Ⅱ型前胶原羧基末端前肽对骨性关节炎早期诊断价值的实验研究

目的通过建立大鼠骨性关节炎（OA）模型,研究大鼠血清和关节液中Ⅱ型前胶原羧基末端前肽（PⅡCP）水平变化,探讨体液PⅡCP对早期OA的诊断价值。方法将Wistar大鼠随机分成OA模型组和假手术组,用改良Hulth法诱导大鼠膝关节OA模型。分别于造模后1-5周,每周每组抽取6只大鼠取关节液、血清及关节标本,用ELISA检测体液PⅡCP水平,关节软骨行大体观察评分和组织病理学评分。所得数据用方差分析比较各时间点两组间的差异性,比较PⅡCP水平和软骨评分随时间的变化规律,用Pearson相关系数和线性回归分析来检验体液PⅡCP水平的相关性。结果 OA模型组在术后第1周软骨组织学表现接近假手术组,从第2周开始逐渐出现明显的OA病理学改变,假手术组软骨组织学无明显改变。OA模型组体液PⅡCP水平从术后第1周开始较假手术组明显增高,并随时间推移差异性逐渐增大;假手术组体液PⅡCP始终维持在较低水平;血清与关节液PⅡCP水平具有良好相关性。结论大鼠OA模型中,血清和关节液PⅡCP水平在软骨出现明显病理变化之前就已经升高,PⅡCP水平与OA病理变化相符合,关节液和血清PⅡCP水平可作为OA早期诊断的参考指标。

扩张型心肌病双心室同步化起搏前后血清前胶原端肽的变化及临床意义

目的 探讨扩张型心肌病患者双心室同步化起搏（CRT）前后血清I型前胶原端肽（PⅠCP）和Ⅲ型前胶原端肽（PⅢNP）的变化以及CRT植入与前胶原端肽的相关性.方法 将行CRT植入的40例扩张型心肌病患者,根据随访半年的左室射血分数（LVEF）结果分为CRT应答组（20例）和CRT无应答组（20例）.分别检测比较两组患者术前及术后半年LVEF、左室舒张末期内径（LVEDd）及PⅠCP、PⅢNP的浓度.结果 与术前比较,CRT应答组患者术后半年LVEF明显升高（P＜0.05）,LVEDd及PⅠCP、PⅢNP均明显下降（均P＜0.05）;而CRT无应答组手术前后各观察指标均未发生明显变化（P ＞0.05）.结论 CRT植入能明显降低应答者PⅠCP、PⅢNP浓度,可能可以改善扩张型心肌病患者心肌纤维化程度,是此类患者药物治疗外改善预后的强有力治疗手段之一.

TGFβ1和IFN—α2b对Ito细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达影响的研究

用胆总管结扎的方法制备狗肝纤维化模型，12周后取肝分离Ito细胞，并进行鉴定和培养。经用TGFβ1和IFN—α2b孵育后用异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法分离细胞总RNA。对含有Ⅰ、Ⅱ型前胶原cDNA片段的质粒分别进行扩增和提纯，酶切后用自由引物延伸法进行地高辛标记，以制备Ⅰ、Ⅱ型前胶原探针。用此探针与Ito细胞总RNA进行斑点杂交，杂交斑点行灰度数字转换和半定量分析。结果显示，TGFβ1能够促进Ito细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达，而IFN—α2b则能明显抑制Ito细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达。据此认为TGFβ1具有致纤维化作用，而IFN-α2b具有抗纤维化作用。

“短刺法”对兔膝骨关节炎软骨中Ⅱ型胶原及其标记物表达的影响及影像学观察

目的:观察"短刺法"对兔膝骨关节炎(osteoarthritis of the knee,KOA)软骨中Ⅱ型胶原及分子标记物Ⅱ型前胶原羧基端前肽(pro-collagen typeⅡC-terminal propeptide,PⅡCP)、Ⅱ型胶原羧基端端肽(C-telopeptide of typeⅡcollagen,CTX-Ⅱ)表达的影响。方法:40只新西兰兔取10只作为正常组,剩余30只复制KOA模型,X线检测评估造模结果。造模成功的新西兰兔随机分为模型组、短刺组和普通刺法组,每组10只。短刺组和普通刺法组均取"内膝眼""犊鼻""阴陵泉""足三里""梁丘"穴,短刺组采用贴骨进针,针刺深度以抵骨为准,普通刺法组常规针刺,除"梁丘"外均连接电针仪,每次20min,每日1次,5次为一疗程,疗程间休息2d,连续治疗4个疗程。正常组与模型组相同固定。治疗结束后采用磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)进行膝关节影像学观察;透射电镜观察膝关节软骨细胞组织结构;HE染色观察膝关节病理学改变;TUNEL法检测膝关节软骨细胞凋亡情况;免疫印迹法(Western-blot)和逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测Ⅱ型胶原蛋白和mRNA表达;酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测PⅡCP、CTX-Ⅱ表达。结果:治疗结束后,与模型组相比,短刺组与普通刺法组关节腔积液减少,无软骨下骨水肿;膝关节软骨细胞形态规则,凋亡减少;Ⅱ型胶原蛋白和mRNA表达显著升高(均P<0.05);PⅡCP水平上升(均P<0.05),而CTX-Ⅱ水平下降(均P<0.05)。短刺组Ⅱ型胶原蛋白及mRNA表达、PⅡCP、CTX-Ⅱ水平与普通刺法组比较差异均有统计学意义(均P<0.05);短刺组与正常组比较差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:"短刺法"能显著改善膝骨关节炎关节软骨的病理状态,减少软骨细胞凋亡,可能通过调节PⅡCP、CTX-Ⅱ表达来促进Ⅱ型胶原的合成,且效果优于普通针刺。

