血小板膜糖蛋白Ⅰbα、血管性血友病因子表达水平与深静脉血栓进展的相关性

目的 观察血液血小板膜糖蛋白Ⅰbα（GPⅠbα）、血管性血友病因子（vWF）表达水平与静脉血栓性疾病（VTE）进展的相关性。方法 SD大鼠下腔静脉（IVC）血栓造模,检测造模后2、8、24、72 h各组大鼠血液中GPⅠbα、vWF的变化情况;收集30例DVT患者、30例实验对照患者、30例健康对照者血样,ELISA法检测GPⅠbα、vWF的表达水平并进行比较分析。结果 大鼠造模后,假手术组与模型组血GPⅠbα、vWF水平均呈增高趋势。在下腔静脉受损、血栓形成的起始阶段（2 h）,GPⅠbα、vWF水平未明显增高;而在2~24 h血栓形成高峰阶段,假手术组与模型组GPⅠbα、vWF水平升高,模型组GPⅠbα、vWF升高更显著;24~72 h稳定血栓形成,GPⅠbα水平降低,模型组和假手术组vWF水平仍表现高于2 h和对照组。DVT患者组GPⅠbα、vWF表达水平高于无DVT患者组及健康人对照组（P〈0.05）。结论 血GPⅠbα、vWF表达水平随DVT发生而升高,与VTE的进展相关。

钙调蛋白抑制剂诱导血小板GPⅠbα酶切的分子机制研究

目的探讨钙调蛋白抑制剂在GPⅠbα酶切中的作用和分子机制。方法取健康志愿者静脉血5份[(10 ml/(人)份],分离得到洗涤血小板3 ml/份,将洗涤血小板分别与Calpain抑制剂、活性氧(ROS)拮抗剂、NAD(P)H氧化酶抑制剂、线粒体ROS拮抗剂或溶剂对照(DMSO)等预孵育,再与钙调蛋白抑制剂W7孵育;流式细胞仪检测GPⅠbα表达、胞内Ca2+和ROS浓度;Western blot检测GPⅠbα酶切产物、Calpain底物talin的酶切。结果W7浓度依赖地引起血小板胞内Ca2+浓度升高,Ca2+平均荧光强度DMSO为52±9,而W7在25、50和100μmol/L时分别为121±17、225±23和308±25;W7浓度依赖地诱导血小板ROS产生,与DMSO比较,W7在25、50和100μmol/L时诱导的ROS相对浓度分别为150±11、209±20和297±18;ROS拮抗剂和Calpain抑制剂单独使用时都部分抑制W7诱导的GPⅠbα酶切,联合使用时则完全抑制W7诱导的GPⅠbα酶切。结论钙调蛋白抑制剂通过活化Calpain和产生ROS共同调控ADAM17介导的GPⅠbα酶切。

血小板膜糖蛋白GPⅠbα拮抗剂的研究进展

血小板膜表面糖蛋白GPⅠb-Ⅸ-Ⅴ复合物可通过与血管性血友病因子的结合,在止血和血栓的形成过程中发挥重要作用。GPⅠbα拮抗剂能够通过阻断GPⅠbα-vWF的相互作用,抑制血小板在受损血管内皮局部的聚集和黏附,从而抑制血栓形成。因此,GPⅠbα拮抗剂是目前研发新型抗血小板药物的方向之一。现就近年来GPⅠbα拮抗剂在心血管方面的研究进展做一综述。

血小板糖蛋白Ⅰbα上血管性血友病因子结合域的研究进展

血小板糖蛋白 (GP)Ⅰb Ⅸ Ⅴ复合物与其配体、血管性血友病因子 (vWf)的结合是止血和血栓形成的始动环节。GPⅠb Ⅸ Ⅴ复合物的vWf结合域存在于GPⅠb的α亚单位的N端。至少有三个区域对vWf的结合有着重要的影响 :富含亮氨酸重复序列、阴离子化的酪氨酸硫酸化序列和由Cys2 0 9和Cys2 4 8形成的二硫键环。了解vWf结合域对血小板代用品和抗血栓药的研究有着重要的意义 ,本文综述了此方面的研究进展。

