Peroxiredoxin Ⅱ基因敲除对高脂膳食下小鼠脂肪蓄积的影响

利用高脂饲料诱导小鼠肥胖模型和苏木精—伊红染色法(H&E染色)检测PeroxiredoxinⅡ(PrxⅡ)基因敲除对小鼠体重、内脏脂肪、肝脏和皮下脂肪的影响。结果表明,高脂饲料饲养9周后,高脂饲料饲养组PrxⅡ基因敲除对小鼠(HFD-PrxⅡ-/-)体重、腹膜后脂肪重量、肾脏周围脂肪重量和附睾脂肪垫重量与高脂饲料饲养组野生型小鼠(HFD-PrxⅡ^(+/+))相比均无统计学意义,HFD-PrxⅡ-/-小鼠的肝脏重量与HFD-PrxⅡ^(+/+)小鼠相比显著增加(P<0.01),H&E染色观察发现,HFD-PrxⅡ-/-小鼠肝脏脂肪空泡明显多于HFD-PrxⅡ^(+/+)小鼠。高脂饲料饲养9周后,H&E染色观察小鼠皮下脂肪厚度,HFD-PrxⅡ-/-小鼠皮下脂肪厚度与HFD-PrxⅡ^(+/+)小鼠相比显著增厚(P<0.001)。研究证明,PrxⅡ基因敲除小鼠经高脂饲料喂养后能显著增加脂肪在肝脏和皮下的蓄积,为进一步探究PrxⅡ抑制脂肪形成和异常蓄积提供了基础研究数据。

高碘对金属硫蛋白Ⅰ／Ⅱ敲除小鼠甲状腺线粒体超氧化物生成的影响

目的观察高碘对金属硫蛋白Ⅰ／Ⅱ敲除（MT-Ⅰ／ⅡKO）小鼠甲状腺线粒体超氧化物生成的影响。方法利用6-8周龄健康雄性MT-Ⅰ／ⅡKO小鼠和同源对照（WT）小鼠的甲状腺组织，制备甲状腺细胞悬液，分别用10-4、10-3、10-2mol／L碘化钾（KI）和10-3mol／L过氧化氢（H2O2）处理2h，并以无KI或H2O2处理作为对照。利用甲基噻唑基四唑（MTT）法检测细胞活力，酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测培养液中乳酸脱氢酶（LDH）含量．利用MitoSOX探针通过流式细胞术检测甲状腺细胞线粒体超氧化物生成。结果与对照组[（100．00±0．00）％、（100．00±0．00）％]比较，10-4、10-3、10-2mol／LKI组和10-3mol／LH2O2组WT、MT-Ⅰ／ⅡKO小鼠甲状腺细胞活力[（73．63±2．05）％、（72．41±2．26）％、（69．63±2．29）％、（44．90±2．93）％和（65．40±2．39）％、（64，51±2．27）％、（61．48±2．33）％、（40．80±2．76）％]均显著下降（P均〈0．05），且MT-Ⅰ／ⅡKO小鼠与WT小鼠相比，细胞活力下降更加明显（P均〈0．05）。与对照组[（1995．28±30．52）、（2004．96±19．71）U／L]比较，10-4、10-3、10-2mol／LKI组和10-3mol／LH2O2组WT和MT-Ⅰ／ⅡKO小鼠甲状腺细胞培养液中LDH含量[（2809．22±156．53）、（2850．80±137．83）、（2920．45±152．92）、（4487．49±130．67）U／L和（3261．06±120．44）、（3474．19±142．15）、（3597．08±150．86）、（4706．64±148．57）U／L]均显著升高（P均〈0．05），且MT-Ⅰ／ⅡKO小鼠与WT小鼠相比，LDH含量升高更加明显（P均〈0．05）。与对照组（26．49±7．66、37．11±8．48）比较，10-2mol／LKI组和100mol／LH202组WT、MT-Ⅰ／ⅡKO小鼠甲状腺细胞线粒体超氧化物生成（58．96±5．1l、87．95±4．25和71．21±5．55、99．76±4．42）明显增加（P均〈0．05）；且MT-Ⅰ／ⅡKO小鼠与WT小鼠相比，线粒体超氧化物生成增加更加明显（P均〈0．05）。结论高碘（10-2mol／L）和10-3mol／LH2O2可诱导WT和MT-Ⅰ／ⅡKO小鼠甲状腺细胞线粒体超氧化物生成增多，细胞活力下降．LDH分泌增加：MT-Ⅰ／ⅡKO小鼠较WT小鼠甲状腺线粒体超氧化物生成增加更明显。提示MT-Ⅰ／Ⅱ在对抗氧化应激方面具有一定作用。