富硒益生菌对鸡产蛋性能和肝脏Ⅰ型脱碘酶活性以及血清T_3和T_4水平的影响

为比较研究富硒益生菌(selenium-enriched probiotics,SP)和亚硒酸钠(sodium selenite,SS)对鸡产蛋性能和肝脏Ⅰ型脱碘酶(IDⅠ)活性以及血清T3和T4水平的影响,将2种硒源分别以0.2、0.5和1.0 mg.kg-1 3个硒水平添加到基础日粮中组成6种试验日粮,同时将益生菌添加到基础日粮中作为益生菌对照,基础日粮作为空白对照。选取800羽健康罗曼蛋鸡,随机均分为8组,进行为期35 d的饲养试验。在试验期间记录产蛋性能,在试验的第28天,取静脉血和肝脏测定血清T3和T4水平以及肝脏IDⅠ活性。结果表明:富硒益生菌对鸡产蛋性能有显著影响,硒源和硒水平对蛋鸡肝脏IDⅠ酶活性以及血清T3和T4水平均有极显著影响。添加SP或益生菌均可提高蛋鸡产蛋率、日产蛋量和平均蛋质量,降低料蛋比;添加SP或SS均能提高蛋鸡肝脏IDⅠ酶活性和血清T3水平,降低T4水平,特别是添加SP时,随着硒添加水平的升高,蛋鸡肝脏IDⅠ酶活性和血清T3水平升高,血清T4水平则降低;而添加益生菌对蛋鸡肝脏IDⅠ酶活性没有显著影响,却能显著提高血清T3水平,而降低T4水平。结论:添加SP的效果优于添加SS或益生菌。

不同碘摄入水平对小鼠甲状腺组织Ⅰ型脱碘酶基因表达及酶活性的影响

甲状腺功能与碘摄入水平有密切的关系,甲状腺功能主要是通过其合成的甲状腺激素来实现的.脱碘反应是调节甲状腺激素生物活性的重要方式,不同碘营养状态下甲状腺组织Ⅰ型脱碘酶(D1)基因表达及活性的变化是甲状腺功能调节的重要机制.在成功建立碘缺乏与不同程度碘过量的Babl/c小鼠模型的基础上,采用实时荧光定量PCR法检测甲状腺组织D1mRNA表达水平,同时以125I-rT3作为底物,结合离子交换层析技术测定甲状腺D1活性,此外,应用竞争结合放射免疫分析方法对甲状腺组织激素进行了检测.结果显示:碘缺乏时,D1mRNA表达和D1活性均显著升高,甲状腺组织内T3与T4水平均显著降低,但T3/T4明显升高;碘过量可明显抑制D1mRNA表达,但对D1活性并无显著影响,甲状腺组织内T3/T4有所下降.上述结果提示,甲状腺Ⅰ型脱碘酶在甲状腺功能调节中具有重要的作用,碘缺乏时D1mRNA表达及活性的上调可促进T4向T3的转化,以满足机体代谢的需要,而过量碘对D1基因表达的抑制可防止过多的T3对机体的损伤,具有重要的生理意义.

不同碘营养对大鼠甲状腺Ⅰ型脱碘酶活性及mRNA水平的影响

目的:观察碘缺乏和不同程度碘过量大鼠甲状腺组织Ⅰ型脱碘酶(D1)mRNA的表达及D1活性的变化。方法:断乳1月龄的Wistar大鼠随机分为6组,即低碘(LI)、正常碘(NI)、5倍(5HI)、10倍(10HI)、50倍(50HI)和100倍(100HI)碘组,饲养3、6和12个月后分三批处死动物。采用RT-PCR方法,对甲状腺组织D1mRNA水平进行检测。同时以125I-rT3作为底物,结合离子交换层析技术,测定甲状腺D1活性。结果:与NI组比较,各月龄大鼠LI组D1mRNA表达呈下降趋势,但无统计学差异,各月龄大鼠HI组D1mRNA表达也均呈下降趋势,其中3月龄大鼠5HI、10HI、50HI组、6月龄大鼠100HI组、12月龄大鼠50HI、100HI组D1mRNA表达均显著低于NI组。与NI组比较,各月龄大鼠LI组D1活性均显著升高,各HI组D1活性随碘摄入量的增加而呈逐渐减低趋势,其中6月龄和12月龄50HI及100HI组D1活性则显著降低。结论:碘缺乏情况下,D1活性明显升高,以促进更多的T4转变为T3,但碘缺乏对D1mRNA的表达未见促进作用。碘过量可明显抑制D1活性,且随碘摄入量的增加,D1活性降低更为明显,碘过量对D1mRNA的表达具有一定的抑制作用。

