PI3Kp110β在大肠癌癌变过程中的表达及其意义

目的研究磷脂酰肌醇3-激酶p110β亚单位(PI3Kp110β)在大肠癌癌变过程中的表达及其意义。方法用Western Blot检测48例大肠病变组织标本PI3Kp110β的表达情况,用单因素方差分析分析PI3Kp110β在大肠病变组织中的表达情况及其与临床病理特征间的关系。结果 PI3Kp110β蛋白在大肠癌癌变过程中,即在大肠正常组织、大肠增生性息肉、大肠腺瘤、大肠癌中表达阳性率呈递增趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。大肠癌中PI3Kp110β蛋白与患者的肿瘤分化程度无关(P>0.05),但是与临床分期相关(P<0.05)。结论 PI3Kp110β参与大肠癌的发生发展并与其临床分期密切相关。

PI3K p110β在大肠癌癌变过程中的表达及意义

目的研究磷脂酰肌醇3-激酶p110β亚单位(PI3K p110β)在大肠癌癌变过程中,即大肠正常组织、大肠增生性息肉、大肠腺瘤、大肠癌的表达及意义。方法应用免疫组织化学SP法检测145例大肠组织标本中PI3K p110β的表达,用等级相关的秩和检验分析PI3K p110β在大肠病变组织中表达的意义及其与临床病理特征间的关系。结果PI3K p110β蛋白在正常大肠组织、大肠增生性息肉、大肠腺瘤、大肠癌中表达阳性率呈递增趋势,差异有明显统计学意义(P<0.05)。大肠癌中PI3K p110β表达与肿瘤分化程度、患者性别、年龄无关(P>0.05),但与临床分期相关(P<0.05)。结论PI3K p110β蛋白在大肠癌癌变过程中存在异常表达,并与临床分期密切相关,PI3K p110β的高表达与大肠癌的发生、发展、浸润转移有关。

PI3K/p110β和PTEN在前列腺癌中的表达及意义

[目的]探讨磷脂酰肌醇3-激酶亚单位p110β(PI3K/p110β)和PTEN基因在前列腺癌中的表达。[方法]收集绵阳市中心医院2016年1月~2020年1月经手术切除的前列腺癌标本80例,取新鲜癌组织及癌旁组织作为实验样本。用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测癌及癌旁组织PI3K/p110β及PTEN基因相对表达量。[结果]前列腺癌标本中PI3K/p110βmRNA及PTEN mRNA相对表达量分别为4.124±0.194及3.039±0.098,而癌旁组织中PI3K/p110βmRNA及PTEN mRNA相对表达量分别为2.480±0.199及4.012±0.145。前列腺癌标本中的PI3K/p110βmRNA相对表达值明显高于癌旁组织,而PTEN mRNA相对表达值低于癌旁组织,两者比较均有显著性差异(P <0.05)。[结论]前列腺癌患者抑癌基因PTEN失活,导致PI3K/p110β表达增强,从而促进前列腺癌的发生发展。

雄激素调控大鼠阴茎海绵体组织中eNOS表达的分子机制

目的:研究雄激素是否通过蛋白激酶B-3(AKT3)、Ⅰ类磷脂酰肌醇-3-激酶的p110催化亚单位(PIK3CA)、钙调蛋白(CALM)、小窝蛋白1(CAV1)调控大鼠阴茎海绵体组织内皮型一氧化氮合酶(e NOS)的表达,并影响阴茎勃起功能。方法:8周龄健康雄性SD大鼠36只,随机均分为6组:4周对照组(A组)、6周对照组(B组)、4周去势组(C组)、6周去势组(D组)、4周去势+睾酮(T)替代组(E组)、6周去势+T替代组(F组)。C、D、E、F组切除双侧睾丸及附睾,1 d后E、F组隔日1次丙酸睾酮3 mg/kg皮下注射,其余各组等量植物油皮下注射。4周后(A、C、E组)、6周后(B、D、F组)分别检测各组大鼠海绵体内压(ICP_(max))/平均动脉压(MAP)、血清T,通过免疫组化法及Western印迹法分别测定e NOS、P-e NOS、AKT3、PIK3CA、CALM、CAV1在各组大鼠阴茎海绵体中的表达。结果:各组实验大鼠体重、MAP无显著差异。血清T值和ICP_(max)/MAP比值:去势组(C、D组)较对照组(A、B组)及去势+T替代组(E、F组)极显著降低(P均<0.01),且去势6周组(D组)较去势4周组(C组)显著降低(P均<0.05),去势+T替代组(E、F组)及对照组(A、B组)各组间无显著差异。免疫组化结果显示:e NOS、Pe NOS主要表达在血管内皮细胞胞膜和海绵窦血管腔内;AKT3、PIK3CA、CALM、CAV1主要表达于血管内皮细胞胞质和胞膜,少数表达于平滑肌细胞。e NOS、P-e NOS、AKT3、PIK3CA、CALM、CAV1Western印迹结果显示:去势组(C、D组)与对照组(A、B组)、去势+T替代组(E、F组)相比极显著降低(P均<0.01),去势+T替代组(E、F组)与对照组(A、B组)相比无显著差异,且6周去势组(D组)比4周去势组(C组)表达显著降低(P均<0.05),6周去势+T替代组(F组)与4周去势+T替代组(E组)相比无显著差异,6周对照组(B组)与4周对照组(A组)相比无显著差异。结论:雄激素可能通过上调AKT3、PIK3CA、CALM、CAV1蛋白的表达,磷酸化e NOS后激活e NOS,促进勃起;然而,确切的机制还应该采用AKT3、PIK3CA、CALM、CAV1等的阻滞剂或者激活剂,以及采用基因转染或者基因敲除等方法,进一步明确分子机制。