佛波酯诱导血小板黏附受体GPⅠbα酶切的机制研究

目的佛波酯(PMA)能诱导血小板黏附受体GPⅠbα酶切,但分子机制未完全阐明。本研究主要探讨PMA诱导GPⅠbα酶切的分子机制。方法取健康志愿者静脉血,分离得到洗涤血小板。将洗涤血小板分别与蛋白激酶C(PKC)抑制剂、活性氧(ROS)抑制剂、NAD(P)H氧化酶抑制剂、线粒体ROS拮抗剂或二甲基亚矾(DMSO)对照等预孵育,再与PMA孵育。流式细胞仪检测ROS浓度;Western blot检测GPⅠbα酶切产物;用非同位素标记法检测PKC活性。结果 PKC抑制剂BIM和ROS抑制剂二硫苏糖醇(DTT)单独使用时,都能完全抑制PMA诱导的GPⅠbα酶切。PMA浓度依赖地诱导血小板ROS产生,PKC抑制剂和NAD(P)H氧化酶抑制剂都能抑制PMA诱导的ROS产生,而线粒体ROS拮抗剂没有抑制作用。BIM抑制PMA诱导的PKC活化,DTT则没有抑制作用。结论 PMA可能通过PMA-PKC-NAD(P)H氧化酶-ROS-ADAM17-GPⅠbα信号通路调节GPⅠbα酶切。

益气活血方及其拆方对出血性血小板病患者GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ复合物及GPⅠbα表达的影响

目的观察益气活血方及其拆方对出血性血小板病患者凝血酶受体血小板膜糖蛋白(GP)Ⅰb/Ⅸ/Ⅴ复合物及其组分GPⅠbα的表达的影响来探讨其配伍规律。方法68例出血性血小板病患者及32例健康人静脉血在静息状态及体外加益气活血方及其拆方中药孵育后,采用流式细胞术检测血小板GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ及GPⅠbα的表达。结果静息状态时,患者GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ及GPⅠbα的表达明显低于健康人;益气活血方及其部分拆方组能使患者凝血酶受体GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ及GPⅠbα恢复至正常水平;而单味中药组作用不明显;方中的主药黄芪与当归配伍为用,可促进血小板膜糖蛋白的表达。结论益气活血全方及其部分拆方组在受体蛋白水平上调节GPⅠb/Ⅸ/Ⅴ及GPⅠbα的表达,是其治疗出血性血小板病的疗效机制之一。

血小板膜糖蛋白Ⅰbα VNTR基因多态性与脑梗死的相关性研究

目的探讨血小板膜糖蛋白(GP)Ⅰb基因α链变数串联重复序列(VNTR)的等位基因和基因型在中国北方人群中的分布规律,并深入研究这种多态性与脑梗死的相关性。方法共收集105例脑梗死病人和100例对照者,用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)的方法确定其基因型。结果共发现CC、DD纯合子基因型和CD、BD、BC杂合子基因型,未发现AA基因型。脑梗死组和对照组的BC基因型频率分别为0.067和0.01,B等位基因频率分别为0.057和0.01,差异均有统计学意义(P<0.05)。脑梗死组的BC基因型频率和B等位基因频率显著高于对照组(P=0.036,OR=7.071,95%CI 0.85～58.55;P=0.023,OR=3.98,95%CI 1.106～14.32)。结论血小板膜糖蛋白GPⅠbα(VNTR)基因多态性可能是脑梗死的一个危险因素。

