机械加工技术专业“544”人才培养模式构建研究

校企交替是工学结合的一种重要形式。基于此,以机械加工技术专业为背景,论述“544”人才培养模式的构建背景,阐述“544”人才培养模式的内涵和定义,阐释“544”人才培养模式的概念和特征,并提出“544”人才培养模式的构建路径。

miR-544靶向TGF-β抑制神经胶质母细胞瘤细胞迁移、侵袭及EMT

目的探究miR-544在神经胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程中的作用及机制。方法采用RT-qPCR检测miR-544及TGF-β在GBM组织和癌旁组织、GBM转移与非转移的病人血清中的表达。在GBM细胞系U251中转染MiR-544 mimics。采用Transwell、Western boltting检测细胞迁移及侵袭,EMT相关蛋白(E-cadherin和N-cadherin)的变化。荧光素酶报告基因验证miR-544与TGF-β基因3’UTR区结合。结果miR-544在GBM组织及转移组中表达显著降低;TGF-β显著升高(P<0.05)。荧光素酶报告证实miR-544靶向调节TGF-β3’-UTR区域。miR-544 mimics组及si-TGF-β组与NC组相比,细胞迁移与侵袭数目减少(P<0.05);E-cadherin蛋白表达增加,N-cadherin蛋白表达减少(P<0.05)。miR-544mimics+pcDNA-TGF-β组部分逆转了miR-544 mimics对细胞迁移与侵袭和EMT相关蛋白的表达的作用(P<0.05)。结论miR-544靶向调控TGF-β是其参与EMT过程的作用机制之一。

miR-544靶向DUSP13抑制神经胶质瘤细胞增殖、周期分布和凋亡

目的探究miR-544在神经胶质母细胞瘤(Glioblastoma,GBM)细胞增殖中的作用及机制。方法采用RT-qPCR检测miR-544及DUSP13在GBM组织和细胞中的表达。过表达miR-544后,CCK-8检测细胞活性变化;克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡。DUSP13与miR-544的靶向关系通过荧光素酶报告实验来证实。结果GBM组织和细胞中miR-544表达显著低于癌旁组织和正常细胞(P<0.05),DUSP13表达水平显著高于癌旁组织和正常细胞(P<0.05)。过表达miR-544显著抑制细胞增殖和细胞活力,阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡(P<0.05)。过表达miR-544显著降低DUSP1表达水平(P<0.05)。miR-544靶向作用与DUSP13。过表达DUSP13显著削弱过表达miR-544对U87细胞增殖、周期分布和凋亡的影响(P<0.05)。结论miR-544靶向DUSP13抑制神经胶质瘤细胞增殖、周期分布和凋亡,为临床靶向治疗提供新思路。

MicroRNA-544在肝癌组织中的表达及其对肝癌细胞恶性生物学行为的影响

目的明确微RNA-544(microRNA-544,miR-544)在肝癌组织中的表达及其对肝癌细胞增殖、凋亡、克隆形成及成球能力的影响,探讨其在肝癌发生、发展中的作用。方法利用qPCR法检测二乙基亚硝胺(DEN)造模的大鼠肝组织和人肝癌组织与癌旁组织以及成球培养后肝癌干细胞球中miR-544的表达;肝癌细胞株Hep3B转染miR-544mimic或miR-544inhibitor后,利用CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况,平板克隆形成实验观察细胞克隆形成能力,碘化丙啶(PI)染色后流式细胞仪检测细胞凋亡情况。肝癌细胞转染miR-544mimic后成球培养观察细胞形成肿瘤干细胞球能力的变化。结果 MiR-544在DEN造模大鼠肝组织及人肝癌组织中的表达分别较未造模大鼠肝组织(P<0.05)和癌旁组织(P<0.01)下调。过表达miR-544可抑制肝癌细胞的增殖(P<0.05,P<0.01)和平板克隆形成能力(P<0.05),并促进细胞凋亡(48h和72h,P<0.01);而在肝癌细胞中抑制miR-544的作用可促进肝癌细胞的增殖(P<0.01)和克隆形成能力(P<0.05)。在富集肝癌干细胞的成球培养中,miR-544的表达下调(P<0.05);而过表达miR-544可抑制肝癌细胞形成干细胞球(P<0.05)。结论 MiR-544在肝癌组织中表达下调,且可抑制肝癌细胞的多种恶性生物学行为,提示其可能在肝癌的发生、发展中发挥着抑癌作用。

