黄连解毒汤对老年痴呆大鼠SOD活性,MDA含量,Ⅰ-κB和NF-κB蛋白表达的影响

目的:研究黄连解毒汤(HJD)对老年性痴呆(AD)模型大鼠脑组织的保护作用。方法:Aβ1-42ICV(侧脑室)显微注射建立AD大鼠模型,50只健康SD大鼠随机分为5组,即对照组,Aβ1-42模型组(AD大鼠组),Aβ1-42+HJD低剂量组(5g.kg-1),Aβ1-42+HJD中剂量组(10g.kg-1),Aβ1-42+HJD高剂量组(15g.kg-1)。在Aβ1-42造模7天后,各组均灌胃给药(对照组和AD大鼠组给以生理盐水),1次/d,连续给药21天。采用生物化学方法检测HJD对AD模型大鼠海马组织SOD活性,MDA含量的影响,蛋白印迹检测方法检测I-κB和NF-κB蛋白的表达。结果:与对照组相比,Aβ1-42模型组大鼠海马组织SOD活性降低,MDA含量升高(P<0.01,P<0.05),Ⅰ-κB-NF-κB信号通路活化。HJD作用后,AD模型大鼠海马组织SOD活性升高,MDA含量降低(P<0.05),并抑制Ⅰ-κB-NF-κB信号通路活化。结论:HJD通过提高SOD活性,降低MDA含量,抑制I-κB-NF-κB信号通路活化,改善AD模型大鼠的脑组织生化学改变和炎症改变,对AD有一定的改善和保护作用。

Ⅰ型胶原及NF-κB与动脉粥样硬化关系的实验研究

目的探讨动脉粥样硬化(AS)时血脂成分的改变以及Ⅰ型胶原mRNA与其蛋白、NF-κBmRNA与其蛋白在兔AS发生中的作用及其机制,为临床预防及治疗AS斑块提供新的理论依据。方法采用HE、免疫组化及原位杂交法染色,光镜观察AS病变,并应用CMIAS真彩色医学图像分析系统分析;检测40只食饵性AS新西兰兔血脂成分的改变及血管壁的病理变化、Ⅰ型胶原mRNA与其蛋白、NF-κBmRNA与其蛋白的表达情况。结果实验兔15周时血胆固醇(TC)升高约43倍,血低密度脂蛋白(LDL)升高约37倍。主动脉内壁可见脂质条纹形成。主动脉AS病变Ⅰ型胶原、NF-κB蛋白及Ⅰ型胶原mRNA、NF-κBmRNA表达定量(A值)分别为0.27±0.02、0.19±0.01及0.30±0.03、0.35±0.03,显著高于对照组(0.08±0.01、0.09±0.01及0.11±0.01、0.10±0.09,P<0.05)。结论AS时Ⅰ型胶原增多刺激NF-κB的活性,可能参与了血管AS的形成。

NF-κB的诱捕寡核苷酸抑制肺纤维细胞Ⅰ型胶原mRNA表达的实验研究

目的研究NF-κB的诱捕寡核苷酸(decoy-oligonucleotides,Decoy-ODNs)对小鼠肺原代成纤维细胞Ⅰ型胶原形成的影响,为防治肺纤维化的发生提供理论基础。方法设计合成针对NF-κB的Decoy-ODNs,用阳离子脂质体转染小鼠肺原代成纤维细胞,用凝胶迁移变动分析(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)研究Decoy-ODNs对NF-κB的抑制作用,RT-PCR观察对成纤维细胞Ⅰ型胶原合成的影响。结果NF-κB的Decoy-ODNs可竞争抑制核转录因子NF-κB的活性,Decoy-ODNs作用18h后,成纤维细胞Ⅰ型胶原mRNA的表达明显降低。结论Decoy-ODNs可以通过拮抗核转录因子NF-κB的活性而抑制Ⅰ型胶原纤维的表达,为防治肺纤维化的发生提供理论基础。