FIGO分期系统改变后Ⅰb3、Ⅱa2期宫颈癌不同治疗方式的预后分析

目的:探究基于旧分期系统的Ⅰb2期、Ⅱa2期宫颈癌治疗建议是否仍适用新分期系统Ⅰb3期、Ⅱa2期宫颈癌。方法:收集2013年1月至2017年12月在云南省肿瘤医院确诊为Ⅰb2、Ⅱa2期(2009版FIGO分期)宫颈癌患者,根据2018版分期系统筛选出Ⅰb3、Ⅱa2期患者。分别比较新旧分期系统手术组与放疗组5年总生存期(OS)、无病生存期(DFS),以及比较新旧分期系统中手术组与放疗组、新辅助化疗与未行新辅助化疗的OS、DFS。结果:依据旧分期系统手术组纳入患者253例,其中Ⅰb2期199例(78.7%),Ⅱa2期54例(21.3%);放疗组71例,其中Ⅰb2期38例,Ⅱa2期33例。依据新分期系统手术组纳入患者200例,其中Ⅰb3期160例,Ⅱa2期例40例;放疗组41例,其中Ⅰb3期19例,Ⅱa2期22例。基于旧分期系统整体手术组和放疗组的DFS分别为79.8%和77.5%(P=0.42),OS分别为82.6%和70.4%(P=0.0075)。基于新分期系统整体手术组和放疗组的DFS分别为84%和75.5%(P=0.17),OS分别为86.5%和70.7%(P=0.0068)。基于旧分期系统Ⅰb2期手术组和放疗组的DFS分别为83.4%和84.2%(P=0.84),OS分别为86.9%和81.6%(P=0.35);Ⅱa2期手术组和放疗组的DFS分别为66.7%和69.7%(P=0.8),OS分别为66.7%和55.7%(P=0.13)。基于新分期系统Ⅰb3期手术组和放疗组的DFS分别为88.1%和68.4%(P=0.028),OS分别为90.0%和73.3%(P=0.036);Ⅱa2期手术组和放疗组的DFS分别为67.5%和81.1%(P=0.39),OS分别为70.0%和68.2%(P=0.62)。基于旧分期系统:整体手术组中新辅助化疗和未新辅助化疗DFS(P=0.93)、OS(P=0.92)无显著差异;放疗组中新辅助化疗DFS(P=0.64)、OS(P=0.44)无显著差异。基于新分期系统:整体手术组中新辅助化疗和未新辅助化疗DFS(P=0.8)、OS(P=0.8)无显著差异;整体放疗组中新辅助化疗组显示较差DFS(P=0.0089)及OS(P=0.012)。结论:无论新分期系统或旧分期系统手术组OS均高于放疗组,而DFS无显著差异;基于新分期系统手术改善Ⅰb3期患者DFS、OS;无论新分期系统或旧分期系统新辅助化疗未能改善患者手术或放疗患者预后。

二肽基肽酶3(DPP3)通过下调主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关基因B(MICB)的表达抑制胃癌细胞的免疫逃逸

目的探究二肽基肽酶3(DPP3)通过调控主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关基因B(MICB)的表达对胃癌细胞免疫逃逸的影响。方法敲低MKN-45人胃癌细胞DPP3、过表达MGC-803人胃癌细胞DPP3,观察细胞增殖、迁移能力变化及对自然杀伤(NK)细胞杀伤的反应性;采用全转录组测序筛得MICB基因,在过表达DPP3细胞中敲低MICB验证细胞行为变化。在C57小鼠验证敲除DPP3细胞的体内成瘤能力及组织中CD56+细胞浸润情况。结果敲除DPP3促进胃癌细胞增殖、迁移,降低MICB表达,对NK细胞杀伤效应不敏感;小鼠成瘤能力升高且组织中CD56^(+)细胞浸润降低。过表达DPP3的胃癌细胞则呈现相反结果。敲减MICB后能逆转DPP3高表达引起的细胞表型变化。结论DPP3通过下调MICB表达抑制胃癌细胞的免疫逃逸功能。

GP1BA、PTGS1、LTC4S、ITGB3基因多态性检测指导阿司匹林使用

目的对陕西宝鸡地区阿司匹林药物相关基因的基因型分布进行回顾性分析,明确与阿司匹林药物相关基因的突变率。方法选取2022年1月至2023年5月在宝鸡市中医医院心内科接受阿司匹林治疗并进行相关基因检测的住院患者475例,采用飞行时间质谱仪对阿司匹林药物相关的4个基因[血小板膜糖蛋白Ⅰbα多肽(GP1BA)基因、前列腺素内过氧化物合酶1(PTGS1)基因、白三烯C4合酶(LTC4S)基因、糖蛋白Ⅲa(ITGB3)基因]进行检测,然后进行基因多态性分析。结果各基因分布频率符合Hardy-Weinberg平衡定律,GP1BA c.482C>T基因型分布频率CC>CT>TT,ITGB3 c.176T>C基因型分布频率TT>TC>CC,PTGS1 c.-842A>G基因型分布频率AA>AG>GG,LTC4S c.-444A>C基因分布频率AA>AC>CC;不同性别、年龄的各基因型分布比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论对阿司匹林药物治疗患者进行阿司匹林药物相关基因检测,可以为临床医生对患者制订个体化治疗方案提供辅助性的指导,具有重要的临床价值。

