免疫缺陷病相关疫苗衍生性脊髓灰质炎4例病例系列报告

背景目前在我国关于免疫缺陷病相关疫苗衍生性脊髓灰质炎(iVAPP)的病例报道少见。目的总结iVAPP的临床表现、免疫学指标及转归。设计病例系列报告。方法纳入2018年5月至2023年6月在复旦大学附属儿科医院临床免疫科住院的iVAPP患儿,截取患儿的人口学资料、接种脊髓灰质炎病毒(PV)疫苗的相关情况、临床表现、发病时免疫相关指标、病原学检测结果、治疗、转归和肌力恢复情况。主要结局指标临床表现和免疫相关指标。结果4例iVAPP患儿均为男孩,发病年龄为7~12月龄,处于口服脊髓灰质炎病毒疫苗(OPV)4~7个月后;首剂均在3月龄接种OPV,例1、2、4分别接种OPV 1、2、3剂,例3接种OPV 2剂、灭活脊髓灰质炎疫苗(IPV)1剂。2例为联合免疫缺陷病相关疫苗衍生性脊髓灰质炎(CID-VAPP),因“肺部感染、腋下淋巴结破溃”入院,T、B细胞数量均严重降低,呈现多部位肢体瘫痪,存在多侧肢体的肌力减退,积极治疗后未发生缓解;感染累及部位多,感染病原种类多,均发生卡介苗相关结核分枝杆菌感染、重症肺炎,在1周岁内因严重感染死亡。2例为原发性抗体缺陷病(PAD)-VAPP,因“肢体活动障碍”入院,仅B细胞数量降低和抗体分泌障碍,肢体瘫痪症状可累及一侧或双侧,经治疗后肌力可恢复正常,且感染症状轻,预后良好。结论CID和PAD患儿口服OPV均有可能导致iVAPP,患儿的预后主要取决于原发病。

一株基因Ⅲ型禽呼肠孤病毒变异株的分离及其灭活疫苗免疫原性初步评价

为了解禽呼肠孤病毒(Avian reovirus,ARV)变异株在我国的流行情况及其生物学特性和致病特点,试验采集黑龙江省某企业送检的病鸡关节组织进行病毒分离,通过RT-PCR、序列分析及常见禽类外源病毒检测鉴定,进一步通过对体外复制能力、致病性、血清交叉中和能力及灭活疫苗免疫抗体水平检测,分析其致病性、抗原性和免疫原性。结果显示:成功从病鸡关节组织中分离到1株ARV,命名为ARV-HLJ21-1690401,该分离株位于基因Ⅲ型分支,与基因Ⅲ型参考株ISR5233和42563-4-2005遗传距离较近,氨基酸序列相似性为83.4%和81.7%,而与其他基因型分离株遗传距离较远;该分离株在LMH细胞上增殖良好,对鸡胚和SPF鸡均具有明显的致病性,可引起接种鸡胚90%死亡,接种6周龄SPF鸡可引起100%发病;该分离株具有良好的免疫原性,其制备的灭活疫苗免疫SPF鸡可诱导产生较好的抗体水平。综上所述,研究成功分离到一株具有致病性和良好免疫原性的基因Ⅲ型ARV变异株,为了解我国ARV变异株的流行及遗传进化特征提供了重要理论依据。

口服脊髓灰质炎疫苗免疫儿童对四川Ⅰ型脊髓灰质炎病毒的抗体水平

目的：为了解我国口服脊髓灰质炎（以下简称脊灰）疫苗（OPV）按现行免疫程序接种后，被免疫儿童对四川1型脊灰病毒的免疫水平，以指导预防、控制乃至消灭脊灰策略的制定。方法：应用微量中和试验方法检测血清中对三种毒株的中和抗体滴度。结果：儿童基础兔疫后对三种毒株Sabinl、Mahoney、四川株的阳性率为100％，免后GMT分别为1196．8、317．9、62．9。结论：免疫儿童对四川Ⅰ型脊灰病毒抗体的GMT较SabinⅠ型和Mahoney低．但OPV能诱生抗四川株的抗体，OPV对四川Ⅰ型脊灰病毒是有效的。

