超声内镜检查术联合血清丝氨酸蛋白酶抑制剂Kazal 1型和分泌型磷蛋白1对食管癌的早期诊断价值

目的探讨超声内镜检查术(EUS)联合血清丝氨酸蛋白酶抑制剂Kazal 1型(SPINK1)和分泌型磷蛋白1(SPP1)早期诊断食管癌的临床价值。方法选取2021年6月-2023年5月于该院就诊的276例患者作为研究对象。经手术病理诊断为食管癌92例,作为食管癌组,同期收治且经组织活检判定为食管良性病变89例,作为良性病变组,同期在该院体检且身体健康的95例正常人,作为健康对照组。以病理结果为金标准,验证EUS诊断食管癌的准确率;比较3组患者血清SPINK1和SPP1表达情况;探讨食管癌患者血清SPINK1和SPP1表达与病理特征的关系;采用受试者操作特征曲线(ROC curve)分析EUS联合血清SPINK1和SPP1水平检测对食管癌的早期诊断效能。结果EUS结果显示,81例被诊断为食管癌,79例被诊断为良性病变,11例漏诊,10例误诊,准确率为88.40%(160/181);与健康对照组和良性病变组比较,食管癌组血清SPINK1和SPP1表达水平明显升高,良性病变组血清SPINK1和SPP1表达水平明显高于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);血清SPINK1表达与患者肿瘤直径>2 cm、淋巴结转移、淋巴结阳性和组织分级为Ⅲ级有关(P<0.05),血清SPP1表达水平与肿瘤直径>2 cm、淋巴结转移、淋巴结阳性和雌激素受体阳性有关(P<0.05);ROC curve显示,EUS、血清SPINK1、SPP1水平单独检测和三者联合检测,早期诊断食管癌的曲线下面积(AUC)分别为0.862,0.834,0.782和0.926,三者联合早期诊断食管癌的临床效能明显优于EUS、血清SPINK1和SPP1单独检测(Z=2.30、Z=3.70、Z=4.23,P=0.022、P=0.000、P=0.000)。结论食管癌患者血清SPINK1和SPP1表达均异常上调,EUS联合血清SPINK1和SPP1表达水平联合检测用于早期诊断食管癌,具有较高的临床应用价值。

乳腺癌患者血清丝氨酸蛋白酶抑制剂Kazal 1型、着丝粒蛋白U水平及预后分析

目的 探讨乳腺癌患者血清丝氨酸蛋白酶抑制剂Kazal 1型(SPINK1)、着丝粒结合蛋白(CENPU)表达水平及其与患者预后的关系。方法 选择2018年8月—2021年8月在本院确诊为乳腺癌的115例患者作为乳腺癌组,并根据2年预后将患者分为预后良好组(92例)与预后不良组(23例);另选择98名同期健康体检者作为对照组。采用ELISA检测血清中SPINK1水平,采用qRT-PCR法检测血清CENPU表达水平;ROC曲线分析血清SPINK1、CENPU水平对乳腺癌患者预后不良的预测价值;Cox回归模型分析乳腺癌患者2年预后的影响因素。结果 乳腺癌患者血清SPINK1、CENPU水平明显高于对照组(P<0.05)。有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ期乳腺癌患者血清中SPINK1、CENPU水平明显高于无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ+Ⅱ期乳腺癌患者(P<0.05)。预后不良组患者血清SPINK1、CENPU水平高于预后良好组(P<0.05)。ROC曲线分析显示,SPINK1、CENPU预测预后不良的曲线下面积(AUC)分别是0.844(95%CI=0.744~0.943)、0.877(95%CI=0.801~0.953),二者联合预测的AUC为0.946(95%CI=0.899~0.994)。SPINK1、CENPU、淋巴结转移、TNM分期是乳腺癌患者2年内预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结论 SPINK1和CENPU水平在乳腺癌患者血清中高表达,是乳腺癌患者预后不良的危险因素,可能作为评估乳腺癌患者预后的标志物。

