微小隐孢子虫含有纤维连接蛋白Ⅲ型结构域蛋白的亚细胞定位及其细胞黏附特性研究

目的本研究以微小隐孢子虫含有纤维连接蛋白Ⅲ型结构域蛋白(Cryptosporidium parvum fibronectin typeⅢdomain-containing protein,CpFN3)为研究对象,研究其亚细胞定位和黏附特性。方法该蛋白由cgd4_640基因编码、全长为含有2430个氨基酸的I型跨膜蛋白。设计特异性抗原多肽并免疫家兔,获得多克隆抗体,利用亲和纯化法获特异性抗体;经Western blot方法验证该抗体特异性,再通过间接免疫荧光法(IFA)进行蛋白定位。通过原核表达获得重组蛋白(His-CpFN3),通过ELISA确定重组蛋白与HCT-8细胞和肝素的结合情况。结果成功获得纯化的抗CpFN3抗体,Western blot分析显示该抗体可识别条带大小约为280 kDa;IFA结果表明该蛋白定位于子孢子的表膜,呈点状分布。该蛋白在子孢子入侵阶段及胞内无性繁殖和有性繁殖阶段均有表达。利用重组蛋白,确定了CpFN3能够与HCT-8细胞及肝素结合(结合常数Kd分别为0.23和1.21μmol/L),并呈剂量依赖性和可饱和性。结论本研究确定CpFN3参与了虫体与宿主细胞的黏附过程。

富含亮氨酸重复序列/Ⅲ型纤维连接蛋白4在胃癌组织中的表达及临床意义

目的探讨富含亮氨酸重复序列/Ⅲ型纤维连接蛋白4(leucine-rich repeat and fibronectin typeⅢdomain-containing protein 4,LRFN4)在胃癌组织中的表达情况,并分析LRFN4表达水平与胃癌患者临床病理参数和预后的关系。方法收集2017年1月至12月于中山大学附属第一医院胃肠外科中心确诊并行手术治疗的胃癌患者组织标本8对(包含胃癌组织和癌旁正常组织),并选取2004年1月至2005年12月在同一中心行手术治疗的117例胃癌患者的术后组织标本制成胃癌组织芯片。分析LRFN4在癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库胃癌数据集中的表达情况,应用蛋白质印迹法及实时荧光定量聚合酶链反应检测LRFN4在8对新鲜胃癌组织及癌旁正常组织中的表达,应用免疫组织化学检测LRFN4在胃癌组织芯片中的表达。分析不同LRFN4表达水平的胃癌患者其临床病理参数的差异。应用Kaplan-Meier法分析不同LRFN4表达水平的胃癌患者的预后情况。应用单因素和多因素Cox回归分析法分析胃癌患者预后的影响因素。结果LRFN4在TCGA数据库胃癌数据集的胃癌组织以及新鲜胃癌组织中呈高表达状态。LRFN4高表达的患者,表现出更大的肿瘤大小以及更为进展的T分期、N分期、M分期和TNM分期(均P<0.05),其预后也较差(P<0.001)。单因素和多因素Cox回归分析提示LRFN4在胃癌组织中的高表达是影响胃癌患者预后的独立危险因素(HR=3.898,95%CI 2.273~6.686,P<0.001)。结论胃癌组织中LRFN4高表达与患者较差的预后相关,可能成为预测胃癌患者预后的生物标志物之一。

微小RNA-6783-3p通过靶向Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白1基因表达抑制胃癌细胞的增殖和迁移