广东省1997～1999年AFP病例中脊髓灰质炎病毒Ⅱ型疫苗衍生株分子生物学特征及致病性分析

目的 了解广东省 1997～ 1999年急性弛缓性麻痹 (AFP)病例中脊髓灰质炎 (脊灰 )Ⅱ型疫苗衍生株病毒的分子生物学特征及致病性。方法 从脊灰病毒感染的细胞悬液中提取总RNA ,将RT PCR扩增的产物进行RFLP分析及采用Sanger末端双脱氧终止法进行序列测定 ,并结合病例流行病学资料进行分析。结果 1997～ 1999年共从AFP病例中分离到 2 5例脊灰Ⅱ型疫苗株病毒 ,占分离到脊灰病毒病例总数的 37.9% ,其中S2×S3型重组病毒 18例 ,占 72 % ,S2×S1型 1例 ,非重组病毒 6例。S2×S3型重组病毒致残留麻痹 8例 ,占 4 4 .4 %。未服苗儿童感染S2×S3重组病毒致残留麻痹率(6 0 0 % )高于非重组病毒的残留麻痹率 (33 3% )。结论 Ⅱ型疫苗株脊灰病毒普遍存在基因重组现象 ,以S2×S3重组病毒多见 。

Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗与不同剂型Ⅰ型+Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗序贯接种的免疫原性和安全性观察

[目的]研究Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(sIPV)与不同剂型Ⅰ型+Ⅲ型脊髓灰质炎减毒活疫苗(bOPV)序贯接种的免疫原性和安全性。[方法]选择2016年3月—2018年3月某院≥2月龄的婴儿作为观察对象,通过随机抽签法将其均分成糖丸剂型组与液体剂型组。两组均接受sIPV与bOPV序贯接种,其中液体剂型组使用液体剂型bOPV,糖丸剂型组则使用糖丸剂型bOPV。均严格根据0 d、28 d、56 d的免疫程序,前后共进行3剂接种。分别比较两组在免疫原性和安全性方面的差异。[结果]两组完成全程脊髓灰质炎疫苗接种者在脊髓灰质炎病毒Ⅰ型、脊髓灰质炎病毒Ⅲ型免疫后阳转人数占比方面比较差异无统计学意义(P>0.05);糖丸剂型组与液体剂型组完成全程脊髓灰质炎疫苗接种者在脊髓灰质炎病毒Ⅱ型免疫后阳转人数占比方面比较,前者较低(P<0.05)。糖丸剂型组与液体剂型组在脊髓灰质炎病毒Ⅰ型、脊髓灰质炎病毒Ⅲ型完成全程脊髓灰质炎疫苗接种者免疫后抗体GMT水平方面比较,前者较低(P<0.05);糖丸剂型组与液体剂型组在脊髓灰质炎病毒Ⅱ型完成全程脊髓灰质炎疫苗接种者免疫后抗体GMT水平方面比较,前者较高(P<0.05)。糖丸剂型组与液体剂型组完成全程免疫者接种后30 min、接种后14 d内、接种后28 d内、接种28 d后的不良事件发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]sIPV与不同剂型bOPV序贯接种均有较好的免疫原性以及安全性。

湛江市1994～2003年检出脊髓灰质炎疫苗株病毒的急性弛缓性麻痹病例流行病学分析

目的 了解湛江市检出脊髓灰质炎 (脊灰 )疫苗株病毒的急性弛缓性麻痹 (AFP)病例的流行病学特征及疫苗相关麻痹型脊灰 (VAPP)病例的发生情况。方法 对 1994～ 2 0 0 3年检出脊灰疫苗株病毒的AFP病例进行分析。结果 1994～ 2 0 0 3年共报告AFP 199例 ,其中检出脊灰疫苗株病毒16例 ,平均检出率为 8 0 4 %。对检出脊灰疫苗株的AFP病例分析结果显示 :病例以≤ 1岁儿童为主(14例 ) ,男性多于女性 ;地区分布无明显聚集性 ,发病季节高峰在每年 12～ 2月 ;检出的疫苗株以Ⅱ型病毒为主 (9例 ) ,残留麻痹率较高 ;VAPP发生率为 0 37/ 10 0万 ,服苗VAPP发生率为 0 2 2 / 10 0万 ,首次服苗发生率为 1 87/ 10 0万 ,接触者VAPP发生率为 0 15 / 10 0万。结论 脊灰疫苗株病毒可能在湛江市外环境发生循环 ,今后必须提高脊灰疫苗免疫覆盖率 ,以阻止脊灰疫苗株病毒的循环。

脊髓灰质炎病毒减毒株中Ⅲ_2株的性状分析

脊葫灰质炎减毒活疫苗中皿２减毒株是我国已用于人群免疫的疫苗株之一，具有较好的免疫原性及稳定的神经毒力安全性。为探讨中ｍ２株同ｓａｂｉｎ皿型株的相互关系，应用ＲＴ—ＰｃＲ法，克隆了中Ⅲ２株７９４个核苦酸序列。通过核苦酸序列分析、体外特征实验、猴体神经毒力实验发现，中Ⅲ２：株同Ｓａｂｉｎ皿型在核苦酸序列上存在差异。同时，中Ⅲ２株的猴体神经毒力明显低于ＳａｂｉｎⅢ型。结果提示，中ｍ２株同ｓａｂｉｎ皿型之间在基因结构及生物学性状上存在差异。

