烟草HD-ZIP Ⅳ转录因子NtPDF2基因的克隆及表达分析

为了明确NtPDF2在烟草中的生物学功能及其调控腺毛分化发育的作用机制,同源克隆了烟草NtPDF2基因,并对其序列、基因结构、进化关系以及表达模式进行分析。结果表明:NtPDF2 CDS全长为2 199 bp,编码732个氨基酸残基。烟草PDF2蛋白质序列高度保守,尤其是C端序列,均含有3个保守结构域(Homeobox domain,START domain和SAD domain)和1个保守LZ(Leucine zipper)元件。烟草PDF2基因结构高度保守,均由10个外显子和9个内含子组成。进化分析表明,普通烟草NtPDF2基因是由林烟草ML1基因进化而来。表达分析显示,烟草PDF2基因表达具有明显的时空特异性。干旱、黑暗和磷饥饿胁迫可显著下调NtPDF2基因的表达,而盐胁迫对其没有明显影响;NtPDF2基因的表达在赤霉素(GA)、茉莉酸甲酯(Me JA)、脱落酸(ABA)和打顶处理条件下均显著上调,这暗示烟草NtPDF2基因参与了调控多种非生物胁迫和激素应答过程。

人血小板因子Ⅳ在家蚕杆状病毒表达载体系统中的表达

将人血小板因子Ⅳ (HumanPlateletFactorⅣ ,简称hPF4)基因重组于家蚕杆状病毒转移载体pBacPAK8中 ,获得重组转移载体pBacPAK PF4,并与线性化病毒Bm BacPAK6DNA共转染家蚕培养细胞 ,在细胞内发生同源重组 ,获得重组病毒BacPAK PF4。Southern杂交结果表明重组病毒基因组中含有hPF4基因。重组病毒以MOI=10感染家蚕培养细胞 (2× 10 6个细胞 )和家蚕 5龄幼虫 ,表达产物用体外培养的血管内皮细胞测定其生物活性 ,测得表达量在家蚕培养细胞中第 3天达到最高值为 6 0 88μg/ 2× 10 6个细胞 ;在蚕体内表达第 5天达到最高值 。

人类血小板因子Ⅳ水平与恶性疟原虫感染的关系

目的探讨疟原虫感染与血小板因子Ⅳ(PF4)的关系,为疟疾治疗提供思路。方法采用酶联免疫法(ELISA)检测疟疾组(122例疟疾患者)和对照组(399例正常人)的血清PF4浓度,然后对2组进行PF4均值和PF4阳性率比较。结果疟疾组的PF4水平明显高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);疟疾组中的PF4高水平组和PF4正常水平组之间的恶性疟原虫密度的未存在显著差异。结论人类PF4水平的表达与赤道几内亚疟原虫感染有一定的关系。

Ⅳ型胶原蛋白在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的:通过检测乳腺癌组织中Ⅳ型胶原蛋白的表达情况,初步了解Ⅳ型胶原蛋白与乳腺癌侵袭性之间的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测184例乳腺癌组织中Ⅳ型胶原蛋白的表达情况,分析Ⅳ型胶原蛋白的表达与乳腺癌临床病理指标及患者5年无病生存(5-DFS)之间的关系。结果:Ⅳ型胶原蛋白呈黄褐色,在癌﹤周边分布,同时也分布在癌组织中的新生血管壁。Ⅳ型胶原与患者的TNM分期呈负相关(R=-0.161,P=0.029),分期较晚的患者其Ⅳ型胶原蛋白表达越不完整。Ⅳ型胶原与患者淋巴结是否出现转移呈负相关(R=-0.220,P=0.003),出现淋巴结转移的患者中Ⅳ型胶原蛋白表达量少。Ⅳ型胶原蛋白的表达与患者的5-DFS正相关(R=0.148,P=0.045),在出现复发转移的42例患者中Ⅳ型胶原蛋白出现不完整或破裂者占67%。结论:测定乳腺癌患者组织中的Ⅳ型胶原蛋白表达水平可以反映乳腺癌组织的侵袭转移能力。

组织工程心脏瓣叶体外实验研究——内皮细胞分离及鉴定

目的 探讨组织工程心脏瓣叶种子细胞———内皮细胞的体外分离、培养及鉴定。方法 杂种猪 4头 ,取整段主动脉。使用 0 .2 5 %Ⅱ型胶原酶消化分离血管内皮细胞。使用M199培养、扩增内皮细胞。使用倒置显微镜、免疫组化方法及透射电子显微镜对内皮细胞进行鉴定。结果 倒置显微镜结果显示 :原代细胞及经传代培养后的细胞 ,呈现典型的内皮细胞特征 ,呈铺路石样改变。免疫组化检测示内皮细胞Ⅷ因子相关抗原呈阳性反应。透射电镜显示 :细胞间存在上皮细胞特有紧密连接 ,未发现内皮细胞Webel Palade小体结构。内皮细胞经 3～ 4次传代 ,细胞数量可增殖达到 6× 10 6。结论 使用胶原酶消化法可有效分离内皮细胞 ,种子细胞经体外培养扩增达到一定数量 。

