运用原位末端标记和ICM—DNA定量检测重型肝炎中Ⅲ型细胞死亡

目的 探索Ⅲ型细胞死亡在重型肝炎中生物学特性和形态学特征及其发病中的意义。 方法用ICM-末端标记(ISEL)、ICM-DNA定量并结合形态学方法,观察17例重型肝炎中细胞死亡。 结果 ①Ⅲ型细胞的ISEL标记阳性,在急性和亚急性重型肝炎中的阳性率为(15±7)个/hpf,高于I型细胞的(5±3)个/hpr(P<0.05),而且无核周空晕,无凋亡小体形成,多分布于大片或亚大片坏死区和坏死边缘区,形态上与Ⅱ型细胞有过渡。②原位DNA定量I型、Ⅲ型细胞中亚2C细胞的百分率分别65％和46％,高于残存肝细胞的11％,(P<0.01～0.05),I型和Ⅱ型细胞中的亚2C分别为65％和29％,也存在差异(P<0.05);I型和Ⅲ型细胞核面积分别为22.09和25.11μm^2,均低于残存肝细胞的59.91μm^2(P<0.05)。③光镜下形态学观察表明:Ⅲ型细胞核染色质边聚,细胞体积缩小等有I型细胞特征,胞浆丰富,胞膜边界不清,又有Ⅱ型细胞特征。结论 Ⅲ型细胞死亡与凋亡和坏死相关,是在重型肝炎坏死区中出现的一种特殊类型的细胞死亡。

细胞程序性死亡通路的研究进展

细胞程序性死亡(programmed cell death,PCD)一直被看做是细胞凋亡(apoptosis)。随着细胞生物学研究的深入,新的细胞死亡途径逐渐被揭示出来,如胀亡、自噬、副凋亡等。这些通路有些是caspase依赖的,有些不依赖于caspase途径。在细胞程序性死亡过程中,各种通路不是单独起作用的,而是相互交联的,有彼此重叠的机制出现。目前,Clarke形态学分类法是得到大多数学者认可的细胞程序性死亡的分类方式。按照该分类法,可将PCD分为3大类,即:Ⅰ型细胞程序性死亡、Ⅱ型细胞程序性死亡和Ⅲ型细胞程序性死亡。

运用原位末端标记技术检测大鼠缺氧缺血性脑损伤中III型细胞死亡

目的 探讨新生大鼠脑缺氧缺血 (HI)后迟发性神经元死亡的形式。方法 建立新生大鼠脑HI损伤标准动物模型 ,运用HE染色光镜观察及原位末端标记 (ISEL)技术对HI后不同时间点实验侧大鼠大脑皮质、海马回死亡细胞进行观察与比较。结果 HI迟发性脑损伤中 ,存在一种既不同于细胞凋亡又有别于细胞坏死的一种特殊的细胞死亡———III型细胞死亡。光镜下 ,III型细胞既表现为核固缩、核染色质边聚、细胞体积缩小等I型 (凋亡 )细胞的特征 ,又呈现为胞浆丰富、胞膜完整性丧失等Ⅱ型 (坏死 )细胞的特征。ISEL检测III型细胞无核周空晕、无凋亡小体形成。I型细胞在脑HI后6h开始明显增多 ,平均为 (2 1.3± 3.5 ) / 10个高倍视野 (10hpf) ;2 4h达高峰 ,为 (6 3.7± 3.2 ) / 10hpf,与对照组比较差异有显著意义 (P <0 .0 0 1)。脑HI后 2 4h可检测到III型细胞 ,平均为 (5 0 .6± 6 .3) / 10hpf;48h阳性率最高 ,为 (75 .6± 10 .2 ) / 10hpf,明显高于I型细胞 [(42 .3± 4.5 ) / 10hpf,P <0 .0 1]。III型细胞主要分布在坏死区或其周围。结论 新生大鼠HI迟发性神经元死亡中 ,不仅存在细胞坏死和细胞凋亡 ,而且还存在III型细胞死亡。III型细胞死亡是与凋亡和坏死相关的一种特殊类型的细胞死亡。