血清透明质酸、层粘连蛋白、Ⅲ型前胶原N端肽和Ⅳ型胶原辅助诊断原发性肝癌的临床意义分析

目的 分析血清透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原N端肽(PⅢNP)和Ⅳ型胶原(CⅣ)辅助诊断原发性肝癌的可行性和临床价值。方法 选取82例原发性肝癌患者、33例肝硬化患者及127例健康对照者作为研究对象,分别作为原发性肝癌组、肝硬化组及健康对照组。检测并比较三组血清HA、LN、PⅢNP、CⅣ水平;分析血清HA、LN、PⅢNP、CⅣ的受试者工作特征曲线(ROC曲线)及曲线下面积(AUC);分析血清HA、LN、PⅢNP和CⅣ的诊断界值及诊断效能。结果 原发性肝癌组血清HA 80.32(42.18, 165.50)ng/ml、LN 42.91(31.47, 74.91)ng/ml、PⅢNP 16.15(10.93, 31.33)ng/ml和CⅣ126.00(73.16, 236.60)ng/ml均显著高于健康对照组的26.83(17.25, 40.02)、30.46(25.02, 40.95)、6.38(4.93, 7.86)、48.49(40.24, 57.57)ng/ml(P<0.05);原发性肝癌组血清HA、LN、PⅢNP水平显著低于肝硬化组(P<0.05),原发性肝癌组血清CⅣ水平与肝硬化组比较无统计学差异(P>0.05);肝硬化组血清HA、LN、PⅢNP和CⅣ水平均显著高于健康对照组(P<0.05)。ROC曲线及AUC分析血清HA、LN、PⅢNP和CⅣ的诊断效能显示:血清HA、LN、PⅢNP和CⅣ诊断原发性肝癌的AUC分别为0.8453、0.7195、0.9310和0.8842;血清HA、LN和PⅢNP鉴别原发性肝癌和肝硬化的AUC分别为0.7749、0.6208和0.6384。根据ROC曲线计算原发性肝癌和肝硬化的诊断界值,血清HA+LN+PⅢNP+CⅣ诊断原发性肝癌的灵敏度为92.7%。结论 血清HA、LN、PⅢNP和CⅣ可用于原发性肝癌的辅助诊断,具有重要的临床价值。

Ⅳ型胶原蛋白A4在肾透明细胞癌中的表达及其与预后和免疫浸润的相关性分析

目的探究Ⅳ型胶原蛋白A4(collagen typeⅣalpha 4 chain,COL4A4)在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)中的表达及其与临床预后和免疫浸润的关系。方法利用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)和高通量基因表达(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库分析COL4A4在ccRCC组织和癌旁正常组织中的表达差异。Western blot实验探究COL4A4在人ccRCC细胞株(786-O、OS-RC-2、Caki-1、SW839和RCC4)和人正常肾小管上皮细胞株HK-2中的表达差异。Kaplan-Meier曲线用于分析COL4A4表达与ccRCC患者的临床总生存期、无进展生存期和疾病特异性生存期的关系,并用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评价COL4A4对预测ccRCC发生的诊断价值。利用cBioPortal和COSMIC数据库分析COL4A4在ccRCC中的突变情况。采用STRING数据库构建COL4A4的蛋白互作(protein-protein interaction,PPI)网络。采用LinkedOmics数据库构建COL4A4的共表达基因网络。采用R软件进行基因本体(Gene Ontology,GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)信号通路富集分析。基于TCGA数据的单样本基因集富集分析(single sample gene set enrichment analysis,ssGSEA)分析ccRCC中COL4A4表达与免疫浸润的相关性。结果TCGA和GEO数据库均显示,COL4A4在ccRCC组织中低表达(均P<0.05)。Western blot实验证实,COL4A4在ccRCC细胞株(786-O、OS-RC-2、Caki-1、SW839和RCC4)中均低表达(均P<0.05)。高表达COL4A4的患者具有更好的总生存期、无进展生存期和疾病特异性生存期(均P<0.01)。COL4A4是ccRCC患者的独立危险因素(HR=0.562,95%CI:0.352~0.898,P<0.05)。COSMIC数据库发现,COL4A4突变频率较低,在ccRCC中稳定表达。PPI网络显示,COL4A4与整合素家族密切相关。功能富集分析发现,COL4A4参与GTP酶活性调节、细胞核分裂、细胞周期转换、自噬和T细胞激活等生物学过程。信号通路富集分析提示,COL4A4主要参与沙门氏菌感染和细胞间的紧密连接。免疫浸润分析发现,COL4A4表达与调节性T细胞浸润呈负相关(r=-0.428,P<0.05)。结论COL4A4是ccRCC的潜在生物预后标志物和治疗靶点。