目的探讨微小RNA(microRNA,miR)-6783-3p对胃癌细胞增殖与迁移能力的影响及可能的分子机制。方法分别转染阴性对照序列(对照组)和miR-6783-3p模拟物(试验组)至胃癌BGC823细胞。实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测miR-6783-3p模拟物的转染效率。CCK-8法和划痕愈合试验分别检测胃癌细胞的增殖和迁移能力变化。microRNA.org、DIANA-microT在线工具对miR-6783-3p的靶基因进行预测。双荧光素酶报告基因试验验证miR-6783-3p的靶基因。qRT-PCR和蛋白质印迹法(Western blotting)检测靶基因的表达。结果与对照组相比,转染miR-6783-3p模拟物的BGC823细胞增殖能力明显被抑制(P<0.05)。对照组和试验组BGC823细胞划痕愈合率分别为(63.55±8.28)%、(28.79±6.26)%。与对照组相比,试验组BGC823细胞划痕愈合率明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-6783-3p的靶基因可能是Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白1(FNDC1),双荧光素酶报告基因试验证实miR-6783-3p配合结合FNDC1 mRNA(P<0.01)。与对照组相比,转染miR-6783-3p模拟物的BGC823细胞中FNDC1基因表达明显受到抑制(P<0.01)。结论miR-6783-3p直接结合靶基因FNDC1,抑制胃癌BGC823细胞增殖和迁移能力。

黄芪对致敏大鼠气道壁转化生长因子β_1、Ⅲ型胶原和纤维连接蛋白表达的影响

目的探讨黄芪在致敏大鼠气道重塑中的作用。方法Wistar雄性大鼠24只,随机分为对照组、致敏组和黄芪干预组,每组8只。采用卵蛋白腹腔注射致敏动物,2周后用1%卵蛋白雾化吸入激发。黄芪干预组在每日激发前给予黄芪注射液5g/kg腹腔注射。对照组以生理盐水代替卵蛋白雾化吸入和腹腔注射。分别采用免疫组化和原位杂交法测定大鼠气道壁Ⅲ型胶原、纤维连接蛋白(FN)及上皮细胞TGF-β_1蛋白水平和TGF-β_1mRNA表达水平。结果(1)致敏组大鼠气道壁Ⅲ型胶原、FN表达分别为29．49±1．89、25．98±1．53,与对照组(16．53±1．20、9．37±1．11)比较,差异有显著性(P＜0．01)；黄芪干预组(21．24±1．38、19．57±1．36)与致敏组比较,差异有显著性(P＜0．01),但高于对照组(P＜0．01)。(2)致敏组大鼠气道上皮细胞TGF-β_1蛋白和mRNA表达分别为26．99%±2．90%、24．91%±2．88%,与对照组(12．02%±1．52%、5．45%±1．18%)比较,差异有显著性(P＜0．01)；黄芪干预组(19．89%±2．06%、12．33%±1．34%)与致敏组比较,差异有显著性(P＜0．01),但高于对照组(P＜0．01)。结论黄芪可能通过抑制哮喘气道炎症,部分下调TGF-β_1mRNA及其蛋白的表达,抑制ECM中Ⅲ型胶原、FN的过度沉积,延缓哮喘气道重塑的进程。

维生素E对肝纤维化大鼠金属蛋白酶组织抑制因子-2、Ⅲ型胶原及纤维连接蛋白表达的影响

目的 研究维生素E(VE)防治肝纤维化作用及可能存在的机制。方法 以四氯化碳制备大鼠肝纤维化模型 ,用VE乳剂 (10 0mg/kg ,2次 /周 )静脉注射 ,连续 10周。免疫组织化学检测肝组织Ⅲ型胶原、纤维连接蛋白 (FN)沉积 ;原位杂交检测肝内金属蛋白酶组织抑制因子 2 (TIMP 2 )及α1(Ⅲ )前胶原mRNA表达。结果 治疗组大鼠肝内Ⅲ型胶原蛋白及FN形成较对照组减少 ;α1(Ⅲ )前胶原及TIMP 2mRNA表达降低 ,经图像分析 ,与对照组差异有显著性 (P<0 .0 5 )。结论 VE治疗可下调肝纤维化大鼠TIMP 2基因表达 ,减少细胞外基质沉积 。

蚕蚀性角膜溃疡中Ⅲ型胶原层粘连蛋白与纤维连接蛋白的表达

目的 比较蚕蚀性角膜溃疡与正常角膜中Ⅲ型胶原、层粘连蛋白及纤维连接蛋白的定位与含量。方法 应用间接免疫荧光技术检测蚕蚀性角膜溃疡与正常角膜中Ⅲ型胶原、层粘连蛋白、纤维连接蛋白的分布。阳性结果应用图像分析系统进行定量分析。结果 Ⅲ型胶原在正常角膜中无表达 ,在蚕蚀性角膜溃疡中分布在基质溃疡处。层粘连蛋白在正常角膜基底膜微量表达 ,在蚕蚀性角膜溃疡基底膜和Bowman’s膜表达增多。纤维连接蛋白在正常角膜基底膜呈连续线状分布 ,在蚕蚀性角膜溃疡上皮层及基质溃疡处有表达 ,而在基底膜未见表达。结论 蚕蚀性角膜溃疡上皮基底膜在其发病机制中可能发挥作用 ,需要进一步深入研究。

