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山萘酚逆转肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu的作用机制研究
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作者 梁大敏 杨正久 +2 位作者 张子萍 钱静 毛朝坤 《天津医药》 CAS 2024年第9期900-906,共7页
目的探讨山萘酚(KAE)对肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu功能的影响。方法采用KAE处理Bel-7402/5-Fu细胞,将细胞分为对照组和药物组(0.064、0.320、1.600、8、40、200μmol/L KAE);根据干扰DNA依赖性激酶催化亚基(DNA-PKcs)、加入蛋白酶体抑制... 目的探讨山萘酚(KAE)对肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu功能的影响。方法采用KAE处理Bel-7402/5-Fu细胞,将细胞分为对照组和药物组(0.064、0.320、1.600、8、40、200μmol/L KAE);根据干扰DNA依赖性激酶催化亚基(DNA-PKcs)、加入蛋白酶体抑制剂MG132或加入自噬抑制剂CQ,将细胞分为si-NC组和DNA-PKcs干扰(siRNA-1664、siRNA-2142、siRNA-3785)组,对照组、KAE组和KAE+si-DNA-PKcs组,对照组、KAE+DMSO组、KAE+MG132组和KAE+CQ组。采用CCK-8检测细胞增殖,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot检测组蛋白H_(2)AX磷酸化(γ-H_(2)AX)、DNA-PKcs、DNA双链断裂修复/V(D)J重组蛋白(Artemis)和药泵基因(P-gp)mRNA和蛋白的表达,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,蛋白稳定性实验检测DNA-PKcs蛋白稳定性,免疫共沉淀检测DNA-PKcs蛋白泛素化。结果与对照组相比,8μmol/L KAE处理细胞24 h可抑制约50%的细胞增殖能力,选择此时间和浓度进行后续研究。与对照组相比,KAE组γ-H_(2)AX mRNA和蛋白表达水平升高,DNA-PKcs、Artemis和P-gp mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05);与对照组相比,KAE促进Bel-7402/5-Fu细胞周期阻滞于G2/M期,增加细胞凋亡;与si-NC组相比,siRNA-1664能显著下调DNA-PKcs mRNA和蛋白表达水平(P<0.05);与KAE组相比,KAE+si-DNAPKcs组进一步促进了KAE对细胞的效应;与对照组相比,KAE+DMSO组DNA-PKcs蛋白表达水平降低(P<0.05);与KAE+DMSO组相比,KAE+MG132组DNA-PKcs蛋白表达水平升高(P<0.05),而KAE+CQ组DNA-PKcs蛋白表达水平无明显变化(P>0.05);与对照组相比,KAE+DMSO组促进DNA-PKcs蛋白的泛素化,而KAE+MG132组则可抑制其泛素化(P<0.05)。结论KAE能够诱导肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu的细胞凋亡和细胞周期阻滞。 展开更多
关键词 肝细胞 山萘酚 细胞凋亡 细胞周期 bel-7402/5-Fu DNA-PKCS
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利用三代测序技术鉴定c.586T>C突变导致的Bel亚型
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作者 崔文燕 刘金华 付威义 《临床输血与检验》 CAS 2024年第2期262-266,共5页
目的利用PacBio三代测序技术鉴定c.586T>C突变导致的Bel亚型,并分析Bel亚型家系的血型血清学特点。方法ABO血型表型检测使用血清学方法,对ABO正反定型不符的家系标本进行ABO基因第6、7号外显子Sanger测序。利用PacBio三代技术对先证... 目的利用PacBio三代测序技术鉴定c.586T>C突变导致的Bel亚型,并分析Bel亚型家系的血型血清学特点。方法ABO血型表型检测使用血清学方法,对ABO正反定型不符的家系标本进行ABO基因第6、7号外显子Sanger测序。利用PacBio三代技术对先证者及其子女的3例样本进行ABO基因全长单体型分析。结果先证者血清学表型为Bel亚型,测序技术鉴定ABO基因序列第7外显子存在c.586T>C位点突变,三代测序单体型鉴定先证者ABO基因型为ABO^(*)BEL(c.586T>C)/O01.02,其长子和长女基因型为:ABO^(*)A1.02/BEL(c.586T>C)、ABO^(*)B.01/BEL(c.586T>C)。结论c.586T>C位点突变是导致本例Bel的分子基础,PacBio三代测序技术能够精准鉴定ABO亚型单体型。 展开更多