皮肤石蜡组织Ⅳ型胶原免疫荧光抗原修复方法的评估

目的 寻找皮肤石蜡包埋组织Ⅳ型胶原免疫荧光(IF-PE)最佳抗原修复方法。方法以2021年1月至2022年12月在上海交通大学医学院附属儿童医院确诊的X-连锁Alport综合征患儿和父(母)亲共14例皮肤组织,冰冻组织免疫荧光(IF-FT)为自身对照,比较不同抗原修复法IF-PE染色部位和强度。结果 与Ⅳ型胶原IF-FT自身对照比较,采用蛋白酶K修复,仅部分患儿基膜正常分布(6/14),而角质层均异常表达;微波、高温水浴和高压蒸汽3种修复方法,基膜均无正常分布,角质层异常分布(分别为2/14,11/14,12/14);微波联合酶修复法仅2例基膜正常分布,未见角质层异常表达;高压蒸汽联合酶和高温水浴联合酶2种修复法基膜全部正常分布,角质层异常表达(分别为14/14和2/14),表达强度两者接近。结论高温水浴联合蛋白酶K可作为皮肤石蜡包埋组织Ⅳ型胶原免疫荧光理想的抗原修复法。

肾组织石蜡切片Ⅳ型胶原α链免疫组织化学染色在诊断Alport综合征中的应用

目的对Alport综合征(AS)患者肾脏穿刺组织进行石蜡切片Ⅳ型胶原α链免疫组织化学检测,探讨其临床应用价值。方法选取2018年11月至2022年7月浙江大学医学院附属第一医院肾脏病中心确诊的10例AS患者(AS病例组)、10例心脏死亡器官捐献者(DCD)供肾及10例确诊为免疫球蛋白A肾病患者(对照组)的肾组织进行石蜡切片Ⅳ型胶原α1、α3、α5链全自动免疫组织化学染色,将其与冰冻切片免疫荧光染色结果进行比较。将对照组肾组织石蜡切片分别采用多种方法进行抗原修复,比较修复效果。结果对照组肾组织2种染色方法Ⅳ型胶原α1、α3、α5链染色在肾小球基底膜(GBM)中均为连续线状阳性表达。AS病例组肾组织2种染色方法Ⅳ型胶原α1链染色在GBM均呈连续线状阳性表达,α3、α5链染色在GBM为阴性或节段弱阳性表达。2种染色方法染色结果具有较高的一致性(Kappa=0.615,P=0.035)。结论石蜡切片全自动免疫组织化学检测Ⅳ型胶原α1、α3和α5能较好地用于AS的诊断,为AS的诊断和研究提供了一种可靠的技术手段。