合并炎症性肠病的糖原累积病-Ⅰb型5例患儿SGLT2抑制剂治疗效果分析

目的分析5例合并炎症性肠病(IBD)的糖原累积病-Ⅰb型(GSD-Ⅰb)患儿接受钠-葡萄糖共转运体2(SGLT2)抑制剂的治疗效果。方法回顾性分析2021—2022年接受治疗并随访的5例合并IBD的GSD-Ⅰb型患儿,SGLT2抑制剂治疗前后的临床表现、实验室及辅助检查。结果5例患儿IBD发作中位年龄为5.0岁。5例均有口腔溃疡、腹痛、腹泻及肛周脓肿。SGLT2抑制剂治疗前,5例的中位儿童克罗恩病活动指数(PCDAI)为55.0。SGLT2抑制剂中位治疗12.0月后[末次随访中位剂量0.31 mg/(kg·d)],中位PCDAI(10.0)显著降低(P=0.043),5例均获得临床应答。治疗中,2例出现低血糖,4例出现会阴部或尿道口瘙痒。发现2种新SLC 37A4变异(c.2delT,c.1065delG)。c.446G>A(p.G 149E)为热点变异(70%)。结论SGLT2抑制剂可明显改善GSD-Ⅰb型患儿的IBD活动度,且安全性良好。

辅助化疗对ⅠB期非小细胞肺癌患者预后的影响

目的ⅠB期NSCLC患者术后是否需要行辅助化疗存在较大争议。本研究旨在探索辅助化疗对伴或不伴高危因素的ⅠB期NSCLC患者预后的影响。方法通过使用SEER*stat Version 8.4.0.1软件,我们从SEER Research Plus数据库中选择2010-2015年的NSCLC患者。根据本研究纳入排除标准,最终筛选出2018例接受手术的ⅠB期NSCLC,其中包括接受术后辅助化疗254例。采用Cox比例风险回归分析评估潜在预后风险因素。通过采用倾向评分匹配和Kaplan-Meier生存曲线评估辅助化疗对ⅠB期非小细胞肺癌患者肿瘤特异生存期(cancer-specific survival,CSS)的影响。进一步通过Kaplan-Meier生存曲线评估辅助化疗对伴或不伴高危因素的ⅠB期非小细胞肺癌患者CSS的影响。结果在接受手术的ⅠB期NSCLC患者中,未化疗组与化疗组组间的患者CSS(单因素分析:HR=0.934,95%CI:0.724~1.205,P=0.599;多因素分析:HR=0.935,95%CI:0.721~1.213,P=0.612)差异均无统计学意义。辅助化疗未明显延长伴或不伴仅单个高危因素(低分化肿瘤、脏层胸膜受累、亚肺叶切除和清扫不足10个淋巴结)以及伴2个及以上高危因素的ⅠB期NSCLC患者的CSS(P>0.05)。采用倾向性匹配法前后,未化疗组与化疗组组间接受手术的ⅠB期NSCLC患者的CSS差异无统计学意义(P>0.05)。结论辅助化疗未明显改善伴或不伴高危因素的ⅠB期NSCLC患者的肿瘤特异生存期。

LncRNA MEG8通过靶向miR-15a-5p调控MICA/B介导结直肠癌细胞免疫逃逸

目的:探究长链非编码RNA母系表达基因8(LncRNA MEG8)通过靶向miR-15a-5p调控MHCⅠ类相关蛋白A/B(MICA/B)介导的结直肠癌(CRC)细胞免疫逃逸机制。方法:RT-qPCR、Western blot检测CRC组织和细胞系MEG8、miR-15a-5p、MICA、MICB、NKG2D蛋白水平;双荧光素酶实验验证MEG8对miR-15a-5p的调控关系;采用脂质体转染法将NC、MEG8、miR-NC、miR-15a-5p分别或共转染至SW480、SW620细胞,记为NC组、MEG8组、MEG8+miR-NC组、MEG8+miR-15a-5p组;将NK细胞分别与SW480、SW620细胞共培养;ELISA检测共培养液中TNF-α、IFN-γ水平;CCK-8、EdU染色、Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力;RT-qPCR、Western blot检测细胞MEG8、miR-15a-5p、MICA、MICB、NKG2D蛋白水平。结果:与癌旁组织或正常结肠上皮细胞相比,CRC组织和细胞系中MEG8、MICA、MICB、NKG2D mRNA和蛋白水平降低,miR-15a-5p水平升高(P<0.05)。MEG8靶向调控miR-15a-5p。共培养体系中,与NC组相比,MEG8组细胞MICA、MICB、NKG2D蛋白水平、共培养上清液中TNF-α、IFN-γ水平明显升高,培养1 d、2 d、3 d后,OD值、EdU阳性率、迁移和侵袭细胞数明显降低(P<0.05);过表达miR-15a-5p能部分逆转过表达MEG8对细胞MICA、MICB、NKG2D、TNF-α、IFN-γ水平和增殖、侵袭转移能力的影响(P<0.05)。结论:MEG8通过靶向miR-15a-5p调控MICA、MICB表达,促进NK细胞活性,抑制CRC细胞免疫逃逸。

