猪圆环病毒Ⅱ型灭活疫苗免疫试验报告

猪圆环病毒病是近年来新发现的猪传染病之一,其病原是Ⅱ型猪圆环病毒(PCV-Ⅱ),以5~12周龄的猪发病率较高,临床主要表现为生长迟缓、进行性消瘦、呼吸困难、贫血、黄疸和腹泻等,急性暴发猪群的死亡率可达10%,个别情况可高达50%。此外该病与猪的多种疾病综合征有关,特别是断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)和猪皮炎及肾坏死综合征(PDNS)。PCV-Ⅱ能侵害猪体免疫系统,导致猪体的免疫抑制及抵抗力下降,干扰和破坏猪对其它疫病免疫抗体的产生和维持,从而继发或并发其它疾病,已成为危害养猪业的主要疾病之一。

生物反应器培养Vero细胞制备Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗

目的在生物反应器中用微载体连续灌流培养Vero细胞,制备Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗。方法在50 L体积的生物反应器中,加入含10 g/L微载体的DMEM培养基,接种Vero细胞,当细胞密度约达5×10~6个/ml时,感染肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)毒种,接毒后72 h开始收获,连续收获17 d,收获的病毒原液经浓缩、灭活、Sepharose 4FF凝胶层析纯化后制备疫苗,检测病毒滴度、抗原含量及残余牛血清白蛋白、DNA、宿主蛋白含量,并接种新西兰家兔,检测疫苗效力。结果确定最佳Vero细胞接种浓度为1×10~5个/ml,病毒最佳MOI为0.015。利用优化后的培养条件收获的病毒滴度在6.5~8.0 log CCID_(50)/ml,且各项检测指标均符合《中国药典》三部(2010版)相关规定。结论用生物反应器微载体灌流培养制备Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗的小试工艺可行。