Ⅰ型血小板结合蛋白基序的去整合素金属蛋白酶-7在骨关节疾病发病机制中的研究进展

Ⅰ型血小板结合蛋白基序的去整合素金属蛋白酶(ADAMTS)是一类新型锌离子依赖的金属蛋白酶家族,具有多种生理学功能。ADAMTS-7能抑制软骨细胞分化成熟,降解细胞外基质中的软骨寡聚基质蛋白(COMP),参与OA和RA的软骨损伤。在软骨或滑膜细胞中,ADAMTS-7可受包括TNF-α、IL-1β、IL-17A等在内的多种细胞因子调节,影响ADAMTS-7与软骨寡聚基质蛋白之间的相互作用。本综述的目的是更新ADAMTS-7在骨关节疾病发病机制中的作用。

含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶8在恶性肿瘤中的研究进展

近年来,含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS)基因的表达与恶性肿瘤进展之间的关系成为众多学者的研究热点。ADAMTS8是一种定位于肿瘤微环境的金属蛋白酶,是ADAMTS家族成员之一。ADAMTS8在恶性肿瘤中的作用受到越来越多的关注,其表达上调可抑制肿瘤的发生发展并与患者预后密切相关,是肿瘤治疗的潜在靶点。然而,ADAMTS8在各种恶性肿瘤中的功能异常复杂,其具体机制尚未完全阐明。本文综述了ADAMTS8在恶性肿瘤中的研究进展,为恶性肿瘤的发病机制、靶向治疗及预后提供了理论依据。

过表达含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的去整合素样金属蛋白酶18基因抑制人骨肉瘤细胞的增殖与迁移

目的探讨含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的去整合素样金属蛋白酶(ADAMTS)18基因对人骨肉瘤细胞增殖与迁移作用及其机制。方法将ADAMTS18过表达载体和空载体分别转染143B和U-20S人骨肉瘤细胞,细胞计数试剂盒(CCK)-8和Transwell小室实验研究过表达ADAMTS18基因对143B和U-20S细胞增殖和迁移作用,蛋白质Western印迹实验检测ADAMTS18和蛋白激酶B(AKT)蛋白表达水平。结果与空载体转染细胞株比较,过表达ADAMTS18基因可显著抑制143B和U-20S细胞增殖和迁移能力,并下调143B和U-20S细胞AKT蛋白水平。结论 ADAMTS18经下调AKT通路活性而抑制人骨肉瘤细胞恶性表型。

Ⅰ型血小板结合蛋白基序解聚蛋白样金属蛋白酶7基因rs3825807位点单核苷酸多态性与冠心病易感性关系的Meta分析

目的:通过系统评价与Meta分析探索Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶7(ADAMTS7)基因rs3825807位点单核苷酸的多态性与冠心病发病风险的关联。方法:计算机检索PubMed, Web of Science, Cochrane Library,中国知网,万方,维普和中国生物医学数据库,以获取ADAMTS7基因rs3825807多态性与冠心病易感性的原始研究。检索时限均为建库至2019年12月6日。由两位研究者独立筛选文献、提取数据并评价纳入研究的偏倚风险后,采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果:共纳入6个病例-对照研究,观察组包括4 989例病例,对照组包含5 471例。Meta分析结果显示,患者ADAMTS7基因rs3825807多态性与冠心病的发病风险增加有相关性(AA vs, GG:OR=21.07,95%CI:1.61~275.95,P=0.02;AG vs. GG:OR=6.80,95%CI:0.77~60.11,P=0.08;AA+AG vs. GG:OR=13.19,95%CI:1.09~158.97,P=0.04;AA vs. AG+GG:OR=2.39,95%CI:1.44~3.96,P=0.0007;A vs. G:OR=23.44,95%CI:8.19~67.10,P<0.00001)。结论:患者ADAMTS7基因rs3825807多态性是冠心病的发病风险因素之一。受纳入研究数量和质量限制,本研究需更多的高质量临床研究予以验证。

含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶10在压力超负荷诱导的心肌肥厚中的表达及其与心肌纤维化的关系