入院时血清TGF-β1、Smad2、Smad3、HA、LN、PCⅢ、CⅣ水平与CHB肝纤维化严重程度的相关性及对疾病预后的预测价值

目的探讨入院时血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad同源蛋白2(Smad2)、Smad同源蛋白3(Smad3)及透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、层黏连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(CⅣ)水平与慢性乙型肝炎(CHB)肝纤维化严重程度的相关性及联合检测对疾病预后的预测价值。方法选取河南省中医院2021年3月至2022年3月收治的78例CHB肝纤维化患者作为研究组,选择同期78名健康体检者作为对照组。比较研究组和对照组及不同肝纤维化分期、不同炎症活动分级CHB肝纤维化患者入院时血清TGF-β1、Smad2、Smad3、HA、PCⅢ、LN、CⅣ水平;分析入院时血清TGF-β1、Smad2、Smad3、HA、PCⅢ、LN、CⅣ水平与肝纤维化分期、炎症活动分级的相关性。CHB肝纤维化患者治疗3个月后,根据患者预后分为预后良好和预后不良亚组,比较预后良好和预后不良患者入院时血清TGF-β1、Smad2、Smad3、HA、PCⅢ、LN、CⅣ水平;分析入院时血清TGF-β1、Smad2、Smad3、HA、PCⅢ、LN、CⅣ水平联合检测对CHB肝纤维化患者预后不良的预测价值。结果研究组入院时血清TGF-β1、Smad2、Smad3、HA、LN、PCⅢ、CⅣ高于对照组(P<0.05);不同肝纤维化分期、炎症活动分级CHB肝纤维化患者入院时血清TGF-β1、Smad2、Smad3、HA、LN、PCⅢ、CⅣ比较:S1<S2<S3<S4、G1<G2<G3<G4,差异有统计学意义(P<0.05);入院时血清TGF-β1、Smad2、Smad3、HA、LN、PCⅢ、CⅣ水平与肝纤维化分期、炎症活动分级均呈正相关(P<0.05)。预后良好患者入院时血清TGF-β1、Smad2、Smad3、HA、LN、PCⅢ、CⅣ水平均低于预后不良患者(P<0.05);入院时血清TGF-β1、Smad2、Smad3、HA、LN、PCⅢ、CⅣ水平联合预测肝纤维化患者预后不良的曲线下面积(AUC)优于各指标单一检测(P<0.05)。结论CHB肝纤维化患者入院时血清TGF-β1、Smad2、Smad3、HA、PCⅢ、LN、CⅣ水平均呈现高表达,且与肝纤维化分期、炎症活动分级密切相关,其联合检测对CHB肝纤维化患者预后有较高的预测价值,可用于评估CHB肝纤维化患者病情严重程度和预后,为制定针对性治疗措施提供参考。

Ⅳ型胶原蛋白NC1片段在精子发生及血睾屏障中作用的研究进展

在哺乳动物睾丸中,位于生精上皮基底膜附近的血睾屏障(blood-testis barrier,BTB)对精子发生至关重要。BTB由相邻的支持细胞(Sertoli细胞)连接而成,将生精上皮分为靠近基底膜的“基底室”和靠近生精小管管腔的“近腔室”,为精子发生提供了免疫屏障。Ⅳ型胶原蛋白是基底膜的重要组成成分,啮齿类动物的睾丸中Ⅳ型胶原蛋白主要是由3条α3链组成的三螺旋结构。大鼠睾丸的Ⅳ型胶原蛋白α3链C端可以水解成大小为28 ku的蛋白片段,称为C端非胶原结构域(noncollagenous domain-peptide,NC1片段)。NC1片段作为一种基底膜源性多肽在参与精子发生与维系BTB功能方面发挥了重要作用。本文通过分析、总结近期研究结果,概述Ⅳ型胶原蛋白NC1片段在睾丸中的作用及其机制,尤其是其在精子发生与BTB中作用的研究进展。

Ⅳ型胶原蛋白、Ⅲ型前胶原氨基端肽与老年特发性肺纤维化病人肺功能和急性加重的相关性

目的探讨Ⅳ型胶原蛋白(ⅣC)、Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)与老年特发性肺纤维化(IPF)病人肺功能和IPF急性加重(AE-IPF)的相关性。方法选择2018年1月至2022年1月我院收治的89例IPF病人(IPF组)和42例门诊体检健康者(对照组)。检测血清ⅣC、PⅢNP水平以及肺功能,随访出院1个月内AE-IPF的发生情况。采用Pearson相关系数描述ⅣC、PⅢNP与肺功能的相关性,采用多因素Logistic回归分析AE-IPF的危险因素,绘制ROC曲线分析ⅣC、PⅢNP预测AE-IPF的价值。结果IPF组血清ⅣC、PⅢNP水平高于对照组(P<0.01),FEV1、FVC、FEV1/FVC、最大自主通气(MVV)均低于对照组(P<0.01)。ⅣC、PⅢNP与FEV1、FVC、FEV1/FVC、MVV均呈负相关(P<0.01)。随访期间49例发生AE-IPF,高水平ⅣC、高水平PⅢNP、感染是AE-IPF的危险因素(P<0.05)。ⅣC、PⅢNP预测AE-IPF的曲线下面积为0.718、0.768,联合ⅣC和PⅢNP诊断AE-IPF的曲线下面积为0.940,大于单独ⅣC、PⅢNP的诊断效率(Z=3.941、2.991,P均<0.05)。结论老年IPF病人血清ⅣC、PⅢNP水平显著增高,且与肺通气功能下降以及AE-IPF的发生有关,可作为预测AE-IPF的标志物。