关键词 bel亚型 血型血清学 分子机制 单体型鉴定 PacBio三代测序技术
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溯史·凝炼·抒怀——术语Cantabile及Bel Canto的互助性艺术表达
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作者 万梦萦 《浙江艺术职业学院学报》 2024年第2期96-103,共8页
歌唱性的表达一直是键盘艺术追求的终极目标。在键盘艺术被人津津乐道的黄金发展时期,歌唱性的表达实则上形成了两套“系统”,一套是以Cantabile(如歌地,轻柔地)作为巴洛克和古典时期的主导术语,一套是浪漫时期以Bel Canto(歌唱地)建立... 歌唱性的表达一直是键盘艺术追求的终极目标。在键盘艺术被人津津乐道的黄金发展时期,歌唱性的表达实则上形成了两套“系统”,一套是以Cantabile(如歌地,轻柔地)作为巴洛克和古典时期的主导术语,一套是浪漫时期以Bel Canto(歌唱地)建立的情感共鸣。Cantabile与Bel Canto既有代表歌唱性的共性特征,也有区分彼此差异的不同概念,目前学术界尚未对这两者在音乐语汇体系的具体实践代表意义上做出本质的区分与定论。厘清两者术语的音乐语境并构建逻辑桥梁将歌唱性“置入”键盘艺术中,有助于理论与演奏一体的共生发展与互助性艺术表达。 展开更多
关键词 如歌地 抒情的情感共鸣 歌唱性 键盘艺术
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冬凌草甲素对肝癌Bel-7402/Sora细胞增殖、凋亡、细胞周期及PI3K/AKT信号通路的影响
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作者 史国军 叶兴涛 +3 位作者 何国浓 施航 李苗 叶晶琳 《浙江中医药大学学报》 CAS 2024年第9期1102-1109,共8页
[目的]探讨冬凌草甲素对人肝癌Bel-7402/Sora细胞增殖、凋亡、细胞周期及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/AKT)信号通路的影响。[方法]采用浓度梯度递增法建立Bel-7402/Sora耐药细胞株... [目的]探讨冬凌草甲素对人肝癌Bel-7402/Sora细胞增殖、凋亡、细胞周期及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/AKT)信号通路的影响。[方法]采用浓度梯度递增法建立Bel-7402/Sora耐药细胞株,以细胞计数法(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞增殖抑制率并计算细胞耐药逆转指数,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测各组细胞中PI3K、AKT、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)的mRNA表达水平,免疫印迹法检测各组细胞中PI3K、AKT、mTOR的蛋白表达水平。[结果]与空白对照组比较,终浓度为4、8、16、32、64μmol·L^(-1)的冬凌草甲素对Bel-7402/Sora细胞均有较好的抑制作用(P<0.05,P<0.01),且作用呈现浓度依赖性。冬凌草甲素对Bel-7402/Sora细胞耐药逆转指数为2.024。与空白对照组比较,冬凌草甲素组的早期、晚期和总凋亡率均显著升高(P<0.01,P<0.05);与冬凌草甲素组比较,冬凌草甲素+索拉非尼组的早期总凋亡率均显著升高(P<0.05)。与空白对照组比较,冬凌草甲素组的G2期细胞比例显著增加(P<0.01);与冬凌草甲素组比较,冬凌草甲素+索拉非尼组G,期细胞比例增加,G2期细胞比例降低(P<0.01)。与空白对照组比较,冬凌草甲素组PI3K、AKT、mTOR的mmRNA相对表达量均显著降低(P<0.01);与冬凌草甲素组比较,冬凌草甲素+索拉非尼组PI3K、AKT、mTOR的mRNA相对表达量均显著降低(P<0.01)。与空白对照组比较,冬凌草甲素组PI3K、AKT、蛋白相对表达量均显著降低(P<0.01),mTOR蛋白表达无统计学意义(P>0.05);与冬凌草甲素组比较,冬凌草甲素+索拉非尼组AKT、蛋白表达下降,差异有统计学意义(P<0.01),PI3K、mTOR蛋白差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]冬凌草甲素能抑制Bel-7402/Sora细胞增殖,诱导细胞凋亡,阻碍细胞周期进程,其机制可能与干预PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 肝癌 bel-7402/Sora细胞 细胞凋亡 细胞周期 PI3K/AKT信号通路