放化疗对手术切除的Ⅰb期非小细胞肺癌患者预后的影响

目的分析放化疗对手术切除的Ⅰb期非小细胞肺癌(NSCLC)患者预后的影响。方法基于SEER数据库收集2004年至2018年的9155例手术切除的Ⅰb期NSCLC患者临床病理特征和治疗情况,分析放化疗与临床病理特征、总生存期的关系。结果单独化疗是手术切除的Ⅰb期NSCLC患者预后良好的独立预测指标(HR=0.783,P<0.001),而单独放疗或放化联合治疗是预后不良的独立预测指标(HR=1.513,P<0.001;HR=1.838,P<0.001)。接受单独化疗患者的总生存明显高于未接受治疗者,而接受放疗或放化联合治疗患者具有更差的总生存。亚组分析结果一致表明,接受单独化疗患者具有更好的总生存。结论放疗、放化疗及化疗影响手术切除的Ⅰb期NSCLC患者的总生存,对于手术切除的Ⅰb期NSCLC患者建议进行常规的化疗。

老年PMR抗MPO抗体、GPⅠb及抗CarP抗体检测意义

目的 探讨老年风湿性多肌痛(polymyalgia rheumatica,PMR)血抗髓过氧化物酶(anti-myeloperoxidase,抗MPO)抗体、血小板糖蛋白Ⅰb(platelet glycoproteinⅠb,GPⅠb)及抗氨甲酰化蛋白(anti-carbamylated protein,抗CarP)抗体检测的临床意义。方法 选取2019年7月至2022年1月温州市人民医院风湿免疫科收治的65例老年PMR患者(年龄≥60岁)为观察组,65例非老年PMR患者(年龄<60岁)为对照组,两组均予以泼尼松15mg/d连续治疗4周,检测两组患者治疗前后PMR活动度评分(PMR activity score,PMR-AS)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)、抗MPO抗体、GPⅠb和抗CarP抗体的变化;各指标和PMR-AS间的相关性采用Pearson相关分析;绘制受试者操作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)分析各指标对疾病活动程度判断的准确性。结果 治疗后两组患者的PMR-AS、CRP、ESR、抗MPO抗体、GPⅠb和抗CarP抗体水平及病例异常率均较治疗前明显下降(P<0.05),且观察组患者下降更显著(P<0.05);老年PMR患者的CRP、ESR、抗MPO抗体、GPⅠb和抗CarP抗体水平与PMR-AS均呈正相关(r=0.580、0.808、0.755、0.739、0.811,P均<0.001);CRP、ESR、抗MPO抗体、GPⅠb和抗CarP抗体对疾病活动度准确性判断的ROC曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.753、0.811、0.830、0.856、0.887,诊断敏感度分别为62.50%、75.25%、65.50%、75.00%和79.50%,诊断特异性分别为75.25%、80.05%、82.55%、87.50%和90.05%。结论 血抗MPO抗体、GPⅠb和抗CarP抗体水平与老年PMR患者病情活动度呈正相关,泼尼松治疗后各指标水平值下降明显,有望成为老年PMR患者疾病活动情况和治疗效果的监测指标。

ⅠA~ⅠB期子宫内膜癌术后患者5年生存状况分析及其影响因素研究

目的 探讨ⅠA~ⅠB期子宫内膜癌术后患者5年生存状况分析及其影响因素。方法 回顾性分析2015年1月至2017年6月于本院进行子宫内膜癌术且完成随访的ⅠA~ⅠB期子宫内膜癌患者86例的临床资料,选择Kaplan-Meier法计算ⅠA~ⅠB期子宫内膜癌术后患者5年总生存率与无进展生存率。同时,依据5年无进展生存状况分为无进展存活组与病情进展与死亡组,采用χ^(2)检验对临床资料实施单因素分析,并将有统计学意义的单因素分析结果进行Cox模型多因素分析。结果 随访5年后,死亡8例,单纯远处转移2例、单纯局部复发3例、局部复发与远处转移同时出现4例,5年总生存率90.70%,5年无进展生存率80.23%;单因素分析显示,年龄>60岁、BMI≥28 kg/m^(2)、组织学G2与G3分级、低分化、肿瘤直径>2 cm、为ⅠA~ⅠB期子宫内膜癌术后5年无进展生存率的影响因素,差异有统计学意义(P<0.05);Cox模型多因素分析显示,年龄>60岁、低分化为ⅠA~ⅠB期子宫内膜癌术后5年无进展生存的危险因素。结论 本研究中,5年总生存率及无进展生存率分别为90.70%、80.23%,且Cox模型多因素分析显示,年龄、低分化为ⅠA~ⅠB期子宫内膜癌术后患者疾病进展或死亡的危险因素。