乙型肝炎病毒X蛋白下调微RNA-544-3p并激活Arf6/Akt-mTOR信号轴促进肝脏细胞迁移和侵袭

目的探讨mi RNA-544-3p对乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)诱导的肝细胞癌的影响及分子机制。方法培养含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和HBx的慢病毒稳转小鼠永生化肝前体细胞株14-19(HBx-EGFP-14-19细胞),并通过向昆明小鼠肝门静脉注射上述细胞构建可长期稳定表达HBx的模型,采用q PCR检测mi RNA-544-3p在HBxEGFP-14-19细胞及小鼠模型肝组织中的表达。在HBx-EGFP-14-19细胞中瞬时转染mi RNA-544-3p模拟物(mimic)或抑制剂(inhibitor),应用划痕愈合实验、Transwell细胞迁移和侵袭实验检测mi RNA-544-3p对HBx-EGFP-14-19细胞迁移和侵袭的影响,采用q PCR和蛋白质印迹法探究mi RNA-544-3p对二磷酸腺苷核糖基化因子6(Arf6)、Akt、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)表达的调控作用。结果成功构建了可长期稳定表达HBx的小鼠模型,该小鼠在造模后360 d处死时可见肝组织有恶性肿瘤生成。与对照组相比,HBx-EGFP-14-19细胞和HBx模型小鼠各时间点(造模后30、90、180、360 d)肝组织中mi RNA-544-3p表达水平均降低(P均<0.05)。与对照组比较,转染mi RNA-544-3p mimic的HBx-EGFP-14-19细胞迁移和侵袭能力均降低,转染mi RNA-544-3p inhibitor的HBxEGFP-14-19细胞迁移和侵袭能力均增强(P均<0.05)。q PCR和蛋白质印迹法检测结果显示mi RNA-544-3p低表达与Arf6表达水平上调、Akt-m TOR信号轴的激活有关。结论HBx可能通过下调mi RNA-544-3p激活Arf6/AktmTOR信号轴促进小鼠肝癌细胞的侵袭和迁移能力。

新型混合学习模式下“微学习”数字化资源建设及其效用评价研究

随着互联网技术的不断发展,借助手机、平板电脑等移动设施的教学形式丰富多样。为适应现代的发展趋势,突出连接与互动的互联网教学特征,以“544”数字化网络平台和微信公众平台为依托,将现代教学方式与“互联网+”有效结合,构建了“微学习”数字化资源,并且提出了一种对于“微学习”进行量化评判的分层分析法,以客观清晰的分项得分代替之前笼统模糊的主观评价。经过实践表明,基于互联网技术的新型混合学习模式,为学生提供优质便利的学习资源,教学效果显著。

中国隋唐时期对于太阳运动认识的演变——兼与古希腊太阳运动理论比较

目的廓清中国隋唐时期太阳运动理论发展的基本线索。方法把托勒玫(约100—165)《至大论》中和隋唐时期的太阳运动理论曲线、中心差和近地点平黄经的计算精度进行比较。结果在托勒玫《至大论》中太阳非匀速运动改正数表的基础上,给出其太阳中心差曲线和速度曲线,并在前人对隋唐时期太阳运动理论研究的基础上,重新考证了张子信关于太阳不均匀运动发现的含义。结论中国隋唐时期太阳运动理论与张子信(?—577)的发现虽然一脉相传,但这二者直到一行(683—727)时代才基本相符并被理解。一行包括后来的历算家的太阳运动理论存在系统误差,中心差和近地点平黄经的计算精度都逊于古希腊,一个重要原因就是古代中国一直把冬至点作为近地点。

北周《辛术妻裴氏墓志》考释——兼论北周对洋州的管理

北周《辛术妻裴氏墓志》追溯了裴姓源流及裴氏的父祖名讳官职,颂扬了裴氏襄助丈夫建功与她独自抚育子女成人的妇德与母仪,强调了她去世后获赠郡君的哀荣。志文的细微之处,蕴含着一些值得深入解读的历史文化信息,如"治……"是当时的一种独特的任职形式,又如裴氏一子辛伯儒任治洋州刺史,透露出北周对设立不久的洋州进行着严格而有效的管理。

TP 40对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的：探讨转化生长因子α（ Ｔ Ｇ Ｆα）绿脓杆菌外毒素（ Ｐ Ｅ４０）融合蛋白（ Ｔ Ｐ４０）对血管平滑肌细胞（ Ｓ Ｍ Ｃ）增殖的抑制作用。方法：用免疫组化 Ａ Ｂ Ｃ 法检测原代培养增殖期及静止期 Ｓ Ｍ Ｃ表皮生长因子受体（ Ｅ Ｇ Ｆ Ｒ）的表达，用结晶紫染色法和３ Ｈ亮氨酸掺入法检测 Ｔ Ｐ４０ 对增殖期和静止期 Ｓ Ｍ Ｃ增殖及蛋白质合成的抑制，用过量 Ｅ Ｇ Ｆ竞争抑制 Ｔ Ｐ４０ 的细胞毒作用。结果：增殖期 Ｓ Ｍ Ｃ能高水平表达 Ｅ Ｇ Ｆ Ｒ，静止期 Ｓ Ｍ Ｃ表达水平较低。 Ｔ Ｐ４０ 浓度为０．１ 和１０ ｎｇ／ｍ ｌ时，对增殖期 Ｓ Ｍ Ｃ增殖及蛋白质合成的抑制作用与静止期 Ｓ Ｍ Ｃ无差异（ Ｐ＞ ０．０５）；１０ 及１００ ｎｇ／ｍ ｌ时，对增殖期 Ｓ Ｍ Ｃ增殖及蛋白质合成的抑制作用较静止期 Ｓ Ｍ Ｃ强（ Ｐ＜ ０．０１）；过量 Ｅ Ｇ Ｆ能完全抑制 Ｔ Ｐ４０ 的细胞毒作用。结论： Ｔ Ｐ４０ 对增殖期 Ｓ Ｍ Ｃ的增殖具有较强的抑制作用，对静止期 Ｓ Ｍ Ｃ则影响较小，作用部位为细胞的 Ｅ Ｇ Ｆ Ｒ。