骨性关节炎生物学标记物Ⅱ型胶原羧基前肽的研究进展

目的综述骨性关节炎(osteoarthritis,OA)生物学标记物Ⅱ型胶原羧基前肽(Cterminal propeptide of collagen typeⅡ,CTX-Ⅱ)的研究进展。方法广泛查阅近年关于CTX-Ⅱ的文献,并对其进行分析。结果 CTX-Ⅱ是目前用于检测OA的生物学标记物之一,其研究最为广泛。CTX-Ⅱ在OA早期诊断、预测病情进展与评价治疗效果方面发挥着重要作用。结论单一检测CTX-Ⅱ不能准确地早期诊断并预测OA病情进展,需要结合其他标记物或检查方法。

血清COMP、COL10A1、PⅡANP在骨关节炎诊断及病情评估中的意义

目的探讨血清软骨寡聚基质蛋白(COMP)、X型胶原α1链(COL10A1)、ⅡA型前胶原氨基端肽(PⅡANP)在骨关节炎诊断及病情评估中的意义。方法选取2017年3月~2018年8月期间本院收治的85例膝骨关节炎患者为研究对象,设为OA组。选取同期健康受试者85例作为对照组。统计并比较两组受试者血清中COMP、COL10A1、PⅡANP水平。比较不同病情分级、不同VAS评分的OA组患者血清中COMP、COL10A1、PⅡANP水平。对血清COMP、COL10A1、PⅡANP水平与Pettersson评分进行直线相关性分析。结果OA组血清中COMP、COL10A1水平均明显高于对照组,PⅡANP水平均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。不同病情分级、疼痛程度的骨关节炎患者血清中的COMP、COL10A1、PⅡANP水平存在明显统计学差异(P<0.05)。病情分级越高、疼痛越严重,血清中的COMP、COL10A1水平越高,PⅡANP水平越低,差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析结果显示,血清COMP、COL10A1水平与Pettersson评分呈显著正相关(P<0.05),血清PⅡANP水平与Pettersson评分呈显著负相关(P<0.05)。结论血清COMP、COL10A1、PⅡANP可反映骨关节炎患者的骨与软骨损伤情况。

“肝纤四项”检测在肝纤维化诊断中的价值

肝纤维化是是一种疾病状态,是各种慢性肝脏疾病发展成为肝硬化的前期过程。肝纤维化不是一个独立的疾病,而是许多慢性肝病的共同病理过程,几乎任何能造成慢性肝损害的病因都可导致肝纤维化。慢性乙、丙型肝炎、脂肪性肝炎、免疫性肝病、

绝经后女性骨转换生化标志物水平与骨密度的相关性分析

目的探讨绝经后女性骨转换生化标志物水平与骨密度的相关性。方法选择2018年5月至2019年5月该院接诊的104例绝经后女性,其中53例骨质疏松症女性设为观察组,51例无骨质疏松症女性作为对照组,分析血清组织蛋白酶K(CatheK)、Ⅱ型前胶原氨基端前肽(PINP)、β胶原降解产物(β-crosslaps)、骨钙素及抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)与股骨颈、腰椎骨密度之间的相关性。结果观察组患者血清CatheK、PINP、β-crosslaps、骨钙素及TRAP水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者股骨颈、腰椎骨密度以及腰椎和髋部的总T值(简称T值)明显小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析结果提示,股骨颈骨密度、腰椎骨密度、T值与CatheK、PINP、β-crosslaps、骨钙素及TRAP均呈负相关(P<0.05)。结论绝经后女性血清骨转换生化标志物的表达和骨密度之间存在着密切关系。

