离子型及Ⅰ型代谢型谷氨酸受体对大鼠温度过敏的调节作用

目的探讨离子型及Ⅰ型代谢型谷氨酸受体对大鼠温度过敏的调节作用。方法将离子型谷氨酸受体作用药谷氨酸(Glu)、N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)、α-氨基-3羟基-5甲基-4异恶唑(AMPA),Ⅰ型代谢型谷氨酸受体作用药[(S)-DHPG],非竞争性NMDA受体拮抗剂(MK-801),竞争性AMPA受体拮抗剂(CNQX),选择性Ⅰ型代谢型谷氨酸受体拮抗剂(cpcco E)t分别注入L5~6脊神经结扎和假手术大鼠左足底部皮下组织,观察大鼠对辐射热的反应。结果 Glu、NMDA、AMPA、(S)-DHPG能减少假手术组足底逃避阈值,而对手术组则无效;相反,MK-801、CNQX及cpcco Et能增加手术组足底逃避阈值,但对假手术组无效。结论外周离子型和Ⅰ型代谢型谷氨酸受体敏感性的改变可导致末梢神经可塑性变化,这种变化是神经损伤引发的神经病理性疼痛产生与维持的基础。

大鼠颈上神经节中Ⅰ组代谢型谷氨酸受体表达及慢性间歇性低氧对其的影响

目的观察Ⅰ组代谢型谷氨酸受体(mGluR1/5)在大鼠颈上神经节(SCG)组织的表达、定位,及慢性间歇性低氧(CIH)对mGluR1/5蛋白水平的影响。方法12只雄性SD大鼠随机分为对照组(Ctrl)和CIH组(CIH),每组6只,模型制作6周。Western blotting检测CIH对mGluR1/5蛋白水平的影响,免疫组织化学法和免疫荧光共定位染色检测大鼠SCG中mGluR1/5的表达及分布。结果mGluR1/5表达于大鼠SCG,mGluR1分布于神经元和小强荧光(SIF)细胞,而在卫星胶质细胞(SGCs)、神经纤维和血管不表达;mGluR5主要分布于神经纤维,少量分布于神经元,而在SIF细胞、SGCs及血管不表达;CIH上调mGluR1/5的蛋白水平(P<0.01)。结论mGluR1和mGluR5均表达于大鼠SCG,但其表达部位有所不同,两者蛋白水平的升高可能参与了CIH诱导的血压升高。

代谢型谷氨酸受体在胶质瘤发展中的作用及其作为潜在治疗靶点的研究进展

代谢型谷氨酸受体(mGluRs)是中枢谷氨酸能系统中重要的受体之一,其广泛参与调控突触传递、突触可塑性、神经兴奋性和抑制性平衡等生理过程。mGluRs在介导胶质瘤的发生和发展中起重要作用,其介导的细胞内信号通路参与胶质瘤的进展、侵袭和复发过程,因此mGluRs作为胶质瘤的潜在药物靶点越来越受到关注。其中,mGluR1和mGluR3的体外药物阻断已被证明对于胶质瘤细胞具有抗细胞增殖和迁移的作用,mGluR3拮抗剂对于替莫唑胺有增加敏感性的作用,mGluR4和mGluR8可能成为治疗恶性胶质瘤的潜在靶点,但需要广泛的研究验证。未来应对不同类型的mGluRs在胶质瘤细胞中的作用进行深入探索,以为临床药物的研发提供理论依据。

代谢型谷氨酸受体5与临床相关疾病的关系研究进展

代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)是中枢谷氨酸能系统的重要受体之一,在中枢神经系统方面发挥着重要作用,广泛参与调控突触传递、突触可塑性、神经兴奋性/抑制性平衡等生理过程。研究发现,mGluR5与多种不同的神经系统疾病和非神经系统疾病密切相关,因此其作为潜在的药物治疗靶点日益受到关注。本文旨在对mGluR5的结构、分布、生理功能以及mGluR5在神经系统疾病、非神经系统疾病中的作用进行概述,以期为mGluR5在临床相关疾病中的研究提供有意义的参考。

