肝纤维化状态下小肠药物代谢功能的改变

目的 探讨肝纤维化时小肠药物代谢功能的变化 ,为合理用药提供依据。方法 在大鼠肝纤维化模型上 ,测定小肠粘膜上皮细胞药物代谢酶、抗氧化酶及膜流动性变化 ,并与急性肝损伤、慢性肝硬化大鼠小肠相关指标进行比较。结果 与正常对照组相比 ,肝纤维化大鼠小肠粘膜上皮细胞药物代谢Ⅰ相酶红霉素N 脱甲基酶 (CYP3A)、7 乙氧异口恶唑O 脱乙基酶 (CYP1A1)和苯胺羟化酶 (CYP2E1)活性分别增加 2 .2 ,0 .6和 0 .3倍 ,而Ⅱ相酶葡糖醛酸转移酶 (UDPGT)和α 、π 谷胱甘肽S 转移酶 (GST)活性则分别减少 15 % ,4 3%和 5 7% ,同时膜脂质过氧化产物增加 ,抗氧化酶活性减弱 ,膜流动性降低。急性肝损伤时 ,上述指标无明显变化 ,而肝硬化时上述指标与肝纤维化组变化一致 ,并进一步增强。结论肝纤维化可影响小肠粘膜上皮细胞药物代谢功能 ,使Ⅰ相氧化功能增强 ,Ⅱ相结合反应减弱。小肠抗氧化功能降低可能与Ⅰ相氧化代谢增强有关。

人类Ⅱ相药物毒物代谢酶非同义单核苷酸多态性的表型预测：分子进化观

药物毒物代谢酶编码区的非同义单核苷酸多态性(nsSNPs)导致氨基酸改变,从而可能改变相应蛋白质的功能,使人体对有关药物毒物产生异常反应,亦与疾病易感性关联.在人类Ⅱ相代谢酶基因中已发现大量nsSNPs,但对这些酶nsSNPs基因型和表型间的关系了解甚少.本研究从Ensembl基因组数据库和NCBISNP数据库识别出104个人类Ⅱ相酶基因的923个经确认的nsSNPs.用PolyPhen,Panther和SNAP算法预测,发现44%～59%的nsSNPs影响到蛋白质功能.本研究的预测结果与已有实验研究证据基本吻合.68%的已知有害nsSNPs被正确预测为有害.本研究识别出多个尚未经实验研究的功能氨基酸.Panther和PolyPhen的预测结果吻合,SNAP非中性预测结果与PolyPhen预测分值亦吻合.进化上非中性的(去稳定化的)氨基酸替换可能是Ⅱ相酶活性改变,产生疾病易感性和药物/外源物毒性的致病基础.本研究还在有害nsSNPs预测的框架内阐明了Ⅱ相酶的分子进化模式.

异烟肼致小鼠肝脏损伤和对Nrf2及GSTA1 mRNA表达的影响

目的研究在异烟肼(INH)致小鼠肝脏损伤进程中,核因子相关因子2(Nrf2)通路及其下游靶基因谷胱甘肽-S转移酶A1(GSTA1)mRNA的表达情况,为INH致肝损伤的预防和治疗提供依据。方法 64只昆明小鼠,随机分为8组,实验组分别为INH 90 mg/kg·d灌胃1 d、3 d、5 d、7d、2周、3周和4周组;对照组给予等容积蒸馏水灌胃。比色法检测肝组织中还原性谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量及GSTs活力;应用SYBR Green实时荧光定量RT-PCR法检测肝组织中Nrf2、GSTA1 mRNA表达情况。结果用药2周后,血清ALT含量升高(P<0.001);用药5 d后可见肝组织病理形态学改变;用药5 d、7 d、2周和3周后肝组织中GSH含量明显低于对照组(P<0.001),7 d、2周和4周组肝组织中MDA含量高于对照组(P=0.002);5和7 d组GSTs活力降低(P=0.005),随后又上升至正常水平;4周时,Nrf2 mRNA表达比值增加至6.24倍(P=0.014);用药2、3和4周组GSTA1 mRNA表达上调(P<0.001);GSTA1和Nrf2 mRNA的表达有相关性(r=0.861,P=0.006)。结论在INH导致的肝损伤发生过程中,Nrf2及GSTA1基因表达上调,调节机体的Ⅱ相药物代谢能力,抵御药物毒性作用,提示及时激活Nrf2通路上调其下游靶基因可能会预防肝损伤的发生。