4岁儿童对四川Ⅰ型脊髓灰质炎野病毒的免疫水平观察

目的 了解已口服脊髓灰质炎疫苗 (OPV)基础免疫的儿童在加强免疫前后对四川Ⅰ型脊灰野病毒的免疫水平 ,指导预防、控制乃至消灭脊灰策略的制定。方法 微量中和试验。结果 80名 4岁儿童加强免疫前对Sabin 1、Ma honey、四川株的阳性率分别为 98 8%、 93 8%、 73 8% ,GMT分别为 2 5 6 0、 49 8、 9 9,免后的阴性率分别为 98 8%、98 8%、 82 5 % ,GMT分别为 415 9、 177 9、 2 5 6。结论 4岁儿童加强免疫后的阳性率和GMT均有明显的提高 ,加强服苗对四川Ⅰ型脊灰病毒是有效的。因此 ,强化免疫对预防、控制、消灭脊灰是行之有效且十分必要的手段。

MAPREC与MNVT评价Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎病毒神经毒力的比较

目的用PCR扩增及限制性酶切分析突变技术(MAPREC)和猴体神经毒力试验(MNVT)评价同一批Ⅲ型Sabin株脊灰病毒神经毒力的结果差异。方法采用MAPREC技术,检测Ⅲ型Sabin株脊灰病毒神经毒力关键位点472位点突变率;采用MNVT病理切片分析,评价Ⅲ型Sabin株脊灰病毒神经毒力。结果 MAPREC检测待测样品核酸472位点突变率均值为0.324%,低于高突变参考品的0.621%。MNVT切片结果分析表明,xtest–xref=0.169,小于C1。对同一批样品,MAPREC与MNVT分析结果一致。结论在Ⅲ型Sabin株脊灰病毒神经毒力检测方面,操作简单,试验周期短的MAPREC技术可作为金标准MNVT的有益补充。

52株脊髓灰质炎I型病毒的鉴别分析

脊髓灰质炎(简称脊灰)是由脊灰病毒引起的以肢体麻痹为主要临床特征的急性肠道传染病。实践证明,脊灰疫苗可有效地预防脊灰的发病,从而使该病成为继消灭天花之后有可能被消灭的第二种传染病。然而,随着脊灰发病的控制,与服用青灰减毒活疫苗(OPV)有关的麻痹型脊灰病例(VAPP)将变得愈加突出。

安徽省2023年Ⅰ型疫苗衍生脊髓灰质炎病毒鉴定及其传播风险评估

目的 分析2023年安徽省从1例非急性弛缓性麻痹(AFP)病例中分离到的2株Ⅰ型疫苗衍生脊髓灰质炎病毒(VDPV)的基因型别及特征,探讨其对安徽省维持无脊髓灰质炎状态的影响。方法 从2023年安徽省报告的1例非AFP病例双份粪便标本中分离脊髓灰质炎病毒(PV),用实时荧光定量RT-PCR方法对其进行型内鉴定,通过中和实验获得单型毒株,提取病毒RNA,进行RT-PCR扩增,对VP1区进行核苷酸序列测定和分析。结果 从1例非AFP病例粪便标本中分离出2株Ⅰ+Ⅲ混合型PV,其中Ⅰ型(2023MYKJH 01-1和2023MYKJH 01-2)分别有13和12个核苷酸变异,变异率分别为1.4%和1.3%,鉴定为Ⅰ型VDPV,与近年来我国其他省份监测到的Ⅰ型VDPV处于不同分支,Ⅲ型为疫苗相似株。后续采集的粪便标本未分离到Ⅰ型VDPV。结论 2023年安徽省检出两株Ⅰ型VDPV的非AFP病例未持续排毒,发生Ⅰ型VDPV循环的风险较低。

HIV-I CN54株gagprotease基因嵌合脊髓灰质炎病毒cDNA质粒的构建和表达研究(英文)