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STAT3抑制剂S3I-201对人肝癌BEL-7402细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响
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作者 李玲玲 林斯晓 +1 位作者 周文英 彭晓谋 《实用癌症杂志》 2023年第8期1229-1232,1238,共5页
目的 研究STAT3小分子抑制剂S3I-201对人肝癌细胞系BEL-7402增殖、凋亡与细胞周期的影响和初步的作用机制。方法 分别采用细胞活性检测试剂盒cell couting kit-8(CCK-8)和EdU细胞增殖法检测S3I-201对人肝癌细胞BEL-7402细胞增殖的影响,... 目的 研究STAT3小分子抑制剂S3I-201对人肝癌细胞系BEL-7402增殖、凋亡与细胞周期的影响和初步的作用机制。方法 分别采用细胞活性检测试剂盒cell couting kit-8(CCK-8)和EdU细胞增殖法检测S3I-201对人肝癌细胞BEL-7402细胞增殖的影响,应用流式细胞术分析S3I-201对BEL-7402的细胞凋亡和周期的影响,通过Western blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果 CCK-8及EdU结果显示,S3I-201能抑制BEL-7402细胞的生长和增殖(P<0.05),使BEL-7402细胞阻滞于S期,具有诱导细胞凋亡的作用,上调Bax的表达,下调Bcl-2的表达(P<0.05)。结论 STAT3小分子抑制剂S3I-201通过促进BEL-7402凋亡、上调促凋亡蛋白Bax、下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,并将BEL-7402阻滞于S期而发挥抗肿瘤效应。 展开更多
关键词 STAT3抑制剂 bel-7402肝癌细胞 增殖 凋亡 细胞周期
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苦参碱衍生物ZS10基于PI3K/AKT信号通路诱导人肝癌细胞BEL-7402凋亡 被引量:5
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作者 王湘 张森 +3 位作者 韩科研 曾攀科 李雪娇 王立升 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期116-124,共9页
目的探讨新型苦参碱衍生物ZS10抑制BEL-7402细胞增殖,诱导细胞凋亡的信号通路。方法采用有机合成的方法,合成ZS10;采用MTT法,分析在作用时间分别为24、48、72 h时,ZS10对BEL-7402细胞增殖的抑制作用,计算IC 50;采用DAPI染色法,观察BEL-7... 目的探讨新型苦参碱衍生物ZS10抑制BEL-7402细胞增殖,诱导细胞凋亡的信号通路。方法采用有机合成的方法,合成ZS10;采用MTT法,分析在作用时间分别为24、48、72 h时,ZS10对BEL-7402细胞增殖的抑制作用,计算IC 50;采用DAPI染色法,观察BEL-7402细胞状态;采用克隆形成法,观察BEL-7402细胞集落形成情况;采用流式细胞仪观察BEL-7402细胞周期阻滞情况和凋亡情况;采用Western blot法检测PI3K-AKT通路及相关蛋白表达水平。结果获得新型苦参碱衍生物ZS10,并进行了结构表征;MTT结果表明,ZS10作用于BEL-7402细胞48 h,IC 50为(6.62±1.11)μmol·L^(-1);DAPI染色结果表明,给药浓度升高,细胞核发生明显改变;克隆形成结果表明,ZS10明显抑制BEL-7402细胞的集落形成;流式细胞术结果表明,ZS10诱导BEL-7402细胞凋亡并阻滞S期。Western blot结果显示,ZS10在浓度为0~8μmol·L^(-1)时,对PI3K/AKT通路及其相关蛋白具有调节作用,并呈剂量依赖性。与对照组比较,给药组PI3K、AKT、p-AKT和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平均明显降低,促凋亡蛋白Bax表达水平均明显升高,周期蛋白Cyclin D1和CDK2表达水平均明显降低,迁移蛋白EGFR、N-cadherin、Vimentin表达降低,E-cadherin表达升高。结论ZS10对肝癌细胞BEL-7402的生长、增殖具有抑制作用。 展开更多
关键词 苦参碱衍生物ZS10 bel-7402细胞 迁移 周期 凋亡 PI3K/AKT信号通路
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17-羟-岩大戟内酯B对肝癌BEL-7402细胞增殖和凋亡的影响及机制
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作者 龚飞 吴思明 +3 位作者 徐磊 林宇 马德翊 韩翠翠 《齐齐哈尔医学院学报》 2023年第8期701-705,共5页