DcR3对人肺成纤维细胞合成Ⅳ型胶原的作用

目的:探讨诱骗受体3(DcR3)对人肺成纤维细胞(HLF)合成Ⅳ型胶原的作用。方法:Over-PCR方法构建DcR3的真核表达载体,脂质体法转染HLF细胞,Westernblo检测HLF细胞合成Ⅳ型胶原的含量。结果:成功构建了pvax1-DcR3真核表达载体并转染HLF细胞;转染组细胞ColⅣ表达量明显升高,从12h开始持续到72h,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);而转染+抗体组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);转染组不同时间ColⅣ表达量有统计学意义(F=34.25,P<0.05)。结论:DcR3促进HLF细胞合成Ⅳ型胶原的能力,可能是加速肺纤维形成的因素之一。

SOCS2基因转染对人肾小球系膜细胞TGF-β、Ⅳ型胶原蛋白、纤维连接蛋白表达的影响

目的观察过表达细胞因子信号转导抑制因子(SOCS2)对人肾小球系膜细胞(HMCs)中转化生长因子β(TGF-β)、Ⅳ型胶原蛋白(CollagenⅣ)、纤维连接蛋白(FN)表达的影响,并探讨其可能机制。方法体外培养HMCs,分为A、B、C、D、E、F组,A、B组分别加入Ad-SOCS2病毒液(含SOCS2的腺病毒病毒液)、Ad-null病毒液(只含腺病毒的病毒液),24 h后将培养液更换成高糖培养液;C组加入30 mmol/L的D-葡萄糖;D、E组分别加入Ad-SOCS2病毒液、Ad-null病毒液,24 h后将培养液更换成常规培养液;F组加入5.5 mmol/L的D-葡萄糖+24.5mmol的D-甘露醇。Western blotting法检测各组TGF-β、CollagenⅣ、FN及贾纳斯激酶2(JAK2)、信号传导及转录激活因子3(STAT3)、磷酸化贾纳斯激酶2(p-JAK2)、磷酸化信号传导及转录激活因子3(p-STAT3)。结果与F组比较,A、B、C组TGF-β、CollagenⅣ、FN、p-JAK2、p-STAT3的相对表达量升高;与C组比较,A组TGF-β、CollagenⅣ、FN、p-JAK2、p-STAT3的相对表达量降低;P均<0.01。结论 SOCS2通过抑制JAK/STAT信号通路来下调HMCs中TGF-β、CollagenⅣ、FN表达。

磁共振功能成像联合尿8-羟基2脱氧鸟苷、Ⅳ型胶原检测对党参改善糖尿病肾病肾功能用量的研究

目的:探讨磁共振功能成像联合尿8-羟基2脱氧鸟苷(8-OHdG)、Ⅳ型胶原指标评估党参对糖尿病肾病(DN)患者肾功能的影响。方法:选取64例DN患者,党参用药低剂量组、中等剂量组、高剂量组及对照组(20例),各组用药后4周、8周、12周末,使用核磁共振功能成像对各组受试者进行肾脏MRI扫描及尿液分析。比较用药后肾脏MRI表现、尿8-OHdG、Ⅳ型胶原水平。结果:高剂量组糖尿病肾病ADC值较用药前明显升高,差异显著具有统计学意义(P<0.05);低剂量组及中等剂量组ADC值变化不具有统计学意义。低剂量组及中等剂量组尿8-OHdG、Ⅳ型胶原水平均高于高剂量组,差异显著具有统计学意义(P<0.05)。低剂量尿8-OHdG、Ⅳ型胶原水平与中等剂量组对照差异不明显,不具有统计学意义。结论:MRI联合尿8-OHdG、Ⅳ型胶原水平检测可以有效评估不同剂量党参用药对糖尿病肾病患者肾功能的影响;高剂量党参用药可以改善糖尿病肾病患者肾功能。

疏血通注射液对IgA肾病纤维蛋白原、Ⅳ型胶原及C反应蛋白的影响

目的:观察肾功能正常的IgA肾病血瘀证患者疏血通注射液治疗前后血清C反应蛋白(CRP)、纤维蛋白原(FIB)及血、尿Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)的变化,探讨其疗效及可能机制。方法:69例IgA肾病患者随机分为37例疏血通治疗组和32例对照组,进行临床观察。结果:治疗组治疗前后血CRP、FIB及血、尿Col-Ⅳ均明显下降(P<0.05,P<0.01)。治疗组较对照组治疗前后血CRP及血、尿Col-Ⅳ下降更为明显(P<0.05,P<0.01)。结论:疏血通注射液对于改善IgA肾病的炎症状态,延缓纤维化进展可能有一定的益处。