草鱼丝氨酸蛋白粗酶的提取、酶学特性及大豆胰蛋白酶抑制剂对其活性的影响

【目的】探究草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶(MBSP)粗酶的提取方法、酶学特性,以及大豆胰蛋白酶抑制剂(STI)对草鱼鱼糜凝胶品质的影响,为改善传统草鱼鱼糜制品品质提供理论基础。【方法】从草鱼背肌中提取MBSP粗酶液,探究提取过程中漂洗次数(1~5次)、热处理温度(35、40、45、50、55℃)、酸洗脱pH值(pH 4.0、pH 5.5)对提取液酶活性的影响,获得最佳提取条件;设置梯度实验探究所得酶的最适温度、pH、稳定性等酶学特性,最后探究大豆胰蛋白酶抑制剂对粗酶酶活性的影响及其对草鱼鱼糜凝胶性能的调控。【结果及结论】经3次漂洗、45℃热处理、pH 4.0酸洗脱后得到的草鱼MBSP粗酶液酶活性最高(P<0.05);所得MBSP最适pH值在9.0附近,最适温度为45℃,具有较好的温度稳定性(P<0.05),其活性可被Na^(+)在一定程度上抑制且被K+、Ca^(2+)激活(P<0.05);STI添加可以显著改善草鱼鱼糜质构,其对草鱼肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶有可逆竞争性抑制作用,半抑制质量浓度为10.85μg/mL,抑制常数Ki=0.24μmol/L。

肝细胞癌患者血浆Ⅰ型丝氨酸蛋白酶抑制剂kazal表达及意义

目的探讨肝细胞癌患者血浆Ⅰ型丝氨酸蛋白酶抑制剂kazal(serine peptidase inhibitor kazal 3type 1,SPINK1)的表达及意义。方法肝细胞癌患者70例,肝硬化患者30例,体检健康者30例(对照组),抽取空腹静脉血后应用ELISA法检测血浆SPINK1、甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)水平;分析SPINK1与肝细胞癌患者临床病理特征的关系;绘制ROC曲线分析血浆SPINK1、AFP诊断肝细胞癌的效能。结果肝细胞癌组、肝硬化组血浆SPINK1水平[(2.45±0.83)、(2.07±0.81)μg/L]高于对照组[(1.32±0.47)μg/L],且肝细胞癌组高于肝硬化组,差异均有统计学意义(P<0.001);肝细胞癌组血浆AFP水平[(128.72±111.49)μg/L]高于肝硬化组[(47.38±46.16)μg/L]和对照组[(33.36±28.69)μg/L](P<0.01),肝硬化组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);肝细胞癌患者血浆SPINK1水平在年龄≥50岁与<50岁[(2.52±0.90)、(2.27±0.56)μg/L]、不同性别[(2.33±0.73)、(2.66±0.94)μg/L]上差异无统计学意义(P>0.05),肿瘤分期Ⅰ期者[(2.28±0.78)μg/L]低于Ⅱ+Ⅲ期者[(2.72±0.85)μg/L](P<0.05);ROC曲线分析结果显示,血浆SPINK1诊断肝细胞癌的AUC为0.835,最佳截断值为1.695μg/L,灵敏度为85.71%,特异度为54.90%;血浆AFP诊断肝细胞癌的AUC为0.735,最佳截断值为94.927μg/L,灵敏度为63.41%,特异度为62.50%;血浆SPINK1诊断肝细胞癌的灵敏度高于血浆AFP,特异度低于血浆AFP(P<0.01)。结论血浆SPINK1可用于肝细胞癌患者的诊断,其诊断肝细胞癌的灵敏度高于血浆AFP。

家蚕Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂基因BmSPI3的克隆与表达特征分析

Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂(SPI)在机体的发育、免疫等生理过程中发挥重要的作用。从家蚕蛹cDNA文库中获得一条全长为728bp的基因序列,对该基因编码的氨基酸序列进行同源性比对,发现其蛋白具有保守的Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂结构域(CⅠ-X3-CⅡ-X8-CⅢ-X14-CⅣ-X6-CⅤ-X13-CⅥ),且P1活性位点为赖氨酸(K),因此将该基因命名为BmSPI3(Gen-Bank登录号:DN237641)。通过PCR扩增BmSPI3基因,经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后成功构建了重组表达质粒pGEX-4T-1-BmSPI3,并转化到E.coliBL21(DE3)表达,经SDS-PAGE电泳检测在约36kD处有明显的蛋白表达条带。提取各发育时期蚕体和5龄幼虫各个组织的总RNA进行荧光定量PCR,检测结果表明:BmSPI3在5龄幼虫期表达量最高,卵期最低;在5龄幼虫表皮中的表达量最高,在马氏管的表达量最低。推测BmSPI3对胰蛋白酶和类胰蛋白酶具有抑制作用。