RNA聚合酶Ⅰ抑制剂通过NF-κb调控鼻咽癌细胞系CNE-1的增殖、侵袭与凋亡

目的探讨RNA聚合酶Ⅰ抑制剂CX-5461对人鼻咽癌细胞CNE-1增殖、侵袭与凋亡的作用机制。方法免疫组织化学染色检测鼻咽癌与癌旁组织NF-κb的表达。Western blot检测相关效应蛋白在蛋白质水平的表达。CCK-8法检测不同浓度药物处理后CNE-1细胞系的增殖情况。Transwell法比较药物处理后CNE-1细胞系的侵袭能力变化。流式细胞术检测不同浓度药物处理后鼻咽癌细胞系CNE-1细胞周期和凋亡的变化。结果鼻咽癌组织中磷酸化NF-κb表达较癌旁组织明显增高(P<0.01)。NF-κb总蛋白在蛋白水平无明显变化,但磷酸化水平在药物处理后明显降低(P<0.01)。Bax较对照组明显增高(P<0.01),Bcl-2较对照组明显降低(P<0.01)。药物处理后,发现CNE-1细胞系的增殖、侵袭能力较对照组明显降低且差异具有统计学意义(均P<0.01);细胞凋亡较对照组明显增多(P<0.01),药物处理组较对照组细胞周期明显阻滞在G_2期(P<0.01)。结论 RNA聚合酶Ⅰ抑制剂CX-5461能够通过调控NF-κb磷酸化促进鼻咽癌CNE-1细胞系凋亡及周期阻滞,抑制其增殖与侵袭能力。

中药阻断NF-κB信号通路抑制Ⅰ型单纯疱疹病毒感染的研究进展

核转录因子-κB(NF-κB)是诱导抗病毒基因表达的重要转录因子,通过调控多种靶基因的表达在氧化应激、细胞凋亡、炎症等生理病理过程中起到重要作用。Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)是一种广泛传播的病毒,可在世界范围内引起多种疾病。耐药株的出现增加了研发新型抗病毒药物的紧迫性,而药用植物及其提取物作为抗病毒药物越来越受到人们的关注。本文主要综述了HSV-1潜伏感染及复发的机制、HSV-1感染引发NF-κB激活机制及不同中药阻断NF-κB信号通路抑制HSV-1感染机制,以期为抗HSV-1的新药研发及控制病毒所致疾病提供参考依据。

高张溶液复苏大鼠创伤失血性休克对肺组织I-κBα水平的影响

目的探讨高张溶液复苏大鼠THS对肺组织I-κBα水平及该作用对减轻急性肺损伤的意义。方法实验大鼠分为假创伤失血性休克(Sham)组、大容量等张乳酸钠林格氏液+6%羟乙基淀粉液(RLH)复苏组和小容量高张(7·5%氯化钠)液+6%羟乙基淀粉溶液(HTH)复苏组。采用Westernblot技术检测肺组织I-κBα蛋白含量;以RT-PCR检测ICAM-1mRNA表达水平;以分光光度法测定肺组织MPO活性;光镜下评估肺炎症损伤程度;以干/湿重比代表肺组织水含量。结果与Sham组比较,肺组织I-κBα含量RLH组明显降低(P<0·01),HTH组轻微降低且明显高于RLH组(P<0·01);而ICAM-1mRNA表达水平RLH组明显增高,HTH组仅轻度增高,低于RLH组(P<0·05);RLH组MPO活性和炎症损伤评分也均明显高于HTH和Sham两组(P<0·01),HTH组与Sham组比较差异无统计学意义(P>0·05);肺水含量在RLH组也有所增高。结论HTH可明显抑制大鼠THS复苏后肺组织I-κBα的降低,此作用可能与其抑制THS后ICAM-1表达增高和中性粒细胞在肺部大量聚集、从而减轻急性肺损伤有关。