血清Ⅳ型胶原、透明质酸及板层素对肝纤维化的诊断价值

本文用放射免疫法检测了２２０例各型肝病患者血清Ⅳ型胶原（Ⅳ－Ｃ）、透明质酸（ＨＡ）及板层素（ＬＮ）水平。结果显示各类肝病患者血清Ⅳ－Ｃ、ＨＡ及ＬＮ水平随病情进展而逐渐升高，以Ⅳ－Ｃ≥１３０μｇ／Ｌ、ＨＡ≥２６０μｇ／Ｌ、ＬＮ≥１６０μｇ／Ｌ为诊断肝纤维化的临界点，其敏感度、特异性、准确率分别达８０％以上，联合检测以Ⅳ－Ｃ与ＨＡ联合较为理想，说明三者可作为肝纤维化诊断较为敏感的指标，其中Ⅳ－Ｃ对早期肝纤维化的诊断优于ＨＡ和ＬＮ。

Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原在肝包虫囊肿周围人体纤维囊壁中的特异性分层表达

探讨Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ型胶原在形成肝包虫囊肿周围人体纤维囊壁中的作用及其临床意义。采用免疫组织化学方法检测Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ型胶原在40例肝包虫囊肿周围纤维囊壁中表达。Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ型胶原在肝包虫囊肿周围纤维囊壁中出现特异性分层表达。靠近虫体侧纤维囊壁中,Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ型胶原的表达阳性率分别为500%、375%和400%。靠近肝实质侧纤维囊壁中,Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ型胶原的表达阳性率分别为875%、825%和850%。Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原在两层中表达的差异均有显著意义(P<001,P<001,P<001)。肝包虫囊肿周围人体纤维囊壁分层,Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ型胶原与肝实质侧纤维囊壁的形成有密切关系。

血清Ⅳ型胶原测定在临床肝纤维化中的应用

肝纤维化是各种慢性肝炎发展的共同结局，Ⅳ型胶原在血清中的含量与肝纤维化严重程度相关~[1]，因而动态测定肝病患者血清中的Ⅳ型胶原含量对肝纤维化诊断、预后及疗效判断有很大价值。本文应用Ⅳ型胶原酶联免疫试剂盒对50例正常人和227例临床确诊的各类肝病及其他疾病患者血清进行了Ⅳ型胶原含量测定，结果表明血清中Ⅳ型胶原的含量对肝纤维化诊断有重要参考价值。

Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、透明质酸及层粘连蛋白在诊断肝纤维化中的意义

目的 探讨血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、透明质酸 (HA)及层粘连蛋白 (LN)的测定在诊断肝纤维化中的意义。方法 用放射免疫法检测 263例慢性乙型肝炎、67例急性乙型肝炎、27例肝硬化及 20例健康人血清PCⅢ、CⅣ、HA及LN,并进行了统计学分析。结果 中度、重度慢性乙型肝炎及肝硬化的 4项指标定量结果均高于对照组、急性乙型肝炎及轻度慢性乙型肝炎(P<0. 001)。4项指标联合检测显示,重度慢性乙型肝炎及肝硬化的阳性率 (84. 3%与 88. 9% )显著高于其他组别。结论 联合检测血清PCⅢ、CⅣ、HA及LN水平对诊断肝纤维化有较大意义。

Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原、层黏连蛋白和透明质酸酶在诊断肝纤维化程度中的应用

目的探讨在肝纤维化诊断中采用Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、层黏连蛋白(LN)和透明质酸酶(HA)进行联合诊断的价值。方法选取2015年12月至2017年12月在该院就诊的病毒性肝炎及肝炎后肝硬化患者共80例(观察组)和80例健康献血者(对照组)作为研究对象。对所有研究对象采用化学发光法测定其血清PCⅢ、Ⅳ-C、LN以及HA指标,并与病理检查结果结合分析其与肝纤维化程度之间的关系。结果肝炎患者的血清PCⅢ、Ⅳ-C、LN以及HA指标显著升高,其中最高的为肝硬化患者;慢性肝炎患者的肝纤维化分期程度越严重,则PCⅢ、Ⅳ-C、LN以及HA检查结果水平越高,两者呈正相关关系,不同肝纤维化分期之间各指标的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论血清PCⅢ、Ⅳ-C、LN以及HA水平与肝纤维化程度之间呈正相关关系,因此临床上可将血清PCⅢ、Ⅳ-C、LN以及HA指标作为反映肝纤维化严重程度的测量指标,在肝纤维化的早期诊断时作为重要的诊断依据。