血清中丝氨酸肽酶抑制剂Kazal 4型联合癌胚抗原、糖类抗原199对结直肠癌的诊断价值

目的 检测外周血中丝氨酸肽酶抑制剂Kazal 4型(SPINK4)的水平,及联合癌胚抗原、糖类抗原199(CA199)对结直肠癌的诊断价值。方法 收集2020年1月至2021年7月在焦作市第二人民医院就诊的结直肠癌病人85例,及同时期来该院体检的健康志愿者45例。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测病人外周血中SPINK4、癌胚抗原和糖类抗原199(CA199)的水平,比较SPINK4、癌胚抗原和CA199的表达水平与结直肠癌临床病理特征的相关性,受试者操作特征曲线(ROC曲线)评估SPINK4、癌胚抗原和CA199单独及联合检测诊断结直肠癌的临床价值。结果 结直肠癌组外周血中SPINK4(15.84±2.10)μg/L、癌胚抗原(24.62±4.81)μg/L和CA199(58.10±6.62)U/mL的水平均高于健康对照组(2.85±0.54)μg/L、(1.02±0.08)μg/L和(18.36±4.08)U/mL,结直肠癌术后外周血中SPINK4的水平为10.25±1.84,与术前相比显著降低,组间比较均差异有统计学意义(P<0.05)。SPINK4表达水平与病人年龄、肿瘤长径、分化程度、TNM分期、脉管浸润和淋巴结转移有关,癌胚抗原表达水平与病人分化程度和TNM分期有关,CA199表达水平与病人分化程度、TNM分期、脉管浸润和淋巴结转移有关。SPINK4+癌胚抗原+CA199联合检测诊断结直肠癌的曲线下面积0.943和准确度89.2%均高于SPINK4(0.764、70.0%)、癌胚抗原(0.644、77.4%)、CA199(0.674、63.1%)的单独检测。结论 SPINK4和癌胚抗原在结直肠癌病人外周血中表达水平增加,与CA199联合检测可提高诊断结直肠癌的准确度,具有一定的临床应用价值。

青蛤Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂基因的克隆及其在组织间的表达分析

利用构建的SMART-cDNA文库及高通量测序方法，获得了青蛤Kazal家族丝氨酸蛋白酶抑制剂基因（Serine Protease Inhibitor，SPI）的全长序列，采用荧光定量PCR方法分析了SPI在青蛤各组织的表达情况，并在鳗弧菌胁迫下分析了SPI在青蛤血液中的时序表达关系。结果表明，青蛤SPI基因全长587 bp，CDS为67-520 bp，编码151个氨基酸，具有19个氨基酸的信号肽序列；荧光定量PCR结果显示，该基因在血液、肝脏、外套膜、鳃和闭壳肌等组织中表达差异明显，其中血液中表达水平最高，在闭壳肌中表达水平较低，其他组织表达量极少；在鳗弧菌刺激后3 h和48 h青蛤血液中SPI的表达量出现明显上调的趋势且与对照组有极显著性差异（P〈0.01）,说明SPI基因在青蛤的免疫反应中具有重要的作用。

非小细胞肺癌患者术后组织中丝氨酸蛋白激酶抑制剂kazalⅠ型、CD147和E-cadherin的表达及意义

目的检测非小细胞肺癌患者术后组织中丝氨酸蛋白激酶抑制剂KazalⅠ型(SPINK1)、白细胞分化抗原(CD)147和上皮型黏附蛋白(E-cadherin)的表达,分析其关系及临床意义。方法选取确诊的103例非小细胞肺癌患者术后组织作为观察组,选取76例病理证实切端为正常的支气管黏膜组织作为对照组,应用免疫组化二步法检测两组中SPINK1、CD147和E-cadherin的表达。结果两组中SPINK1、CD147和E-cadherin表达的阳性率差别均有统计学意义。观察组中SPINK1、CD147和E-cadherin的表达与肿瘤的最大径、是否伴有坏死、胸膜累犯、淋巴结转移和脉管浸润相关。线性相关分析显示SPINK1和E-cadherin、CD147和E-cadherin的表达均具有负相关性。结论非小细胞肺癌患者术后组织SPINK1和CD147高表达,E-cadherin低表达可以促进肿瘤的发生和进展,SPINK1和CD147在发挥作用过程中可能与对E-cadherin的调节有关。