目的研究17-羟-岩大戟内酯B(HJB)对人肝癌BEL-7402细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其分子机制。方法将BEL-7402细胞分为空白对照组、HJB 10μg/mL组、20μg/mL组和40μg/mL组。采用MTT实验检测各组细胞存活率。采用流式细胞术检测HJB对BEL-... 目的研究17-羟-岩大戟内酯B(HJB)对人肝癌BEL-7402细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其分子机制。方法将BEL-7402细胞分为空白对照组、HJB 10μg/mL组、20μg/mL组和40μg/mL组。采用MTT实验检测各组细胞存活率。采用流式细胞术检测HJB对BEL-7402细胞周期和凋亡的影响;AO/EB双染色法检测细胞凋亡形态的变化;Western blot法检测Bcl-2、Bax、Cleaved-Caspase-9和Cleaved-Caspase-3蛋白表达的变化。结果HJB可呈浓度-时间依赖趋势抑制BEL-7402细胞增殖。不同浓度HJB作用24小时后,各HJB处理组主要表现出S期和G2/M期阻滞;早、晚期细胞凋亡率均明显增加(P<0.05或P<0.01)。随着HJB浓度的增加,晚期凋亡细胞数量逐渐增加,呈固缩或圆珠状。各HJB处理组Bcl-2的蛋白表达均明显下调,40μg/mL组细胞Bax的蛋白表达明显上调,此外,各组细胞Cleaved-Caspase-9和Cleaved-Caspase-3蛋白的表达均显著上调(P<0.05)。结论17-羟-岩大戟内酯B可以抑制肝癌BEL-7402细胞增殖,调控细胞周期并诱导其凋亡,其分子机制可能与下调Bcl-2蛋白表达、上调Bax、Cleaved-Caspase-9和Cleaved-Caspase-3蛋白表达有关。 展开更多
关键词 17-羟-岩大戟内酯B 肝癌 bel-7402细胞 增殖 凋亡
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ABO血型基因外显子1上新变异的鉴定
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作者 薛阳 李抄 +5 位作者 辛文龙 曾星 马涛 陈芳芳 曹晨 高宏军 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1212-1216,共5页
目的:应用血清学和分子生物学方法鉴定1例ABO正反定型不一致患者的血型,并探讨其遗传学特点。方法:采用试管法鉴定该患者的ABO表型,荧光PCR法测定患者及其父母的ABO血型基因型,并对ABO基因7个外显子进行直接测序分析。结果:本例患者血... 目的:应用血清学和分子生物学方法鉴定1例ABO正反定型不一致患者的血型,并探讨其遗传学特点。方法:采用试管法鉴定该患者的ABO表型,荧光PCR法测定患者及其父母的ABO血型基因型,并对ABO基因7个外显子进行直接测序分析。结果:本例患者血清学初步鉴定为Bel亚型;基因分型检测患者及其父亲的基因型为B/O1,其母亲的基因型为O1/O1;测序发现在患者及其父亲ABO基因外显子1上有新的c.16_17delins TGTTGCA杂合变异。结论:外显子1上新的变异导致该患者ABO血型出现Bel亚型,并具有遗传性。 展开更多
关键词 ABO血型 bel亚型 分子生物学 基因 外显子
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文化观照下意大利美声唱法经验的汲取与借鉴
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作者 朱琳 《湖北第二师范学院学报》 2024年第5期28-32,共5页
20世纪20年代起,西方艺术中的美声唱法在我国获得快速发展,对社会民众审美观念造成巨大影响,同时也给我国声乐艺术带来革命性变化,并在20世纪中叶形成“土洋之争”。“土洋之争”历史较长,对我国声乐领域发展造成一定影响,使得在较长时... 20世纪20年代起,西方艺术中的美声唱法在我国获得快速发展,对社会民众审美观念造成巨大影响,同时也给我国声乐艺术带来革命性变化,并在20世纪中叶形成“土洋之争”。“土洋之争”历史较长,对我国声乐领域发展造成一定影响,使得在较长时间内,我国声乐水准提升缓慢。直至改革开放之后,引入西方美声学派理论知识和表演技巧后,争论的重点才逐渐转变,开始倾向于探讨具有深层次特征的实质内容,对美声唱法的认知也更加客观。对美声唱法在引入我国之后的发展作出梳理,从工艺美学角度出发,探讨音乐和文化之间的具体关系,强调在文化建设过程中需要基于“以我为主”的原则,积极推进多元化发展,通过结合与吸收,将理论知识充分应用于实践中。 展开更多
关键词 文化观照 美声唱法 经验汲取
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从“Bel canto”的兴落发展探究不同时期人对其的理解——简析罗西尼、多尼采蒂、贝里尼对“Belcanto”的理解