甲基强的松龙对香烟烟雾提取物诱导A549细胞I-κBα的影响

目的：观察香烟烟雾提取（CSE）诱导人类怖泡Ⅱ型上皮细胞A549后Ⅰ-κBα的变化及甲基强的松龙（Mp）对其的影响。方法：体外培养A549细胞系，根据条件不同将其分为3组：（1）对照组：无血清DMEM处理。（2）CSE组：10％浓度CSE处理。（3）CSE＋Mp组：CSE刺激后加入0．015％甲基强的松龙处理。于不同时间段收集各组细胞裂解物后，应用免疫印迹法（Western blot）、酶联免疫法（ELISA）观察Ⅰ-κBα的变化。结果：对照组无变化，CSE组Ⅰ-κBα从处理后15min开始后减少，30min后消失，CSE＋Mp组Ⅰ-κBα在15～30min内始终有本底表达，3组间Ⅰ-κBα蛋白的表达水平差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：甲基强的松龙能使CSE刺激后A549细胞Ⅰ-κBα蛋白表达增加。

哮喘大鼠IKK/NF-kB信号通道及银杏叶提取物的调控作用

目的探讨IkB激酶mRNA(IKKβmRNA)、核转录因子(NF-kB)、IL-5与气道炎症的关系及银杏叶提取物(Egb)对支气管哮喘(简称哮喘)炎症影响的机制。方法36只SD雄性大鼠随机分为正常组(C组)、哮喘组(A组)、Egb治疗组(E组)。复制哮喘大鼠模型,光镜观察病理形态学改变；分类计数法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中的细胞计数；分别以原位杂交法和免疫组化检测肺组织IKKβmRNA和NF-kB p65蛋白活性；ELISA法检测血清及BALF中IL-5的浓度。结果A组IKKβmRNA及NF- kB p65表达量均显著高于C组(均为P＜0.01)；E组IKKβmRNA和NF-kB p65表达均显著低于A组(均为P＜0.01)；A组血清及BALF中的IL-5的浓度均显著高于C组；E组血清及BALF中的IL-5的浓度均显著低于A组(均为P＜0.01)；A组BLAF中的嗜酸细胞(EOS)显著高于C组(P＜0.01)；E组BLAF中的EOS显著低于A组(P＜0.01)。结论哮喘组肺组织IKKβmRNA,NF-kB p65表达显著增强,Egb能有效抑制哮喘大鼠肺组织IKKβmRNA表达及NF-kB p65的活性,提示Egb能抑制IKK/NF-kB信号通道的活性,从而减轻气道炎症。

重楼皂苷Ⅰ对柯萨奇病毒B3诱导的病毒性心肌炎小鼠心肌的保护作用及其机制

目的:探讨重楼皂苷Ⅰ(PPI)对柯萨奇病毒B3(CVB3)诱导的病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌的保护作用及其可能机制。方法:将75只BALB/c小鼠随机分成正常对照组(control组)、VMC模型组(VMC组)、阳性药物利巴韦林(RBV,0.02 g·kg^(−1)·d^(−1))组、低剂量(75 mg·kg^(−1)·d^(−1))PPI(L-PPI)组和高剂量(300 mg·kg^(−1)·d^(−1))PPI(H-PPI)组,每组15只。通过腹腔注射CVB3建立VMC小鼠模型,造模2 h后腹腔注射给药,每天1次,连续1周。HE染色观察小鼠心肌组织损伤情况;ELISA法检测血清中心肌损伤标志物心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和肌红蛋白(Mb)水平,以及心肌组织中炎症因子白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和IL-1β含量;RT-qPCR检测心肌组织中CVB3 mRNA表达量;Western blot检测心肌组织中凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、Bax和Bcl-2,以及NF-κB信号通路相关蛋白水平。结果:与control组比较,VMC小鼠心肌组织损伤严重,血清中cTnI、CK-MB和Mb含量,心肌组织中CVB3 mRNA表达量,IL-6、TNF-α和IL-1β含量,以及cleaved-caspase-3、Bax、p-IκBα(Ser32)和p-NF-κB(Ser536)蛋白水平均显著上升(P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.01);与VMC组比较,H-PPI和RBV组心肌组织损伤程度减轻,血清中cTnI、CK-MB和Mb含量,心肌组织中CVB3 mRNA表达量,IL-6、TNF-α和IL-1β含量,以及cleaved caspase-3、Bax、p-IκBα(Ser32)和p-NF-κB(Ser536)蛋白表达水平均显著下降(P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平显著上升(P<0.01),而L-PPI组相关指标均无显著变化(P>0.05)。结论:PPI可能通过抑制NF-κB信号通路激活对VMC小鼠心肌组织起到保护作用。