PCⅢ RIA诊断肝纤维化的临床价值

近年来肝纤维化的血清学诊断发展迅速，据国内外报道血清Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)是诊断肝纤维化的良好血清指标。我们采用国产血清Ⅱ型前胶原(PCⅢ)试剂盒检测各种慢性肝病147例，以探讨其对肝纤维化的临床诊断价值。

联合检测软骨代谢生物标志物在膝骨关节炎早期诊断中的应用

目的评估软骨合成降解中的生物标志物在膝骨关节炎(OA)早期诊断和疾病进展中的临床意义。方法收集神木市医院门诊及住院部确诊的膝OA患者227例作为膝OA组,选取同期健康体检者178例作为对照组。酶联免疫吸附法检测血清ⅡA型前胶原N端前肽(PⅡANP)、软骨寡聚基质蛋白(COMP)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和尿Ⅱ型胶原交联C端肽(CTX-Ⅱ)水平,双膝X线正侧位片和SF-36简明健康调查问卷分别评估膝OA受累程度和生活质量。结果1)与对照组相比,膝OA组血清PⅡANP水平降低,血清COMP、MMP-3和尿CTX-Ⅱ水平均升高(P<0.05);2)中晚期膝OA组血清PⅡANP低于早期膝OA组及对照组(P<0.05),血清COMP、MMP-3(P<0.05)和尿CTX-Ⅱ均高于早期膝OA组及对照组;3)膝OA组血清PⅡANP水平与K-L分级呈反相关(P<0.05),血清COMP和MMP-3水平与K-L分级呈正相关(P<0.05),血清COMP水平还与年龄呈正相关(P<0.05)。血清PⅡANP水平与精神健康呈反相关(P<0.05);血清COMP水平与生理功能呈反相关(P<0.05),与精神健康呈正相关(P<0.05)。结论血清PⅡANP、COMP、MMP-3和尿CTX-Ⅱ在膝OA中表达异常,并随疾病严重程度增加而变化,可作为膝OA诊断和疾病进展的参考指标。

25-羟基胆固醇对大鼠关节软骨细胞的影响及其机制

目的探讨25-羟基胆固醇对大鼠软骨细胞基质合成及降解相关基因表达的影响及其机制。方法原代大鼠关节软骨细胞分为对照组(正常细胞不做处理)、模型组[白介素-1β(IL-1β)进行骨关节炎(OA)造模]和5、25、125μmol/L组(分别给予5、25、125μmol/L的25-羟基胆固醇处理)。检测5组软骨细胞总胆固醇(TCH)含量、Ⅱ型胶原前体α1(Col2a1)、蛋白聚糖(Aggrecan)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、肝脏X受体α(LXRα)、ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)和ABCG1的mRNA表达情况。结果模型组软骨细胞Col2a1、Aggrecan和LXRα的mRNA表达低于对照组,而MMP-13的mRNA表达高于对照组(P<0.05)。125μmol/L组Col2a1、Aggrecan、LXRα、ABCA1和ABCG1的mRNA表达水平低于模型组,但MMP-13的mRNA表达升高(P<0.05)。125μmol/L组软骨细胞TCH含量较对照组显著增加(P<0.05)。结论胆固醇可能通过抑制软骨细胞胆固醇流出通路,进而导致软骨细胞内胆固醇蓄积,最终引起软骨细胞质量降低,加重OA发展进程。

针刺联合祛风汤加减方治疗骨关节炎的临床观察

【目的】观察针刺联合祛风汤加减方治疗骨关节炎的临床疗效。【方法】将106例骨关节炎患者随机分为观察组和对照组,每组各53例,2组患者均给予玻璃酸钠注射联合双氯芬酸钠口服的常规治疗,在此基础上,对照组给予针刺治疗,观察组给予针刺联合祛风汤加减方治疗,连续治疗4周。治疗4周后,评价2组临床疗效,观察2组患者治疗前后视觉模拟量表(VAS)评分的变化情况,以及膝关节功能(Lysholm)评分的情况。比较2组患者治疗前后血清和关节液中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平的变化情况,以及骨代谢生物标志物X型胶原α1链(COL10A1)和ⅡA型前胶原氨基端肽(PⅡANP)水平的变化情况。【结果】(1)治疗后,2组患者的VAS评分明显改善(P<0.05),且观察组在改善VAS评分方面明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)治疗后,2组患者的Lysholm评分明显改善(P<0.05),且观察组在改善Lysholm评分方面明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)观察组总有效率为96.23%(51/53),对照组为84.91%(45/53)。观察组疗效优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)治疗后,2组患者的血清相关因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平均明显改善(P<0.05),且观察组在改善血清相关因子IL-1β、IL-6、TNF-α水平方面明显优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(5)治疗后,2组患者的血清中COL10A1、PⅡANP水平明显改善(P<0.05),且观察组在改善血清中COL10A1、PⅡANP水平方面明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。【结论】针刺联合祛风汤加减方治疗骨关节炎能明显改善患者的疼痛症状,改善患者膝关节功能的恢复状况,临床效果显著。