目的:探讨含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶10(ADAMTS10)在压力超负荷诱导的心肌肥厚中的表达及其与心肌纤维化的关系。方法:将60只8周雄性C57BL/6J小鼠随机分成假手术组(n=20)和实验组(n=40)。应用主动脉弓缩窄术(TAC)建立压力负荷诱导的心肌肥厚模型。两组小鼠分别于第4周和第8周超声检测小鼠心功能,之后处死测量体质量和心脏质量,同时行心肌组织苏木素-伊红、天狼猩红、麦胚凝集素(WGA)和免疫荧光染色。应用免疫印迹(Westernblotting)法检测小鼠心肌组织ADAMTS10蛋白质的表达,应用实时聚合酶联反应(RT-PCR)法检测小鼠心肌组织ADAMTS10、心房钠尿肽(ANP)、β-肌球蛋白重链(β-MHC)、基质金属蛋白酶(MMP)2和MMP9mRNA的表达。结果:实验组与假手术组比较,小鼠第4周心脏质量显著升高(P<0.05),且在实验组第8周进一步升高(P<0.05);小鼠第4周左心室射血分数以及短轴缩短率均明显降低(P<0.05,且在第8周进一步降低,P<0.05);ADAMTS10mRNA和蛋白表达升高(P均<0.05)。免疫荧光结果提示ADAMTS10定位于成纤维细胞;RT-PCR结果提示ADAMTS10mRNA水平与心肌组织ANP水平显著正相关[r=0.6017,P<0.05(实验组4周)和r=0.6607,P<0.05(实验组8周)],与β-MHC水平显著正相关[r=0.6249,P<0.05(实验组4周)和r=0.7194,P<0.05(实验组8周)],与MMP2显著正相关[r=0.6971,P<0.05(实验组4周)和r=0.8689,P<0.05(实验组8周)],与MMP9水平显著正相关[r=0.6931,P<0.05(实验组4周)和r=0.8096,P<0.05(实验组8周)]。结论:在压力超负荷诱导的心肌肥厚模型,ADAMTS10通过调控细胞外基质重构,参与心肌肥厚和纤维化的发生发展。

Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶1基因多态性与老年原发性高血压患者颈动脉粥样硬化斑块形成的关系

目的分析Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶1(ADAMTS-1)基因多态性与老年原发性高血压(EH)患者颈动脉粥样硬化斑块(CAP)形成的关系。方法选择2015年1月至2021年7月于河北医科大学第一医院门诊或住院治疗的老年EH患者400例为研究对象。根据患者是否有CAP形成,将患者分为非斑块组(144例)和斑块组(256例)。比较2组ADAMTS-1基因rs402007位点等位基因和基因型频率。采用Logistic回归方法分析老年EH患者CAP形成的影响因素,建立列线图模型,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估列线图模型对老年EH患者CAP形成的预测能力。结果斑块组ADAMTS-1基因rs402007位点C等位基因及CC基因型频率均高于非斑块组[46.3%(237/512)比36.8%(106/288)、21.5%(55/256)比13.9%(20/144)],差异均有统计学意义(均P<0.001)。多因素Logistic回归分析结果显示,收缩压、尿酸、高密度脂蛋白胆固醇、同型半胱氨酸、C反应蛋白、ADAMTS-1基因rs402007位点CC+CG基因型是老年EH患者CAP形成的独立相关因素(均P<0.05)。纳入所有独立相关因素建立的列线图模型的一致性指数为0.948(95%置信区间:0.925~0.983)。ROC曲线分析结果显示,该列线图模型预测老年EH患者CAP形成的曲线下面积为0.854(95%置信区间:0.826~0.892)。结论ADAMTS-1基因rs402007位点C等位基因是老年EH患者CAP形成的遗传易感等位基因。

Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶的研究进展

Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS)是一种新型Zn2+依赖的分泌型金属蛋白酶。近来,ADAMTS的结构分析显示,凝血敏感蛋白的超甲基化使得癌基因、抑癌基因和mRNA的稳定性发生了改变,并在关节炎发生中与软骨聚集蛋白聚糖水解有关。补体-纤维-骨变形蛋白结构域CUB参与vWF剪切,与血小板减少性紫癜发生有关。这些进展都为今后的疾病诊断和治疗提供新的思考方向。

多配体蛋白聚糖-4和新型金属蛋白酶-1在组织愈合过程中的作用

多配体蛋白聚糖-4是一种新发现的多肽,广泛存在于多种组织中,调控着多种生物学效应。含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS)-1是一种新型金属蛋白酶,广泛存在于哺乳动物和无脊椎动物体内,在保持凝血系统的稳态、器官生成、炎症和生育等方面起着重要的作用。二者均参与组织的创伤愈合过程,且ADAMTS-1特异性地作用于多配体蛋白聚糖-4,使其胞外区脱落。本文就多配体蛋白聚糖、ADAMTS-1、多配体蛋白聚糖-4与ADAMTS-1、多配体蛋白聚糖-4与牙周组织等研究进展作一综述,为探究牙周组织的损伤修复机制提供理论依据。