偏侧咀嚼对Ⅲ型胶原和纤维连接蛋白的表达

目的 研究Ⅲ型胶原和纤维连接蛋白基因在偏侧咀嚼大鼠磨牙牙周膜表达中的变化 ,探讨偏侧咀嚼对牙周膜改建的分子生物学机理。方法 用 8周龄雄性SD大鼠建立偏侧咀嚼动物模型 ,采用原位杂交的方法检测在偏侧咀嚼 12h及 3、7、14、30d后牙周膜细胞中Ⅲ型胶原和纤维连接蛋白mRNAs表达的动态变化。结果 偏侧咀嚼后的 12h到第 7dⅢ型胶原和纤维连接蛋白mRNAs在牙周膜细胞中的表达主要集中于牙侧和骨侧 ,7d时最明显 ,但在牙周膜中表达的整体强度与正常组没有显著差别 ,14d后二者表达分布与正常组相似。结论 偏侧咀嚼时Ⅲ型胶原和纤维连接蛋白mRNAs表达的分布发生变化 ,这种变化可能与偏侧咀嚼时力增加有关 ,表明纤维连接蛋白和Ⅲ型胶原在偏侧咀嚼时牙周膜组织改建过程中起重要作用。

干扰素α-2b对胰腺纤维化大鼠Ⅲ型胶原和纤维连接蛋白表达的影响

目的观察干扰素α-2b对大鼠实验性胰腺纤维化Ⅲ型胶原和纤维连接蛋白合成的影响。方法采用每周2次腹腔内注射二乙基二硫代氨基甲酸盐（diethyldithio carbamate,DDC）1000mg/kg体重诱导健康雄性Wistar大鼠胰腺纤维化。干扰素α-2b治疗组（n=10）在造模日起每天1次皮下注射干扰素α-2b100000U,连续6周。对照组（n=10）注射等容积生理盐水。6周末处死大鼠,取新鲜胰腺组织,10%甲醛溶液固定,常规石蜡包埋切片,观察病理改变。免疫组织化学染色检测Ⅲ型胶原和纤维连接蛋白。结果干扰素α-2b治疗组腺泡细胞炎症反应和纤维化程度较对照组减轻;干扰素α-2b治疗组Ⅲ型胶原和纤维连接蛋白量分别为88.14±42.58和2.37±1.56,较对照组的59.95±25.50和1.50±0.31显著减少（P〈0.05）。结论干扰素α-2b可能通过减少胰腺组织内Ⅲ型胶原和纤维连接蛋白的合成起到治疗胰腺纤维化的作用。

纤维连接蛋白FNDC10通过增强STAT3活化促进乳腺癌细胞的恶性生物学行为

目的:研究纤维连接蛋白Ⅲ型域包含蛋白10(FNDC10)对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭等能力的影响,并初步探讨其作用机制。方法:采用TCGA数据库分析FNDC10在乳腺癌组织中表达情况。通过qPCR检测FNDC10在正常永生化乳腺细胞(MCF-10A)和乳腺癌细胞(MCF-7、MDA-MB-231、BT549、MDA-MB-468、HCC1806和HCC1937)中的表达水平。选取MCF-7和MDA-MB-231细胞转染FNDC10 siRNA或对照siRNA后进行功能实验:CCK-8实验检测FNDC10对乳腺癌细胞增殖的影响,集落形成实验检测对乳腺癌细胞集落形成能力的影响,Transwell实验检测其对乳腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响,WB法检测转移相关分子和细胞信号通路在蛋白水平的变化。结果:FNDC10在乳腺癌组织中的表达水平明显高于正常组织(P<0.01),FNDC10在乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231内表达水平高于正常乳腺细胞(P<0.01或P<0.05)。敲低FNDC10表达抑制了乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.01或P<0.05)。机制研究表明,干扰FNDC10表达抑制了乳腺癌细胞中STAT3的活化(P<0.01或P<0.05),促进了细胞EMT标志物E-cadherin的表达(P<0.05),抑制了EMT进程。结论:FNDC10通过增强STAT3信号通路活化促进乳腺癌细胞增殖和EMT进程,从而促进乳腺癌恶性进展。