核磁共振T2-star-mapping成像软骨定量分析联合血清COMP、PⅡANP对膝骨关节炎的诊断价值研究

目的:探讨核磁共振T2-star-mapping成像软骨定量分析联合血清软骨寡聚基质蛋白(COMP)、ⅡA型前胶原氨基端肽(PⅡANP)对膝骨关节炎(KOA)的诊断价值。方法:选择2021年4月至2022年6月本院收治的KOA患者138例为KOA组,同期在本院体检的健康志愿者126例为对照组。采用西门子1.5T核磁共振扫描仪,行膝关节T2-star-mapping成像,获取股骨、胫骨内外侧髁关节面及髌骨软骨面T2^(*)值,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清COMP、PⅡANP水平,比较对照组与KOA组、不同病情严重程度KOA患者T2^(*)值及血清COMP、PⅡANP水平,采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析T2^(*)值联合血清COMP、PⅡANP对KOA的诊断价值。结果:对照组血清COMP水平、股骨内侧T2^(*)值、股骨外侧T2^(*)值、胫骨内侧T2^(*)值、胫骨外侧T2^(*)值、髌骨软骨面T2^(*)值低于KOA组(P<0.05),血清PⅡANP水平高于KOA组(P<0.05)。重度组血清COMP水平、股骨内侧T2^(*)值、股骨外侧T2^(*)值、胫骨内侧T2^(*)值、胫骨外侧T2^(*)值、髌骨软骨面T2^(*)值高于中度组,且中度组高于轻度组(P<0.05);重度组血清PⅡANP水平低于中度组,且中度组低于轻度组(P<0.05)。血清COMP水平、血清PⅡANP水平、T2^(*)值、联合检测诊断KOA的ROC曲线下面积分别为0.873、0.843、0.898、0.981。结论:KOA患者血清COMP水平、T2^(*)值升高,血清PⅡANP水平降低,其升高或降低程度与病情严重程度有关,联合检测血清COMP、PⅡANP水平及T2^(*)值对KOA早期诊断价值较高。

大黄蔗虫丸抗肝纤维化作用的临床研究

目的 :观察大黄蔗虫丸对慢性肝病患者肝功能、血清肝纤维化标志物及 B超等指标的影响 ,探讨其可能存在的抗肝纤维化作用。方法 :用大黄蔗虫丸配合中药辨证治疗慢性肝病患者 36例 (治疗组 ) ,与单纯应用中药辨证治疗 32例 (对照组 )进行比较 ,观察治疗前后患者血清透明质酸 (HA)、 型前胶原 (PC )、 型胶原 ( - C)和层粘蛋白 (L N)的变化 ,观察期均在 6个月以上 ,并同时检测治疗前后的肝功能 [丙氨酸转氨酶 (AL T)、总胆红素(TBil)、白蛋白 (Alb)、球蛋白 (Glb) ]和 B超 (门静脉主干、脾静脉内径和脾厚 )等情况。结果 :治疗组患者血清肝纤维化标志物均明显下降 ,尤以 HA和 PC 下降明显 ,与治疗前比较差异有显著性意义 (P<0 .0 1) ,且治疗 6个月后肝纤维化标志物仍持续下降并接近正常组水平 (P>0 .0 5 ) ,治疗组各项指标的差值与对照组比较差异均有显著性意义 (P<0 .0 5 )。治疗后患者的肝功能指标 (AL T、TBil、Glb)均有不同程度的好转 (P<0 .0 5 ) ,多数患者的 B超指标有改善。结论 :大黄蔗虫丸可能具有减轻和抑制肝纤维化进程的作用。

高截面纵横比容器和微载体技术在胎儿骨髓基质干细胞向软骨细胞转化中的应用

目的利用体外细胞培养方法,进行胎儿骨髓基质干细胞(BMSCs)向软骨细胞的诱导分化,以有效获得表型正常的软骨组织工程功能细胞。方法从胎儿骨髓血中提取BMSCs,体外扩增培养3代,流式细胞仪鉴定胎儿BMSCs的纯度后,1.2×107个细胞与Cytodex-3微载体充分混匀,放入含无血清完全培养基的高截面纵横比容器(HARV,旋转式细胞培养系统的一种)中诱导培养,7、14d取材,用RT-PCR检测细胞内Ⅱ型前胶原mRNA的表达,同时以培养瓶诱导培养作为对照。结果HARV诱导培养组在培养7、14d检测出细胞内Ⅱ型前胶原mRNA的表达,而培养瓶诱导培养组则未检出。结论HARV诱导培养具有使胎儿BMSCs向软骨细胞转化的能力。