IL-17单克隆抗体对肺纤维化大鼠的保护作用及部分机制研究

目的探讨白介素(IL)-17单克隆抗体(m Ab)对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的保护作用及相关机制。方法将♂SD大鼠75只随机分为正常对照组、假手术组、模型组、非特异性Ig G组、IL-17 m Ab组,各组15只,后3组大鼠予以博莱霉素A5气管内注入构建肺纤维化模型,而假手术组给予等量生理盐水气管内注入。后2组于d 7、14、21分别给予非特异性IgG、IL-17 mAb尾静脉注射,其余3组给予等量生理盐水尾静脉注射。所有大鼠d 28处死,留取肺组织,行HE和Masson染色,通过酶联免疫吸附法(ELISA)测定肺组织IL-17、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,Western blot分析肺组织胞核核因子-κB(NF-κB)p65以及细胞Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)蛋白表达情况,荧光实时定量PCR检测肺组织ColⅠ、ColⅢmRNA表达水平,分离血清,采用ELISA检测血清Ⅰ型前胶原羧基端前肽(PICP)、Ⅲ型前胶原氨基端前肽(PIIINP)浓度。结果 IL-17m Ab组肺泡炎症和肺纤维化程度明显轻于模型组及非特异性Ig G组(P<0.01)。模型组和非特异性Ig G组肺组织IL-17、IL-6、TNF-α含量、胞核NF-κB p65蛋白表达、ColⅠ、ColⅢmRNA和蛋白表达以及血清PICP、PIIINP浓度较正常对照组及假手术组明显升高(P<0.01)。经IL-17 m Ab处理后,上述指标相比模型组和非特异性IgG组明显降低(P<0.01)。但非特异性Ig G组与模型组以及假手术组与正常对照组上述指标比较无差异(P>0.05)。结论 IL-17 mAb通过下调NF-κB表达,抑制肺组织炎症反应及减少胶原蛋白合成,对肺纤维化大鼠产生保护作用。

