川芎嗪干预早期膝骨关节炎大鼠软骨Ⅱ型胶原纤维α1基因与血管内皮生长因子mRNA及miR20b的表达

背景:课题组前期研究发现川芎嗪能明显降低骨关节炎关节液中NO、前列腺素E2水平,对减轻骨性关节炎的炎症有一定作用,但具体机制还不清楚。目的:观察川芎嗪治疗膝骨关节炎模型关节软骨中Ⅱ型胶原纤维α1基因、血管内皮生长因子mRNA及miR20b表达水平,并探讨川芎嗪治疗早期膝骨关节炎大鼠的作用机制。方法:健康雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、川芎嗪高剂量组、川芎嗪低剂量组、阳性对照组,后4组通过木瓜蛋白酶关节腔注射制作早期膝骨关节炎大鼠模型。造模后川芎嗪高、低剂量组分别灌胃川芎嗪100 mg/kg和50 mg/kg,阳性对照组灌服塞来昔布24 mg/kg;正常组、模型组灌服等量生理盐水。干预6周后取材,分别行鼠软骨大体组织学评分、qR T-PCR检测软骨Ⅱ型胶原纤维α1基因、血管内皮生长因子mRNA及miR20b的表达水平。结果与结论:(1)软骨Mankin评分:川芎嗪高、低剂量组和阳性对照组均较正常组高(P<0.05),较模型组低(P<0.05),且川芎嗪高剂量组<阳性对照组<川芎嗪低剂量组;(2)川芎嗪各剂量组和阳性对照组的Ⅱ型胶原纤维α1基因、血管内皮生长因子mRNA表达较正常组上调(P<0.05),较模型组下调(P<0.05),且川芎嗪高剂量组<阳性对照组<川芎嗪低剂量组;(3)川芎嗪各剂量组、阳性对照组及正常组的miR20b表达均较模型组上调(P<0.05),其中川芎嗪低剂量组<阳性对照组<川芎嗪高剂量组;(4)提示:川芎嗪对早期膝骨关节炎大鼠治疗具有积极作用,可能通过上调软骨中miR20b从而抑制血管内皮生长因子mRNA的表达,促进软骨的修复。

氨基葡萄糖胶囊干预膝骨关节炎患者外周血单个核细胞中软骨代谢相关基因的表达

背景:目前关于氨基葡萄糖的研究多集中于对膝骨关节炎的治疗作用,但关于其对膝骨关节炎患者外周血中软骨代谢相关基因影响的研究有限。目的:观察氨基葡萄糖胶囊对膝骨关节炎的治疗效果及对软骨代谢相关基因表达的影响。方法:选取2017年3月至2019年2月郑州大学附属郑州中心医院收治的90例膝骨关节炎患者,另选取同期医院体检中心收入的40例健康受试者,检测并对比健康受试者与膝骨关节炎患者治疗前外周血单个核细胞中软骨寡聚基质蛋白、Ⅱ型胶原纤维α1、聚糖蛋白、特异性组织抑制物3基因表达水平。采用随机数表法将膝骨关节炎患者分为常规组和研究组,分别给予双氯芬酸钠缓释片、双氯芬酸钠缓释片+氨基葡萄糖胶囊治疗12周,对比治疗前后2组外周血单个核细胞中各基因表达水平、Lequesne指数,统计治疗期间2组不良反应发生情况。结果与结论:①与健康受试者比较,膝骨关节炎患者外周血单个核细胞中软骨寡聚基质蛋白、特异性组织抑制物3 mRNA相对表达量升高(P<0.05),Ⅱ型胶原纤维α1、聚糖蛋白mRNA相对表达量降低(P<0.05);②治疗前研究组和常规组外周血单个核细胞中各基因表达水平比较,差异均无显著性意义(P>0.05);治疗后2组外周血单个核细胞中软骨寡聚基质蛋白、特异性组织抑制物3 mRNA相对表达量均低于治疗前,且研究组低于常规组(P<0.05);治疗后2组外周血单个核细胞中Ⅱ型胶原纤维α1、聚糖蛋白mRNA相对表达量均高于治疗前,且研究组高于常规组(P<0.05);③治疗前研究组和常规组Lequesne指数比较,差异均无显著性意义(P>0.05);治疗后2组Lequesne指数均低于治疗前,且研究组低于常规组(P<0.05);④研究组和常规组不良反应发生率比较,差异均无显著性意义(P>0.05);⑤结果表明,氨基葡萄糖胶囊可有效改善膝骨关节炎患者临床症状且安全可靠,可能通过抑制软骨寡聚基质蛋白、特异性组织抑制物3基因表达,促进Ⅱ型胶原纤维α1、聚糖蛋白基因表达实现的。

自噬在大鼠椎间盘软骨终板退变中的作用

背景:椎间盘退变引起的下腰痛是导致老年人瘫痪的主要原因,但是有关椎间盘退变的机制仍未完全明确。自噬可能在椎间盘退变过程中起重要作用。目的:研究自噬对大鼠腰椎间盘软骨终板细胞Ⅱ型胶原纤维α1(COL2A1)和聚集蛋白聚糖(aggrecan)分泌的影响。方法:将细胞分为对照组、巴弗洛霉素(Baf)组、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)组、TNF-α+Baf组4组,其中对照组、Baf组、TNF-α组分别采用二甲基亚砜、Baf、TNF-α作用于细胞24 h,TNF-α+Baf组先用Baf阻断自噬,再用TNF-α作用于细胞24 h。分别通过实时定量荧光聚合酶链反应、蛋白质印迹法、细胞免疫荧光染色等方法检测各组COL2A1、aggrecan mRNA和蛋白的表达并进行比较。结果:Baf组、TNF-α组和TNF-α+Baf组COL2A1、aggrecan mRNA和蛋白表达量均较对照组减少,且差异均有统计学意义(P均<0.05);TNF-α+Baf组COL2A1、aggrecan mRNA和蛋白表达量均较Baf组、TNF-α组减少,且差异均有统计学意义(P均<0.05);Baf组与TNF-α组COL2A1、aggrecan mRNA和蛋白表达量差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论:自噬对大鼠腰椎间盘软骨终板细胞分泌的COL2A1和aggrecan具有保护作用。