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作者 李敏 《艺术教育》 2014年第12期132-133,共2页
19世纪上半叶,罗西尼作为复兴"Bel canto"的勇者在继承的基础上做了很多革新,在多尼采蒂和贝里尼的鼎力协助下,使得"Bel canto"的第二个黄金时代不断走向稳定,他们的作品不但继承了第一个黄金时代的传统,更重要的... 19世纪上半叶,罗西尼作为复兴"Bel canto"的勇者在继承的基础上做了很多革新,在多尼采蒂和贝里尼的鼎力协助下,使得"Bel canto"的第二个黄金时代不断走向稳定,他们的作品不但继承了第一个黄金时代的传统,更重要的是将华彩乐段编入乐谱中,避免了过去像阉人歌手肆意演唱作品的演唱方式,对声乐科学长久的发展起到了奠定性的作用。文章通过简析三位作曲家的创作风格,以期深入了解了第二个黄金时期作曲家对"Bel canto"的解释。 展开更多
关键词 罗西尼 多尼采蒂 贝里尼 “bel canto”
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温阳散结中药诱导BEL-7402细胞凋亡的初步研究 被引量:23
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作者 张侠 刘端棋 +2 位作者 刘彦珠 王沛 陈信义 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第7期428-430,共3页
目的 :探讨温阳散结中药的抗肿瘤机制 ,研究温阳散结中药诱导BEL 740 2细胞凋亡作用。方法 :采用细胞形态学、原位末端标记和流式细胞技术 ,观察温阳散结中药对BEL 740 2细胞的影响。结果 :BEL 740 2细胞经中药处理后 ,光镜下可见凋亡... 目的 :探讨温阳散结中药的抗肿瘤机制 ,研究温阳散结中药诱导BEL 740 2细胞凋亡作用。方法 :采用细胞形态学、原位末端标记和流式细胞技术 ,观察温阳散结中药对BEL 740 2细胞的影响。结果 :BEL 740 2细胞经中药处理后 ,光镜下可见凋亡细胞的形态学特征性改变 ,TUNEL标记阳性 ,流式细胞仪分析DNA含量 ,在非凋亡细胞二倍体峰 (G1)之前细胞出现典型的凋亡细胞峰 (Ap峰 )。 0 0 0 5g·ml-1中药组和 0 0 1g·ml-1中药组发生凋亡的细胞数分别为 13 9%和 2 1 6 %。结论 :温阳散结中药可诱导BEL 740 2细胞发生凋亡 ,并有随浓度升高作用增强的趋势 ,实验结果表明 ,诱导肿瘤细胞凋亡可能是温阳散结中药治疗肝癌的作用机理之一。 展开更多
关键词 bel-7402细胞 浊国阳散结中药 细胞凋亡 肝癌
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蒺藜皂苷对人肝癌细胞BEL7402生长抑制和诱导凋亡作用的研究 被引量:17
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作者 孙斌 瞿伟菁 +3 位作者 张晓玲 杨煌建 庄秀园 章平 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期681-684,共4页
目的 :探讨蒺藜皂苷 (STT)对体外培养的人肝癌细胞BEL 74 0 2的增殖抑制作用及诱导凋亡作用。方法 :应用MTT与SRB法检测蒺藜皂苷对人肝癌细胞BEL 74 0 2的抑制作用 ,采用形态学观察以及流式细胞术 (FCM)检测了STT诱导人肝癌细胞BEL 74 ... 目的 :探讨蒺藜皂苷 (STT)对体外培养的人肝癌细胞BEL 74 0 2的增殖抑制作用及诱导凋亡作用。方法 :应用MTT与SRB法检测蒺藜皂苷对人肝癌细胞BEL 74 0 2的抑制作用 ,采用形态学观察以及流式细胞术 (FCM)检测了STT诱导人肝癌细胞BEL 74 0 2凋亡的效应 ,采用流式细胞术检测BEL 74 0 2细胞Bcl 2蛋白表达。结果 :①STT能够剂量依赖地抑制人肝癌细胞BEL 74 0 2的增殖 ;②细胞显现典型的凋亡形态学改变 ,FCM出现凋亡峰 ;③STT能降低BEL 74 0 2细胞的Bcl 2蛋白表达。结论 :STT在体外能抑制BEL 74 0 2细胞的增殖并能诱导细胞凋亡 ,其诱导凋亡作用的途径之一是下调Bcl 2蛋白表达。 展开更多
关键词 蒺藜皂苷 肝癌细胞 bel-7402 生长抑制 细胞凋亡 肿瘤 STT
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白花蛇舌草体外对人肝癌多药耐药细胞Bel-7402抗肿瘤活性的研究 被引量:41
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作者 于春艳 李薇 +3 位作者 刘玉和 盖小东 张维瑜 陆军 《北华大学学报(自然科学版)》 CAS 2004年第3期221-223,共3页