鞣花酸对马兜铃酸Ⅰ诱导小鼠急性肾损伤的保护作用

目的:研究鞣花酸(ellagic acid,EA)对马兜铃酸I(aristolochic acids I,AAI)诱导的急性肾损伤的保护作用。方法:40只昆明小鼠(雌雄各半)随机分为健康组、模型组(10 mg/kg m_(b) AAI)、EA低剂量组(10 mg/kg m_(b) AAI+10 mg/kg m_(b) EA)和EA高剂量组(10 mg/kg m_(b) AAI+30 mg/kg m_(b) EA),EA不同剂量组小鼠每天灌胃不同剂量的EA,从第7天开始,腹腔注射AAI建立急性肾损伤模型,然后灌胃给予不同剂量的EA,12 d后处死小鼠;检测肾脏指数、尿蛋白、尿素氮和肌酐水平等肾功能指标;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)和Masson染色检测肾脏组织病理学变化;检测肾脏内氧化应激指标(包括还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)、总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平),检测小鼠体内炎症因子水平;通过免疫印迹和定量聚合酶链式反应检测肾脏中核因子(nuclear factor,NF)-κB和NOD样受体蛋白3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)通路相关因子的表达。结果:与模型组相比,EA能显著改善肾损伤模型小鼠的各项肾功能指标以及肾脏组织病理学变化,恢复肾组织中氧化应激指标到接近正常水平;此外,与模型组相比,在EA的作用下小鼠血清中炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素(interleukin,IL)-1β水平下降,肾脏中TNF-α和IL-1β编码基因的转录水平亦有明显下降;进一步研究发现,与模型组相比,EA能显著下调小鼠肾脏内NF-κB抑制蛋白(inhibitor of NF-κB,IκB)α和NF-κB p65蛋白的磷酸化水平(P<0.05,P<0.01),抑制NLRP3炎性小体各组分(包括NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein,ASC)、半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-1和IL-1β的转录和翻译。结论:EA对AAI诱导的小鼠急性肾损伤具有保护作用,其机制可能与通过干预NF-κB/NLRP3通路阻断AAI所致的肾脏内炎症反应紧密相关。

Ⅰ型胶原及核因子-κB与动脉粥样斑块的关系

目的:探讨人颈动脉粥样硬化(AS)时血脂成分,Ⅰ型胶原mRNA及其蛋白与NF-κBmRNA及其蛋白在人颈AS病变中的表达及临床意义。方法:对18例行颈动脉造影确诊有颈AS病变的患者,测定血脂成分,且行颈动脉内膜剥脱术,取出粥样斑块送病检;另取6例意外死亡(排除心血管疾病)的颈动脉标本作为对照;石蜡包埋制成切片。采用免疫组化及原位杂交法染色,检测Ⅰ型胶原mRNA及其蛋白与NF-κBmRNA及其蛋白在AS斑块中表达,并通过CMIAS真彩色医学图像分析系统测出表达的定量A值,进行2组间比较。结果:人颈AS病变中Ⅰ型胶原、NF-κB蛋白及Ⅰ型胶原mRNA、NF-κBmRNA表达定量A值,分别为:0.27±0.08、0.34±0.10及0.49±0.12、0.58±0.15,显著高于对照组(0.10±0.01、0.10±0.02及0.17±0.02、0.18±0.02)的定量表达(P<0·05)。结论:Ⅰ型胶原蛋白、NF-κB蛋白及Ⅰ型胶原mRNA、NF-κBmRNA表达与AS发生、发展有着密切关系,该因素的表达增强是致AS的机制之一。