ADAMTS-1对小鼠肺成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白的影响

目的探讨含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)对小鼠肺成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白(COL1)表达的影响及可能的机制。方法应用细胞培养技术进行小鼠肺成纤维细胞培养,利用ADAMTS-1为刺激因子,将培养的细胞分为空白组、低、中、高浓度组,应用逆转录-多聚酶链反应技术(RT-PCR)观察COL1 mRNA、转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA在各组中的表达情况;采用蛋白质印迹法(Western blotting)观察各组细胞COL1、TGF-β1的变化。结果与空白组相比,低浓度组、中浓度组、高浓度组的COL1、TGF-β1表达水平下降,其中高浓度组表达水平最低(P<0.05)。结论 ADAMTS-1能降低COL1的表达,抑制TGF-β1是其抗纤维化作用的可能潜在机制。

转化生长因长-β1与含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶4在颈动脉粥样硬化斑块中的关系

目的探讨转化生长因子(TGF)-β1与含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶4(ADAMTS4)在人颈动脉粥样硬化(AS)斑块中表达的关系。方法收集颈动脉内膜剥脱术(CEA)后的斑块组织(n=46),以苏木精-伊红(HE)染色后依据病理学特征分为稳定斑块组和易损斑块组;分别采用免疫组织化学(IHC)与实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测ADAMTS4与TGF-β1的表达部位及水平,以脐动脉作为对照(n=10)进行比较分析,应用SPSS23.0统计软件分析。结果易损斑块组、稳定斑块组及对照组的ADAMTS4mRNA表达量分别为4.43±2.02、3.16±1.57、1.02±0.22,组间比较差异有统计学意义(F=17.545,P<0.05);易损斑块组、稳定斑块组及对照组的TGF-β1mRNA表达量分别为3.57±1.76、4.68±1.42、1.14±0.31,组间比较差异有统计学意义(F=24.676,P<0.05);Pearson相关分析显示斑块中两者的表达量呈正相关(r=0.439,P<0.05)。结论在AS发生发展及斑块演变过程中,斑块局部ADAMTS4与TGF-β1的表达量呈正相关性增加趋势,其机制可能与剂量或细胞类型依赖性有关。

氧化修饰低密度脂蛋白和Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶的表达水平与急性心肌梗死患者冠状动脉斑块稳定性的关系

目的研究氧化修饰低密度脂蛋白(OX-LDL)和Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-Ⅰ)表达水平与急性心肌梗死(AMI)患者冠状动脉斑块稳定性的关系。方法以本院收治的AMI患者90例作为AMI组,以本院同期正常的健康志愿者40例作为健康组;用酶联免疫吸附法检测血浆OX-LDL和ADAMTS-Ⅰ水平。根据冠状动脉斑块特征将AMI患者分成3组:软斑块组、混合斑块组和硬斑块组,每组30例;比较3组患者血浆OX-LDL和ADAMTS-Ⅰ水平差异,以Logistic分析血浆OX-LDL和ADAMTS-Ⅰ水平与其他危险因素之间的相关性。结果 AMI组和健康组血浆OX-LDL水平分别为(459. 31±61. 57)和(210. 49±40. 15)μg·L-1;AMI组和健康组血浆ADAMTS-Ⅰ水平分别为(94. 58±22. 61)和(40. 97±16. 74)μg·L-1,组间比较差异均有统计学意义(均P <0. 05)。血浆OX-LDL和ADAMTS-Ⅰ水平由高到低依次为软斑块组、混合斑块组、硬斑块组,组间比较差异均有统计学意义(均P <0. 05)。以AMI患者是否为不稳定斑块作为因变量,以血浆OX-LDL和ADAMTS-Ⅰ以及MMP-9、hs-CRP水平为自变量,结果显示以上4个因子均为AMI患者不稳定斑块的独立危险因素(均P <0. 05)。90例AMI患者血浆OX-LDL和ADAMTS-Ⅰ水平分别与MMP-9、hs-CRP水平呈现正相关(P <0. 05),且血浆OX-LDL和ADAMTS-Ⅰ水平互为正相关(P <0. 05)。结论 AMI患者血浆OX-LDL和ADAMTS-Ⅰ水平均异常升高,且随冠状动脉斑块稳定性变化而变化。