血清丝氨酸蛋白酶抑制剂、内脂素、趋化素在2型糖尿病并发非酒精性脂肪性肝病中的表达及与胰岛素抵抗的关系

目的探讨血清丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)、内脂素(Visfatin)、趋化素(Chemerin)在2型糖尿病(T2DM)并发非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)病人中的表达及其与胰岛素抵抗(IR)的关系。方法选取2018年1月至2019年8月南阳市中心医院收治的T2DM,并发NAFLD病人76例作为观察组,未并发NAFLD病人62例作为对照组。比较两组血清Vaspin、Visfatin、Chemerin水平,受试者工作特征(ROC)曲线分析上述因子对T2DM并发NAFLD的诊断价值,并结合肝影像学诊断结果对比不同病情程度病人血清Vaspin、Visfatin、Chemerin水平、胰岛素参数[胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素敏感指数(ISI)],分析各血清因子与胰岛素参数关联性及T2DM并发NAFLD病情程度的影响或关联作用因素。结果观察组血清Vaspin[(82.03±12.46)ng/L比(70.81±11.22)ng/L]、Visfatin[(39.58±6.90)µg/mL比(33.27±5.73)µg/mL]、Chemerin[(53.37±8.61)ng/L比(45.39±8.02)ng/L]水平及HOMA-IR[(2.71±0.67)比(1.36±0.54)]高于对照组(P<0.05);Chemerin诊断T2DM并发NAFLD的AUC值最大,为0.758。随T2DM并发NAFLD病情加重血清Vaspin、Visfatin、Chemerin、HOMA-IR呈升高趋势,ISI呈降低趋势(P<0.05)。血清Vaspin、Visfatin、Chemerin与HOMA-IR呈正相关,与ISI呈负相关(P<0.05)。BMI、WHR、血清Vaspin、Visfatin、Chemerin、HOMAIR、ISI是T2DM并发NAFLD病情程度的独立影响或关联作用因素(P<0.05)。结论T2DM并发NAFLD病人存在血清Vaspin、Visfatin、Chemerin异常表达情况,且表达水平与IR关系密切,可能通过诱导IR间接参与T2DM并发NAFLD的发病发展过程。

腺苷脱氨酶、C型凝集素及丝氨酸蛋白酶抑制剂基因在白纹伊蚊唾液腺中的表达

目的了解腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)基因、C型凝集素(C-lectin)基因和丝氨酸蛋白酶抑制剂(serine protease inhibitor,serpin)基因在白纹伊蚊唾液腺中的表达情况。方法分别制备未吸血雌蚊唾液腺(SG组)和吸血雌蚊唾液腺(BSG组)、雌蚊躯体(无头无唾液腺,C组)和雄蚊组织(无头含唾液腺,M组)的总RNA,采用实时荧光定量RT-PCR技术,以β肌动蛋白(β-actin)基因作为内参,根据GenBank公布的ADA、C-lectin和Serpin基因序列设计特异性引物进行RT-PCR,分析以上基因在不同组织中的表达情况。结果与雌蚊躯体和雄蚊组织中相对表达量相比,ADA基因在雌蚊唾液腺中的表达分别提高了545倍和123倍(P<0.01);C-lectin基因在雌蚊唾液腺中的表达分别提高了3929倍和4973倍(P<0.01);Serpin基因在雌蚊唾液腺中的表达分别提高了1911倍和2978倍(P<0.01)。吸血前后雌蚊唾液腺中ADA、C-lectin和Serpin等3个基因的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ADA在蚊虫组织中均有表达,在雌蚊唾液腺中高表达;C-lectin和serpin基因在雌蚊唾液腺中特异高表达。

