRNA NEAT1,miR-424-5p诊断EM并发不孕的价值;多因素Logistic回归分析EM并发不孕患病的影响因素;在TargetScanHuman网站上进行LncRNA NEAT1靶向miR-424-5p的生物信息学分析;Pearson法分析EM并发不孕患者血清LncRNA NEAT1与miR-424-5p表达水平的相关性。结果不孕组和对照组血清LncRNA NEAT1(1.16±0.15 vs 1.02±0.13)、盆腔术史比例(17.50%vs 1.79%)、miR-424-5p(0.92±0.11 vs 1.04±0.12)表达水平比较,差异具有统计学意义(t/χ^(2)=7.753,16.018,7.974,均P<0.05);r-AFSⅠ~Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ期患者血清LncRNA NEAT1(1.05±0.10,1.14±0.14,1.24±0.19)依次升高,miR-424-5p(0.99±0.12,0.93±0.11,0.87±0.10)表达水平依次降低,差异具统计学意义(F=13.528,10.910,均P<0.05);LncRNA NEAT1与miR-424-5p存在靶向关系,EM并发不孕患者血清LncRNA NEAT1与miR-424-5p表达水平呈负相关(r=-0.431,P<0.05)。血清LncRNA NEAT1,miR-424-5p及联合诊断EM并发不孕的AUC分别为0.782,0.719和0.835,二者联合诊断的AUC优于各自单独检测(Z=2.625,3.861,P=0.009,0.001);LncRNA NEAT1是EM并发不孕的危险因素,miR-424-5p是保护因素(P<0.05)。结论EM并发不孕患者血清LncRNA NEAT1表达水平升高,miR-424-5p表达水平下降,二者与疾病分期和不孕的发生有关。

lncRNA NEAT1调节miR-424-5p/ELK4轴对ox-LDL诱导的血管内皮细胞损伤、Lp-PLA2和CRP水平的影响

目的:探讨长链非编码RNA核旁斑组装转录本1(lncRNA NEAT1)在氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管内皮细胞损伤中的分子机制和功能。方法:收集健康人和动脉粥样硬化(AS)病人血液标本并通过实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测血清中lncRNA NEAT1、微小RNA-424-5p(miR-424-5p)和ETS域蛋白4(ELK4)mRNA表达水平。体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),qRT-PCR和蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测细胞中lncRNA NEAT1、miR-424-5p和ELK4表达情况;细胞计数试剂盒(CCK-8)法和膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)法检测HUVEC细胞增殖活力和凋亡情况;酶联免疫吸附法(ELISA)测定HUVEC中乳酸脱氢酶(LDH)释放量、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-1β含量、脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)和C反应蛋白(CRP)水平;采用双荧光素酶报告基因测定lncRNA NEAT1、miR-424-5p和ELK4之间的靶向相互作用。进行动物实验以评估lncRNA NEAT1在体内AS进展中的作用。结果:lncRNA NEAT1在AS病人血清和ox-LDL诱导的HUVEC中显著上调(P<0.05)。lncRNA NEAT1的沉默可削弱ox-LDL引发的细胞毒性,降低Lp-PLA2和CRP水平,并减少ApoE^(-/-)小鼠的脂质异常分泌(P<0.05)。miR-424-5p是lncRNA NEAT1在调节ox-LDL诱导的HUVEC损伤中的功能介质,ELK4是miR-424-5p的直接靶标(P<0.05)。miR-424-5p的抑制或ELK4的过表达逆转了lncRNA NEAT1沉默对ox-LDL诱导的HUVEC细胞损伤的影响(P<0.05)。结论:沉默lncRNA NEAT1可通过调控miR-424-5p/ELK4轴保护HUVEC免受ox-LDL触发的细胞毒性,降低Lp-PLA2和CRP水平。