血小板膜糖蛋白Ⅰbα基因多态性与脑卒中关系的研究

目的探讨血小板膜糖蛋白(GP)Ⅰbα基因多态性与脑卒中的发生关系。方法收集300例经CT和(或)MRI检查证实的脑卒中病人,其中脑梗塞200例,脑溢血100例,并收集300例与脑卒中组的年龄、性别相匹配的无脑血管疾病人群作为对照组,采用聚合酶链反应限制性片段多态性(PCRRFLP)方法检测研究对象GPⅠbα基因145Thr/Met变异。结果脑卒中组血小板GPⅠbα基因145Thr/Met突变率显著高于对照组(17.33%比14%,P=0.003,OR=3.33,95%Cl为1.29～5.38)。脑梗塞组GPⅠbα145Thr/Met突变率是21.5%,其对照组为14%,两组比较差异有显著性(P<0.01,OR=7,95%Cl为3.43～10.57)。脑溢血组GPⅠbα145Thr/Met突变率与对照组比较差异无显著性(P=0.158)。结论GPⅠbα145Thr/Met变异与脑梗塞的发生相关,但与脑溢血关系不明显。

血小板糖蛋白GPⅠbα vWF结合域在酵母中的表达鉴定

目的 :实现重组糖蛋白GPⅠbαvWF结合域在巴氏毕赤酵母中的表达。方法 :PCR从重组质粒pcDNA3.1 GPⅠbα中扩增GPⅠbαvWF结合域基因 ,以pPIC9k为表达载体 ,构建包含该目的基因的酵母重组质粒 ,转染毕赤酵母GS115 ,以G4 18筛选抗性克隆 ,甲醇诱导表达 ,SDS PAGE与点印迹鉴定表达产物。结果 :获得编码正确的重组质粒pPIC9k GP30 2 ,电转化GS115 ,以G4 18筛选到阳性克隆 ,诱导表达培养上清进行点印迹 ,结果表明表达蛋白能够与抗GPⅠbα单克隆抗体结合。结论 :获得了表达重组蛋白质GPⅠbαvWF结合域的巴氏毕赤酵母菌株以及重组蛋白质GP30

蛋白激酶A抑制剂对血小板膜糖蛋白Ⅰbα表达及血小板功能的影响

目的探讨蛋白激酶A（proteinkinaseA，PKA）对血小板膜糖蛋白（Glycoprotein，GP）Ⅰbα表达的调控作用。方法用健康人洗涤血小板与PKA抑制剂H89温育。用Westernblot检测血小板悬液中GPⅠbα的酶切片段糖萼蛋白（glycocalicin，GC），并用流式细胞术检测GPⅠbα的膜表达量。用Western blot检测血小板骨架蛋白的酶切程度来确定钙依赖蛋白酶（calpain）活性，并用流式细胞术检测血小板表面calpain的表达。用血小板聚集仪检测PKA抑制剂H89对瑞斯托霉素诱导的血小板聚集功能的影响。结果洗涤血小板经H89处理后，血小板表面GPIbd被酶切并释放于血小板悬液中，使血小板表面GPⅠbα的表达水平显著降低（P〈0．05）。多种calpain抑制剂与血小板预温育均可减少GPⅠbα的酶切程度，表明PKA抑制剂所致的酶切是calpain依赖性的。肌动蛋白结合蛋白（actin—binding protein，ABP）和踝蛋白（talin）的酶切表明calpain可被PKA抑制剂激活，流式细胞术结果表明calpain在血小板表面有所表达。血小板经PKA抑制剂处理后，瑞斯托霉素诱导的聚集功能受到抑制。结论抑制血小板PKA活性，可导致calpain依赖性的GPⅠbα酶切，使GPⅠbα膜表达量减低，并导致GPIbd依赖的血小板聚集功能减低。