高压氧降低急性脑梗死患者β-TG及PF4的表达对早期神经功能缺损的影响

目的探讨高压氧通过降低急性脑梗死患者β-血小板球蛋白(β-thromboglobulin,β-TG)及血小板第Ⅳ因子(platelet factor 4,PF4)的表达对早期神经功能缺损的影响。方法选取2015年1月至7月本院收治的120例急性脑梗死患者为研究对象,按照随机化数字法分为实验组与对照组,每组60例。对照组患者入院后予以改善循环、清除自由基、营养神经等常规治疗。实验组入院后除常规治疗外,辅以高压氧治疗。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定两组患者血浆中β-TG及PF4的表达及治疗后的变化;采用Spearman法分析β-TG及PF4水平与早期神经功能缺损的相关性。结果急性脑梗死患者血浆中β-TG及PF4的表达显著升高,实验组用高压氧治疗后,血浆β-TG及PF4的表达较对照组显著降低,差异均有显著性(均P<0.05)。血浆中β-TG及PF4水平与急性脑梗死患者早期神经功能缺损呈正相关(r=0.564,P<0.05;r=0.337,P<0.05)。结论急性脑梗死患者β-TG及PF4的水平与早期神经功能缺损密切相关,高压氧可能通过降低血浆中β-TG及PF4的表达来减轻急性脑梗死患者的早期神经功能缺损。

钙离子与疼痛及炎症免疫的关系

钙离子和cAMP/cGMP共同参与细胞内一些重要机能的调节,如在肌肉收缩过程中的兴奋—收缩偶联,跨膜信息的传递以及细胞运动、分泌、代谢和分化等基本过程中均起着偶联或第二信使的作用,因此钙离子(Ca^(2+))被公认为第二信使,其生物学意义日益受到人们的重视。本文就Ca^(2+)与疼痛及炎症免疫的关系作一简单概述。Ca^(2+)

慢性肺心病患者血小板功能变化

目的 探讨慢性肺心病患者血小板功能的变化及意义。方法 观测了 2 0例肺心病患者 β血栓球蛋白 (β-TG)、血小板第Ⅳ因子 (PF4 )含量和血小板聚集率 (PAR)的变化。结果 肺心病患者 β -TG ,PF4 ,β -TG/PF4 及PAR均显著大于正常对照组 ,β -TG血浆浓度与动脉血氧分压呈负相关 (r =0 5 1,P <0 0 1)。β -TG和PF4 呈正相关 (r =0 5 1,P <0 .0 1)。结论 肺心病患者存在血小板体内激活现象 。

钙离子与突触传递

钙离子,是生理活性物质,作为细胞功能的调节剂,在细胞的运动、分泌、代谢、分化等许多基本生命活动过程中起着耦联或信使的作用,其生物学功能极为广泛。在神经系统中钙的生理意义也日益引起重视。突触传递是神经活动的重要过程,也是神经生理学研究的活跃领域之一。本文主要对钙离子与突触传递的有关问题进行简要的综述。

全髋关节置换术后血浆TM、PF4水平与深静脉血栓形成的关系

目的探讨全髋关节置换术后血浆中血小板第Ⅳ因子(platelet factor 4,PF4)、血栓调节蛋白(thrombomodulin,TM)水平与深静脉血栓形成的关系。方法选取2016年7月至2018年3月浙江省龙游县人民医院收治的95例全髋关节置换手术患者为研究组,其中男54例,女41例,依据术后有无并发深静脉血栓再分为血栓组(52例)和无血栓组(43例),选取同期健康体检者74例作为对照组,观察对照组和研究组全髋关节置换后血浆TM、PF4水平,并探讨其与深静脉血栓形成的关系。结果研究组和对照组性别、年龄、BMI、吸烟情况、家族史、手术时间、麻醉方式等一般资料比较,差异均无统计学意义(P>0.05),研究组血浆凝血酶-抗凝血酶复合物明显高于对照组(P<0.05);血栓组和无血栓组手术后血浆TM和PF4水平均高于术前(P<0.05),且血栓组水平高于无血栓组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05);TM、PF4诊断深静脉血栓的AUC分别为0.748、0.871,灵敏度分别为65.30%、73.70%,特异度分别为74.70%、88.00%,PF4对全髋关节置换后深静脉血栓的诊断价值高于TM。结论全髋关节置换术后血栓患者体内TM、PF4水平增高,对全髋关节置换术后深静脉血栓具有一定诊断价值。