瘦素人类含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶4与类风湿关节炎骨破坏相关性研究

目的探讨瘦素（leptin）在RA中表达及关节破坏中的意义。方法选取48例初治RA患者（其中14例有膝关节积液）和23名年龄、性别相匹配的健康对照者作为研究对象。RA组按DAS28-ESR分为低中度活动组（2．6〈DAS28≤5．1）5例及高度活动组（DAS28〉5．1）43例。按双手x线分为骨侵蚀组（20例）和无骨侵蚀组（28例）。ELISA检测RA及对照组血清和关节液中leptin及人类含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶4（ADAMTS4）水平。Sharp／vander Heijde评分评估双手及腕骨侵蚀和关节狭窄情况。采用t检验、秩和检验、χ2检验、方差分析统计学方法比较各组血清和关节液中leptin、ADAMTS4水平差异，并与临床及实验室指标行Pearson、Spearman相关性分析。进一步单因素及logistic回归分析筛选RA骨破坏危险因素。结果RA组血清leptin水平高于对照组[8．06（6．24）ng／ml和4．62（7．13）ng/ml，Z=-2．113，P=0．035]，且与Sharp／vander Heijde评分呈正相关（r=0．347，P=0．016）。RA骨侵蚀组血清leptin高于无骨侵蚀组（Z=-2．070，P=0．038），而骨侵蚀RA中关节液leptin水平与关节液ADAMTS4水平呈正相关（r=0．900，P=0．037）。Logistic回归分析提示关节疼痛数目多、leptin值高的RA患者易出现关节破坏[P=0．043，OR=1．229，95％CI（1．007，1．500）；P=-0．030，OR=1．159，95％CI（1．015，1．324）]。结论Leptin参与了RA发病及关节破坏，并可能通过调控ADAMTS4表达进一步参与骨侵蚀；leptin值、关节疼痛数是RA关节破坏的独立危险因素。

基质金属蛋白酶研究进展

炎症是众多疾病的共同病理过程,炎症反应的程度与疾病的临床预后息息相关。基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMPs）作为一组蛋白水解酶类,在胚胎的发育、器官的重塑乃至炎症过程中起重要作用。近年来,随着基础研究的不断深入,

电针对椎间盘退变大鼠含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶4的影响

目的:观察椎间盘退变模型大鼠含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶4(ADAMTS-4)的变化及电针效应,分析电针预防和治疗椎间盘退变的作用和机制。方法:48只成年SD大鼠分为假手术组(n=12)、模型组(n=18)和电针组(n=18)。使用椎间盘穿刺法建立椎间盘退变大鼠模型。电针组造模4周后开始进行电针干预,选取"膀胱俞""足三里""趾间"穴,2Hz连续波刺激,每次20min,每周电针6次,连续4周。分别于造模后第4、6、8周收集椎间盘组织与血清样本,免疫组织化学法观察ADAMTS-4在椎间盘组织中的表达,Western blot法检测椎间盘组织ADAMTS-4的表达水平,ELISA法检测血清中ADAMTS-4的含量。结果:假手术组大鼠的椎间盘组织中有少量ADAMTS-4表达,模型组各时间点椎间盘组织中ADAMTS-4的表达均高于假手术组(P<0.01)。与模型组比较,治疗2周时,电针组椎间盘组织中ADAMTS-4表达水平降低(P<0.05),血清ADAMTS-4含量无明显变化(P>0.05);治疗4周时,电针组椎间盘组织中ADAMTS-4表达水平、血清ADAMTS-4含量较治疗2周时进一步降低(P<0.05)。结论:退变椎间盘组织中ADAMTS-4的表达升高,而电针可以降低椎间盘组织中ADAMTS-4的表达,进而减缓细胞外基质的降解,发挥电针治疗椎间盘退变的作用。

