液质联用法测定十一味参芪片中马兜铃酸Ⅰ、马兜铃酸Ⅳa和马兜铃内酰胺Ⅰ

目的:建立十一味参芪片中马兜铃酸Ⅰ、马兜铃酸Ⅳa和马兜铃内酰胺Ⅰ的液相色谱-质谱法(LCMS)检测分析方法。方法:Kromasil Proshell C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,2.5μm),以乙腈-0.1%乙酸水溶液(含10 mmol·L^(-1)乙酸铵)为流动相,梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(-1);多反应监测模式,马兜铃酸Ⅰ为m/z 359.1→298.1(定量)和m/z 359.1→296.1(定性),马兜铃酸Ⅳa为m/z 375.1→312.2(定量)和m/z 375.1→297.2(定性),马兜铃内酰胺Ⅰ为m/z 294.1→279.0(定量)和m/z 294.1→251.1(定性),建立十一味参芪片中3个马兜铃酸类成分的LC-MS,在方法学验证的基础上对所有样品进行检测分析。结果:马兜铃酸Ⅰ、马兜铃酸Ⅳa和马兜铃内酰胺Ⅰ进样量分别在2.0197~100.9829、1.9478~116.8656、1.9718~98.5880 pg时线性关系良好(r>0.999),定量限分别为1、6、2 pg,加样回收率分别为92.95%(RSD为2.28%)、80.09%(RSD为4.16%)、104.89%(RSD为3.24%)。14批十一味参芪片样品中马兜铃酸Ⅰ、马兜铃酸Ⅳa和马兜铃内酰胺Ⅰ的检出量分别为21.0~47.6、185.0~506.1、164.4~426.0 ng·g^(-1)。结论:所建立的方法快速、准确、灵敏、可靠,能够用于十一味参芪片中上述马兜铃酸类成分的筛查与分析,可为其安全性有关成分研究提供参考。

去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa对缺氧复氧心肌细胞损伤的保护作用

目的研究去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa(DCⅣa)是否为龙牙木匆心木总皂苷抗心肌缺血的有效成分之一。方法取体外培养的新生大鼠心肌细胞建立缺氧6 h复氧3 h心肌细胞损伤模型,并于缺氧及复氧开始时分别加入终浓度为2.5,1.0和0.1 mg.L-1的DCⅣa。检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)漏出量,丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。MTT法检测心肌细胞存活率。结果DCⅣa(2.5,1.0 mg.L-1)显著减少缺氧及复氧后LDH和CK漏出量,降低MDA含量,提高SOD活性,提高心肌细胞存活率。结论DCⅣa为龙牙木匆心木总皂苷抗心肌缺血的有效成分之一,可减轻缺氧复氧对心肌细胞的损伤,对心肌细胞具有直接的保护作用。

HPLC-DAD-ELSD法同时测定牛膝中β-蜕皮甾酮、人参皂苷R0、竹节参皂苷Ⅳa的含量

目的:采用高效液相色谱-二极管阵列检测器-蒸发光散射检测器(HPLC-DAD-ELSD)法同时测定牛膝中3种化合物β-蜕皮甾酮、人参皂苷R0、竹节参皂苷Ⅳa的含量。方法:采用Agilent 5 TC-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.08%甲酸(A),水-2.5%异丙醇-0.08%甲酸(B)不同比例进行梯度洗脱;流速为0.9 mL/min,运行时间80 min,β-蜕皮甾酮采用DAD进行检测,检测波长为248 nm;人参皂苷R0和竹节参皂苷Ⅳa采用ELSD进行检测,漂移管温度为110℃,载气流速3.2 L/min。结果:β-蜕皮甾酮在0.001 9~0.096 3 mg/mL浓度范围内浓度与峰面积间呈良好的线性关系(r^2=0.999 9);人参皂苷R0、竹节参皂苷Ⅳa分别在0.002 2~0.469 5 mg/mL和0.004 7~0.483 0 mg/mL浓度范围内浓度的对数与峰面积的对数间呈良好的线性关系(r^2=0.999 5,r^2=0.999 4)。牛膝中三种化合物(β-蜕皮甾酮、人参皂苷R0、竹节参皂苷Ⅳa)的平均加样回收率分别为99.29%(RSD为2.14%)、99.13%(RSD为2.04%)和98.30%(RSD为2.11%)。结论:本研究所建立的方法简便,快速,且稳定性、精密度、重复性良好,适用于牛膝中甾酮类和皂苷类成分的同时测定,也可用于牛膝药材的质量控制。

去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa抗实验性心律失常作用

目的研究去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa(DCⅣa)是否具有抗实验性心律失常的作用。方法采用氯化钡、乌头碱、毒毛花苷G及结扎左冠状动脉前降支诱发大鼠或豚鼠心律失常模型,八道生理记录仪观察并记录Ⅱ导联心电图,观察DCⅣa对实验性心律失常的预防作用。结果DCⅣa能缩短氯化钡和乌头碱诱发大鼠心律失常的持续时间,增加恢复正常心律的动物数;增加诱发豚鼠心律失常的毒毛花苷G用量;延长冠脉结扎致大鼠心律失常发生的潜伏期,缩短心律失常的持续时间,降低室颤发生的百分率。结论DCⅣa具有明显的抗心律失常作用。

