MHCⅡ类反式激活因子在上调HepG2细胞HLAⅡ类分子表达中的作用

目的探讨主要组织相容性复合物(major histocom patibility complex,MHC)Ⅱ类反式激活因子(classⅡtrans-activator,CⅡTA)在调控HepG2细胞HLAⅡ类分子表达中的作用。方法将含CⅡTAcDNA的真核表达载体EBS-NPL-CⅡTA和不含CⅡTAcDNA的空载体EBS-NPL分别转染至HepG2细胞。用RT-PCR技术检测未经转染的HepG2细胞、转染EBS-NPL-CⅡTA及空载体EBS-NPL的HepG2细胞CⅡTA mRNA的表达,并用间接细胞免疫荧光技术及流式细胞技术检测其3种HLAⅡ类分子(HLA-DR、DP、DQ)的表达。结果未经转染的HepG2细胞和转染空载体EBS-NPL的HepG2细胞均无CⅡTA mRNA和HLAⅡ类分子的表达。转染EBS-NPL-CⅡTA后的HepG2细胞出现CⅡTA mRNA表达,并表达3种HLAⅡ类分子。结论CⅡTA是调控HepG2细胞是否表达HLAⅡ类分子的关键因子,HepG2细胞不表达HLA-Ⅱ类分子与其缺乏CⅡTA表达有关,为进一步研究CⅡTA在肝癌治疗中的作用奠定基础。

MHCⅡ类反式激活因子与病毒感染的关系

MHCⅡ类反式激活因子(ClassⅡtransactivator,CⅡTA)通过调控细胞是否表达MHCⅡ类分子及其水平而决定宿主是否对外来病毒感染产生免疫应答及其程度,从而影响病毒感染的发生、发展与转归。本文介绍了CⅡTA的结构与功能、IFNγ诱导MHCⅡ类基因表达的机制及CⅡTA分子与病毒间的相互作用。

Ⅱ类反式激活因子启动子Ⅳ区C-1350T和G-944C多态性与乙型肝炎肝硬化易感性的关系

目的探讨Ⅱ类反式激活因子（CIITA）启动子Ⅳ区1350和-944位点单核苷酸多态性（SNP）与乙型肝炎肝硬化易感性的关系。方法在191例慢性乙型肝炎、353例乙型肝炎肝硬化与125名无HBV感染的健康献血员人群中，应用序列特异性引物PCR技术对CIITA基因启动子Ⅳ区C1350T和G-944C位点进行基因分型研究。结果慢性乙型肝炎患者CC：37．2％、TG：42．2％、CG：18．9％，肝硬化患者CC：35．3％、TG：34．0％，CG：29．3％，肝硬化患者CC、TG单倍型频率较低，而CG单倍型频率显著升高，差异有统计学意义（CG比CC：x^2=8．274，df=1，P〈0．01；CG比TG：x2=15．027，df=1，P〈0．01）；两组患者间CC与TG单倍型频率比较，x^2=1．231，df=1，P〉0．05，差异无统计学意义。与慢性乙型肝炎患者（CC／CC：12．6％；TG／TG：18．3％；含CG的基因型：33．5％；不含CG的基因型：35．6％）相比，肝硬化人群中CC／CC（1组，19．6％）和含CG的基因型（3组，53．5％）频率显著升高，而TG／TG（2组，11．9％）和不含CG的基因型（4组，15．0％）频率显著降低（1组比2组，X2=7．176，df=1，P〈0．01；1组比4组，x^2=19．818，df=1，P〈0．01；3组比2组，x2=11．423，df=1，P〈0．01；3组比4组，x2=34．226，df=1，P〈0．01；1组比3组，x2=0．009，df=1，P〉0．05；2组比4组，x2=2．176，df=1，P〉0．05）。结论CIITA基因启动子Ⅳ区中1350和-944位点多态性与慢性HBV感染者肝硬化的易感性密切相关，携带含CG单倍型的基因型人群更容易发展为肝硬化。

Ⅱ类抗原反式激活因子与HLA-DR抗原的关系及其意义(英文)