解聚蛋白样基质金属蛋白酶4表达及其与颈动脉斑块易损性关系的研究

目的探讨含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样基质金属蛋白酶4(ADAMTS-4)在颈动脉粥样硬化性狭窄患者中的表达及其与斑块易损性的相关性,同时分析血液相关指标与斑块易损性之间的关系。方法回顾性连续纳入2017年8月至2019年12月广东省人民医院神经外科收治的颈动脉粥样硬化性狭窄并行颈动脉内膜切除术(CEA)患者43例,其中1例分期行双侧CEA,以2例计算,共计44例患者。以颈部血管超声造影结果0~1级为稳定斑块,2~3级为易损斑块;以高分辨率增强MR血管成像(MRA)结果Ⅰ~Ⅲ型、Ⅶ~Ⅷ型为稳定斑块,Ⅳ~Ⅵ型为易损斑块。当颈部血管超声造影与高分辨率增强MRA对斑块易损性评估结果不一致时,以颈部血管超声造影结果为准。根据斑块性质,将44例患者分为稳定组(15例)和易损组(29例)。记录两组患者的一般资料、血液学指标、斑块中ADAMTS-4的表达,一般资料包括年龄、性别、高血压病、糖尿病和狭窄侧别;血液学指标包括血小板计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、ADAMTS-4、血小板与淋巴细胞比值(PLR)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR),并进行组间比较。分析PLR和ADAMTS-4与斑块易损性的相关性(对正态分布资料采用Pearson相关分析,对非正态分布资料及有序变量采用Spearman秩相关分析)。术前采用酶联免疫吸附测定检测血清中ADAMTS-4的水平;对斑块组织行免疫组织化学染色,检测ADAMTS-4在斑块中的表达,分为阳性细胞数<25%、25%~50%和>50%。结果(1)两组患者年龄、性别、高血压病、糖尿病、颈动脉粥样硬化性狭窄侧别的差异均无统计学意义(均P>0.05)。(2)两组血小板计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、NLR的差异均无统计学意义(均P>0.05);稳定组血清ADAMTS-4水平、PLR均低于易损组,组间差异均有统计学意义[分别为(72±26)μg/L比(116±24)μg/L,t=-5.683;110.87(87.25,134.05)比151.33(130.72,169.17),Z=-2.860;均P<0.01]。(3)稳定组阳性细胞数<25%、25%~50%和>50%的占比分别为10/15、3/15、2/15,易损组阳性细胞数<25%、25%~50%和>50%的占比分别为3/29、14/29、12/29,组间差异有统计学意义(Z=-3.330,P=0.001)。(4)相关性分析结果显示,PLR水平、斑块ADAMTS-4与斑块易损性的相关度较低(Spearman相关系数r值分别为0.436、0.508),血清ADAMTS-4水平与斑块易损性呈中度相关(Pearson相关系数r=0.659),均与斑块易损性呈正相关(均P<0.01)。结论PLR及ADAMTS-4表达水平与颈动脉斑块的易损性呈正相关,PLR和斑块ADAMTS-4与易损性相关度均较低,血清ADAMTS-4与斑块易损性为中度相关。

蛋白聚糖和ADAMTS-1在多囊卵巢综合征患者血清中的表达及其临床意义

目的:探讨蛋白聚糖(Versican)和Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1在多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清中的表达,阐明二者在PCOS发病中的作用。方法:选取80例PCOS患者(PCOS组)和100名正常体检妇女(对照组)为研究对象,测量2组受试对象身高和体质量,计算体质量指数(BMI);采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测2组受试对象血清中Versican和ADAMTS-1水平,测定2组受试对象血清中卵泡刺激素(FSH)、黄体生成激素(LH)、睾酮(T)、空腹血糖(FBG)和空腹胰岛素等水平;采用胰岛素抵抗指数稳态模式评估法(HOMA-IR)评估胰岛素抵抗。采用Pearson直线相关分析法分析Versican和ADAMTS-1与代谢指标的相关性。结果:PCOS组患者血清中Versican水平低于对照组(P=0.004),PCOS组患者血清中ADAMTS-1水平低于对照组(P<0.01)。Versican和ADAMTS-1预测PCOS的灵敏度、特异度、受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)分别为76.74%vs 63.64%(P=0.018)、52.94%vs 40.73%(P=0.009)和0.675(0.550～0.795)vs 0.714 (0.601～0.827)(P=0.032)。PCOS组患者Versican水平与FBG水平呈负相关关系(r=-0.738,P=0.022),ADAMTS-1水平与FBG水平亦呈负相关关系(r=-0.524,P=0.043)。结论:Versican和ADAMTS-1在PCOS患者外周血中低表达,并与胰岛素抵抗呈负相关关系,在PCOS发生中可能起抑制作用。

血清蛋白聚糖及ADAMTS-1在多囊卵巢综合征患者中的表达及临床意义

目的探讨血清蛋白聚糖(Versican)及I型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-1(ADAMTS-1)在多囊卵巢综合征(PCOS)患者中的表达及临床意义。方法选取PCOS患者80例为观察组,正常体检妇女100例为对照组,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测受试者血清中Versican、ADAMTS-1水平,并测量身高、体重并计算体重指数。测定血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成激素(LH)、睾酮(T)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素等。采用HOMA-IR公式计算胰岛素抵抗指数。结果观察组BMI、血糖、胰岛素、HOMA-IR、LH、雌二醇、FSH、睾酮、游离睾酮水平高于对照组(P<0.05);观察组ADAMTS-1水平、Versican水平低于对照组(P<0.05)。Versican,ADAMTS-1预测PCOS的灵敏度、特异度、AUC、阳性预测值、阴性预测值分别为76.74%,52.94%,0.675(0.55～0.795),97.35%,64.29%;63.64%,40.73%,0.714(0.601～0.827),70.00%,64.25%。PCOS组血清ADAMTS-1、Versican呈正相关(t=17.05,r=0.415,P=0.02)。Versican与空腹血糖呈负相关(t=15.84,r=-0.354,P=0.021)。ADAMTS-1与空腹血糖呈负相关(t=12.52,r=-0.274,P=0.041)。结论蛋白聚糖及ADAMTS-1在多囊卵巢综合征患者外周血中低表达,Versican在PCOS发生中可能起到一定的作用。