妊娠期高血压对大鼠肝脏Ⅰ型脱碘酶及甲状腺激素的影响研究

目的探讨妊娠期高血压疾病对大鼠肝脏Ⅰ型脱碘酶以及甲状腺激素的影响。方法将20只孕鼠分为正常妊娠对照组(n=10)和妊娠高血压模型组(n=10)。于妊娠第13天,模型组大鼠皮下注射L-NAME至妊娠第21天,复制妊娠高血压疾病;对照组皮下注射等量生理盐水,起止时间同模型组一致。采集两组大鼠肝脏和血液,进行肝脏DIO-ⅠmRNA表达量和血液甲状腺激素水平检测。结果与对照组比较,模型组大鼠肝脏DIO-ⅠmRNA表达量显著下降(P<0.05),血液中TT3、FT3浓度显著降低(P<0.05)。结论妊娠期高血压疾病可降低孕鼠肝脏DIO-Ⅰ基因表达水平,进而导致血液TT3、FT3含量下降。

因宁片对甲亢性肝损害大鼠肝脏的甲状腺激素受体和Ⅰ型脱碘酶基因表达的影响

目的研究因宁片对甲亢性肝损害大鼠的肝组织内甲状腺激素受体(TR)和Ⅰ型脱碘酶(DioⅠ)基因表达的影响。方法采用L-甲状腺激素钠(800 g kg-1 d-1)灌胃建立大鼠甲亢性肝损害模型。给予因宁片低(0.6 g.kg 1.d 1)、中(1.2g.kg 1.d 1)、高(2.4 g.kg 1.d 1)剂量、甲亢灵(1.2 g.kg 1.d 1),灌胃给药30 d后,处死大鼠。取部分肝脏通过实时荧光定量PCR方法检测肝组织中TR 1、TR 2、TR 1、DioⅠ基因的表达变化,酶联免疫吸附法(Elisa)法检测肝组织中DioⅠ含量,Chapra氏方法测定肝组织DioⅠ的活性。结果与空白对照组比较,模型组TR 1表达上调,TR 2表达下调,TR 1表达上调(P<0.01);因宁片能抑制TR 1和TR 1基因表达(P<0.05),对TR 2表达影响不明显(P>0.05)。模型组DioⅠ表达与空白对照组相比显著增强(P<0.01),含量增加(P<0.01)、活性升高(P<0.05);与模型组比较,因宁片能显著降低DioⅠ表达,并呈剂量依赖趋势(r=0.792,P<0.01),各剂量组均降低DioⅠ含量(P<0.05或P<0.01),因宁片中、高剂量能显著降低DioⅠ活性(P<0.05)。结论肝组织内TR和DioⅠ表达异常,可能参与甲亢性肝损害的发生。因宁片能调节甲亢性肝损害大鼠肝脏的TR和DioⅠ基因的异常表达、降低DioⅠ含量、抑制DioⅠ的活性,这可能是因宁片治疗甲亢性肝损害的分子作用机制之一。

牙鲆胚后发育过程中Ⅰ型脱碘酶基因的原位表达谱

甲状腺激素T3在鱼类胚后发育与变态发育过程中发挥着重要作用,甲状腺激素T4通过Ⅰ型甲状腺氨酸脱碘酶(Dio1)生成T3,因此,调查Dio1基因在胚后发育包括变态发育过程中原位表达谱,有助于理解T3在胚后发育中的具体作用。利用RNA整体原位杂交技术,发现Dio1主要在牙鲆肠道、鳃、肝、肌肉、鳍、眼睛周围等器官和组织表达,鳃、肠道、奇鳍中的Dio1原位表达谱有一定的规律性,尤其在生骨肌细胞向鳍褶中迁移、臀鳍和背鳍(包括冠状幼鳍)的鳍条和支鳍骨的发生过程中,Dio1可能通过影响这些组织器官的T3水平而发挥重要作用。