本研究探讨Ⅱ类抗原反式激活因子(CIITA)和人类白细胞抗原(HLA-DR)表达时相的关系和差异,及STAT1-α反义寡核苷酸(STAT1-αAS)对CIITA和HLA-DR的抑制作用。分离健康志愿者外周血T淋巴细胞,给予不同剂量干扰素-γ(IFN-γ)后,用RT-PCR法检测CIITAmRNA,Westernblot分析HLA-DR抗原表达,然后给予不同浓度STAT1-αAS和STAT1-α寡核苷酸有义链(STAT1-αS),再次检测CIITAmRNA和HLA-DR的表达。结果表明:CIITAmRNA在IFN-γ作用后5小时开始表达,14小时达峰值;HLA-DR在28小时后可被检测出,52小时达高峰。5、10和20μmol/LSTAT1-αAS作用于细胞后,CIITAmRNA的表达显著低于对照组(P<0.01),而在S组明显高于AS处理组(P<0.01),S组与对照组间无显著差异;HLA-DR的表达可被STAT1-αAS抑制,AS组仅为对照组的64.3%(P<0.01),S组与对照组间仍无差异;STAT1-αAS作用后,HLA-DR变化同CIITA。结论:CIITAmRNA表达与HLA-DR表达呈正相关且早于后者;STAT1-αAS可特异性抑制CIITA和HLA-DR的表达,并能预防T淋巴细胞激活,CIITA在移植免疫病因中起重要作用。

腺病毒介导MHC Ⅱ类分子反式激活因子突变体基因治疗小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎

目的:观察腺病毒介导MHC Ⅱ类分子(major histocompatibility complex classⅡmolecules)反式激活因子突变体(CⅡTAm)基因治疗小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎(experi mental autoi mmune thyroiditis,EAT)的效果,并探讨其可能的作用机制。方法:31只健康雌性CBA/J小鼠随机分成EAT模型组(n=8)、CⅡTAm治疗组(n=9)、GFP对照组(n=9)和正常对照组(n=5)。除正常对照组不作特殊处理外,其余3组均以猪甲状腺球蛋白(porcine thyroglobulin,pTg)+弗氏佐剂(com-plete or incomplete Freund adjuvant,CFA/IFA)建立EAT小鼠模型,CⅡTAm治疗组和GFP对照组分别静脉注射重组腺病毒Ad-CMV-CⅡTAm及Ad-GFP进行治疗,EAT模型组注射等量生理盐水。首次免疫后第29日处死小鼠,进行H-E染色观察甲状腺病理形态;免疫组织化学染色测定甲状腺MHCⅡ类分子表达;分析pTg刺激下脾脏淋巴细胞的增殖及其上清液中IFN-γ的分泌水平;ELISA法检测血浆中抗-pTg自身抗体滴度;流式细胞术分析外周血和脾脏淋巴细胞中CD4+T淋巴细胞上可诱导共刺激分子(inducible costi mulator,ICOS)的表达水平。结果:H-E染色结果表明,CⅡTAm治疗组甲状腺淋巴细胞浸润指数(0.3±0.5)低于EAT模型组(1.4±0.4)和GFP对照组(1.5±0.2,P<0.01)。免疫组化结果显示,EAT模型组和GFP对照组甲状腺组织有弥漫性MHC Ⅱ类分子表达,而CⅡTAm治疗组未见明显表达,正常对照组表达呈阴性。80μg/mlpTg刺激下,CⅡTAm治疗组小鼠淋巴细胞刺激指数(SI)明显低于EAT模型组或GFP对照组(P<0.05);培养上清各组IFN-γ分泌水平与SI结果类似(P<0.01)。CⅡTAm治疗组血浆抗-pTg自身抗体滴度显著低于EAT模型组或GFP对照组(P<0.01);CⅡTAm治疗组外周血和脾脏CD4+T细胞ICOS分子阳性表达率亦显著低于EAT模型组或GFP对照组(P<0.01)。结论:重组腺病毒Ad-CMV-CⅡTAm能抑制EAT小鼠甲状腺组织MHCⅡ类分子表达,抑制自身反应性T细胞增殖,减轻甲状腺炎性细胞浸润,降低自身抗体滴度,对EAT有一定的治疗作用。

Ⅱ类分子反式激活因子与MHC表达

MHC Ⅱ类分子反式激活因子 (CⅡTA)是参与MHC Ⅱ类基因转录的关键调节蛋白 ,它的调节基本上决定了MHC Ⅱ类分子的存在与否及表达程度 ,也决定了免疫应答的本质 ,因而被看作是MHC Ⅱ类基因表达的主宰调节者。

