终末期肾脏病患者桡动脉中膜钙化与核心结合因子α_1及Ⅰ型胶原的关系研究

目的探讨终末期肾脏病（ESRD）患者桡动脉中膜钙化与核心结合因子α1（Cbfα1）及Ⅰ型胶原的关系。方法选择2009年5月—2012年12月在河北医科大学第四医院肾内科住院初次行前臂动-静脉内瘘成形术的ESRD患者62例。采用von kossa染色法观察桡动脉钙化情况,并根据组织钙化积分将患者分为无钙化组（〈1.0分）和钙化组（1.0~4.0分）;采用免疫组织化学法观察Cbfα1及Ⅰ型胶原的表达情况;检测相关临床指标〔空腹血清钙（Ca）、血清磷（P）、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、血红蛋白（Hb）、碱性磷酸酶（ALP）、铁蛋白、甲状旁腺素（iPTH）和C反应蛋白（CRP）,血压,体质指数（BMI）〕。结果62例ESRD患者桡动脉标本中25例（40.3%）发生血管钙化,其中轻中度钙化22例（35.5%）,重度钙化3例（4.8%）,均发生在血管中膜。根据组织钙化积分,无钙化组37例,钙化组25例。钙化组桡动脉中膜均有Cbfα1及Ⅰ型胶原的阳性表达;无钙化组桡动脉中膜31例（83.8%）Cbfα1阳性表达,19例（51.4%）Ⅰ型胶原阳性表达。钙化组Cbfα1及Ⅰ型胶原的阳性表达积分均高于无钙化组（P〈0.05）。钙化组与无钙化组的年龄、BMI、血压、Ca、iPTH、TG、TC、LDL、HDL、Hb、CRP、铁蛋白、ALP比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;钙化组血清P水平高于无钙化组（P〈0.05）。钙化组Cbfα1阳性表达积分与血清P呈正相关（r=0.679,P〈0.05）,与年龄、BMI、血压、血清Ca、TG、TC、LDL、HDL、iPTH、Hb、CRP、铁蛋白、ALP无相关性（P〉0.05）;Ⅰ型胶原阳性表达积分与血清P呈正相关（r=0.393,P〈0.05）,与年龄、BMI、血压、血清Ca、TG、TC、LDL、HDL、iPTH、Hb、CRP、铁蛋白、ALP无相关性（P〉0.05）;Cbfα1阳性表达积分与Ⅰ型胶原阳性表达积分呈正相关（r=0.307,P〈0.05）。结论 ESRD患者血管中膜钙化发生率较高,其发生机制可能与高磷诱导血管平滑肌细胞表型转化,促进I型胶原表达增加有关,为临床进一步研究提供了参考依据。

表达分泌型与膜结合型HH7N9 AIV血凝素蛋白重组NDV载体疫苗的免疫原性比较

研究以新城疫病毒(NDV)弱毒株LX为载体,构建了一株表达H7N9亚型禽流感病毒(H7N9 AIV)血凝素(HA)胞外区的重组病毒(LXs HA),并与一株前期构建的表达膜结合型HA的重组病毒(LXHAF)进行比较。生物学特性评价显示,两株病毒均为弱毒且在鸡胚中的繁殖性能较强。此外,LXs HA主要以分泌形式表达HA蛋白,而LXHAF则以膜结合形式表达HA。鸡的免疫试验显示,两株重组病毒在一次免疫后均能诱导针对NDV载体的血凝抑制抗体,但LXHAF能够诱导较高水平的H7N9 AIV特异性Ig Y抗体,而LXs HA不能诱导H7N9 AIV抗体应答。结果表明,表达膜结合型HA的重组病毒具有针对H7N9 AIV较好的免疫原性,而表达分泌型HA的重组病毒免疫原性较差。这为研发H7N9亚型禽流感载体疫苗提供新的信息与参考。

心肌型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)、cTnI与CK-MB在诊断早期AMI中的比较

目的 研究血清心肌型脂肪酸结合蛋白（H—FABP）在早期急性心肌梗死（AMI）诊断中的价值。方法 选择82例疑似急性心肌梗死的胸痛患者，采用快速检测法检测患者发病0～3h、3～6h和6h后血清的H—FABP，并与心肌肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）、肌酸激酶同工酶（CK—MB）的检测结果进行比较，分析3种心肌标志物在诊断不同发病时间段AMI的敏感性和特异性。结果 H—FABP检测诊断AMI的敏感性在0～3h（66．7％）和3～6h（100％）时间段显著高于cTnⅠ（33．3％、66．7％）和CK—MB（0％、61％）；在诊断特异性上，H—FABP高于cTnⅠ，比CK—MB低；H—FABP诊断AMI的准确率高达94．15％。结论 H—FABP对于诊断早期AMI具有较高的敏感性和良好的特异性，更适合于临床AMI的早期诊断。

用傅里叶变换红外光谱技术研究HIV-1融合肽的插膜深度与角度

为探讨HIV -1gp41N端融合肽诱导膜融合的机理 ,利用傅里叶变换红外光谱技术研究了化学方法合成的代表HIV -1gp41N末端的23肽 (HIVWT)分别与酸性POPG和中性POPC脂膜作用后 ,多肽H/D交换程度的变化及其在膜中的取向。结果表明 ,HIVWT 分子中的大部份氨基酸残基被POPG脂膜保护 ,分子骨架上的酰胺质子只有11.9 %可被D交换 ,而HIVWT 被POPC脂膜保护的程度则小得多 ;在POPG脂质体中 ,HIVWT 分子中的α -螺旋与脂双层平面的角度为29±2°,β-折叠与脂双层平面的夹角为25±1°。在POPC脂质体中 ,HIVWT 分子的α -螺旋与脂双层平面的角度为22±1°;β-折叠与脂双层平面的夹角为26±3°。根据实验结果 ,对HIVWT 的插膜状态进行了讨论。