动脉粥样硬化病变中纤维连接蛋白定位的研究

应用免疫组织化学和免疫电镜技术,研究人体动脉粥样硬化病灶纤维连接蛋白的分布、形态特征和来源,结果发现在脂纹、胶样病变及早期斑块的内膜上有大量纤维连接蛋白沉积。纤维连接蛋白主要由内膜平滑肌细胞合成,平滑肌细胞表达纤维连接蛋白的能力也可能是反映其表型改变的一个标志。随着斑块的成熟、纤维化,纤维连接蛋白则减少。动脉粥样硬化斑块Ⅲ型前胶原肽的分布与纤维连接蛋白具有一致性。

早期动脉瘤模型大鼠形成过程中血管壁基质结构蛋白的表达

背景:基质蛋白是构成血管壁的必不可少的重要成分,为血管壁的完整性和血管壁细胞发挥生理功能提供了必要的框架,并参与对细胞和平滑肌的调控。目的:构建早期动脉瘤模型大鼠评价基质结构蛋白在形成过程中的表达差异性。方法:将28只健康雄性SD大鼠随机分为2组:对照组(n=8)和模型组(n=20)。模型组大鼠以结扎左侧颈总动脉和右侧肾肾动脉致高血压方法建立脑动脉瘤模型;对照组大鼠仅暴露左侧颈动脉分叉和双侧颈动脉。模型组大鼠分别于造模后15,30 d处死,取大鼠右侧大脑前动脉和嗅动脉的分叉处部分组织进行免疫组化染色,分析纤维连接蛋白、α-平滑肌肌动蛋白和Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果与结论:与对照组相比,造模后30 d时模型组大鼠右侧大脑前动脉和嗅动脉的分叉处部分中纤维连接蛋白表达水平差异无显著性意义(P>0.05),而Ⅲ型胶原和α-平滑肌肌动蛋白表达明显减少(P<0.05)。提示大鼠早期脑动脉瘤形成过程中的结构蛋白表达存在差异性并发生动态变化,血管壁基质结构蛋白降解是动脉瘤形成主要机制之一。

凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1下调对糖尿病小鼠肝损伤及Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白5的影响研究

目的探讨凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)下调对糖尿病小鼠肝损伤及Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白5(FNDC5)的影响。方法30只7~8周龄的雄性db/db小鼠进行糖尿病造模,按照随机数字表法将其分为3组:db/db LOX-1敲减[AAV(腺相关病毒)-shLOX-1]组、db/db空载体(AAV-shCON)组和空白对照(db/db)组,每组10只;10只同龄的雄性db/m小鼠为正常对照(NC)组。采用HE染色观察小鼠肝脏的病理形态,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blotting法检测小鼠肝脏中LOX-1、白细胞介素-6(IL-6)及FNDC5的mRNA和蛋白表达水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、甘油三酯(TG)及FNDC5的水平。采用单因素方差分析进行组间比较。结果HE染色显示,与NC组相比,AAV-shLOX-1组、AAV-shCON组和db/db组小鼠肝小叶结构紊乱,肝细胞内可见大量的空泡样脂滴,呈显著的脂肪变性;与AAV-shCON组和db/db组相比,AAV-shLOX-1组小鼠肝细胞中脂滴数量明显减少,脂肪变性明显减轻。qRT-PCR和Western blotting结果显示,与NC组相比,AAV-shLOX-1组、AAV-shCON组和db/db组小鼠肝脏中LOX-1、IL-6的mRNA和蛋白表达均升高,FNDC5的mRNA和蛋白表达均降低;与AAV-shLOX-1组相比,AAV-shCON组和db/db组小鼠肝脏中LOX-1、IL-6的mRNA和蛋白表达均升高,FNDC5的mRNA和蛋白表达均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与NC组相比,AAV-shLOX-1组、AAV-shCON组和db/db组小鼠血清中ALT、TG均升高,FNDC5降低;与AAV-shLOX-1组相比,AAV-shCON组和db/db组小鼠血清中ALT、TG均升高,FNDC5均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论LOX-1参与调控了db/db小鼠肝损伤和FNDC5的变化,LOX-1下调可减轻db/db小鼠肝脏的脂肪变性及炎症反应,提高db/db小鼠FNDC5的组织和血清水平,糖尿病小鼠的肝损伤可能与LOX-1/FNDC5的调控有关。