构建MHCⅡ类分子反式激活因子基因突变体抑制转染细胞HLAⅡ类分子的表达

目的 探讨MHCⅡ类分子反式激活因子 (CⅡTA)突变体抑制HLAⅡ类分子表达的可能性。方法 构建不含起始密码子的pcDNA3mCⅡTA2、含起始密码子的pcDNA3mCⅡTA3和含起始密码子及NLS(nuclearlocalizationsignal)的pcDNA3mCⅡTA4突变体。用脂质体转染法将上述 3种突变体及pcDNA3空载体转入HeLa细胞和Raji细胞。用流式细胞术和RT PCR法观察它们对HeLa/Raji细胞HLA DR/DQ分子的诱导性和组成性表达的影响。结果 在细胞和基因水平证实pcDNA3mCⅡTA3和pcDNA3mCⅡTA4对HeLa/Raji细胞HLA DR/DQ的表达起明显抑制作用 ,而pcDNA3mCⅡTA2和pcDNA3空载体无此作用。

Ⅱ类抗原反式激活因子和人白细胞抗原-DR检测方法的比较

目的 研究Ⅱ类抗原反式激活因子 (CⅡTA)与人白细胞抗原 DR(HLA DR)表达的相关性 ,探讨CⅡTA在移植物抗宿主病 (GVHD)中检测的意义。方法 从健康人外周血分离获得T细胞 ,给予干扰素 γ(IFN γ) 10 0 0U /ml后 ,在不同时间用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR )检测CⅡTAmRNA表达 ,用免疫印迹法检测HLA DR抗原的表达。然后 ,给予Stat1α反义寡核苷酸 (AS)抑制CⅡTA ,分别检测CⅡTAmRNA及HLA DR抗原在各自表达量最高时间点的变化。结果 CⅡTAmRNA在IFN γ作用后 5h开始表达 ,至 14h表达量最高 ,此后逐渐下降 ;HLA DR抗原在 2 8h可检测出 ,52h表达量最高 ,此后逐渐下降 ,至 76h仅可检测到少量抗原的表达 ;给予AS后与对照组相比 ,CⅡTAmRNA和HLA DR表达量均下降。结论 CⅡTA与HLA DR表达成正相关性 ,且先于HLA DR出现 。

组氨酸接枝聚介导的RNA干扰技术对大鼠肝脏主要组织相容性复合体Ⅱ类基因及其反式激活因子基因表达的抑制作用

目的 观察应用新型纳米载体组氨酸接枝聚（β-氨基酯）（HGPAEs）介导的RNA干扰技术对大鼠肝脏主要组织相容性复合体Ⅱ类基因（MHC-Ⅱ）及其反式激活因子基因（CⅡTA）表达的抑制作用.方法 构建HGPAEs及针对大鼠CⅡTA基因的短发夹RNA（shRNA）质粒,并将两者耦合成pCⅡTA-HGPAEs载体,分别设置生理盐水组、单纯HGPAEs组、pHK-HGPAEs阴性对照组和pCⅡTA-HGPAEs干预组,通过门静脉注射方法体内转染大鼠肝脏,分别采用荧光定量聚合酶链式反应（FQ-PCR）和Western blot检测转染后CⅡTA和MHC-Ⅱ基因的mRNA转录水平及蛋白表达水平.结果 成功构建载shRNA质粒的HGPAEs载体,体内转染大鼠肝脏后,pCⅡTA-HGPAEs组CⅡTA与MHC-Ⅱ基因的mRNA转录水平及蛋白表达水平显著下降（P＜0.01）,与生理盐水组比较,C ⅡTA及MHC-Ⅱ转录水平分别为（21.4±4.2）％和（26.3±5.8）％,蛋白表达水平分别为（21.6±7.6）％和（27.8±5.6）％.而生理盐水、HGPAEs、pHK-HGPAEs组转染后CⅡTA与MHC-Ⅱ基因mRNA转录水平及蛋白表达水平差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 HGPAEs是一种较为理想的基因转运载体,应用RNA干扰技术经门静脉注射方法转染大鼠肝脏,可显著抑制CⅡTA和MHC-Ⅱ基因表达.

