4岁儿童对四川Ⅰ型脊髓灰质炎野病毒的免疫水平观察

目的 了解已口服脊髓灰质炎疫苗 (OPV)基础免疫的儿童在加强免疫前后对四川Ⅰ型脊灰野病毒的免疫水平 ,指导预防、控制乃至消灭脊灰策略的制定。方法 微量中和试验。结果 80名 4岁儿童加强免疫前对Sabin 1、Ma honey、四川株的阳性率分别为 98 8%、 93 8%、 73 8% ,GMT分别为 2 5 6 0、 49 8、 9 9,免后的阴性率分别为 98 8%、98 8%、 82 5 % ,GMT分别为 415 9、 177 9、 2 5 6。结论 4岁儿童加强免疫后的阳性率和GMT均有明显的提高 ,加强服苗对四川Ⅰ型脊灰病毒是有效的。因此 ,强化免疫对预防、控制、消灭脊灰是行之有效且十分必要的手段。

四川省两株脊髓灰质炎Ⅰ型野病毒的核酸序列分析

目的 :探索脊髓灰质炎 (脊灰 )流行与野毒株性状的关系。方法 :选择了 1991年安岳县和 1992年会东县各一例临床诊断为脊灰的患者 ,从其粪便标本中各分离出一株病毒 ,用微量中和试验进行血清学鉴定 ,PCR— RFL P法进行型内鉴定 ,对 VP1区 30 0个核苷酸进行测序。结果 :血清学定型均为脊灰 型病毒 ,经 PCR— RFL P法检测 ,判为野病毒。核酸序列分析证实两株病毒与 Sabin 有明显差异为野病毒。两毒株间核酸序列不完全一致 ,有 2 0个核苷酸的差异。结论 :不同年份、不同地方流行株间的序列有差异。四川省脊灰流行与毒株间核酸序列的差异有关。但我国现行疫苗 OPV能有效预防我省脊灰 。

口服脊髓灰质炎疫苗免疫儿童对四川Ⅰ型脊髓灰质炎病毒的抗体水平

目的：为了解我国口服脊髓灰质炎（以下简称脊灰）疫苗（OPV）按现行免疫程序接种后，被免疫儿童对四川1型脊灰病毒的免疫水平，以指导预防、控制乃至消灭脊灰策略的制定。方法：应用微量中和试验方法检测血清中对三种毒株的中和抗体滴度。结果：儿童基础兔疫后对三种毒株Sabinl、Mahoney、四川株的阳性率为100％，免后GMT分别为1196．8、317．9、62．9。结论：免疫儿童对四川Ⅰ型脊灰病毒抗体的GMT较SabinⅠ型和Mahoney低．但OPV能诱生抗四川株的抗体，OPV对四川Ⅰ型脊灰病毒是有效的。

中国脊髓灰质炎Ⅰ型病毒VP1/2A区变异的分子流行病学研究

应用基因测序法对我国12个省24份脊髓灰质炎1型病毒标本散了VP1/2A片段的测序工作,并与疫苗株sabin 1型参考株的序列,我国台湾省和其他国家15株病毒的序列做了比较。由计算机PCGene程序分析处理,构建出两株关系树,初步揭示了我国大陆6个基因型病毒之间,以及它们与台湾省和其他国家病毒之间的分子流行病学关系。

微电流协同低浓度氯对脊髓灰质炎Ⅰ型病毒的灭活作用

目的 观察微电流与游离氯对水中脊髓灰质炎Ⅰ型病毒 (PV1)的协同灭活效果。方法 用微电流 0 4～1 2mA·cm-2 协同氯 0 2mg·L-1处理污染PV1水样 ,比较作用前后灭活率K值评价灭活效果 ,用透射电镜观察病毒形态变化。结果 电流密度达到 1 2mA·cm-2 与 0 2mg·L-1氯对水中PV1有协同灭活效应 ,与单独氯相比有显著差别 ,增加了氯的灭活效果 ,微电流作用后透射电镜下病毒颗粒集聚程度降低。结论 微电流协同氯可提高低浓度氯灭活水中病毒的效果。

用蚀斑抑制试验研究中国脊髓灰质炎Ⅰ型流行毒株的株间差异

利用株特异性的抗Sabin-I株与抗Brunhilde株的豚鼠免疫血清进行蚀斑抑制试验,以研究Polio-I型毒株的型内差异。对国内近年分离株的分析结果表明,Sabin-I疫苗株抗体对不同地区流行株的中和效果有明显差异,对徐州与云南流行的野毒株的中和效果较好,只需160单位(中和单位)的抗体即可达到80％的抑制率,而对山东、广西两暴发流行区的野毒株,则需1280才能抑制80％,相差8倍。对北京地区野毒株的抑制率介于上述两类毒株之间,与对Mahoney株的抑制率相近似。该方法以测中和抗体为基础,但比常规中和试验法更精确,是一种简便、客观、有效的研究型内差别的分析手段,具有重要的理论和实际意义。