Ⅲ型纤维连接蛋白结构域蛋白3B在胰腺癌组织的表达及其临床意义

目的探讨Ⅲ型纤维连接蛋白结构域蛋白3B(FNDC3B)在胰腺癌中的表达差异与临床病理特征和预后的关系,并探讨其可能发生相互作用的蛋白网络及其在胰腺癌发生发展中调控的可能信号通路。方法采用蛋白质印迹法(Western blot)检测FNDC3B在胰腺癌组织及癌旁组织中的蛋白表达差异,用GEPIA分析FNDC3B在胰腺癌组织及正常胰腺组织中的mRNA表达差异。在癌症基因组图谱(TCGA)数据库获取胰腺癌病例资料,利用SPSS 25.0分析FNDC3B表达差异与胰腺癌患者临床病理特征和预后的关系。采用Kaplan-Meier法绘制胰腺癌患者生存曲线。STRING数据库分析与FNDC3B相互作用的蛋白网络。基因集富集分析(GSEA)预测FNDC3B在胰腺癌中调控的可能信号通路。计数资料比较采用χ^(2)检验,单因素及多因素分析采用COX回归分析,组间比较采用t检验。结果 Western blot检测结果显示FNDC3B在胰腺癌组织中的蛋白表达量高于癌旁组织(1.038±0.103比0.341±0.027,t=22.807,P<0.01)。GEPIA数据库分析结果显示FNDC3B在胰腺癌组织中的mRNA表达量高于正常胰腺组织(P均<0.05)。FNDC3B基因表达水平与胰腺癌患者的年龄(χ^(2)=12.115,P<0.01)、病理分级(χ^(2)=11.490,P<0.01)和N分期(χ^(2)=3.962,P<0.05)密切相关,与性别、病理分期、T分期、M分期无明显相关(P均>0.05)。单因素Cox分析结果显示N分期[风险比(HR)=2.001,95%可信区间(CI)=1.193~3.354,P<0.01]和FNDC3B mRNA表达水平(HR=1.595,95%CI=1.051~2.421,P<0.05)对胰腺癌患者的预后存在显著影响。多因素Cox分析结果显示FNDC3B mRNA表达水平(HR=1.565,95%CI=1.011~2.423,P<0.05)是胰腺癌患者预后的独立危险因素。FNDC3B高表达组胰腺癌患者的生存时间显著低于FNDC3B低表达组患者(χ^(2)=4.898,P<0.05,中位生存时间为592 d比634 d)。STRING数据库分析结果表明,与FNDC3B相互作用蛋白有FAM46A(分值=0.687)、ZNF469(分值=0.672)、B3GNT7(分值=0.647)等。GSEA研究结果显示,FNDC3B mRNA高表达样本富集到TGF-β、WNT、NOTCH、JAK-STAT、mTOR等信号通路相关基因集(P均<0.05)。当FNDC3B基因表达上调时,上述通路被激活。结论 FNDC3B在胰腺癌中高表达,且与胰腺癌不良预后密切相关,可能通过调节FAM46A等相互作用蛋白及激活TGF-β等信号通路在胰腺癌发生发展中发挥促癌作用。

