福美双对斑马鱼胚胎Ⅲ型脱碘酶基因表达的影响

福美双是一种二硫代甲氨基甲酸盐类农药,在我国应用较为广泛,但其残留毒性引起广泛重视。试验采用斑马鱼胚胎作为动物模型,探讨了福美双对斑马鱼胚胎的毒性。结果表明福美双导致斑马鱼胚胎孵化率下降,在受精后72 h(72 hpf),对照组的孵化率是100%,1×10-7mol·L-1福美双染毒组的孵化率降至46%,而1×10-6mol·L-1福美双染毒致使孵化率降到0%。III型脱碘酶与斑马鱼的发育和变态息息相关,以上2种浓度的福美双在24 hpf分别增高了III型脱碘酶基因的表达6.71和14.84倍,结果表明福美双具有一定的内分泌搅乱作用,也表明斑马鱼胚胎作为农药安全评价模型的理论可行性。

蛋清内注射三碘甲腺原氨酸对鸭出雏前后生长发育、血清中甲状腺激素水平及肝脏中D1和D3表达的影响

【目的】以金定鸭为研究对象,孵化前向蛋清内注射三碘甲腺原氨酸(triiodothyronine,T3),检测鸭出雏前后体重、胸浅肌重、血清中甲状腺激素(thyroid hormones,THs)水平的变化,分析肝脏中I型脱碘酶(deiodinases I,D1)和Ⅲ型脱碘酶(deiodinasesⅢ,D3)m RNA表达、蛋白水平及酶活性的变化,探究外源性T3对鸭出雏前后生长发育及肝脏中脱碘酶表达的影响。【方法】将200枚金定鸭种蛋随机分为对照组和试验组,在孵化前从蛋的锐端往试验组种蛋蛋清内注射100μL含250 ng T3的生理盐水,对照组注射不含T3的100μL生理盐水,两组种蛋在相同条件下同期孵化。在27胚龄和7日龄时,记录鸭的体重和胸浅肌重,采用放射免疫分析法检测鸭血清中T3和四碘甲腺原氨酸(thyroxine,T4)水平,利用实时荧光定量PCR检测鸭肝脏中D1和D3的m RNA表达,利用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测鸭肝脏中D1和D3蛋白水平及酶活性。【结果】在27胚龄和7日龄时试验组鸭的体重(P=0.035,0.044)和胸浅肌重(P=0.027,0.037)均显著高于对照组;试验组血清中T3和T4水平在27胚龄时与对照组之间差异不显著(P>0.05),而7日龄时均显著低于对照组(P=0.040,0.040);试验组鸭肝脏中脱碘酶m RNA表达量仅D3在7日龄时显著低于对照组(P=0.040);在7日龄时试验组鸭肝脏中D1和D3的蛋白含量和酶活性亦均显著低于对照组(P=0.017,0.045;P=0.013,0.039)。鸭出雏前后的胸浅肌重与血清中T3水平呈强的负线性相关(r=-0.431,P=0.025);血清中T3水平与肝脏中D3的m RNA表达呈极显著正向相关(r=0.778,P=0.005),血清中T4水平与D1和D3的蛋白水平和酶活性均呈正线性相关(r=0.685,P=0.020;r=0.662,P=0.026;r=0.710,P=0.014;r=0.705,P=0.015)。【结论】蛋清内注射T3促进了鸭出雏前后生长发育,同时伴随着出雏后循环中THs水平的降低,肝脏中D1和D3的表达发生下调。

对孕母鼠进行BDE-209染毒对子鼠甲状腺激素的干扰效果

目的:研究孕母鼠进行十溴联苯醚(decabromodiphenyl ether,BDE-209)染毒对子鼠甲状腺激素的干扰效果。方法:随机将怀孕雌性大鼠随机分为四组,即对照组(无BDE-209暴露组)和BDE-209暴露组[5、40、320mg/(kg·d)],每组10只。从怀孕第1d开始,每天进行BDE-209口服灌胃染毒一次,直至出生后子鼠断乳。观察孕母鼠和子鼠的体重变化,检测子鼠血清样本中总四碘甲腺原氨酸(T4)和促甲状腺激素(TSH)水平,并采用实时荧光定量PCR检测子鼠脑组织中Ⅲ型脱碘酶(deiodinase-3,DI-3)基因的表达。结果:与对照组相比,BDE-209暴露组母鼠的妊娠天数、每窝活胎数、出生时子鼠体重和存活率差异无统计学意义(P>0.05))。结论:孕哺期BDE-209染毒降低了子鼠的血清T4浓度,其作用机制可能与子鼠脑组织中DI-3表达抑制有关。