Ⅲ期、Ⅳa期肝癌肝移植围术期辅助性化疗效果分析

目的探讨期、a期肝癌肝脏移植围术期辅助性化疗的效果。方法对16例期、a期肝癌患者(观察组)在肝脏移植围术期行辅助性化疗,并与前期单纯行肝移植手术的8例期、a肝癌患者(对照组)进行比较。结果对照组和观察组分别随访3～12个月和3～16个月,后者肿瘤复发率(43.75%)低于前者(100%),长期存活率(36.25%)高于前者(0)。结论期、a期肝癌肝脏移植围术期行辅助性化疗效果确切,值得临床借鉴。

陕西不同产区珠子参中竹节参皂苷Ⅳa含量比较研究

目的测定陕西不同产区珠子参中竹节参皂苷Ⅳa含量,以评价药材质量。方法采用HPLC法,色谱柱为Inert-sil ODS-sp(150 mm×4.6 mm,5μm)柱,以乙腈-0.2%磷酸溶液(35∶65)为流动相,流速为1.0 mL.min-1,检测波长为203 nm。结果陕西不同产区珠子参中竹节参皂苷Ⅳa含量存在一定的差异,其中野生珠子参中竹节参皂苷Ⅳa含量普遍高于移植珠子参,但移植2年的珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量明显高于移植1年的珠子参。结论不同地域环境的珠子参其质量存在差异。

HPLC同时测定竹节参中竹节参皂苷Ⅴ和Ⅳa含量

目的：建立HPLC同时测定竹节参中竹节参皂苷Ⅴ和Ⅳa的含量测定方法,并对不同产地的竹节参药材进行含量测定。方法：采用Hibar C18色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,柱温30℃,检测波长203 nm。结果：竹节参皂苷Ⅴ在0.36--7.20μg（r〉0.999）范围内线性关系良好,平均加样回收率为96.0%,（RSD=0.73%,n=6）;竹节参皂苷Ⅳa在0.57~11.40μg（r〉0.999）范围内线性关系良好,平均加样回收率为104.2%（RSD=0.86%,n=6）。结论：该方法结果准确、重复性好,可用于竹节参药材的质量控制。

猪胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣA2.5kb基因片段的分子克隆及其表达

以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清1型国内分离株721株基因组DNA为模板,用PCR方法扩增出ApxⅣA基因2.5kb特异片段,将其克隆于pMD18T中,经酶切鉴定筛选重组质粒后进行核苷酸序列测定,并与GenBank中登录的血清1型ApxⅣA(AX002405)基因进行比较,结果显示核苷酸同源性为99.5%。将该片段亚克隆到原核表达载体pGEX6P1的EcoRⅠ/SalⅠ位点,成功地构建了重组表达载体pGEXapxⅣA,并转化大肠埃希氏菌BL21,获得了表达。SDSPAGE检测结果显示,表达的融合蛋白分子质量约为117ku,与预期片段大小相符;Westernblotting分析证实,该融合蛋白具有免疫学活性。

301例Ⅳa期非小细胞肺癌的诊治与预后分析

目的分析Ⅳa期非小细胞肺癌（NSCLC）的临床特征,探讨其临床诊治的特点及预后因素。方法分析2009年10月至2013年12月收治的首次诊断为Ⅳa期NSCLC患者301例,随访至2014年11月30日,分析其临床特征及诊治情况。主要观察指标为发生率、有效率、无进展生存期（PFS）和总生存期（OS）。结果Ⅳa期NSCLC的患者中位PFS为3.3个月（95%CI：2.808-3.792）,中位OS为7.8个月（95%CI：6.700-8.900）。多变量Cox回归分析表明,体能状态（PS）评分、胸腔积液是否可控、能否接受4周期及以上化疗是影响疾病进展以及总生存的独立因素,酪氨酸激酶抑制剂（TKI）治疗亦是总生存的独立预后因素。结论Ⅳa期NSCLC中位OS是7.8个月。对于表皮生长因子受体（EGFR）突变患者,应用TKI治疗;对于体能状态好的患者,积极控制胸腔积液和全身化疗有利于提高Ⅳa期NSCLC患者的生存期。

珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量测定

目的建立高效液相色谱法测定珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量。方法供试品用60%乙醇超声提取40min,滤过,取续滤液作为供试品溶液;高效液相色谱仪测定峰面积。色谱柱：InertsilODS-sp（5μm,4.6 mm×150 mm）;流动相：乙腈-0.2%磷酸溶液（35∶65）;柱温：30℃;流速：1.0 ml/min;检测波长：203 nm。结果珠子参中竹节参皂苷Ⅳa与其他组分分离良好,保留时间12.5 min。竹节参皂苷Ⅳa对照品线性范围1.007 6~10.076μg,r=0.999 9,平均回收率为103.46%,RSD为0.81%。结论该法操作简便,方法稳定性,分离度好,灵敏度高,可用于珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的含量测定。