重新评价G-480位点变异对I型脊髓灰质炎疫苗病毒神经毒力的影响

在对分离于中国贵州省的9株I型循环的疫苗衍生脊髓灰质炎病毒(cVDPVs)进行全基因组核苷酸序列分析后,发现已知最重要的决定病毒神经毒力的位点G-480和U-525并没有发生回复野生型突变;另外一些已知的神经毒力决定位点,如A-2438、A-2795、C-6203和G-7441等均已经发生了回复野生型突变。根据核苷酸序列的不同,从9株I型cVDPVs毒株中选取5株病毒感染转人脊髓灰质炎病毒受体基因的小鼠进行神经毒力实验,发现它们的神经毒力都有所升高,其中CHN8184株和CHN8229-1.1株的神经毒力已经十分接近P1/Mahoney株,CHN8229-1.1株、CHN8229-2株和CHN8229-3株神经毒力依次递减,但仍处于较高水平,在它们的全基因组中分别只有7个和2个核苷酸的差异,而毒力却相差很多,提示有新的未鉴别的神经毒力决定位点的存在。对这些毒株5′非编码区(5′NCR)的第V结构域进行二级结构预测,发现它们的二级结构很稳定。在G-480位点没有发生回复突变的情况下,部分毒株的神经毒力已经非常接近P1/Mahoney的水平,提示先前的研究中关于G-480突变对I型脊髓灰质炎病毒神经毒力的作用可能被估计过高,G-480位点不是唯一重要的神经毒力决定位点,可能多个核苷酸联合突变才能达到减毒的效果。要真正全面了解P1/Sabin株的减毒机制,还需要进行更加深入的研究。

Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗与不同剂型Ⅰ型+Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗序贯接种的免疫原性和安全性观察

[目的]研究Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(sIPV)与不同剂型Ⅰ型+Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗(bOPV)序贯接种的免疫原性和安全性。[方法]选择2016年3月—2018年3月某院≥2月龄的婴儿作为观察对象,通过随机抽签法将其均分成糖丸剂型组与液体剂型组。两组均接受sIPV与bOPV序贯接种,其中液体剂型组使用液体剂型bOPV,糖丸剂型组则使用糖丸剂型bOPV。均严格根据0 d、28 d、56 d的免疫程序,前后共进行3剂接种。分别比较两组在免疫原性和安全性方面的差异。[结果]两组完成全程脊髓灰质炎疫苗接种者在脊髓灰质炎病毒Ⅰ型、脊髓灰质炎病毒Ⅲ型免疫后阳转人数占比方面比较差异无统计学意义(P>0.05);糖丸剂型组与液体剂型组完成全程脊髓灰质炎疫苗接种者在脊髓灰质炎病毒Ⅱ型免疫后阳转人数占比方面比较,前者较低(P<0.05)。糖丸剂型组与液体剂型组在脊髓灰质炎病毒Ⅰ型、脊髓灰质炎病毒Ⅲ型完成全程脊髓灰质炎疫苗接种者免疫后抗体GMT水平方面比较,前者较低(P<0.05);糖丸剂型组与液体剂型组在脊髓灰质炎病毒Ⅱ型完成全程脊髓灰质炎疫苗接种者免疫后抗体GMT水平方面比较,前者较高(P<0.05)。糖丸剂型组与液体剂型组完成全程免疫者接种后30 min、接种后14 d内、接种后28 d内、接种28 d后的不良事件发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]sIPV与不同剂型bOPV序贯接种均有较好的免疫原性以及安全性。

HIV-I CN54株gagprotease基因嵌合脊髓灰质炎病毒cDNA质粒的构建和表达研究(英文)