大鼠颈上神经节代谢型谷氨酸受体7,8的表达及慢性间歇性低氧对其的影响

目的研究大鼠颈上神经节(SCG)组织中III组代谢型谷氨酸受体7和8(mGluR7/8)的表达、定位,以及慢性间歇性低氧(CIH)对mGluR7和mGluR8蛋白表达量的影响。方法选取8周龄雄性SD大鼠30只,免疫组织化学染色检测大鼠SCG组织中mGluR7和mGluR8的表达。免疫荧光共定位染色检测mGluR7和mGluR8的分布。核浆分离蛋白进行Western blot检测mGluR7和mGluR8在细胞浆和细胞核的分布情况。构建6周CIH大鼠模型,CIH组放于低氧小室中:首先向小室内充入100%氮气,使氧浓度分数逐渐降低至6%并维持30 s,然后充入100%氧气,使氧浓度分数回升至21%,作用周期为4 min/次,8 h/d,对照组放于常氧环境中。通过尾动脉血压检测大鼠收缩压、舒张压和平均动脉压的变化。Western blot检测CIH对SCG中mGluR7和mGluR8蛋白表达量的影响。结果大鼠SCG表达mGluR7和mGluR8。mGluR7分布于神经元和小荧光(SIF)细胞,上述细胞胞浆和胞核中均染色阳性,而在卫星胶质细胞(SGCs)、神经纤维和血管中不表达;mGluR8定位于神经元和SIF细胞的胞浆中,而在SGCs、神经纤维和血管中不表达。大鼠SCG核浆蛋白检测结果进一步证实mGluR7不仅存在于胞浆也存在于胞核蛋白中,而mGluR8仅存在于胞浆蛋白中。动物实验结果显示,与对照组相比,CIH升高大鼠的收缩压(P<0.0001)、舒张压(P<0.001)和平均动脉压(P<0.0001)。CIH增加mGluR7和mGluR8的蛋白表达量(P<0.05)。结论mGluR7和mGluR8均表达于大鼠SCG,但是细胞定位方式不同,CIH升高大鼠血压并增加mGluR7和mGluR8蛋白在SCG的表达水平。

Ⅲ型代谢型谷氨酸受体在痛觉调控中的作用

代谢型谷氨酸受体(mGluR)是G蛋白偶联受体,通过与谷氨酸这一主要中枢神经递质结合后而激活。目前已有8种不同的mGluR亚型被鉴定出来,并根据其分子结构、药理学特性和信号转导机制分为Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ型。mGluR介导了多种生理功能,如神经元兴奋性和突触可塑性,但它们同时也参与了如疼痛等多种病理条件下的调控。mGluR广泛表达于外周及中枢痛觉调控通路中,近些年来,随着Ⅲ型mGluR新的选择性配体及正性变构调节剂的开发,使得Ⅲ型mGluR在痛觉中的生理及病理性调控作用及机制逐渐明确,提示Ⅲ型mGluR可能是治疗病理性疼痛的潜在靶点。本文就Ⅲ型mGluR在痛觉调控中的作用进行综述。

代谢型谷氨酸受体5的纯化及纳米抗体的筛选

文章首先采用细胞表达抑制状态的代谢型谷氨酸受体5(Metabotropic glutamate receptor 5,m GluR5)蛋白免疫野生双峰驼,构建纳米抗体文库,运用M13噬菌体展示技术,筛选出与m Glu R5具有特异性结合的纳米抗体;其次用细胞对m GluR5蛋白进行表达纯化,然后对野生单峰驼进行7次免疫,对抽取骆驼的外淋巴细胞总RNA进行提取,经过反转录的方式转为c DNA,将用巢式PCR对VHH片段进行扩增并与p MECS噬菌粒载体进行连接,并电转化至TG1大肠杆菌中构建纳米抗体噬菌体展示文库;其三通过M13噬菌体展示技术对文库进行淘选,淘选出多个互补决定区3序列不同的纳米抗体;最后纯化出纯度较高的m GluR5蛋白,构建出库容量为5.47×10^(8)CFU/mL的噬菌体文库菌,经过两轮液相淘选,获得了12个互补决定区3序列不同的纳米抗体。研究成功筛选出12个与m GluR5特异性结合较高的纳米抗体,为m Glu R5的靶向药物研发和G蛋白偶联受体的信号通路研究奠定了基础。