小鼠pIV启动子调控CⅡTA突变体重组腺病毒表达选择性抑制MHC Ⅱ类分子的表达

目的:观察受CⅡTA-pIV启动子驱动的MHCⅡ类分子反式激活因子突变体(CⅡTAm)重组腺病毒对MHC Ⅱ类分子表达的选择性抑制作用,并探讨其相关机制。方法:构建了N-端酸性氨基酸区缺失了118aa的CⅡTA突变体及其CⅡ TA-pIV启动子驱动的重组腺病毒Ad-pIV-CⅡTAm,将Ad-pIV-CⅡTAm或对照腺病毒Ad-GFP感染小鼠内皮细胞株SVEC细胞和转染巨噬细胞株J774细胞,并以IFN-γ刺激。用RT-PCR检测野生型和突变型CⅡTA mRNA的表达,用流式细胞术检测MHC Ⅱ类分子在细胞表面的表达。结果:成功构建CⅡTA-pIV启动子调控下的CⅡTA突变体基因重组腺病毒表达载体Ad-pIV-CⅡ TAm;该腺病毒介导的CⅡTA突变体mRNA在SVEC和J774细胞内的表达受到IFN-γ的上调,同时抑制这些细胞上诱导型和组成型MHC Ⅱ类分子的表达。结论:Ad-pIV-CⅡTAm重组腺病毒是一种IFN-γ调控型表达载体,可有效地抑制受感染细胞上 MHC Ⅱ类分子的表达。

肝细胞癌肝内HLA-DR和CⅡTA的表达

目的探讨人类白细胞抗原DR(human leucocyte antigen DR,HLA-DR)和Ⅱ类反式激活因子(classⅡtransactivator,CⅡTA)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者癌组织与癌周肝组织中的表达水平及其意义。方法用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测33例乙型肝炎相关性肝细胞癌患者手术切除的肝癌组织和癌周肝组织中CⅡTA mRNA的表达状况,并用免疫组织化学染色检测肝癌组织和癌周肝组织中HLA-DR和CⅡTA蛋白的表达水平。结果癌周肝组织中HLA-DR蛋白、CⅡTA蛋白与mRNA表达阳性检出率均为100%,肝癌组织中HLA-DR蛋白与CⅡTA蛋白表达阳性检出率分别为24.2%和33.3%,CⅡTA mRNA未检测到阳性表达,两者间差异显著(P<0.05);33例患者的肝癌细胞中均缺乏HLA-DR与CⅡTA蛋白表达,而癌周组织肝细胞中均有不同程度HLA-DR与CⅡTA蛋白表达;组织中HLA-DR表达水平与CⅡTA表达水平呈明显正相关(rs=0.9085,P<0.05)。结论肝癌细胞缺乏HLA-DR表达,与其不表达CⅡTA有关,并可能在肝癌细胞免疫逃逸中起重要作用。

CⅡTA基因启动子Ⅳ区G-944C多态性与慢性HBV感染发病易感性的关系研究

目的探讨MHCⅡ类反式激活因子(CⅡTA)启动子Ⅳ区G-944C基因多态性与慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染发病易感性的关系。方法在1203例慢性HBV感染无症携带与慢性肝患者中,应用序列特异性引物PCR技术(PCR-SSP)对CⅡTA基因启动子Ⅳ区G-944C位点进行基因分型研究。结果CC基因型频率在2组人群中分别为25·7%和19·7%,彼此间相差显著(χ2=5.560,P=0·018),而GC基因型频率分别为43.6%和49.9%,彼此间相差显著(χ2=4·774,P=0·029);在G基因显性模式下(C基因隐性模式),即GG+GC基因型频率在无症状携带和发病组人群中分别为74.3%和80.3%,两者间相差显著(χ2=5.560,P=0·018);在慢性肝炎、慢性重型肝炎和肝炎肝硬变3组人群中,C等位基因频率分别为44.1%、45.8%和45.0%,彼此间相差不显著(P>0.05)。结论CⅡTA基因启动子Ⅳ中的G-944C位点多态性与慢性HBV感染者发病易感性存在一定的关系,而与疾病的严重程度无明显关系;基因型为CC纯合子的慢性HBV感染者不容易发展成慢性肝病。

CⅡTA基因的应用研究进展

人 MHC-Ⅱ类分子反式激活因子（MHC classⅡtransactivator, CⅡTA）基因全长4,543bp,含有一个3,390bp长的开放读码框,编码一个含1,130个氨基酸的蛋白（分子量为123.5kDa）。它的表达水平直接影响着MHC-Ⅱ分子的表达量,是后者表达的主要调控因子,此外,它还参与激活MHC-Ⅰ类基因和多种抗原递呈相关基因［1,2］。本文就CⅡTA的主要应用研究进展进行综述。