神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂在大鼠小胶质细胞缺氧／复氧模型上的作用

目的探讨神经源性丝氨酸蛋白酶抑制剂(neuroserpin,NSP)是否可以改变组织型纤溶酶原激活物(tissueplasminogen activator,tPA)对于小胶质细胞(microglia,MG)活化的影响。方法体外原代培养的大鼠皮层MG并鉴定。建立缺氧-复氧模型并鉴定。首先,使用ELISA试剂盒测定MG在缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)状态下自身释放tPA的含量,细胞被分为正常组、PBS对照组和OGD3h复氧不同时间组(1、3、5、7、24 h)。其次,研究NSP在MG缺氧/复氧时的作用,本部分实验分3组,分别为缺氧/复氧干预组、tPA干预组及tPA+NSP干预组。以上各组均设3个复孔,实验重复3次。采用倒置相差显微镜直接观察盖玻片上细胞形态学变化,CCK-8法检测各组间细胞增殖率,ELISA试剂盒测定IL-1β和NO含量。结果 MG在H/R时合成tPA,OGD3h复氧3h时释放量最多。H/R时MG激活,炎性因子IL-1β和NO的释放增多。tPA干预MG后,细胞活化并增殖、IL-1β和NO的释放增多。各NSP预处理组细胞活化、增殖和炎性因子的释放增多均没有tPA或H/R干预组明显。结论 MG在H/R时合成tPA。H/R早期即诱发了MG的活化。tPA可以进一步诱发MG的增殖和活化。H/R和tPA的干预均引起IL-1β和NO的释放。NSP可减轻H/R和tPA干预引起的MG活化和增殖,减少MG中IL-1β和NO的释放。

初诊2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病患者利拉鲁肽治疗后血清脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂水平的变化

目的探讨初诊2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者血清脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)变化及胰高糖素样肽-1(GLP-1)类似物利拉鲁肽对血浆Vaspin水平的影响。方法将92例新诊断2型糖尿患者,按有无脂肪肝分为单纯糖尿病组52例(DM组),合并NAFLD组40例(DM+NAFLD组),另选健康对照组50例(NGT组)。测定血清Vaspin、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、血脂、糖化血红蛋白(HbA1c)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、谷氨酰转肽酶(GGT),采用稳态模型(HOMA-IR)评估胰岛素抵抗。分析Vaspin与脂肪肝的关系,观察利拉鲁肽治疗前后T2DM合并NAFLD患者血浆Vaspin水平变化。结果 DM+NAFLD组血清Vaspin水平高于NGT组与DM组,差异有显著性(P<0.01),DM组高于NGT组,差异有显著性(P<0.01),DM组与DM+NAFLD组比较,差异无显著性(P>0.05)。经利拉鲁肽治疗后,Vaspin水平较治疗前明显降低,差异有显著性(P<0.01),体重、FBG、HbA1c、InHOMAIR较治疗前降低,差异有显著性(P<0.01)。Vaspin与性别、TG、HbA1c、InFINS、InHOMA-IR成正相关(r值分别为0.561,0.279,0.481,0.251,0.181;P<0.05)。Logistic回归分析显示InFINS、HbA1c和TG为影响Vaspin水平的独立相关因素,Vaspin、HbA1c、InHOMA-IR和TG是初诊T2DM合并NAFLD危险因素。结论血清Vaspin水平的变化可能在初诊T2DM合并NAFLD的发生发展中起一定作用,利拉鲁肽能有效改善初诊T2DM合并NAFLD患者的糖脂代谢和胰岛素敏感性,同时降低血浆Vaspin水平。

2型糖尿病患者血清脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂与糖脂代谢的相关性研究

目的探讨2型糖尿病患者血清中脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)与糖脂代谢的关系。方法用ELISA法测定80例2型糖尿病,69例空腹糖耐量受损患者,73例健康对照者血清中vaspin的水平,同时测定空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TCHO)、甘油三酯(TG)、空腹胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(HBA1C)、超敏CRP(hsCRP),并做统计学处理。结果 2型糖尿病组vaspin水平显著高于健康对照组和空腹糖耐量受损组(P<0.05),空腹糖耐量受损组vaspin水平高于健康对照组(P<0.05)。同组患者中肥胖亚组vaspin水平高于非肥胖亚组(P<0.05),2型糖尿病组中血清vaspin与体质指数(body mas index,BMI)、FBG、FINS、HOMA-IR、TG、hsCRP呈正相关(r值分别为0.472、0.464、0.302、0.347、0.268、0.311,P<0.05)。结论 Vaspin是联系2型糖尿病糖脂代谢的重要脂肪因子,与BMI、FBG、FINS、HOMA-IR、TG、hsCRP呈正相关,可为2型糖尿病治疗提供新思路。

中国明对虾Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂基因(Fc-Kazal)的重组表达及活性分析

Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂可以通过精确调控丝氨酸蛋白酶的活力,在生物体的防御应答等众多生物过程中发挥重要作用。以前期克隆的中国明对虾Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂基因(Fc-Kazal,GenBank注册号为DQ318856)为基础,对其功能结构域进行序列比对和进化分析;组织表达分析结果表明,该基因在血细胞、鳃和淋巴器官等组织中高水平表达,而在眼柄、神经和肌肉中无表达;利用原核表达系统对该基因成熟肽区域成功进行了重组表达,纯化后的目的蛋白最终得率为0.4 g/L培养液;活性分析结果显示,复性后的rFc-Kazal对鳗弧菌、金黄色葡萄球菌、杀鲑气单胞菌、苏云金芽孢杆菌有明显的抑菌作用。

长岛型掌跖角化病一家系丝氨酸蛋白酶抑制剂B7基因的突变分析

目的:对一家系长岛型掌跖角化病(NPPK)丝氨酸蛋白酶抑制剂B7(SERPINB7)基因突变进行分析。方法:采用聚合酶链式反应扩增SERPINB7基因所有的外显子及其邻近的剪切点并进行直接测序。结果:一家系成员5人,患者1人。先证者,男,23岁,先证者及其母亲均检测到SERPINB7纯合突变c.796C>T(p.Arg266Ter),该突变导致SERPINB7基因编码的蛋白第266位氨基酸由精氨酸变为终止密码。先证者父亲、两位弟弟及100例正常对照中均未检测到SERPINB7基因突变。结论:SERPINB7 c.796C>T(p.Arg266Ter)基因纯合突变可能是该例NPPK患者的致病原因。

利拉鲁肽对2型糖尿病患者血浆丝氨酸蛋白酶抑制剂水平的影响

目的探讨胰高糖素样肽-1(GLP-1)类似物利拉鲁肽(Liraglutide)对2型糖尿病(T2DM)患者血浆丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)水平的影响。方法采用酶联免疫法测定T2DM患者及正常人Vaspin水平,分析血浆Vaspin水平与体重指数(BMI)、腰臀比(WHR)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素分泌指数(HOMA-IS)、游离脂肪酸(FFA)等的关系,观察利拉鲁肽治疗前后T2DM患者血浆Vaspin水平变化。结果 T2DM患者血浆Vaspin水平显著高于正常人(P<0.05)。血浆Vaspin水平与空腹血糖(FPG)及糖化血红蛋白(HbA1c)呈明显正相关(r=0.35,P<0.01和r=0.25,P<0.05),而与DBP呈明显负相关(r=-0.25,P<0.05),FPG、WHR分别是影响血浆Vaspin水平的独立相关因素。T2DM患者经利拉鲁肽治疗后,体重、BMI、WHR、FPG、餐后2小时血糖(2hPG)、HbA1c均显著降低(P<0.01),而HOMA-IS则显著增高(P<0.01),空腹血浆Vaspin也显著增高(P<0.05)。结论利拉鲁肽能有效改善T2DM患者糖脂代谢和胰岛素敏感性,增强胰岛β细胞功能,同时升高血浆Vaspin水平。

血清分泌型丝氨酸蛋白酶抑制剂Kazal 1型对浸润性肺腺癌的诊断价值

目的探讨血清分泌型丝氨酸蛋白酶抑制剂Kazal 1型(SPINK1)对浸润性肺腺癌的诊断价值。方法收集2014年1月至2019年12月在浙江大学舟山医院就诊的153例肺腺癌患者和28例健康志愿者,采用ELISA法分别检测两组受试者血清SPINK1浓度,荧光定量PCR法和免疫组织化学染色法检测肺腺癌患者的癌组织与癌旁组织SPINK1 mRNA表达水平和蛋白表达情况。分析肺腺癌患者血清与癌组织SPINK1表达水平的相关性、血清SPINK1与肺腺癌患者临床病理特征的关系。结果浸润性肺腺癌患者血清SPINK1浓度明显高于健康志愿者和浸润性腺癌患者,差异均有统计学意义(均P<0.05)。血清SPINK1浓度与癌组织SPINK1 mRNA表达水平呈正相关(r=0.277,P=0.014)。血清SPINK1低浓度患者主要分布于SPINK1蛋白低表达组,而血清SPINK1高浓度患者主要分布于SPINK1蛋白高表达组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。血清SPINK1低浓度与高浓度患者在性别、年龄、吸烟史、淋巴结转和胸膜侵犯间比较差异均无统计学意义(均P>0.05),而在病理类型、肿瘤大小以及TNM分期间比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。单因素及多因素分析显示,血清SPINK1浓度(OR=1.967,95%CI:1.116~4.116,P=0.033)、癌胚抗原(CEA)(OR=2.189,95%CI:1.211~5.516,P=0.025)和肿瘤大小(OR=2.121,95%CI:1.200~5.226,P=0.034)是浸润性肺腺癌独立预测因素。血清SPINK1浓度绘制ROC曲线,AUC为0.83,最佳截断值为1288.5729 pg/ml,灵敏度为0.743,特异度为0.827。结论肺腺癌患者血清SPINK1浓度升高可以反映癌组织SPINK1表达水平,对浸润性肺腺癌具有潜在的诊断价值。