RNA干扰靶向抑制PIK3CB基因表达对结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨RNA干扰靶向抑制PIK3CB基因(编码PI3Kp110β蛋白)的表达对结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响。方法:设计3条针对PIK3CB基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)片段及1条阴性对照siRNA,分别瞬时转染结肠癌HCT116细胞。用Real time PCR及Western印迹法筛选出1条抑制效率最高的PIK3CB-siRNA序列,然后进行CCK-8细胞增殖实验,并采用JC-1染色法检测线粒体膜电位(Δψm)的变化。结果:经转染PIK3CB-siRNA-179序列的HCT116细胞中PI3Kp110βmRNA及蛋白表达降低最为明显,抑制率达80%,选择该条siRNA作为有效干扰组进行后续实验。CCK-8细胞增殖实验显示,瞬时转染24、48及72h后,PIK3CB-siRNA-179组细胞的相对存活率较阴性对照组细胞明显降低,其中以24h及48h降低最为明显(P<0.05)。JC-1染色结果显示,瞬时转染48h后PIK3CB-siRNA-179组细胞的线粒体膜电位较阴性对照组细胞明显降低。结论:抑制PI3Kp110β蛋白表达可降低结肠癌HCT116细胞的增殖速度,诱导细胞的凋亡,推测PIK3CB基因可能成为结肠癌基因治疗的一个新靶点。

P21ras、PIK3CA在肝癌与肝硬化中的表达及意义

目的 研究P21ras和PIK3CA蛋白在乙肝病毒相关性肝细胞肝癌、乙型病毒性肝炎后肝硬化及正常肝组织标本中的表达差异、相关性及意义.方法 收集乙肝病毒相关性肝细胞肝癌组织标本34例、乙型病毒性肝炎后肝硬化37例、正常肝组织标本30例,用免疫组化检测P21ras和PIK3CA蛋白表达水平,并进行比较和相关性分析.结果 P21 ras在乙肝病毒相关性肝细胞肝癌、乙型病毒性肝炎后肝硬化及正常肝组织标本中的平均灰度值分别为138.86±2.9、145.34±2.06和152.07±1.17,与肝病的不同进展情况存在显著性差异（P＜0.01）.PIK3CA在乙肝病毒相关性肝细胞肝癌、乙型病毒性肝炎后肝硬化及正常肝组织标本中的平均灰度值分别为138.20±3.14、149.49±0.78和154.71±1.29,与肝病的不同进展情况存在显著性差异（P＜0.01）.在乙肝病毒相关性肝细胞肝癌组和乙型病毒性肝炎后肝硬化组中,P21ras和PIK3CA蛋白表达均有相关性,在乙肝病毒相关性肝细胞肝癌组中r=0.64,P＜0.05;乙型病毒性肝炎后肝硬化组中r=0.42,P＜0.05.结论 P21ras和PIK3CA蛋白在乙肝病毒相关性肝细胞肝癌、乙型病毒性肝炎后肝硬化组织的过表达提示二者参与了肝硬化、肝癌的发病过程.在乙肝病毒相关性肝细胞肝癌和乙型病毒性肝炎后肝硬化中可能存在着P21ras／PI3K的信号转导途径,从而促进肝细胞再生,发生肝硬化及癌变.