硫酸雾测试方法若干问题思考

简述了我国硫酸雾测试方法的发展历史,分析和总结了《固定污染源废气硫酸雾的测定离子色谱法》(HJ 544—2016)存在的一些争议和问题,包括硫酸雾的定义、测试方法的干扰控制等。分析认为,相比《硫酸工业污染物排放标准》(GB 26132—2010),HJ 544—2016对硫酸雾的定义更加合理。实验结果表明:硫酸盐是测试方法条件下的目标物,滤筒可以显著地捕捉硫酸盐。9组样品滤筒中,被测目标物所占比例为7.9%~69.1%;滤筒和前吸收液中,被测目标物所占比例为93.7%~97.8%。HJ 544—2016新增加的两级串联碱液吸收瓶可以较完全地捕集穿透滤筒后的硫酸雾,同时也会捕集SO2。SO2会对硫酸雾测试产生正干扰,约42.9%的SO2在被吸收后转化为硫酸雾。

miR-544在心肌梗死大鼠心肌纤维化的作用机制研究

目的探讨微小RNA 544(miR-544)在心肌梗死大鼠心肌纤维化的作用机制。方法将大鼠随机分成假手术组、模型组、转染组-1和转染组-2。假手术组、模型组心脏注射磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS),转染组-1和转染组-2分别心脏注射9型重组腺相关病毒(rAAV9)-miR-544-mimics-NC病毒载体和rAAV9-miR-544-mimics病毒载体。注射30 min后,采用无菌7-0结扎线结扎大鼠的左前降支冠状动脉的方法来构建心肌梗死大鼠模型。依次使用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,qRT-PCR)、2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride,TTC)染色、免疫组化染色法检测各组大鼠心肌组织miR-544表达水平、心肌梗死比例、Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白的表达;荧光素酶报告基因分析miR-544与果蝇抗生物皮肤生长因子蛋白3(drosophila mothers against decapentaplegic 3,Smad3)的作用关系,以蛋白质印迹法测定大鼠心肌组织中转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)及Smad3蛋白的表达。结果假手术组、模型组、转染组-1和转染组-2大鼠心肌组织miR-544相对表达水平依次为1.02±0.08,0.43±0.16,0.40±0.14,0.68±0.04;心肌梗死比例依次为0,(58.22±0.13)%,(56.78±0.37)%,(19.86±0.15)%;Ⅰ型胶原蛋白的相对表达水平依次为1.01±0.03,4.56±0.16,4.32±0.41,2.01±0.12;Ⅲ型胶原蛋白的相对表达水平依次为0.99±0.04,7.63±0.13,7.52±0.28,2.16±0.28;TGF-β1的相对表达水平依次为1.00±0.01,4.25±0.08,4.23±0.09,1.86±0.06;Smad3的相对表达水平依次为0.99±0.02,4.73±0.13,4.75±0.11,2.25±0.07。模型组与假手术组比较,转染组-2与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论miR-544能靶向调控Smad3的表达,进而阻断TGF-β1/Smad3信号通路,以发挥其抗纤维化效应。

正常成年人甲状腺多层螺旋CT分析

目的分析正常成年人甲状腺形态、大小和密度特点，为建立成年人甲状腺形态、大小和CT值的正常参考值范围提供依据。方法回顾性分析2011年6月至2012年6月在重庆医科大学附属第一医院放射科行头颈CT血管造影（computed tomography angiography，CTA）检查的317例的资料。在轴位上观察甲状腺形态，测量甲状腺外侧角、内外径、前后径、峡径、平扫及动脉期的CT值。统计各参数在左右叶、性别、年龄间是否差异有统计学意义．并计算各参数的正常值范围。结果①形状：正常甲状腺在轴位上呈蝶形，占95．9％（304／317），峡部缺如占4．1％（13／317）。②外侧角在左右叶、性别间差异无统计学意义（P〉0．05），年龄间差异有统计学意义（p=-o．00）；95％参考值范围：〈60岁为111．7°±31．60，≥60岁为101-3°-36．7°。③甲状腺右叶的内外径及前后径大于左叶的相应值，男性左右叶的内外径及前后径大于女性的相应值，内外径及前后径在年龄组间差异无统计学意义。峡径在性别、年龄组间差异无统计学意义（P〉0．05），其95％参考值范围为1.1～7．3mm。④甲状腺平扫及增强CT值在左右叶、性别、年龄组间差异有统计学意义（P〈0．05），其95％参考值范围在左右叶、性别、〈30岁与≥30岁间需分开制定。结论初步建立了重庆地区甲状腺影像解剖的正常数据，为甲状腺疾病的影像诊断提供了参考依据。