利用核糖体展示文库初步筛选与伤寒杆菌Ⅳ型纤毛结合的细胞受体

伤寒杆菌病原毒力岛上的Ⅳ型纤毛与伤寒杆菌的致病性密切相关,但对Ⅳ型纤毛在人巨噬细胞、树突状细胞上的受体及其序列或结合的关键部位还一无所知。本研究拟用核糖体展示文库筛选伤寒杆菌结合的细胞受体。体外人工合成引物和含36个随机序列的寡核苷酸,通过两轮PCR构建随机DNA文库,随后在体外进行偶联的转录和翻译,得到含随机12肽的核糖体文库。利用含随机12肽的核糖体文库与体外重组表达的Ⅳ型纤毛结构蛋白(PilS蛋白)进行了初步筛选,为筛选到与伤寒杆菌毒力岛上Ⅳ型纤毛结构蛋白结合的细胞受体奠定了基础。

腐蹄病节瘤拟杆菌的分子致病机制的研究进展

腐蹄病是反刍动物绵羊、山羊、鹿和奶牛等常见的一种高度接触性传染病。节瘤拟杆菌是致病作用的主要病菌之一,它是通过IV型纤毛和细胞外蛋白酶而产生作用。但从腐蹄病发病症状看,节瘤拟杆菌所致疾病的严重程度不是相同的,据此节瘤拟杆菌被分为毒性、弱毒性和良性菌,这种分类通过对该菌基因组毒性关联蛋白Vap(Virulence-associated protein)区域和毒性相关位点vrl(Virulence Related Locus)区域的研究,发现其致病特点与基因的顺序有很大联系。

十字花科黑腐病菌pilY基因与涌动有关

细胞的运动在细菌的趋化、粘附、生物膜形成以及致病等过程中发挥关键作用。细菌的运动方式主要有三种:游动(Swimming motility)、涌动(Swarming motility)和颤动(Twitching motility)。游动和涌动由鞭毛介导,而颤动由Ⅳ型纤毛介导。全基因组测序结果显示,十字花科黑腐病菌(Xanthomonas campestris pv.campestris,Xcc)存在一套完整的合成Ⅳ型纤毛的基因,而且能够产生Ⅳ型纤毛;但有证据表明Xcc不能进行颤动。在实验室之前的研究中发现,Ⅳ型纤毛基因pilH和pilG与Xcc的游动和涌动有关。在本研究中,通过缺失突变体和互补菌的构建,以及表型分析策略,对Ⅳ型纤毛基因pilY进行了生物学功能鉴定。结果发现,pilY缺失突变体的涌动能力比野生型菌株显著增强,而互补菌株的涌动能力与野生型的相似,证明pilY基因具有抑制Xcc涌动的功能。此外,本研究还发现pilY缺失不影响Xcc的生长繁殖、致病力以及致病因子的产生。