骨关节炎患者TNF-α、IL-17、COMP、ADAMTS-7及mRNA表达水平研究

目的研究骨关节炎患者肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-17(interleukin-17,IL-17)、软骨寡聚基质蛋白(cartilage oligomeric matrix protein,COMP)、Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-7(a disint egrin and metalloprotease with thrombospondin motifs-7,ADAMTS-7)及mRNA表达水平。方法选择2012年1月至2017年12月本院收治的100例骨关节炎患者为研究对象,根据患者的病情程度将其分为轻度病变组、中度病变组、重度病变组。统计三组患者基本临床资料,采用酶联免疫吸附测定检测患者关节液中TNF-α、IL-17及COMP水平,采用逆转录聚合酶链反应检测患者滑膜组织中ADAMTS-7 mRNA表达情况,免疫组化法检测患者滑膜组织中ADAMTS-7表达水平,分析骨关节炎病变程度与上述指标表达水平的相关性。结果重度病变组患者年龄均明显大于轻度病变组和中度病变组(P_均<0.05),病程均明显长于轻度病变组和中度病变组(P_均<0.05),Lysholm评分均明显低于轻度病变组和中度病变组(P_均<0.05)。重度病变组患者关节液中TNF-α、IL-17及COMP水平均显著高于中度病变组和轻度病变组(P_均<0.05),中度病变组患者TNF-α、IL-17及COMP水平均显著高于轻度病变组(P_均<0.05)。ADAMTS-7蛋白表达强度和ADAMTS-7 mRNA表达水平在不同病变程度患者的滑膜组织中表达强度比较:重度病变组>中度病变组>轻度病变组。骨关节炎病变程度与滑膜组织ADAMTS-7蛋白、ADAMTS-7 mRNA表达及关节液中COMP、IL-17及TNF-α表达均呈正相关(P_均<0.05),与Lysholm评分呈负相关(P<0.05)。结论骨关节炎患者TNF-α、IL-17、COMP、ADAMTS-7及m RNA表达水平与病情严重程度具有相关性。

血清ADAMTS13、IL-18对急性ST段抬高型心肌梗死经皮冠状动脉介入治疗术后患者预后的预测价值

目的探讨血清含1型血小板结合蛋白基序的去整合素样金属蛋白酶成员13(ADAMTS13)、IL-18对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后患者预后的预测价值。方法213例STEMI患者,根据PCI术后1年是否发生主要不良心血管事件(MACE)分为MACE组(n=52)和非MACE组(n=161)。采用酶联免疫吸附法测定血清ADAMTS13、IL-18,Spearman相关性分析Killip分级与血清ADAMTS13、IL-18水平的相关性,多因素Logistic回归分析STEMI患者PCI术后MACE发生的影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清ADAMTS13、IL-18水平对STEMI患者PCI后MACE发生的预测价值。结果MACE组发病至入院时间、支架长度长于非MACE组,Killip分级≥Ⅱ级比例、支架数目高于非MACE组(P均<0.05)。Killip分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级患者血清ADAMTS13水平依次降低,IL-18水平依次升高;Killip分级与ADAMTS13水平呈负相关,与IL-18水平呈正相关(r_(s)分别为-0.740、0.797,P均<0.001)。发病至入院时间、Killip分级≥Ⅱ级、IL-18水平为STEMI患者PCI术后MACE发生独立危险因素,ADAMTS13水平为独立保护因素(P均<0.05)。ADAMTS13+IL-18预测STEMI患者PCI术后MACE发生的曲线下面积大于ADAMTS13、IL-18单独预测(P均<0.05)。结论血清ADAMTS13水平降低和IL-18水平升高与STEMI患者心功能降低和MACE发生有关,二者联合能提升PCI术后MACE发生预测价值。