美托洛尔对脓毒症大鼠血清肌钙蛋白Ⅰ、肿瘤坏死因子-α及核因子-κB的影响

目的 观察美托洛尔对脓毒症大鼠血清肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及核凶子-κB（NF-κB）的影响.方法 选取雄性SD大鼠40只,根据数字表随机分组法分为美托洛尔组（n=10）、模型组（n=10）、假手术组（n=10）、正常对照组（n=10）,除正常对照组不给予建立脓毒症模型处理外,其余3组均给予盲肠结扎穿孔术（CLP）建立脓毒症模型处理,假手术组开腹后不做任何处理,模型组制模后经尾静脉注射生理盐水,美托洛尔组于制模后2h经大鼠尾静脉以0.2 mg/（kg·h）速度给予冲击量0.05 mg的美托洛尔至CLP5 h.并分别于术后3、12、24h采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定4组大鼠血清cTnⅠ及TNF-α水平,采用免疫组织化学半定量法对NF-κB的变化情况进行观察,并取心肌组织制作病理切片观察各组大鼠心肌超微结构病理学的变化.结果 术后24 h,假手术组与正常对照组的cTnⅠ、TNF-α及NF-κB水平比较差异无统计学意义（P=0.058、0.124、0.063）;美托洛尔组的cTnⅠ、TNF-α及NF-κB水平分别为（0.43 ±0.18） ng/ml、（18.29±2.13） pg/ml、（43.28 ±2.49） μg/ml,模型组为（0.68 ±0.14） ng/ml、（20.32 ±2.16） pg/ml、（51.37±2.61） μg/ml,与假手术组的（0.12 ±0.04） ng/ml、（5.54±1.17） pg/ml、（12.43±1.53） μg/ml,正常对照组的（0.10 ±0.01） ng/ml、（5.21±1.12） pg/ml、（11.38±1.65） μg/ml比较明显升高,但美托洛尔组cTnⅠ、TNF-α及NF-κB水平较模型组降低（P =0.042、0.056、0.003）;且美托洛尔组中血清cTnⅠ与血清TNF-α呈正相关（r=0.895,P=0.000）,血清cTnⅠ与血清NF-κB呈正相关（r=0.921,P=0.000）;病理切片观察正常对照组与假手术组心肌超微结构未见明显异常,模型组心肌超微结构变化明显异常,而美托洛尔组心肌超微结构轻度变化.结论 美托洛尔作为一种β受体阻断药,对脓毒症大鼠具有减轻心肌损伤作用,其可能是由美托洛尔抑制大鼠血清中cTnⅠ、TNF-α及NF-κB的水平来实现的.

核因子-κB/I-κB传导通路在肝脏缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨核因子 (NF) κB/I κB传导通路在肝脏缺血再灌注损伤中的作用。方法采用阻断大鼠部分肝血供的缺血再灌注损伤模型 ,左半肝缺血 90min ,再灌注分 0、1、2、4h等时点。用凝胶滞留电泳方法测定NF κB的结合活性 ;应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)测定肝组织中肿瘤坏死因子 α(TNF α)、细胞间粘附因子 1(ICAM 1)mRNA的表达量。结果 肝脏缺血再灌注损伤时NF κB与其特异性调控序列的结合活性增高且具有时相性。再灌注 1～ 2hNF κB结合活性增高 ,4h后开始降低。肝组织中TNF α、ICAM 1mRNA表达在再灌注 2h后升高。讨论 肝脏缺血再灌注损伤时 ,NF κB激活并进入细胞核内 ,与一些炎症因子基因启动子区特异序列结合 ,上调TNF α、ICAM 1mRNA表达 ,从而引起肝脏缺血再灌注损伤。

类I-κB基因多态性与湖南汉族类风湿关节炎的相关性

类风湿关节炎（RA）是以慢性对称性多关节损害为主要表现的一种全身性自身免疫性疾病，其病因及发病机制尚不十分明确，但环境与遗传因素的交织作用共同促成RA的发生已成为医学界的共识。以往对RA遗传因素的研究主要集中在HLA、尤其是HLA-Ⅱ类分子。随着生物技术的飞速发展，新近发现许多候选基因与RA易感性有关，且独立于HLA-Ⅱ类分子而起作用。我们采用PCR-单链构象多态性（SSCP）技术结合DNA直接测序法，在国内首次检测了湖南汉族RA患者和对照人群中类Ⅰ-κB（IκBL）基因-62位点的多态性，并以RA患者的临床资料为依据，探讨基因型和临床表现型的关系。