血清内皮细胞特异分子-1、 脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂水平对2型糖尿病大血管病变诊断的临床价值

目的探讨血清内皮细胞特异分子-1(Endocan-1)、脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)水平对2型糖尿病(T2DM)大血管病变(MVC)的临床诊断意义。方法选取72例患者,根据是否合并大血管疾病,分为T2DM组36例和MVC组36例;此外,选同期36例健康者作为对照组。利用酶联免疫吸附检测技术(ELISA)测定3组血清Endocan-1、Vaspin水平。结果T2DM组和MVC组血清Endocan-1水平均高于对照组,且MVC组高于T2DM组,差异有统计学意义(P<0.05)。MCV组Vaspin水平均低于T2DM组和对照组,T2DM组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Endocan-1与T2DM合并大血管疾病呈正相关,Vaspin与T2DM合并大血管疾病呈负相关。MVC组血清Endocan-1和Vaspin的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.910%、0.720%,截断值分别为1410 pg/mL、890 pg/mL,敏感度分别为81%、85%,特异度分别为76%、73%。结论血清Endocan-1、Vaspin的水平均与T2DM大血管病变相关,其可作为T2DM大血管病变的诊断依据。

Kunitz型丝氨酸蛋白酶抑制剂结构与功能研究

蛋白酶抑制剂在酶学及蛋白质的结构与功能关系研究中有重要意义,Kunitz型丝氨酸蛋白酶抑制剂是其中最重要的,也是研究最广泛的蛋白酶抑制剂之一.该类蛋白酶抑制剂三维结构高度保守:由一个明显的疏水核心、三对高度保守的二硫键桥、三链β 折叠和一个N端310螺旋及一个C端α 螺旋组成.3对二硫键对分子空间结构的稳定起着非常重要的作用.这一类型抑制剂有5个主要的活性位点:P1、P1′、P3、P3′、P4,它们都位于一个溶剂暴露的环上.P1位点是抑制作用的关键活性位点,抑制剂的专一性由P1位点氨基酸残基的性质决定;P1′位点氨基酸残基的侧链大小对抑制剂 酶的结合常数有很大影响,用大的侧链残基取代会导致结合常数降低;P4位点残基被取代经常产生负效应,会导致活性区域环的构象发生很大改变,从而影响酶与抑制剂的结合.

补阳还五汤联合针刺对急性脑梗死脑灌注、血同型半胱氨酸和内脏脂肪组织源性丝氨酸蛋白酶抑制剂水平的影响

目的探讨补阳还五汤联合针刺对急性脑梗死脑灌注、血同型半胱氨酸(Hcy)和内脏脂肪组织源性丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)水平的影响。方法选择2019年10月至2020年7月泰安市中医二院收治的急性脑梗死患者80例进行前瞻性研究,按照随机数字表法分为两组,每组各40例。对照组实施针刺治疗,观察组则联合应用补阳还五汤,比较干预期间患者语言表达能力,两组治疗后脑灌注指标变化,干预前后两组外周血Hcy水平变化,干预前后两组Vaspin水平变化。结果干预1周后和干预1个月后,观察组语言表达能力得分高于对照组(P<0.05),观察组脑血容量比值(rCBV)及脑血流量比值(rCBF)均显著高于对照组(P<0.05),平均达峰时间比值(rTTP)比值显著低于对照组(P<0.05),干预后观察组Hcy水平低于对照组(P<0.05),干预后观察组Vaspin水平高于对照组(P<0.05)。结论针对急性脑梗死联合使用补阳还五汤,能有效的改善患者发病后语言功能恢复,改善脑灌注,降低Hcy,提高Vaspin水平。