代谢型谷氨酸受体5与白细胞介素1受体Ⅰ型在大鼠大脑皮质及海马神经元的共存

目的 研究代谢型谷氨酸受体 5 (mGluR5 )和白细胞介素 1受体Ⅰ型 (IL 1RⅠ )在大鼠大脑皮质和海马的分布及共存状况。方法 采用相邻切片的免疫细胞化学双标法 ,在两张相邻脑冠状切片上分别显示mGluR5与IL 1RⅠ的免疫组化染色结果 ,通过显微摄像确定mGluR5 /IL 1RⅠ双标神经元。结果 切片上mGluR5阳性产物为蓝黑色 ,定位于细胞膜上 ;IL 1RⅠ阳性产物为棕黄色 ,主要定位于细胞膜 ,也存在于神经元内。在大鼠大脑皮质及海马锥体细胞层均存在较丰富的mGluR5及IL 1RⅠ阳性神经元。在大脑皮质 ,有部分神经元内mGluR5与IL 1RⅠ共存 ;在海马锥体细胞层 ,mGluR5及IL 1RⅠ阳性反应细胞密集 ,分布区重叠 ,很可能也存在二者共存的神经元。结论 大鼠大脑皮质内存在mGluR5及IL 1RⅠ共存神经元。

代谢型谷氨酸受体Ⅰ组在成年大鼠脑的神经生发区SVZ的表达

成年哺乳动物侧脑室外侧壁的脑室下带(SVZ)具有持续性的神经生发功能。但其受哪些物质调节还不清楚。本研究采 用原位杂交和免疫组织化学方法,显示了代谢型谷氨酸受体I组的mGluR1和mGluR5在SVZ及其邻近室管膜细胞有明显表 达,mGluR5还在侧脑室内侧壁室管膜细胞表达。本研究结果提示,脑室下带细胞可能受谷氨酸的调节。

Ⅰ组代谢型谷氨酸受体拮抗剂对吗啡耐受大鼠热痛阈的影响

目的观察鞘内注射Ⅰ组代谢型谷氨酸受体(mGluRs)拮抗剂对吗啡耐受大鼠热痛阈的影响。方法 36只雄性Spague-Dawley大鼠随机均分为6组,鞘内置管后第4天开始给药。0.9%氯化钠溶液组(C组)予0.9%氯化钠溶液10μL。吗啡耐受组(M组)予吗啡10μg。吗啡+1-胺塞茚满-1,5-二羟酸(AIDA)组(MA组)予吗啡10μg+AIDA60nmol。吗啡+2-甲基-6-苯基苯乙炔-吡啶(MPEP)组(MM组)予吗啡10μg+MPEP60nmol。AIDA组予AIDA60nmol。MPEP组予MPEP60nmol。连续给药7d,每天2次。给药前和给药后30min测定大鼠甩尾潜伏期(TFL)以观察各组热痛阈的变化。结果 M组在第1、2天的TFL显著高于C组(P值均<0.05),随着用药天数增加,M组TFL逐渐缩短,到第7天与C组的差异无统计学意义(P>0.05)。MA组和MM组的TFL也呈下降趋势,但明显缓于M组。MA组第3～7天的TFL高于MM组,但差异均无统计学意义(P值均>0.05)。AIDA组和MPEP组TFL的变化不大,与C组的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论Ⅰ组mGluRs拮抗剂有抑制吗啡耐受的作用。

Ⅰ组代谢型谷氨酸受体拮抗药AIDA对吗啡耐受大鼠脊髓pCREB表达的影响

目的观察I组代谢型谷氨酸受体拮抗药AIDA对吗啡耐受大鼠脊髓背角磷酸化环腺苷酸反应元件结合蛋白(pCREB)表达的影响。方法24只雄性SD大鼠,随机均分为四组:吗啡耐受组(M组)、AIDA组(A组)、吗啡加AIDA组(MA组)和对照组(C组)。每组连续给药8d,每天2次。行为学上测定大鼠甩尾潜伏期(TFL)观察大鼠吗啡耐受情况,根据公式计算最大镇痛效应百分比(MPE%)。8d后处死动物,采用Westernblot方法测定并比较每组脊髓背角蛋白pCREB表达量。结果第1、2天M组和MA组MPE%明显高于C组(P<0·01),但随着用药天数增加,M组的MPE%逐渐下降,第7天后与C组比较差异无统计学意义。用药后第3至第8天MA组MPE%显著高于M组(P<0·01)。MA组各时点MPE%均显著高于A组和C组(P<0·01)。M组脊髓背角pCREB表达量明显高于其他三组(P<0·01)。MA组pCREB表达量亦较C组和A组升高(P<0·05)。结论吗啡耐受时pCREB表达上调。AIDA可以延缓吗啡耐受形成,其机制与抑制pCREB表达有关。