大鼠肾虚型椎间盘软骨终板退变病证结合模型的构建与评价

目的:探讨采用切除双侧卵巢结合阻断软骨终板营养供应法构建大鼠肾虚型椎间盘软骨终板(cartilage endplate,CEP)退变病证结合模型的可行性。方法:将108只12周龄SPF级雌性SD大鼠随机分为空白组、CEP退变模型组、病证结合模型组,每组36只。CEP退变模型组大鼠于椎间盘CEP下方骨质处注射无水酒精,病证结合模型组大鼠摘除双侧卵巢并于椎间盘CEP下方骨质处注射无水酒精,空白组大鼠不做任何处理。造模后观察并记录大鼠表观特征,测定肾虚症状体征量化评分。分别于造模后4周、8周,从各组随机抽取6只大鼠,先摄尾椎X线片,测算尾椎骨密度;再处死大鼠,取出尾椎,行Micro-CT扫描测算骨小梁数目(trabecular number,TN)、骨小梁分离度(trabecular separation,TS)、骨小梁厚度(trabecular thickness,TT);再从各组随机抽取6只大鼠,切取造模椎间盘,采用HE染色观察各组大鼠椎间盘CEP组织退变情况,采用实时定量聚合酶链反应法检测椎间盘CEP组织聚集蛋白聚糖和含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(a disintesrin and metalloprotease with thrombospondin typeⅠmotifs,ADAMTS)-5基因表达量。结果:①一般情况。在造模过程中,所有大鼠均无意外死亡发生。CEP退变模型组1只大鼠术后3 d出现尾部切口愈合不良、坏死现象,换药后1周左右切口愈合;其余大鼠尾部切口均愈合良好。②大鼠表观特征。造模后,病证结合模型组大鼠逐渐出现毛发枯槁易脱落、饮食增多、精神倦怠、两眼无神、大便干结变硬、活动减少、反应迟钝等肾虚表现,空白组与CEP退变模型组大鼠无上述表现。③肾虚症状体征量化评分。时间因素和分组因素存在交互效应(F=14.326,P=0.000)。3组大鼠肾虚症状体征量化评分总体比较,差异有统计学意义,即存在分组效应(F=22.317,P=0.000)。造模后不同时间点大鼠肾虚症状体征量化评分的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=50.279,P=0.000)。造模后,3组大鼠肾虚症状体征量化评分随时间变化趋势不一致,空白组大鼠肾虚症状体征量化评分随时间未见明显变化[(1.00±0.71)分,(1.40±0.55)分,(1.80±0.84)分,(2.00±1.00)分,F=1.573,P=0.235],CEP退变模型组和病证结合模型组大鼠肾虚症状体征量化评分随时间均呈升高趋势[(0.80±0.45)分,(1.20±0.45)分,(1.60±0.55)分,(2.20±0.84)分,F=5.095,P=0.012;(1.40±0.55)分,(3.40±1.14)分,(4.60±0.55)分,(6.80±0.84)分,F=39.256,P=0.000]。造模后2周,3组大鼠肾虚症状体征量化评分比较,差异无统计学意义(F=1.400,P=0.284)。造模后4周、6周、8周,3组大鼠肾虚症状体征量化评分比较,组间差异均有统计学意义(造模后4周:F=12.333,P=0.001;造模后6周:F=32.462,P=0.000;造模后8周:F=46.083,P=0.000);空白组和CEP退变模型组大鼠肾虚症状体征量化评分均低于病证结合模型组(造模后4周:LSD-t=4.082,P=0.002;LSD-t=4.491,P=0.001。造模后6周:LSD-t=6.725,P=0.000;LSD-t=7.206,P=0.000。造模后8周:LSD-t=8.485,P=0.000;LSD-t=8.132,P=0.000);空白组与CEP退变模型组大鼠肾虚症状体征量化评分比较,差异均无统计学意义(造模后4周:LSD-t=0.408,P=0.690;造模后6周:LSD-t=0.480,P=0.640;造模后8周:LSD-t=0.354,P=0.730)。④尾椎骨密度。造模后4周,3组大鼠尾椎骨密度比较,差异有统计学意义[(4.15±0.44)g·cm^(-3),(4.04±0.38)g·cm^(-3),(3.30±0.33)g·cm^(-3),F=7.719,P=0.007];空白组和CEP退变模型组大鼠尾椎骨密度均高于病证结合模型组(LSD-t=3.682,P=0.003;LSD-t=3.028,P=0.011);空白组大鼠尾椎骨密度与CEP退变模型组比较,差异无统计学意义(LSD-t=0.655,P=0.525)。