蛛网膜下腔出血后早期基底动脉ADAMTS-1表达与急性脑血管痉挛的相关性研究

目的:检测大鼠蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后早期海马组织中含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-1(a disintegrin-like and metalloproteinase with thrombospondin type l motifs,ADAMTS-1)在基底动脉中的表达,分析其与大鼠SAH后急性脑血管痉挛(cerebral vasospasm,CVS)的相关性,探讨其在SAH后早期脑损伤(earlybrain injury,EBI)中的作用。方法:健康雄性成年SD大鼠108只,体质量250～300g,随机分为SAH组(n=90)和假手术组(sham组,n=18)。SAH组取大鼠自体动脉血,用视交叉池注血法建立大鼠SAH模型(sham组注入等量0.9%氯化钠液)。将SAH组随机分为6h、12h、24h、48h、72h5个亚组,每个亚组18只,分别在相应时间点处死。用蛋白质印迹(Western-blot)方法及实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测SAH各亚组及sham组基底动脉ADAMTS-1的表达,同时用HE染色法对基底动脉进行形态学观察。探讨ADAMTS-1与实验性大鼠SAH后急性CVS的相关性。结果:与sham组相比,SAH 6h亚组基底动脉ADAMTS-1表达无显著差异;12h亚组基底动脉ADAMTS-1蛋白表达显著增高,24h亚组最高,48h亚组、72h亚组逐渐下降,但仍维持在较高水平。与sham组相比,SAH 6h亚组大鼠基底动脉变化不明显;12h亚组大鼠基底动脉管腔缩小,管壁增厚;24h亚组基底动脉痉挛最为明显;48h亚组基底动脉痉挛较24h亚组减轻;与24h亚组、48h亚组相比,72h亚组基底动脉管腔直径更大、管壁厚度更薄。ADAMTS-1蛋白表达与SAH后急性CVS呈正相关(r=0.916,P=0.003)。结论:大鼠SAH后早期基底动脉ADAMTS-1表达与急性CVS正相关,提示ADAMTS-1可能参与大鼠SAH后EBI的病理过程。

骨关节炎患者TNF-α、IL-17、COMP、ADAMTS-7及mRNA表达水平研究

目的研究骨关节炎患者肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-17(interleukin-17,IL-17)、软骨寡聚基质蛋白(cartilage oligomeric matrix protein,COMP)、Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-7(a disint egrin and metalloprotease with thrombospondin motifs-7,ADAMTS-7)及mRNA表达水平。方法选择2012年1月至2017年12月本院收治的100例骨关节炎患者为研究对象,根据患者的病情程度将其分为轻度病变组、中度病变组、重度病变组。统计三组患者基本临床资料,采用酶联免疫吸附测定检测患者关节液中TNF-α、IL-17及COMP水平,采用逆转录聚合酶链反应检测患者滑膜组织中ADAMTS-7 mRNA表达情况,免疫组化法检测患者滑膜组织中ADAMTS-7表达水平,分析骨关节炎病变程度与上述指标表达水平的相关性。结果重度病变组患者年龄均明显大于轻度病变组和中度病变组(P_均<0.05),病程均明显长于轻度病变组和中度病变组(P_均<0.05),Lysholm评分均明显低于轻度病变组和中度病变组(P_均<0.05)。重度病变组患者关节液中TNF-α、IL-17及COMP水平均显著高于中度病变组和轻度病变组(P_均<0.05),中度病变组患者TNF-α、IL-17及COMP水平均显著高于轻度病变组(P_均<0.05)。ADAMTS-7蛋白表达强度和ADAMTS-7 mRNA表达水平在不同病变程度患者的滑膜组织中表达强度比较:重度病变组>中度病变组>轻度病变组。骨关节炎病变程度与滑膜组织ADAMTS-7蛋白、ADAMTS-7 mRNA表达及关节液中COMP、IL-17及TNF-α表达均呈正相关(P_均<0.05),与Lysholm评分呈负相关(P<0.05)。结论骨关节炎患者TNF-α、IL-17、COMP、ADAMTS-7及m RNA表达水平与病情严重程度具有相关性。

过表达MtVP1对马铃薯表型及糖代谢的影响

I型H^(+)-PPase参与糖异生和蔗糖分解代谢,利用不同的糖(蔗糖、葡萄糖和果糖)饲喂拟南芥(Arabidopsis thaliana)Ⅰ型H^(+)-PPase基因不同类型的突变体,产生的表型不一致,因此,推测Ⅰ型H^(+)-PPase可能存在其它影响糖代谢的机制。为进一步明确该酶对糖代谢的影响,以过表达MtVP1的马铃薯(Solanum tuberosum)渭薯4号为研究对象,观察不同培养条件下的表型,监测糖含量变化,并利用转录组测序分析转录谱。结果表明,过表达MtVP1马铃薯表现出红色茎、紫色花和表皮毛更发达,单株块茎数减少,块茎变大,块茎皱缩速度加快;转基因马铃薯块茎中淀粉、葡萄糖和果糖含量显著下降,芽中葡萄糖和果糖含量也显著下降。果糖饲喂导致转基因马铃薯花青素含量显著降低;转基因马铃薯体内果糖-1,6-二磷酸酶和果糖-2,6-二磷酸酶基因表达上调3–7倍。研究结果为进一步从糖代谢角度探究Ⅰ型H^(+)-PPase的生理功能提供参考。