IKKε通过E-cadherin调控人脑胶质瘤迁移和侵袭能力的实验研究

目的 探讨胶质瘤细胞中IKKε对E-cadherin表达的调控作用及其对胶质瘤细胞迁移和侵袭能力的影响.方法 构建IKKε过表达载体及IKKε shRNA慢病毒,以IKKε过表达质粒转染TP483胶质瘤细胞株,上调胶质瘤细胞中IKKε的表达水平;以IKKε shRNA慢病毒转染U251、U138胶质瘤细胞株,下调胶质瘤细胞中IKKε的表达水平.采用RT-PCR和Western blot检测细胞中IKKε及E-cadhenn的表达;应用免疫荧光法观察转染后IKKε及E-cadherin表达的变化.通过划痕实验和Transwell法分别检测细胞的迁移和侵袭能力.结果 与未转染组（TP483对照组）相比,转染IKKε的过表达质粒组（TP483处理组）的IKKε蛋白的表达水平升高（P =0.000）,而E-cadherin蛋白的表达水平降低（P=0.000）.转染IKKε shRNA的胶质瘤细胞（U251处理组和U138处理组）中IKKε蛋白的表达水平较未转染组（U251对照组和U138对照组）明显降低（均P＜0.05）,同时各处理组E-cadherin蛋白的表达水平均较其对照组升高（均P ＜0.05）.TP483处理组划痕修复率较对照组高[（56.39±0.93）％对比（46.43±1.68）％,P=0.035）].过表达质粒转染24h后,TP483处理组穿过滤膜的细胞数目较对照组增加[（55.8±6.0）个对比（24.6±2.3）个,P =0.000].U251、U138处理组划痕修复率较其各自的对照组降低[U251处理组：（50.40±1.09）％,U251对照组：（87.29±11.11）％,P=0.043;U138处理组：（48.20±1.34）％,U138对照组：（73.15±6.62）％,P=0.035）].IKKε shRNA转染24h后,U251、U138处理组穿过滤膜的细胞数目较对照组少（[U251处理组：（77.8±6.4）个,U251对照组：（124.0±13.4）个,P=0.000;U138处理组：（25.8±4.2）个,U138对照组：（54.8±7.1）个,P=0.000].结论 IKKε低表达可有效抑制胶质瘤细胞的侵袭和迁移,而IKKε高表达可增强其侵袭和迁移能力.其可能的机制是通过调节E-cadherin的表达水平从而影响胶质瘤细胞的侵袭和迁移能力.

苦参多路径抗冠状病毒的机制探究

新型冠状病毒肺炎(COVID-19),2019年12月始发于我国湖北省武汉市,随后迅速传播至国内大部分省份和地区,甚至波及国外多个国家。COVID-19具有流行性广、传染性强、发病急骤和病情危重等特点。面对这场疫情,全国各地迅速掀起抗击COVID-19的高峰,但短期内尚未研发出治疗COVID-19的特效药物。近期,多家医院在运用化学药的基础上联合中医药治疗,临床效果显著,证实了中药具有抗病毒的作用。大量的药理学和临床研究证实,苦参具有显著的抗病毒作用。从多个路径阐述苦参抗冠状病毒作用的可能相关机制,如通过I型干扰素、核转录因子-κB(NF-κB)信号通路、细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路、磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路、苦参碱类生物碱等途径,拟为COVID-19的临床治疗和相关药物研发提供参考。

RNF34调控天然免疫的初步研究

目的研究环指蛋白34(RING finger protein 34,RNF34)对天然免疫的调控。方法利用重组PCR方法构建pcDNA3-Flag-RNF34、pcDNA3-Flag-RNF34-ΔFYVE、pcDNA3-Flag-RNF34-ΔCID和pcDNA3-Flag-RNF34-ΔRING质粒,并在HEK293T细胞中瞬时表达;利用双荧光素酶报告基因技术检测RNF34及其3种突变体对仙台病毒(SeV)和N-RIG-Ⅰ激活NF-κB和IFN-β转录活性的影响。结果成功构建了Flag-RNF34及其3种结构域缺失突变体的真核表达质粒;发现在SeV刺激下,RNF34对NF-κB和IFN-β转录活性有明显抑制作用,RNF34-ΔFYVE、RNF34-ΔCID和RNF34-ΔRING与RNF34相比此种抑制作用减弱。同时发现对于N-RIG-Ⅰ激活的NF-κB和IFN-β活性,RNF34及其3种结构域缺失突变体也有相似的抑制作用。结论 RNF34通过负调控RIG-Ⅰ-MAVS信号通路调控天然免疫。