代谢型谷氨酸受体5正电子发射断层扫描成像在神经精神性疾病中应用的研究进展

代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)在神经精神性疾病中发挥重要作用,正电子发射断层成像(PET)可无创性在活体分子水平评估神经系统疾病的mGluR5变化。为进一步探明mGluR5在神经精神类疾病中的变化及病理机制,本文就mGluR5的分子机制及其PET在阿尔茨海默病、帕金森病、癫痫、精神性疾病、睡眠与觉醒等的应用中作一综述,以期为mGluR5显像的实验研究及临床应用提供指导意义。

I型代谢型谷氨酸受体在脊髓水平参与疼痛信号的传递

目的观察I型代谢型谷氨酸受体在脊髓水平痛信号传递过程中的作用。方法先在鞘内分别注射缓冲液或I型代谢型谷氨酸受体两种拮抗剂CPCCOEt和MPEP,再给大鼠脚掌注射致痛物质formalin,1 h后立即处死,用免疫组化的方法检测大鼠脊髓背角Fos免疫阳性神经元的数目。结果分别给予拮抗剂CPCCOEt和MPEP后,大鼠的第二相痛行为反应明显减弱,脊髓背角Fos免疫阳性神经元的数目明显减少。结论I型代谢型谷氨酸受体在脊髓水平促进了痛信号的传递,在脊髓水平阻断I型代谢型谷氨酸受体可能成为镇痛药物的新靶点。

Ⅰ型代谢型谷氨酸受体与癫癎

在哺乳动物的中枢神经系统中,谷氨酸是调节绝大多数神经突触兴奋性的主要神经递质.这种调节作用主要是通过激活以下受体来实现的,配基门控离子通道型谷氨酸受体(iglur,简称离子通道型谷氨酸受体)和代谢调节型谷氨酸受体(mglur,简称代谢型谷氨酸受体).

Ⅰ组代谢型谷氨酸受体在帕金森病大鼠模型中的表达变化

目的通过研究Ⅰ组代谢型谷氨酸受体(mGluRs)mGluR1及mGluR5在帕金森病(PD)大鼠纹状体神经元细胞膜蛋白和总蛋白的表达变化,探讨Ⅰ组mGluRs在纹状体神经元细胞膜/细胞内分布改变是否参与PD的发病机制。方法选取雄性SD大鼠20只,随机分为PD组〔以6-羟多巴(6-OHDA)单侧脑内注射法制备;n=10〕和Sham组(操作方法相同,以等量生理盐水代替6-OHDA;n=10)。采用Western blot方法检测两组大鼠纹状体损伤侧和非损伤侧mGluR1及mGluR5总蛋白和膜蛋白水平变化,以及其下游重要信号分子细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和c-Jun氨基末端激酶(JNK)磷酸化水平,比较两组损伤侧与非损伤侧上述各指标表达情况。结果Western blot结果显示Sham组非损伤侧、Sham组损伤侧、PD组非损伤测及PD组损伤侧mGluR1总蛋白水平差异无统计学意义(F=0.329,P=0.805),PD组损伤侧mGluR1膜蛋白表达较PD组非损伤侧、Sham组损伤侧和Sham组非损伤侧均明显增高(均P<0.05);PD组损伤侧mGluR5总蛋白水平和膜蛋白水平均较相应PD组非损伤侧、Sham组损伤侧及Sham组非损伤侧均明显增高(均P<0.05);与PD组非损伤侧、Sham组损伤侧和Sham组非损伤侧比较,PD组损伤侧ERK1/2磷酸化水平明显降低,JNK磷酸化水平明显升高(均P<0.05);上述指标在PD组非损伤侧、Sham组损伤侧和Sham组非损伤侧之间两两比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论PD大鼠纹状体Ⅰ组mGluRs的变化以膜蛋白的表达异常增加为主,可能与其在细胞膜/细胞内分布的改变相关,并且改变可能影响下游ERK1/2和JNK磷酸化水平,推测纹状体神经元Ⅰ组mGluRs分布的变化可能与PD发病机制相关。