FNDC1蛋白在食管癌组织中的表达及干扰FNDC1表达对食管癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白1(FNDC1)对食管癌发生、发展的影响及在紫杉醇(PTX)化疗中的应用前景。方法:采用免疫组化法检测食管癌及其癌旁正常组织(n=53)中FNDC1蛋白的表达。将食管癌TE13和KYSE180细胞各分为4组,空白组不做任何处理,Lipofectamine3000组、阴性对照组、FNDC1 siRNA3组分别转染Lipofectamine3000、阴性对照siRNA和FNDC1 siRNA3。48 h后,CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭和转移能力。将TE13和KYSE180细胞各分为6组,分别转染阴性对照siRNA或FNDC1 siRNA3,48 h后再用不同浓度PTX(0、1.22和12.2μmol/L)处理24 h,CCK-8法检测细胞增殖能力。结果:①食管癌和癌旁正常组织中FNDC1蛋白阳性表达率分别为64.2%和24.5%,癌组织中的阳性率高于癌旁正常组织(P<0.05),且深层浸润或伴有淋巴结转移的食管癌组织中FNDC1阳性表达率高于浅层浸润或无淋巴结转移者(P<0.05)。②转染FNDC1 siRNA3的TE13和KYSE180细胞增殖能力、侵袭能力和转移能力均显著降低(P<0.05)。③FNDC1 siRNA3和PTX均可抑制TE13和KYSE180细胞的增殖,两者有协同增效的作用(P<0.05)。结论:FNDC1有望成为食管癌临床生物治疗的有效靶点。

持续快速心房起搏对犬肺静脉及心房组织连接蛋白43和Ⅲ型胶原的影响

目的 探讨持续快速心房起搏对犬肺静脉和心房组织连接蛋白 43(Cx43)和Ⅲ型胶原的影响。方法 16只杂种犬,随机分为持续快速心房起搏组(8只)和正常对照组 (8只 ),前者以 400次 /min的频率持续起搏 10周,建立心房颤动(房颤)动物模型。分别取两组犬的左上肺静脉、左房游离壁和右心耳等部位的心肌组织进行Cx43的免疫荧光半定量分析和Ⅲ型胶原纤维定量分析。结果10周后快速心房起搏组所有犬均可诱发出持续性房颤。快速心房起搏组犬肺静脉、左房游离壁和右心耳部位的Cx43水平显著高于正常对照组犬各相应的部位 (肺静脉: 3370 .91±275. 11与1405 .82±90. 38, P<0. 05;左房游离壁: 2448. 68±272 .10与 1467. 12±147 .93,P<0. 05;右心耳: 2331 .96±199 .61与 1288. 27±216 .22, P<0 .05)。快速心房起搏组犬肺静脉Cx43的水平显著高于左心房游离壁和右心耳(P<0. 05),而左心房和右心耳部位的Cx43水平差异无统计学意义 (P>0. 05)。持续快速心房起搏组犬肺静脉、左房游离壁和右心耳等部位的Ⅲ型胶原含量显著高于正常对照组犬各相应部位(肺静脉: 3301 97±309 70与 1404 56±178 02, P<0 05;左房游离壁: 2477 86±190. 43与1479. 20±187 .17, P<0 .05;右心耳: 2045 .92±139 .43与 1417. 07±139. 43,P<0 .05 )

蝉花菌丝对TGF-β_1作用下的肾小管上皮细胞α-SMA等蛋白及mRNA表达的影响

目的:探讨蝉花菌丝对TGF-β1作用下肾小管上皮细胞α-SMA、FN、LN、ColⅢ蛋白及mRNA表达的影响。方法:以TGF-β1剌激下的肾小管上皮细胞为研究对象,采用血清药理学研究方法和免疫组化、RT-PCR检测技术,观察空白对照组、TGF-β1对照组、冬虫夏草组、蝉花高剂量组、蝉花中剂量组和蝉花低剂量组的α-SMA、FN、LN、ColⅢ蛋白及mR-NA表达,采用SPSS11.5统计软件统计分析。结果:TGF-β1剌激下的肾小管上皮细胞α-SMA、FN、LN、ColⅢ蛋白及mRNA的表达与正常组比较明显增加(P<0.01);蝉花大、中、小剂量组均能下调肾小管上皮细胞对α-SMA、LN、FN、ColⅢ蛋白及mRNA的表达,与TGF-β1对照组比较差异有统计学意义(P<0.05～0.01),并且大剂量的蝉花菌丝组优于虫草菌丝组(P<0.05);不同剂量的蝉花菌丝组存在量效依赖关系。结论:本研究表明蝉花菌丝通过下调TGF-β1刺激下的肾小管上皮细胞对α-SMA、LN、FN、ColⅢ蛋白及mRNA的异常表达而发挥抗肾间质纤维化的药理作用。