造模后8周,3组大鼠尾椎骨密度比较,差异有统计学意义[(4.12±0.42)g·cm^(-3),(3.88±0.53)g·cm^(-3),(2.86±0.63)g·cm^(-3),F=7.927,P=0.006];空白组和CEP退变模型组大鼠尾椎骨密度均高于病证结合模型组(LSD-t=3.749,P=0.003;LSD-t=3.035,P=0.010);空白组大鼠尾椎骨密度与CEP退变模型组比较,差异无统计学意义(LSD-t=0.714,P=0.489)。⑤骨微结构指标。造模后4周,3组大鼠TN、TS比较,组间差异均具有统计学意义[TN:(5.01±0.12)个·mm^(-1),(4.81±0.12)个·mm^(-1),(3.86±0.17)个·mm^(-1),F=95.936,P=0.000;TS:(0.20±0.03)μm,(0.24±0.02)μm,(0.30±0.04)μm,F=10.807,P=0.002];空白组和CEP退变模型组大鼠TN高于病证结合模型组(LSD-t=12.991,P=0.000;LSD-t=10.657,P=0.000),TS低于病证结合模型组(LSD-t=4.623,P=0.001;LSD-t=2.736,P=0.018);空白组大鼠TN和TS与CEP退变模型组比较,组间差异均无统计学意义(TN:LSD-t=0.432,P=0.924;TS:LSD-t=1.887,P=0.084)。造模后8周,3组大鼠TN、TS比较,组间差异均具有统计学意义[TN:(4.91±0.26)个·mm^(-1),(4.61±0.55)个·mm^(-1),(3.05±0.44)个·mm^(-1),F=27.088,P=0.000;TS:(0.22±0.04)μm,(0.23±0.02)μm,(0.29±0.03)μm,F=7.679,P=0.002];空白组和CEP退变模型组大鼠TN高于病证结合模型组(LSD-t=6.854,P=0.000;LSD-t=5.750,P=0.000),TS低于病证结合模型组(LSD-t=3.623,P=0.003;LSD-t=3.106,P=0.009);空白组大鼠TN和TS与CEP退变模型组比较,组间差异均无统计学意义(TN:LSD-t=1.104,P=0.291;TS:LSD-t=0.518,P=0.614)。造模后4周、8周,3组大鼠TT比较,组间差异均无统计学意义[造模后4周:(0.08±0.02)μm,(0.09±0.01)μm,(0.10±0.01)μm,F=1.462,P=0.304;造模后8周:(0.09±0.01)μm,(0.09±0.02)μm,(0.08±0.01)μm,F=2.400,P=0.171]。⑥椎间盘CEP组织形态。造模后,CEP退变模型组和病证结合模型组大鼠尾椎CEP均出现退变,表现为软骨细胞排列不规则,软骨细胞簇聚,潮线模糊,染色不均,软骨钙化层增厚等,而病证结合模型组退变更明显。⑦椎间盘CEP组织聚集蛋白聚糖和ADAMTS-5基因的表达。造模后4周、8周,3组大鼠椎间盘CEP组织聚集蛋白聚糖基因表达量比较,组间差异均有统计学意义(造模后4周:1.07±0.19,0.74±0.09,0.51±0.07,F=23.498,P=0.000;造模后8周:1.03±0.22,0.65±0.08,0.43±0.07,F=23.538,P=0.000);空白组大鼠聚集蛋白聚糖基因表达量高于CEP退变模型组和病证结合模型组(造模后4周:LSD-t=4.045,P=0.002;LSD-t=6.815,P=0.000。造模后8周:LSD-t=4.329,P=0.001;LSD-t=6.774,P=0.000),CEP退变模型组大鼠聚集蛋白聚糖基因表达量高于病证结合模型组(造模后4周:LSD-t=2.770,P=0.017。造模后8周:LSD-t=2.445,P=0.031)。造模后4周、8周,3组大鼠椎间盘CEP组织ADAMTS-5基因表达量比较,组间差异均有统计学意义(造模后4周:1.06±0.07,1.30±0.08,1.81±0.15,F=64.344,P=0.000;造模后8周:1.13±0.09,1.59±0.13,2.14±0.10,F=110.156,P=0.000);空白组大鼠ADAMTS-5基因表达量低于CEP退变模型组与病证结合模型组大鼠(造模后4周:LSD-t=3.543,P=0.004;LSD-t=11.104,P=0.000。造模后8周:LSD-t=6.702,P=0.000;LSD-t=14.821,P=0.000),CEP退变模型组大鼠ADAMTS-5基因表达量低于病证结合模型组(造模后4周:LSD-t=7.562,P=0.000;造模后8周:LSD-t=8.119,P=0.000)。结论:切除双侧卵巢结合阻断CEP营养供应法是构建大鼠肾虚型椎间盘CEP退变病证结合模型的一种可行方法。