Ⅰ型促代谢性谷氨酸受体在小剂量氯胺酮保护抑郁大鼠电休克后学习记忆功能中的作用

目的·探讨Ⅰ型促代谢性谷氨酸受体(groupⅠmetabotropic glutamate receptor,Ⅰ型mGluR)调节谷氨酸N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartic acid receptor,NMDAR)介导的突触可塑性在小剂量氯胺酮保护抑郁大鼠改良电休克(modified electroconvulsive shock,MECS)后空间学习记忆功能中的作用。方法·对2~3月龄Sprague Dawley(SD)大鼠,应用慢性不可预见性应激建立抑郁模型。取10只健康大鼠作为对照组(C组),另取30只抑郁大鼠随机分为D组、M组、KM组。C组不予实验处理;D组腹腔注射生理盐水后行伪MECS处理;M组腹腔注射丙泊酚,KM组腹腔注射丙泊酚复合小剂量氯胺酮(10 mg/kg),之后分别行MECS处理。应用糖水偏好实验评估抑郁状态;Morris水迷宫检测空间学习记忆功能;Western blotting检测海马组织细胞膜NMDAR1、mGluR1、mGluR5蛋白表达。另取36只抑郁大鼠随机分为6组:DE组、m1E组、m5E组,DE'组、m1E'组、m5E'组。DE组、DE'组脑片灌流单纯人工脑脊液;m1E组、m1E'组脑片灌流含有mGluR1阻断剂的人工脑脊液;m5E组、m5E'组脑片灌流含有mGluR5阻断剂的人工脑脊液。检测DE组、m1E组、m5E组长时程增强(long-term potentiation,LTP)以及DE'组、m1E'组、m5E'组NMDAR介导的场电位(fEPSPNMDAR)。结果·实验处理后,与D组比较,M组和KM组糖水偏好百分比升高(P<0.05),逃避潜伏期(escape latency,EL)延长(P<0.05),目标象限空间探索时间(space exploration time,SET)缩短(P<0.05);与M组比较,KM组EL缩短(P<0.05),目标象限SET延长(P<0.05)。与D组比较,M组和KM组NMDAR1、mGluR1、mGluR5蛋白表达降低(P<0.05);与M组比较,KM组NMDAR1、mGluR1、mGluR5蛋白表达升高(P<0.05)。与DE组比较,m1E组和m5E组LTP降低(P<0.05)。与DE'组比较,m1E'组和m5E'组fEPSPNMDAR降低(P<0.05)。结论·小剂量氯胺酮可能通过上调抑郁大鼠MECS后海马组织细胞膜NMDAR和Ⅰ型mGluR表达,增强NMDAR激活状态同时上调LTP,减轻空间学习记忆功能损伤。

突触前代谢型谷氨酸受体调节神经递质的释放

谷氨酸通过激活离子型受体(iGluR)介导快速兴奋性突触传递,参与脑内几乎所有生理过程。谷氨酸过量释放可导致与脑缺血、缺氧及变性疾病有关的兴奋毒作用,最终引起神经元的死亡。代谢型谷氨酸受体(mGluRs)是一个与G-蛋白偶联的受体家族,分三型共八个亚型。其中Ⅱ和Ⅲ型mGluRs主要位于突触前,发挥对谷氨酸释放的负反馈调节。Ⅲ型mGluRs中的mGluR,位于谷氨酸能末梢突触前膜的活性区,发挥自身受体的作用,对正常情况下突触传递过程的谷氨酸释放进行负反馈调节;而属于Ⅱ型的mGluR2及属于Ⅲ型的mGluR4和mGluR8,则位于远离突触前膜活性区的外突触区,因而正常突触传递过程中释放的谷氨酸量不能激活它们。只有在突触传递增强的情况下才被激活,抑制递质的释放。另外,mGluRs还分布在GABA能纤维末梢,通过突触前机制抑制GABA的释放。对突触前膜受体尤其是位于外突触区的mGluRs受体的研究,将有可能开发出理想的工具药,从而预防和阻止谷氨酸过量释放引起的神经毒及神经元的死亡。

代谢型谷氨酸受体与应激损伤

代谢型谷氨酸受体 (mGluRs)在应激性损伤中的作用日益受到重视 ,它可参与GC水平的调节 ,影响谷氨酸神经毒性作用和突触可塑性 (LTP、LTD)的诱导 ,由此表明mGluRs在应激性损伤中可能占有重要的地位。由于不同类型的mGluRs具有不同的作用 ,机制较为复杂 ,因此 。