用优化的OE-PCR法构建CⅡTA中间缺失突变体

目的：以构建缺失第109～226位氨基酸密码子的MHCII类分子反式激活因子（MHCclass Ⅱ molecule transactivator，CIITA）突变体为例探索一种简便、稳定的构建中间缺失突变体的方法。方法：首先按照传统重叠延伸PCR方法的原理扩增缺失片段两端的基因片段，再将两片段混合，在不加入外围引物的情况下进行8次PCR循环以有效完成重叠延伸，然后再加入引物进行目的片段指数扩增，将扩增产物直接克隆至真核表达载体pIRES。结果：成功地构建出缺失第109～226位氨基酸密码子的CⅡTA突变体。结论：优化后的重叠延伸PCR法（OE—PCR）克服了传统方法的诸多弊端，非常适合于构建中间缺失突变体，值得推广。

CⅡTA与疾病的关系及潜在应用前景

近年来发现的MHCⅡ类分子反式激活因子(MHC classⅡtransactivator, CⅡTA)是对MHCⅡ类分子起严格且专一调控作用的转录激活因子。CⅡTA的表达对维持机体免疫功能的稳定与平衡至关重要,其异常表达与多种感染性疾病及自身免疫病的发生发展密切相关。CⅡTA及其人工修饰构建的突变体在这些疾病的预防和治疗中有着广泛的应用前景。

CIITA锤头状核酶的克隆及其体外活性

通过CIITA核酶抑制HeLa细胞表面MHCⅡ类分子的表达。设计并合成针对人类CIITA的核酶Rz464,通过体外转录和切割实验鉴定其活性。将Rz464亚克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP(pRz464),并稳定转染HeLa细胞株,流式细胞术检测MHCⅡ类抗原表达,RT-PCR检测CIITA mRNA水平。结果表明,Rz464与CIITA靶序列体外切割产物电泳见预期切割条带。pRz464^+HeLa细胞与对照组比较,HLA-DR、DP、DQ抗原诱导型表达分别降低了79.21%、90.31%及48.30%;同时CIITA的诱导型mRNA含量明显减少。Rz464通过切割CIITA mRNA,进而阻止了后者调控的MHCⅡ类分子的表达。

人CIITA基因启动子IV不同单倍型DNA真核表达载体的构建

目的:构建人MHCⅡ类反式激活因子(CIITA)基因启动子IV4种不同单倍型DNA的真核表达载体。方法:根据人CIITA基因启动子IV区的2个单个核苷酸多态性(SNPs)位点C-1350T和G-944C,可以构建出4种单倍型(CG、CC、TG和TC)。分别以CG/CG、CC/CC、TG/TG和TC/TC4种基因型的人基因组DNA为模板,用PCR法扩增出包含启动子IV两个SNP位点的长487bp的DNA片断,TA克隆至pMD18-TSimple载体后用MluI/HindⅢ双酶切,纯化回收后分别与同样双酶切的荧光素酶报告基因载体PGL3-Basic和PGL3-Promoter相连接,构建CG-PGL3-Basic、CG-PGL3-Promoter、CC-PGL3-Basic、CC-PGL3-Promoter、TG-PGL3-Basic、TG-PGL3-Promoter、TC-PGL3-Basic、TC-PGL3-Promoter8个表达载体,并测序验证其DNA序列。结果:实验得到含有人CIITA基因启动子IV4种不同单倍型DNA序列的真核表达载体8个,且测序证实了这8个表达载体序列与理论序列完全一致。结论:成功构建人CIITA基因启动子IV不同单倍型的真核表达载体,为CIITA基因启动子IV不同单倍型的功能研究奠定基础。