血清透明质酸、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原及层粘蛋白水平与实验性肝纤维化的关系

目的 :评价血清透明质酸 (HA)、Ⅲ型前胶原 (PCⅢ)、Ⅳ型胶原 (CⅣ)及层粘蛋白 (LN)水平与实验性肝纤维化的关系。方法 :采用半定量计分系统 (SSS)中炎症活动度及纤维化程度计分方案对温阳中药肝之福预防及治疗肝纤维化大鼠实验的病理组织共 73份标本进行半定量计分 ,同时检测血清HA、PCⅢ、CⅣ及LN水平 ,进行Pearson相关性分析。结果 :四项血清肝纤维化指标不论与肝脏炎症活动度还是纤维化程度均呈正相关 (P <0 0 1)。结论 :血清HA、PCⅢ、CⅣ及LN水平可在一定程度上反映肝组织的炎症和纤维化程度 ,联合检测价值较高。

血清透明质酸Ⅲ型前胶原Ⅳ型胶原及脯氨酸肽酶对肝组织纤维化诊断的意义

探讨肝病患者血清透明质酸(HA),Ⅲ型前胶原(PCⅢ),Ⅳ型胶原(CⅣ)及脯氨酸肽酶(PLD)水平与肝纤维化程度的关系。用酶联免疫(ELISA)法及生化比色法检测225例各种肝病患者血清中HA、PCⅢ、CⅣ及PLD水平,并与肝活检病理炎症分级和纤维化分期相比较。四项指标与肝组织炎症坏死及纤维化程度均呈显著相关(P<0.05)。HA、PCⅢ及CⅣ与肝纤维化相关性高于炎症,PLD与炎症的相关性高于纤维化。血清学指标与肝组织病理病变程度一致,联合检测肝病患者血清HA、PCⅢ、CⅣ及PLD水平,既可反映肝纤维化严重程度,又能了解肝坏死情况,为临床诊断治疗提供参考。

加味四逆散对肝纤维化大鼠肝组织Ⅰ，Ⅲ，Ⅳ型胶原影响的实验研究

目的观察加味四逆散对肝纤维化大鼠肝组织Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ型胶原的影响效果,从而探讨该方抗肝纤维化的机理。方法采用二甲基亚硝胺腹腔注射制备大鼠肝纤维化模型,加味四逆散灌胃给药,免疫组织化学方法检测分析各组大鼠肝组织Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ型胶原的含量。结果加味四逆散能明显降低肝纤维化大鼠肝组织Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ型胶原的含量,与病理模型组比较有显著性差异(P<0.05)。结论加味四逆散可有效的减少肝组织Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ型胶原的沉积,对肝纤维化有肯定的治疗作用。

Ⅳ型胶原、MMP-9和TIMP-1基因表达在早期放射性肺纤维化启动中的作用

目的观察早期放射性肺纤维化启动过程中Ⅳ型胶原、明胶酶B(MMP-9)、金属蛋白酶1组织抑制剂(TIMP-1)的基因表达特点,探讨其在放射性肺损伤中的作用。方法C57小鼠于20Gy 60Co γ射线全肺照射后照射后1、2、4周活杀,每个时间点分别配有相应的正常对照组。RT-PCR检测Ⅳ型胶原、MMP-9、TIMP-1 mRNA水平的变化,并应用图像分析仪测定电泳条带的平均光密度值。结果Ⅳ型胶原mRNA于照射后1周开始增高(0.202),4周达高峰(0.340);MMP-9 mRNA于照射后1周即有明显增高并且达到高峰(0.730),于第2周开始降低(0.592);TIMP-1 mRNA于照射后1周开始轻度增加(0.987),4周时达高峰(2.027)。结论60Co γ射线可刺激Ⅳ型胶原、MMP-9和TIMP-1 mRNA的表达,但随照射后时间的延长呈现不同的变化趋势,它们之间的相互制约导致了放射性肺损伤早期的组织重建,与后来形成的肺纤维化有必然的内在联系。