目的探讨白花蛇舌草在体外对肝癌多药耐药细胞Bell-7402生长活性的抑制作用.方法 MTT法检测白花蛇舌草提取物对Bel-7402生长的抑制作用,有无逆转Bel-7402的多药耐药性;用淋巴细胞转化实验检测白花蛇舌草提取物能刺激T淋巴细胞增殖,并筛... 目的探讨白花蛇舌草在体外对肝癌多药耐药细胞Bell-7402生长活性的抑制作用.方法 MTT法检测白花蛇舌草提取物对Bel-7402生长的抑制作用,有无逆转Bel-7402的多药耐药性;用淋巴细胞转化实验检测白花蛇舌草提取物能刺激T淋巴细胞增殖,并筛选出药物的安全剂量范围;集落形成实验观察体外抗癌药物的敏感性.结果白花蛇舌草提取物对肝癌多药耐药细胞Bel-7402的生长具有明显的抑制作用,且这种作用是剂量依赖关系.结论白花蛇舌草提取物在体外对人肝癌多药耐药细胞Be1-7402有抑制作用. 展开更多
关键词 白花蛇舌草 bel-7402 淋巴细胞转化 多药耐药
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高良姜素诱导肝癌BEL-7402细胞凋亡的研究 被引量:20
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作者 罗辉 马超 +3 位作者 汪亚君 陈杰 刘江琴 张海涛 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1204-1207,共4页
目的:研究高良姜素诱导肝癌细胞系BEL-7402细胞凋亡。方法:MTT法测定BEL-7402细胞毒性及细胞生长,荧光显微镜观察细胞形态学的变化,流式细胞仪分析细胞周期和线粒体膜电位的变化。发色底物法检测Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9活... 目的:研究高良姜素诱导肝癌细胞系BEL-7402细胞凋亡。方法:MTT法测定BEL-7402细胞毒性及细胞生长,荧光显微镜观察细胞形态学的变化,流式细胞仪分析细胞周期和线粒体膜电位的变化。发色底物法检测Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9活性变化。结果:高良姜素对BEL-7402细胞IC50为30.15mg/L,BEL.7402细胞生长曲线表明,高良姜素浓度增高,生长率明显下降。细胞凋亡可在20~80mg/L高良姜素处理后24h出现。凋亡细胞主要表现为核染色质固缩,荧光染色增强。高良姜素阻断细胞于G1期,线粒体膜电位降低。Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9被激活,呈时间依赖性改变。高良姜素处理BEL-7402细胞6h时Caspase-9活性最高,而Caspase-6活性在12h达峰值,Caspase-3活性峰值时间在18h。结论:高良姜素可以诱导BEL-7402细胞发生凋亡,其途径可能是通过线粒体旁路。 展开更多
关键词 高良姜素 bel-7402 荧光 凋亡 线粒体膜电位
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蜂毒素对人肝癌BEL-7402细胞裸鼠皮下移植瘤生长及肿瘤血管生成的影响 被引量:26
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作者 宋长城 吕祥 +3 位作者 程彬彬 杜娟 李柏 凌昌全 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1315-1322,共8页
背景与目的:蜂毒素体外抗骨肉瘤、白血病及宫颈癌的研究已有报道。我们先前的实验发现蜂毒素能够抑制人肝癌细胞株BEL-7402细胞增殖,并诱导其凋亡。本研究拟探讨蜂毒素在裸小鼠体内的抗肝癌作用及其对肿瘤血管生成的影响。方法:建立人肝... 背景与目的:蜂毒素体外抗骨肉瘤、白血病及宫颈癌的研究已有报道。我们先前的实验发现蜂毒素能够抑制人肝癌细胞株BEL-7402细胞增殖,并诱导其凋亡。本研究拟探讨蜂毒素在裸小鼠体内的抗肝癌作用及其对肿瘤血管生成的影响。方法:建立人肝癌BEL-7402细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为5组:生理盐水对照组(10ml/kg)、阳性对照组(沙利度胺,200mg/kg)、蜂毒素低剂量组(40μg/kg)、蜂毒素中剂量组(60μg/kg)和蜂毒素高剂量组(80μg/kg)。测量各组裸鼠肿瘤体积,观察蜂毒素的体内抗肿瘤作用。光镜下观察肿瘤组织及瘤内血管形态。采用免疫组织化学SABC法检测微血管密度(microvessel density,MVD)及血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)和核转录因子κB(nuclear factor κB,NF-κB)蛋白表达。应用实时荧光定量PCR法检测BEL-7402细胞VEGF mRNA和bFGF mRNA的表达。结果:蜂毒素低、中、高剂量组裸鼠肿瘤相对体积(V/V0)分别为4.42±0.58、3.47±0.97和3.06±1.23,与生理盐水对照组(V/V0为9.06±1.45)相比,蜂毒素处理组肿瘤体积明显缩小(P<0.01)。