云南省基诺族、傣族、馒尼族人群CⅡTAG－944C多态性与HBV感染的相关性研究

目的分析云南省西双版纳地区基诺族、傣族和傻尼族人群CⅡTAG-944C多态性的分布，并探讨其多态性与HBV感染的相关性。方法运用PCRN序的方法对三民族人群CⅡTAG-944C位点进行基因分型，并分析其基因多态性与HBV感染的相关性。结果（1）馒尼族人群HBV感染率及HBsAg携带率显著高于基诺族和傣族，差异有统计学意义（馒尼族抛基诺族χ^2值分别为135．196和10．361，P值分别为0．000和0．001；馒尼族vs．傣族χ^2值分别为96．783和8．748，P值分别为0．000和0．003）。（2）馒尼族人群CIITAG-944C位点基因型与等位基因分布频率与其他两民族显著不同，CC基因型与C等位基因频率升高，而GG基因型与G等位基因频率则降低，差异有统计学意义（馒尼族椰．基诺族χ^2值分别为11．841和12．208，P值分别为O．003和0．000；馒尼族vs.傣族χ^2值分别为23．902和20．220，P值均为0．000）。（3）CIITAG-944C基因型和等位基因分布频率在基诺族人群HBV感染组与对照组中差异有统计学意义（f值分别为6．150和4．911，P值为0．046和0．027）；而HBsAg^＋组与HBsAg^-组相比，在馒尼族人群和三民族总体人群中分布均有差异（傻尼族χ^2值分别为8．650和5．034，P值分别为0．013和0．025；总体人群χ^2值分别为13．047和9．416，P值分别为00．001和0．002）；HBsAg^＋组CC基因型和C等位基因分布频率显著升高。（4）以非条件logistic回归模型校正混杂因素后，在C隐性模式下（CC／GG＋GC），HBsAg^＋组与HBsAg^-组差异有统计学意义（P=O．000；OR=2．964；95％CI：1．609～5．460）。结论CIITAG-944C基因型和等位基因频率具有民族差异，并且其多态性与HBsAg携带密切相关，基因型为CC纯合子的HBV感染患者更易发展成为HBsAg携带者。

人CⅡTA基因不同单倍型CDNA真核表达载体的构建

目的 构建人MHCⅡ类反式激活因子（CⅡTA）基因3种不同单倍型cDNA的真核表达载体。方法 以野生型重组质粒EBS-NPL-CⅡTA cDNA为模板,用重叠延伸PCR定点突变技术对CⅡTA基因编码区的两个非同义单个核苷酸多态性（SNP）位点进行突变,制备CⅡTA基因另外3种单倍型CDNA的部分片段。将其分别克隆至EBS-NPL-CⅡTA酶切后的线性化载体上,通过菌落PCR及酶切鉴定获得阳性克隆,并对其进行测序鉴定。然后将4种单倍型的真核表达载体和空载体EBS-NPL分别转染至HepG2细胞,用间接细胞免疫荧光技术检测其HLA-DR分子的表达。结果 成功制备人CⅡTA基因3种单倍型CDNA的部分片段,并获得含有CⅡTA基因3种不同单倍型cDNA完整序列的真核表达载体。证实未经转染和转染空载体的HepG2细胞无HLA-DR分子的表达,转染4种真核表达载体的HepG2细胞均可表达HLA-DR分子。结论 成功构建人CⅡTA基因不同单倍型的真核表达载体,为研究CⅡTA基因不同单倍型功能之间的差异奠定基础。

CⅡTA基因编码区不同单倍型cDNA的功能研究

目的研究MHCⅡ类反式激活因子（CⅡTA）基因编码区非同义单核苷酸多态性（SNP）位点C19170G（Leu45Val）和C30799G（Ala500Gly）构成的4种不同单倍型eDNA的功能。方法将4种不同单倍型的真核表达载体和空载体分别转染至HeLa细胞。用RT—PCR和间接细胞免疫荧光技术检测未经转染的HeLa细胞、转染4种真核表达载体及空载体的HeLa细胞C1ITAmRNA与3种HLAⅡ类分子（HLA-DR、DP、DQ）的表达，并用流式细胞技术对其表达的3种HLAⅡ类蛋白进行定量分析。结果未经转染和转染空载体的HeLa细胞均无CⅡTA mRNA和3种HLAⅡ类分子的表达，而转染4种不同单倍型真核表达载体的HeLa细胞均出现CⅡTA mRNA表达，并表达3种HLAⅡ类分子。证实了转染4种不同单倍型真核表达载体后的HeLa细胞3种HLAU类分子表达水平差异无统计学意义（P均〉0．05）。结论中国人CⅡTA基因编码区这两个SNP位点的多态性（2个位点氨基酸的改变）不影响CⅡTA反式激活HLAⅡ类基因表达的能力。