目的构建HIV-1CN54株gagprotease基因嵌合脊髓灰质炎病毒cDNA的表达质粒,并鉴定、检测基因及其表达。方法用PCR技术获得人免疫缺陷病毒CN54株的gagprotease基因,并使其两端带上合适的酶切位点,将其定向插入到包含脊髓灰质炎病毒cDNA的表达质粒pSVA14中,替代其部分结构基因,构建HIV基因嵌合缺陷性脊髓灰质炎病毒基因组的表达质粒。经筛选、鉴定后用脂质体转染技术将新构建的质粒转入Hela细胞内,用WesternBlot方法检测目的基因在Hela细胞内的表达。结果PCR技术扩增所得的人免疫缺陷病毒CN54株gagprotease基因经琼脂糖凝胶电泳、DNA测序证实成功获得,未引入突变碱基,筛选、鉴定证明gagprotease基因被正确定向插入到脊髓灰质炎病毒的cDNA序列之中,WesternBlot检测到gagprotease基因正确表达了相关蛋白。结论成功构建了表达人免疫缺陷病毒CN54株gagprotease基因的缺陷性脊髓灰质炎病毒基因组嵌合质粒,为利用脊髓灰质炎病毒作人免疫缺陷病毒基因的表达载体奠定了基础,此研究对开发以脊髓灰质炎病毒为艾滋病的疫苗载体有重要意义。

我国预防儿童肠道病毒感染疫苗的临床研究进展

肠道病毒是单股正链RNA病毒,属于小RNA病毒科肠道病毒属,感染人的肠道病毒主要包括脊髓灰质炎病毒(polioviruse,PV)、柯萨奇病毒(coxsackievirus,CV)、肠道病毒68-71型(enterovirus,EV)、甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)[1]。肠道病毒感染能引起流行性胸膜痛、手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)、疱疹性咽炎、脊髓灰质炎、甲型病毒性肝炎等疾病。在美国,每年肠道病毒导致1000万~3000万人患病,高发于夏季和秋季[2]。肠道病毒是儿童感染的重要病原体,为家庭和社会带来严重的疾病负担。自1949年至今,脊髓灰质炎和甲型病毒性肝炎都是我国儿童肠道病毒感染导致的主要肠道传染病。2008年,我国EV71感染所致的HFMD暴发和流行,是迄今为止亚太地区最严重的一次HFMD流行。这些肠道病毒疾病的暴发和流行给流行地区带来了巨大的社会、经济负担。

世界卫生组织宣称对消除2型脊髓灰质炎取得重大胜利

2015年10月23日，卫生领域专家向世界卫生组织提议，应停止给儿童接种2型脊髓灰质炎疫苗。目前口服疫苗是预防脊髓灰质炎的主要措施，该类病毒株主要有l型、2型和3型。但自1999年以来，世界范围内未再检出2型脊髓灰质炎病毒株。另外，口服疫苗接种者排出的病毒也可能感染未接受疫苗的人群。近期在疫苗低覆盖地区如老挝、乌克兰、马达加斯加及几内亚等地已出现多起与使用疫苗相关感染。

应用中和性单克隆抗体对历年来分离的脊髓灰质炎病毒进行抗原分析

利用脊髓灰质炎三个型中和性单克隆抗体——Ⅰ型 A(1s—7),B(1B—5);Ⅱ型2Mf—7,17C_2;Ⅲ型3s—12,3Sau—1——对我省历年来分离的脊髓灰质炎病毒51株(Ⅰ型14株,Ⅱ型13株,Ⅲ型24株)进行了单克隆抗体研究。14株脊灰Ⅰ型病毒可以分成两类单克隆抗体型:第一类只被 A 类单克隆抗体中和而不被 B 类单克隆抗体中和;第二类两种单克隆抗体都不能中和;13株脊灰Ⅱ型病毒可以分成三类单克隆抗体型:第一类是不被所使用的两种单克隆抗体中和;第二类是只能被单克隆抗体17c_2中和而不被2Mf—7中和;第三类是能被2Mf—7中和而不被17C_2中和;24株脊灰质Ⅲ型病毒,可分成四类单克隆抗体型:第一类所选用的两种单克隆抗体都不能抑制;第二类只被单克隆抗体3S—12抑制而不被单克隆抗体3S—1中和;第三类只被3S—1中和而不被3S—12中和;第四类是同时被两种单克隆抗体中和。

Ⅲ型干扰素减弱作为疫苗载体的水疱性口炎病毒的致病性

水疱性口炎病毒（ VSV）被广泛地用于疫苗载体及瘤细胞溶解剂的研究。但出于对安全性的考虑，大大限制了它在人体中的应用。归属于细胞因子的Ⅲ型λ干扰素（ IFN－λ）家族与IFN－α／β家族有着相同的信号转导路径，所以也能激发相似的抗病毒活性。不过，IFN－λ是通过一种细胞型特异性方式表达的独特的受体－复合物形式实现信号转导的，正是这个原因限制了它只对上皮屏障组织具有活性，尤其是呼吸道和胃肠道的上皮细胞。我们在此项研究中明确了由重组VSV表达的IFN－λ如何影响载体复制、传播及干扰素的免疫原性。