鼠动脉内皮细胞的培养和鉴定

目的 :建立体外培养原代鼠动脉内皮细胞 (RAEC)的方法 ,并对培养的细胞进行鉴定 ,为研究血管疾病打下基础。方法 :组织块法分离 RAEC,用含胎牛血清的 M199营养液培养。相差显微镜、电镜、免疫组化 ABC方法进行鉴定。结果 :分离的 RAEC体外培养一周左右可成长单层 ,光镜下为扁平多角形 ,呈铺路石子状排列。电镜可见内皮细胞特性。免疫染色 因子相关抗原阳性。结论 :所培养的细胞为 RAEC。

罗格列酮对糖尿病大鼠肾组织转化生长因子β、Ⅳ型胶原的影响

目的探讨罗格列酮对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病(DM)大鼠肾组织转化生长因子β(TGF-β)及Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)表达的影响。方法40只大鼠分为正常对照组(C组)、DM组和糖尿病罗格列酮治疗组(DR组)。10周后观察血糖(BG)、肾脏指数(KI)、尿微量白蛋白(MAU)及肾组织形态学改变。免疫组化法观察肾皮质TGF-β及C-Ⅳ表达。结果DM组尿素氮(BUN)、KI、MAU及肾皮质TGF-β、C-Ⅳ表达显著高于C组(P<0.01),并出现糖尿病肾病(DN)典型的病理改变;而DR组KI、MAU及TGF-β、C-Ⅳ表达较DM组明显减低(P<0.01)。结论罗格列酮可通过下调肾皮质中TGF-β、C-Ⅳ表达,对DN起保护作用。

人体的钙与优生

在地球地壳内主要元素中,钙占第5位,其它前4位是氧、硅、铝、铁。而人体内的元素中,钙也占第5位,其它前4位是碳、氢、氧、氮。据研究,人体与地壳、人体与海水中元素丰度基本一致,这是人类在进化和生命形成过程中逐步适应平衡的结果。钙在人体中,虽不是微量元素(后者为<机体总重万分之一或体液中浓度<1μg/g),但钙在整体中除发挥着最重要的常量元素作用外。

老药新用

硝苯吡啶硝苯吡啶(Nifedipine)商品名心痛定,为目前临床应用的较理想的预防和治疗心绞痛的药物。本晶具有扩张冠状动脉作用.

钙剂的药物相互作用

血液中钙的含量不到人体总钙的0.1%,其平均浓度约为2.25~2.75mmol/1,(相当于每100ml 血中含钙9~11mg)其中游离钙和结合钙各约占一半.

硫酸镁在产科应用的护理体会

硫酸镁是中枢神经抑制剂和钙拮抗剂.镁离子能抑制运动神经末梢对乙酰胆碱的释放,阻断神经和肌肉间的传导,从而使骨骼肌松弛,故能有效地预防和控制子痫发作,镁离子可使血管内皮合成前列环素增多,血管扩张,痉挛解除,血压下降.镁离子可直接作用子宫肌细胞拮抗钙离子对子宫收缩的活性,从而抑制子宫收缩.……

TTA-TOPO萃取荧光分析法测定岩矿及环境试样中的痕量钐和铕

作者等曾考察了钐、铕和噻吩甲酰三氟丙酮（TTA）与三正辛基膦化氧（TOPO）所形成的三元络合物的荧光特性,并应用于测定稀土矿物中的钐、铕。本文将此法应用于测定岩矿及环境试样中的钐和铕,结果较为满意。 1.主要试剂和仪器: （1）1ppm钐和0.1ppm铕标准溶液（0.1N盐酸）。 （2）1×10-4MTTA-2×10-2MTOPO己烷溶液。 （3）O.2MTTA苯溶液。

左心室舒张性能的测定方法

充血性心力衰竭时,心室舒张充盈压升高是心室收缩力减弱,心室收缩排空减少,收缩末期残余血量增多的结果。近日研究指出,某些充血性心力衰竭的心室舒张充盈压升高与心室舒张不全有关。心室舒张的性能反映在心室弛缓(Ventricular relaxation)和心室顺应性(ventricular Compliance)两方面。

抗心律失常新药实验初获成功

哥伦比亚大学马克斯博士等在9日出版的《科学》杂志上报告说,他们正在开发的一种代号为“JTV519”的新药在初步的动物实验中可有效地预防大鼠因心律失常而猝死。 这种药物能够制造一种名叫“calstabin2”的蛋白质,该蛋白质能够附着在心肌细胞钙离子通道上并堵住通道的渗漏从而降低心律失常的发生率。19只实验性钙离子通道渗漏的大鼠随机分实验组(n=10)和阴性对照组(n=9)。