硒对碘过量小鼠肝脏I型脱碘酶活性的影响

目的 研究碘过量摄入对小鼠肝脏I型脱碘酶 (IDI)活性的影响及硒的干预作用。方法 将 4 0只Balb c小鼠按体重随机分为 5组 :正常对照组、碘过量I组 (3mg L)、碘过量I+Se(1mg L)组、碘过量II组 (5mg L)以及碘过量II+Se(1mg L)组 ,分别喂饲碘过量水或碘过量 +硒水以及正常鼠饲料。 3个月后 ,取血、尿及脏器测定相关指标。结果 碘过量组小鼠出现了弥漫胶质性甲状腺肿 ;与正常对照组相比 ,两个碘过量的血清TT4水平显著升高 ,而碘过量II组血清TT3水平显著降低 ;碘可显著降低肝硒水平及I型脱碘酶活性 ,补硒可明显增加碘过量小鼠的肝硒储备 ,抑制碘过量I组脱碘酶活性的降低。结论 碘过量摄入降低小鼠肝硒水平及肝脏I型脱碘酶活性 ,可能是引起血清TT4升高、出现甲状腺肿的原因 ,补硒具有一定的干预作用。

硒对大鼠高碘性I型脱碘酶损伤的干预作用

目的研究高碘性甲状腺损伤的机制并寻求合适的硒干预剂量。方法50只Wistar大鼠分为5组正常组、高碘组(饮水含碘酸钾48mg/L)和3个补硒组(饮水含碘酸钾48mg/L,亚硒酸钠分别为0.5、1.0、2.0mg/L),共喂养36周。放射免疫法测定甲状腺激素水平,测定肝脏和肾脏组织Ⅰ型脱碘酶(IDI)活性,以RT-PCR测定IDImRNA水平。结果与正常组比较,高碘组肝、肾IDI活性[(17.1±2.1,2.67±1.10)pmolI·mg-1·min-1vs(13.0±2.9,1.52±0.44)pmolI·mg-1·min-1]、mRNA水平(1.78±0.14,1.55±0.17vs0.90±0.05,0.58±0.12,均P<0.05)下降(均P<0.05),而补充0.5mg/L硒组上述指标与正常组差异无统计学意义。结论IDI活力、mRNA水平下降可能是高碘性甲状腺损伤的机制之一,而补充硒应选择合适的干预剂量。

硒化壳聚糖对种公鸡组织硒含量、硒酶活性及其基因表达的影响

本试验旨在比较研究硒化壳聚糖(SC)和亚硒酸钠(SS)对海兰褐种公鸡组织硒沉积量,硫氧还蛋白还原酶(TrxR)、Ⅰ型脱碘酶(IDⅠ)活性及TrxR2、IDⅠ基因表达的影响。选取280只20周龄海兰褐种公鸡,随机分为7个处理,每个处理4个重复,每个重复10只鸡。将SC和SS分别以0.4、0.8和1.2 mg/kg 3个硒水平添加到海兰褐种公鸡基础饲粮中,对照组饲喂基础饲粮,进行为期35 d饲养试验。结果表明:1)不同的硒源和硒添加水平对种公鸡生长性能影响不显著(P>0.05)。2)在睾丸中,1.2 mg/kg SS添加组硒含量显著高于对照组(P<0.05),1.2 mg/kg SC添加组硒含量极显著高于对照组(P<0.01);在肾脏中,0.8 mg/kg SS、1.2 mg/kg SS以及1.2 mg/kg SC添加组硒含量均显著高于对照组(P<0.05)。3)饲粮中添加0.4 mg/kg SS极显著提高了种公鸡睾丸TrxR活性(P<0.01),添加0.4 mg/kg SC显著了提高种公鸡睾丸TrxR活性(P<0.05),但只有添加0.4 mg/kg SC才能极显著提高肾脏IDⅠ活性(P<0.01)。4)0.4 mg/kg SC添加组睾丸TrxR2基因mRNA相对表达水平最高,但各组均差异不显著(P>0.05);随着硒添加水平的升高,在SS添加组,睾丸TrxR2基因mRNA相对表达水平呈现先升高后下降的趋势,而在SC添加组,睾丸TrxR2基因mRNA相对表达水平呈现先升高后下降再升高的趋势。与对照组比较,0.4 mg/kg SS添加组肾脏IDⅠ基因mRNA相对表达水平显著降低(P<0.05)。由此可知,SC对海兰褐种公鸡组织硒沉积,TrxR、IDⅠ活性以及TrxR2、IDⅠ基因表达有较大影响;建议添加低水平(0.4 mg/kg)SC。