丹皮酚通过上调miR-424-3p和抑制PI3K/AKT信号通路影响肝癌细胞的生长和迁移

目的:探讨丹皮酚对肝癌细胞活力和迁移能力的影响和分子机制。方法:分别采用不同浓度(50、100、200和400 mg/L)的丹皮酚干预人肝细胞癌Hep3B细胞。CCK-8法检测细胞活力,确定药物浓度。将Hep3B细胞分为正常对照组、丹皮酚组、miR-NC组、miR-424-3p组、丹皮酚+anti-miR-NC和丹皮酚+anti-miR-424-3p组。RT-qPCR法检测miR-424-3p表达水平;CCK-8法检测细胞活力;Transwell实验检测细胞的迁移能力;Western blot检测细胞周期素D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9及PI3K/AKT信号通路相关蛋白的水平。结果:丹皮酚干预可抑制Hep3B细胞的活力(P<0.05),并呈一定的浓度依赖性。选择200 mg/L的丹皮酚进行后续研究。丹皮酚干预可抑制Hep3B细胞MMP2和MMP9蛋白表达,抑制细胞迁移(P<0.05)。丹皮酚干预可促进Hep3B细胞miR-424-3p的表达(P<0.05)。过表达miR-424-3p可抑制Hep3B细胞cyclin D1、MMP2和MMP9的表达,抑制细胞的活力和迁移能力(P<0.05)。抑制miR-424-3p表达可逆转丹皮酚对Hep3B细胞活力和迁移能力的影响(P<0.05)。丹皮酚可抑制Hep3B细胞PI3K和AKT的磷酸化,抑制PI3K/AKT信号通路的活化(P<0.05)。抑制miR-424-3p表达可逆转丹皮酚对Hep3B细胞PI3K/AKT信号通路的影响(P<0.05)。结论:丹皮酚可上调miR-424-3p和抑制PI3K/AKT信号通路,进而抑制肝癌细胞的活力和迁移。

MicroRNA-424在肿瘤发生中的作用和机制研究进展

MiR-424是miR-16家族成员。近年研究表明miR-424与肿瘤的发生、发展及治疗预后密切相关。本文对miR-424在乳腺癌、宫颈癌、肺癌、肝癌及结直肠癌等多种肿瘤及白血病中的表达变化、作用及机制进行综述。研究发现miR-424的表达受多种因素的影响,miR-424可作为肿瘤诊断、分期、预后的生物标记物,可用于明确肿瘤范围,也可作为肿瘤的治疗靶物。

MicroRNA-424参与多种疾病发生发展的分子机制研究进展

近20余年大量研究发现miRs靶向mRNA,通过降解mRNA或抑制其翻译,控制细胞增殖、分化、凋亡等多种生理病理过程,参与个体发育和疾病的发生发展。近年研究发现miR-424是血管生成的重要调节因子,参与了多种疾病的发生发展过程,本文对miR-424在感染性疾病、血管性疾病、中枢神经系统疾病及生殖系统疾病等多种疾病中的表达变化、作用及机制进行了综述。

lncRNA NNT-AS1和miR-424在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义

目的分析长链非编码RNA烟酰胺核苷酸转氢酶反义RNA1(lncRNA NNT-AS1)、微小RNA-424(miR-424)在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义。方法收集60例子宫内膜癌患者的子宫内膜癌组织和40例正常子宫内膜组织,检测lncRNA NNT-AS1、miR-424的相对表达水平,分析二者的相对表达水平与患者临床病理特征及预后的关系,以及二者的相关性。结果lncRNA NNT-AS1在子宫内膜癌组织中高表达,并与国际妇产科联盟(FIGO)分期、脉管浸润和淋巴结转移相关(P<0.05)。miR-424在子宫内膜癌组织中低表达,与FIGO分期、肌层浸润程度、脉管浸润和淋巴结转移相关(P<0.05)。lncRNA NNT-AS1高表达、miR-424低表达的患者5年生存率较低(P<0.05)。lncRNA NNT-AS1高表达和miR-424低表达是患者预后不良的影响因素。lncRNA NNT-AS1相对表达水平与miR-424呈负相关(r=-0.368,P<0.05)。结论lncRNA NNT-AS1和miR-424在子宫内膜癌中均异常表达,且与子宫内膜癌患者不良病理特征和预后相关。

食管鳞癌患者血浆miR-424、miR-92a及miR-130b水平变化及意义

目的探讨食管鳞癌(ESCC)患者血浆miR-424、miR-92a及miR-130b水平变化及意义。方法采用qRT-PCR法检测43例食管鳞癌患者及43例同期体检健康者血浆miR-424、miR-92a、miR-130b,分析血浆miR-424、miR-92a、miR-130b水平与食管鳞癌临床病理特征间的关系,应用受试者工作特征(ROC)曲线计算血浆miR-424、miR-92a及miR-130b用于食管鳞癌诊断的特异度及灵敏度,评价其在食管鳞癌中的诊断价值。结果食管鳞癌患者血浆miR-424、miR-92a及miR-130b水平均明显高于体检健康者,差异均有统计学意义(P均<0.05)。血浆miR-92a、miR-130b表达均与食管鳞癌患者的病理分级、淋巴结转移和TNM分期相关,此外,低分化患者血浆miR-130b表达较高分化者明显上调。血浆miR-424、miR-92a及miR-130b单独用于食管鳞癌诊断的特异度分别为72.09%、51.84%、90.7%,灵敏度分别为62.79%、88.37%、81.4%,曲线下面积(AUC)分别为0.703、0.720、0.862。结论食管鳞癌患者血浆miR-424、miR-92a及miR-130b水平升高,检测患者血浆miR-92a及miR-130b水平有助于食管鳞癌的诊断及病情评估。