与生理盐水对照组MVD(16.50±2.35)比较,蜂毒素低、中、高剂量组肿瘤组织MVD(11.33±1.86、9.17±1.17和6.67±1.21)明显降低(P<0.01)。显微镜下可见蜂毒素各剂量组肿瘤组织呈片状坏死,肿瘤间质内可见肿瘤血管,并有血管破坏现象。蜂毒素低、中、高剂量组肿瘤组织VEGF(2.59±0.27、2.61±0.17和1.55±0.22)、bFGF(2.45±0.78、2.27±0.36和2.10±0.27)及NF-κB(2.79±0.29、2.71±0.66和2.26±0.56)阳性表达指数均低于生理盐水对照组(3.80±0.60、4.43±0.34和4.98±0.63)(P<0.01)。实时荧光定量PCR检测显示,蜂毒素能够抑制BEL-7402细胞VEGF mRNA和bFGF mRNA的表达。结论:蜂毒素能够明显抑制人肝癌BEL-7402细胞裸鼠移植瘤的生长,影响NF-κB表达、下调VEGF和bFGF的表达、抑制肝癌血管生成可能是其抗肿瘤作用的重要机理之一。 展开更多
关键词 蜂毒素/药理学 bel-7402细胞移植瘤 血管生成抑制剂 小鼠
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根皮素诱导肝癌BEL-7402细胞凋亡 被引量:18
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作者 罗辉 汪亚君 +2 位作者 陈杰 刘江琴 张海涛 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期1249-1251,共3页
目的研究根皮素诱导肝癌细胞系BEL-7402细胞凋亡。方法MTT法测定BEL-7402细胞毒性,荧光显微镜观察细胞形态学的变化,流式细胞仪分析细胞周期和线粒体膜电位的变化。发色底物法检测Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9活性变化。结果根皮素... 目的研究根皮素诱导肝癌细胞系BEL-7402细胞凋亡。方法MTT法测定BEL-7402细胞毒性,荧光显微镜观察细胞形态学的变化,流式细胞仪分析细胞周期和线粒体膜电位的变化。发色底物法检测Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9活性变化。结果根皮素对BEL-7402细胞IC50在89.23μg/mL。BEL-7402细胞生长曲线表明,根皮素浓度增高,生长率明显下降。细胞凋亡可在40-160μg/mL根皮素处理后24h出现。凋亡细胞主要表现为核染色质固缩,荧光染色增强。根皮素阻断细胞于G1期,线粒体膜电位降低。Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9被激活,呈时间依赖性改变。根皮素处理BEL-7402细胞12hCaspase-9活性最高,而Caspase-6活性在18h达峰值,Caspase-3活性峰值时间在24h后。结论根皮素可以诱导BEL-7402细胞发生凋亡,途径可能是通过线粒体旁路。 展开更多
关键词 根皮素 bel-7402 细胞凋亡 线粒体膜电位
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胡桃醌对人肝癌BEL-7402细胞亚显微结构的影响 被引量:11
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作者 陈丽 那顺巴雅尔 +2 位作者 张建 于娟 顾为望 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1208-1211,共4页
目的了解胡桃醌对人肝癌BEL-7402细胞亚显微结构的影响。方法12.5μmol/L胡桃醌作用于BEL-7402细胞24h后固定,分别行HE染色、考马斯亮蓝染色、扫描电镜及透射电镜样品制备。结果12.5μmol/L胡桃醌处理组细胞形态和细胞骨架发生改变。扫... 目的了解胡桃醌对人肝癌BEL-7402细胞亚显微结构的影响。方法12.5μmol/L胡桃醌作用于BEL-7402细胞24h后固定,分别行HE染色、考马斯亮蓝染色、扫描电镜及透射电镜样品制备。结果12.5μmol/L胡桃醌处理组细胞形态和细胞骨架发生改变。扫描电镜结果显示BEL-7402细胞胞体体积缩小,与周围细胞群脱离,表面微绒毛卷曲、畸变、小球结构逐渐增多,细胞间连接逐渐断裂,细胞间隙增宽,有凋亡小体形成。透射电镜结果显示胡桃醌作用BEL-7402细胞24h后,细胞内质网扩大,线粒体结构疏松,胞核核仁裂解,凋亡小体形成。结论胡桃醌能有效改变人肝癌BEL-7402细胞亚显微结构,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 bel-7402 细胞骨架 亚显微结构 细胞凋亡
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虫草素对人肝癌Bel-7402细胞抑制及作用机制的研究 被引量:25