氟斑牙儿童甲状腺激素异常与DIO1基因多态性的关系

目的分析氟斑牙儿童甲状腺激素异常情况及与Ⅰ型脱碘酶(DIO1)基因多态性的关系。方法 2018年6月—2019年6月,在天津市历史水氟区和非水氟区共随机抽取169名7~12岁儿童,检测儿童氟斑牙水平。其中正常儿童(正常组)79名,氟斑牙儿童(氟斑牙组)90名。采集尿样,利用砷铈催化分光光度方法测定尿碘水平。采集血样,化学发光法检测促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)和游离甲状腺素(FT4),采用Sequenom SNP分型检测实验测定DIO1中rs2294512位点的多态性,并进行问卷调查。根据DIO1 rs2294512位点的基因型分层后进行多因素Logistic回归分析,研究DIO1基因多态性在氟斑牙与甲状腺激素异常中的作用。结果相对于正常组,氟斑牙组FT3水平较高,FT4水平较低(P<0.05)。氟斑牙组FT3过高率达40.0%,高于正常组的21.5%,FT4过高率为3.3%,低于正常组的12.7%(P<0.05)。DIO1基因AA基因型儿童中,患氟斑牙者FT3较高(OR=6.357,95%CI:1.808~22.347,P=0.004)。结论 DIO1基因rs2294512位点为AA基因型的氟斑牙儿童FT3水平更易升高。

高脂膳食诱导的甲状腺激素改变对肥胖易感性的影响

目的通过饲喂高脂膳食建立肥胖易感和肥胖抵抗表型,探究高脂膳食诱导的甲状腺激素改变对肥胖易感和肥胖抵抗表型产生的影响。方法 40只C57BL/6雄性小鼠分为正常组(脂肪含量4.6%,n=10)和高脂组(脂肪含量22.9%,n=30)。17w时用综合实验动物监测系统(CLAMS)测定小鼠的能量代谢后处死,测定血清中甲状腺激素水平和血脂水平,并采用荧光定量PCR(q RT-PCR)测定肝脏中Ⅰ型脱碘酶(DIO1)和甲状腺激素受体β(TRβ)以及脂代谢相关基因脂肪酸合成酶(FAS)、肉毒碱棕榈酸转移酶1α(CPT1α)、过氧化物酶增殖体激活受体辅激动子1α(PGC1α)和胆固醇7α羟化酶(CYP7A1)的表达。结果肥胖易感组的平均体重显著高于肥胖抵抗组(P<0.05)。肥胖抵抗组小鼠的能量摄入量显著低于肥胖易感组而产热量显著高于肥胖易感组(P<0.05),且肥胖抵抗组的呼吸交换率(RER值)更接近0.7。q RT-PCR结果表明与肥胖易感组相比,肥胖抵抗组小鼠肝脏中DIO1、TRβ、CPT1α、PGC1α和CYP7A1的表达显著上调(P<0.05),而FAS的表达显著下调。结论高脂膳食可能通过抑制肥胖易感组小鼠肝脏DIO1和TRβ的表达使得能量消耗降低,摄入的过多能量以脂肪形式储存在体内,最终导致肥胖抵抗和肥胖易感的表型差异。