目的构建HIV-1CN54株gagprotease基因嵌合脊髓灰质炎病毒cDNA的表达质粒,并鉴定、检测基因及其表达。方法用PCR技术获得人免疫缺陷病毒CN54株的gagprotease基因,并使其两端带上合适的酶切位点,将其定向插入到包含脊髓灰质炎病毒cDNA的表达质粒pSVA14中,替代其部分结构基因,构建HIV基因嵌合缺陷性脊髓灰质炎病毒基因组的表达质粒。经筛选、鉴定后用脂质体转染技术将新构建的质粒转入Hela细胞内,用WesternBlot方法检测目的基因在Hela细胞内的表达。结果PCR技术扩增所得的人免疫缺陷病毒CN54株gagprotease基因经琼脂糖凝胶电泳、DNA测序证实成功获得,未引入突变碱基,筛选、鉴定证明gagprotease基因被正确定向插入到脊髓灰质炎病毒的cDNA序列之中,WesternBlot检测到gagprotease基因正确表达了相关蛋白。结论成功构建了表达人免疫缺陷病毒CN54株gagprotease基因的缺陷性脊髓灰质炎病毒基因组嵌合质粒,为利用脊髓灰质炎病毒作人免疫缺陷病毒基因的表达载体奠定了基础,此研究对开发以脊髓灰质炎病毒为艾滋病的疫苗载体有重要意义。

应用中和性单克隆抗体对历年来分离的脊髓灰质炎病毒进行抗原分析

利用脊髓灰质炎三个型中和性单克隆抗体——Ⅰ型 A(1s—7),B(1B—5);Ⅱ型2Mf—7,17C_2;Ⅲ型3s—12,3Sau—1——对我省历年来分离的脊髓灰质炎病毒51株(Ⅰ型14株,Ⅱ型13株,Ⅲ型24株)进行了单克隆抗体研究。14株脊灰Ⅰ型病毒可以分成两类单克隆抗体型:第一类只被 A 类单克隆抗体中和而不被 B 类单克隆抗体中和;第二类两种单克隆抗体都不能中和;13株脊灰Ⅱ型病毒可以分成三类单克隆抗体型:第一类是不被所使用的两种单克隆抗体中和;第二类是只能被单克隆抗体17c_2中和而不被2Mf—7中和;第三类是能被2Mf—7中和而不被17C_2中和;24株脊灰质Ⅲ型病毒,可分成四类单克隆抗体型:第一类所选用的两种单克隆抗体都不能抑制;第二类只被单克隆抗体3S—12抑制而不被单克隆抗体3S—1中和;第三类只被3S—1中和而不被3S—12中和;第四类是同时被两种单克隆抗体中和。

广东省1992年脊髓灰质炎流行情况分析

广东省１９９２年脊髓灰质炎流行情况分析吴承民，黄渭泉，郑慧贞，江瑞文，林永杰广东省地处亚热带，是脊髓灰质炎（下称脊灰）的高发省。近几年来，年发病率在０．２１～０．２８／十万之间。１９９２年，脊灰病例数和发病县（区）数又有所增加，居全国第二位。现就我省...

云南省两例输入性脊髓灰质炎Ⅰ型野病毒病例的分子病毒学检测

１９９５年末和１９９６年初，各有１名缅甸儿童到我国云南省就医，临床诊断为脊髓灰质炎（脊所）。从患者的粪便体本中各分离到１株病毒，经血清学定型均为脊灰１型。经ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法检测，两株病毒的酶切图谱完全一致，但与Ｓｄｂｉｎ１有明显差异，判断为野毒株。对相同片段的核苷酸序列测定结果肯定了这一判断。其核苷酸序列经ＰＨＹＬＩＰ软件分析，显示其基因型与我国境内曾经流行过的野毒株有明显差异，说明这两株野毒株是由缅甸传人中国的“输入野毒株”。

中国2009年Ⅰ型脊髓灰质炎病毒基因特征分析

目的研究中国(未包括香港、澳门特别行政区和台湾地区,下同)2009年从急性弛缓性麻痹(Acute FlaccidParalysis,AFP)病例监测系统中,分离到的Ⅰ型脊髓灰质炎(脊灰)病毒(Poliovirus,PV)分子生物学特征,为维持无脊灰状态提供依据。方法采用逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR),对I型PV的VP1编码区进行扩增,并对PCR产物进行核苷酸序列测定和分析;对VP1编码区的核苷酸突变热点和神经毒力位点进行分析,并建立亲缘关系进化树分析毒株间的进化关系。结果中国2009年从AFP病例监测系统中共分离到57株I型PV。对这57株PV进行VP1编码区核苷酸序列测定和分析,未发现PV野毒株或疫苗衍生PV。但发现5株高变异株,其中分离于两例AFP病例的两株高变异株的核苷酸序列同源性100%。同时序列比对结果表明,在VP1编码区的两个核苷酸(nt2747和nt2749)是两个突变热点。结论根据江西省和湖北省两株高变异株的流行病学及实验室检测结果,不能排除它们之间发生了短时间的循环,有待于深入研究。同时,突变热点的存在提示毒株受到选择压力的影响,容易回复突变成野生型,从而带来一系列的神经毒力等表型方面的变化。