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作者 卢群 罗少洪 +1 位作者 何伟彬 梅文杰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1477-1477,共1页
虫草素是虫草的主要活性成分,具有抗肿瘤、抑菌、抑制病毒、抑制蛋白质激酶活性等作用[1-2]。研究证明虫草素能抑制mRNA的合成,诱导细胞凋亡,促进细胞分化,对多种肿瘤细胞的生长具有抑制作用[1-2]。诱导肿瘤细胞凋亡以及作用靶点已成研... 虫草素是虫草的主要活性成分,具有抗肿瘤、抑菌、抑制病毒、抑制蛋白质激酶活性等作用[1-2]。研究证明虫草素能抑制mRNA的合成,诱导细胞凋亡,促进细胞分化,对多种肿瘤细胞的生长具有抑制作用[1-2]。诱导肿瘤细胞凋亡以及作用靶点已成研究的焦点。为探讨虫草素诱导肿瘤细胞凋亡的新靶点。 展开更多
关键词 虫草素 人肝癌bel-7402细胞 抑制 凋亡 机制 P53 BCL-2
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苦参碱诱导人肝癌细胞BEL-7402自吞噬性死亡 被引量:15
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作者 皇甫超申 刘彬 +1 位作者 马永超 邓锦波 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1347-1350,共4页
目的研究苦参碱诱导人肝癌BEL-7402细胞自吞噬和自吞噬性死亡作用。方法体外培养人肝癌BEL-7402细胞,应用MTT法测定细胞增殖抑制率,流式细胞术测定细胞凋亡,自噬体标记物LC3免疫荧光定量检测自吞噬,透射电镜分析细胞自吞噬死亡超微结构... 目的研究苦参碱诱导人肝癌BEL-7402细胞自吞噬和自吞噬性死亡作用。方法体外培养人肝癌BEL-7402细胞,应用MTT法测定细胞增殖抑制率,流式细胞术测定细胞凋亡,自噬体标记物LC3免疫荧光定量检测自吞噬,透射电镜分析细胞自吞噬死亡超微结构改变。结果苦参碱抑制细胞增殖呈质量浓度依赖性,作用48h的IC50值为1.1mg/mL;0.6~1.6mg/mL苦参碱作用12h可诱导BEL-7402细胞凋亡逐渐增多,1.2mg/mL作用12h时细胞凋亡率达(44.88±0.78)%;1.2mg/mL苦参碱持续作用可以诱导自吞噬阳性细胞逐渐增多,作用12h时自吞噬阳性细胞达(63.16±0.29)%;超微结构显示细胞凋亡呈现自噬性细胞死亡特点。结论苦参碱体外能诱导BEL-7402细胞自吞噬和自噬性死亡。 展开更多
关键词 苦参碱 自噬 自噬性死亡 肝癌细胞bel-7402
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脂蟾毒配基通过线粒体途径诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡的研究 被引量:20
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作者 黄应申 肖军军 +3 位作者 孟书聪 董晓敏 王传社 果德安 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第20期1141-1145,共5页
目的:探讨中药蟾酥主要成份之一脂蟾毒配基(Resibufogenin,RG)诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡的作用机制。方法:体外培养Bel-7402细胞,采用酸性磷酸酶法检测RG对细胞增殖抑制作用;吖啶橙荧光染色观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡... 目的:探讨中药蟾酥主要成份之一脂蟾毒配基(Resibufogenin,RG)诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡的作用机制。方法:体外培养Bel-7402细胞,采用酸性磷酸酶法检测RG对细胞增殖抑制作用;吖啶橙荧光染色观察细胞形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率及线粒体膜电位(△ψm)变化;WesternBlot检测与细胞凋亡相关蛋白表达的变化。结果:RG显著抑制细胞增殖,其作用24、48、72h的IC50分别为3.8、1.8、1.2"mol/L;经10"mol/LRG处理24h后,癌细胞出现凋亡的形态变化,其凋亡率明显高于对照组细胞;RG引起△ψm下降,释放入胞质中的细胞色素c(cytochromec,CytC)增多,促进Caspase-3蛋白活化,抑制Bcl-2蛋白表达,诱导细胞凋亡。结论:RG诱导人肝癌Bel-7402细胞凋亡,其诱导凋亡作用可能通过线粒体通路实现。 展开更多
关键词 脂蟾毒配基 细胞凋亡 人肝癌bel-7402细胞 线粒体跨膜电位(△ψm)
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