TGF—β1，VEGF抗体等与2型糖尿病肾病患者并发高血压肾间质纤维化指标变化的相关性研究

目的探讨转化生长因子（TGF-β1）、血管内皮生长因子（VEGF）抗体、肿瘤坏死因子（TNF—α）、透明质酸（HA）、纤维连接蛋白（FN）、层黏连蛋白（LN）、Ⅳ型胶原（CⅣ）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）在2型糖尿病肾病患者并发高血压肾间质纤维化的发病机理及病程进展中表达的相关性。方法选择经诊断为2型糖尿病肾病并发高血压患者146例；同时选择40例健康正常人作对照组。应用酶联免疫分析法（ELISA）对TGF—β1，VEGF抗体，TNF—α进行检测，用化学发光分析法对HA，FN，LN，CⅣ，PCⅢ进行检测。结果2型糖尿病肾病并发高血压肾间质纤维化患者的TGF—β1，VEGF，VEGF抗体，TNF—α，FN，LN，CⅣ，PCⅢ表达显著上调（P〈0．01），较正常对照组差异有统计学显著性意义（P〈0．01），且与病情的进展呈正相关；而HA表达明显下调，较正常对照组差异有统计学显著性意义（P〈0．01），且与病情的进程呈负相关。结论生长因子（PEDF）是有效的血管生成抑制剂，对保持正常组织透明无血管的状态有重要作用，TGF-β1是促进纤维化的重要细胞因子，调节肌成纤维细胞分化和胶原合成，在肾纤维化发生发展中起着重要的作用。而VEGF是血管和淋巴内皮细胞的生长和分化及正常和异常血管新生的重要的调节因子，在生理和病理性血管新生中起重要作用。三者同时表达异常，可能提示肾间质纤维化患者免疫病理机理中的细胞活化模式，对肾间质纤维化患者的免疫机制和指导治疗有指导意义。

子宫内膜癌组织的FNDC10水平及临床意义

目的探讨子宫内膜癌(EC)组织的Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白10(FNDC10)水平及临床意义。方法采用GEPIA分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库中EC组织的FNDC10水平,实时定量PCR(QPCR)检测97例EC组织、67例不典型增生子宫内膜组织和42例正常子宫内膜组织的FNDC10水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线以评估组织FNDC10水平诊断EC的效能和最佳阈值,进一步分析FNDC10水平与EC临床病理特征的关系,通过Kaplan-Meier Plotter数据库在线分析FNDC10水平与EC预后的关系。结果GEPIA在线分析显示,174例EC组织的FNDC10水平高于13例正常组织(P<0.05);QPCR结果显示,97例EC组织、67例不典型增生子宫内膜组织和42例正常子宫内膜组织的FNDC10水平依次为2.788±1.253、1.874±0.759和1.041±0.541,EC组织的FNDC10水平高于其余子宫内膜组织,而不典型增生子宫内膜组织的FNDC10水平也高于正常子宫内膜组织,以上差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析显示,组织FNDC10水平诊断EC的曲线下面积为0.900(95%CI:0.850~0.951,P<0.05),当以1.911为最佳诊断阈值时对应的约登指数最大,敏感度和特异度分别为73.20%和97.62%。FNDC10水平与年龄和病理类型无关(P>0.05),而与组织学分级、FIGO分期、肌层浸润深度和淋巴结转移有关(P<0.05)。Kaplan-Meier Plotter在线分析显示EC组织FNDC10水平与总生存期(OS)有关,其中高水平的中位OS为36.03个月,短于低水平的103.73个月(HR=1.98,95%CI:1.31~3.00)。结论EC组织的FNDC10水平升高且促进了该恶性肿瘤的病情进展,与预后有关,其水平有助于判断EC的组织学分级、FIGO分期、肌层浸润深度和淋巴结转移情况,在EC诊治和预后判断上有重要价值。