2020年新疆维吾尔自治区喀什市环境污水中首次分离到Ⅰ型疫苗衍生脊髓灰质炎病毒的早期应对

目的对新疆喀什市2020年9月环境污水中Ⅰ型疫苗衍生脊髓灰质炎(脊灰)病毒(Vaccine derived poliovirus,VDPV)分离株进行鉴定和早期应对。方法2020年9月-2021年6月在喀什市每月采集1-2份环境污水标本,2020年12月10-12日对环境污水覆盖区域内<5岁健康儿童采集粪便标本,进行脊灰病毒(Poliovirus,PV)分离,采用实时荧光定量PCR对PV分离株进行型内鉴定,分析VP_(1)区核苷酸序列变异,构建系统进化树以确定来源。结果在14份环境污水标本中11份标本分离到38株PV,在51份健康儿童粪便标本中2份标本分离到2株PV,其中2020年9月环境污水标本分离的1株PV的VP_(1)区有12个核苷酸变异,鉴定为I型VDPV,与中国既往或GenBank中Ⅰ型VDPV序列均不同源,之后连续7个月未再检出遗传学相关的VDPV,该分离株确定为未分类VDPV。结论本研究从喀什市环境污水中检出的I型VDPV来源不明确;环境监测有助于VDPV或脊灰野病毒的及时发现和早期应对。

青海省1999年脊髓灰质炎Ⅰ型野毒株的分子病毒学分析

自中国脊髓灰质炎 (脊灰 )监测网络建立以来 ,有报告的脊灰暴发和流行主要由脊灰Ⅰ型野病毒引起。 1993年在新疆维吾尔自治区分离到 1株Ⅲ型野病毒 ,但未发现Ⅱ型野病毒。此外 ,1995年、1996年在云南省发现 2例Ⅰ型〔1〕、2例Ⅲ型境外输入野毒病例〔2〕。 1994年 10月以来我国本土未发现脊灰野病毒。但是 ,1999年 10月从青海省循化撒拉族自治县分离到 2株脊灰Ⅰ型野病毒 ,1株来自 1位 16月龄的病例 ,另 1株来自该病例的接触者。应用基因测序法对该毒株做了VP1片段序列的测定 ,并与疫苗株SabinⅠ型参考株、国内曾经流行的脊灰Ⅰ型野病毒代表株、我国周边国家部分脊灰Ⅰ型野毒株的序列作了基因同源性比较 ,并由计算机用NeighborJoining和BootstrapTest方法分析处理 ,构建出它们之间的关系树 。

二溴海因对MS2噬菌体和脊髓灰质炎病毒Ⅰ型疫苗株杀灭效果研究

目的比较MS2噬菌体和脊髓灰质炎病毒Ⅰ型(Poliovirus-Ⅰ,PV-Ⅰ)对二溴海因消毒剂的抵抗力大小,筛选用于评价消毒因子灭活肠道病毒效果的指示病毒。方法参考2002年版《消毒技术规范》,灭活病毒效果的评价采用病毒悬液定量灭活试验设计,分别对MS2噬菌体和PV-Ⅰ进行病毒灭活试验。结果二溴海因消毒剂的浓度250 mg/L、作用10 min和375 mg/L、作用5 min,对MS2噬菌体的灭活对数值分别达到4.04和6.11。二溴海因消毒剂的浓度500 mg/L、作用20 min和375 mg/L、作用50 min,对PV-Ⅰ的灭活对数值分别达到4.42和4.27。相同浓度(375 mg/L)的二溴海因消毒剂灭活病毒MS2噬菌体和PV-Ⅰ达到消毒水平(灭活对数值≥4.00)的浓时积值(C·t)分别为1 875 mg·min/L和18 750 mg·min/L。结论病毒MS2噬菌体对二溴海因的抵抗力弱于PV-Ⅰ。

2008年1月～2009年3月Ⅰ型和Ⅲ型脊髓灰质炎野病毒在非洲15个国家复燃

全球消灭脊髓灰质炎（脊灰）计划始于1988年。到2006年，全球Ⅱ型脊灰野病毒的本土传播已被阻断，Ⅰ型和Ⅲ型脊灰野病毒的本土传播除4个国家外也已被阻断，这4个国家是阿富汗、印度、尼日利亚、巴基斯坦。2002-2006年，有20个此前已无脊灰的国家受到来自尼日利亚的Ⅰ型脊灰野病毒的输入侵袭，3个无脊灰的非洲国家受到了来自印度的Ⅰ型脊灰野病毒的输入侵袭。