1例粘多糖病ⅣA型儿童GALNS基因突变分析

目的研究1例粘多糖病ⅣA型(mucopolysaccharidosis ⅣA,Morquio A,MPS ⅣA)患者的临床特点及N-乙酰半乳糖胺-6-硫酸酯酶(GALNS)基因的突变。方法研究对象为1例散发粘多糖病ⅣA型患儿及50例正常儿童。分别取其外周血5mL,提取DNA,应用聚合酶链式反应(PCR)扩增GALNS基因的全部14个外显子,应用正反引物对PCR产物进行基因序列直接测序。结果该患儿未发现GALNS基因致病突变。但是检测出2个GALNS基因多态性1431A>G、1569+36A>G。结论 GALNS基因突变不是本研究中1例散发MPSⅣA患儿的主要致病原因。

Ⅲ、Ⅳa期鼻咽癌患者放疗同期化疗加辅助化疗效果观察

目的：探讨Ⅲ、Ⅳ。期鼻咽癌患者放疗同期化疗加辅助化疗的效果。方法：将100例Ⅲ、Ⅳa期鼻咽癌患者随机分为观察组和对照组各50例，对两组治疗后疗效分析结果、5年内远处转移发生率及1、3、5年无瘤生存率进行对比。结果：治疗后3个月，疗效分析结果显示观察组和对照组鼻咽肿瘤达到CR者分别为46例和43例，PR分别为4例和7例，两组对比差异无统计学意义（P〉0．05）。颈部淋巴结达到CR者分别为47例和39例，两组对比差异有统计学意义（P〈0．05），PR分别为3例和11例。观察组和对照组5年内远处转移发生率分别为24％和36％，两组差异有统计学意义（P〈0．05）。观察组1、3、5年无瘤生存率分别为92％、65％、45％，对照组分别为80％、53％、30％，两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：放疗同期化疗加辅助化疗提高了Ⅲ、IVa期鼻咽癌的近期疗效及颈部淋巴结完全缓解率，降低了远处转移率，提高了无瘤生存率。

不同采收期珠子参中竹节参皂苷Ⅳa含量测定

目的测定不同采收期珠子参药材中竹节参皂苷Ⅳa的含量并确定珠子参的最佳采收期。方法供试品用60%乙醇超声提取40 min,滤过,取续滤液作为供试品溶液,高效液相色谱仪测定峰面积。色谱柱:Kromasil-C18(5 um,4.6 mm×150 mm);流动相:乙腈-0.2%磷酸溶液(36:64);柱温:30℃;流速:1.0 mL/min;检测波长:203 nm。结果不同采收期珠子参中竹节参皂苷Ⅳa的累积量差异较大且7月含量最高。结论以竹节参皂苷Ⅳa为指标性成分确定珠子参的最佳采收期应为7月份。

ⅣAl和ⅥAl对硅酸盐拉曼光谱高频区的影响

Raman光谱作为现代物质结构研究的重要方法之一,广泛应用于硅酸盐矿物结构研究领域,已经取得了长足的进展.在硅酸盐矿物和材料研究中,由于铝的双重作用,铝硅酸盐结构的研究成为光谱学关注的一个焦点,也是冶金、陶瓷、玻璃和地学等领域最为重要的研究课题[1].……

猪胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣA基因的克隆和表达

为了研究猪胸膜肺炎放线杆菌溶血素(Apx)ⅣA基因的原核表达,试验采用PCR方法扩增到目的片段,并将该片段连接到pMD18-T载体中,经PCR和限制性酶切鉴定后,在T4 DNA连接酶的作用下将目的片段与pET28a连接。结果表明:ApxⅣA基因测序结果与GenBank中公布的核苷酸序列的同源性达100%,说明已成功构建猪胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣ-pET28a原核表达质粒;表达质粒经IPTG诱导成功表达了36 ku的ApxⅣA原核蛋白。

ⅣA重元素重键化合物的合成及理论研究进展

简要综述了ⅣA族重元素多重键化合物的合成和理论研究的最新进展.概括总结了ⅣA族重元素孤立双键化合物、丙烯型分子和环丙烯型分子的合成及理论研究方面的最新成果.分析并预测了该前沿领域的未来发展趋势.

Ⅲ、Ⅳa期鼻咽癌调强放疗联合三种含铂方案同期化疗的疗效比较

目的：探讨Ⅲ、Ⅳa期鼻咽癌经调强放疗联合顺铂＋氟尿嘧啶（PF）、紫杉醇＋顺铂（TP）、每周顺铂（DDP）三种方案同期化疗的临床疗效以及其产生的副作用。方法：选取近2年来本院就诊的105例鼻咽癌患者作为研究对象,随机分成PF组、TP组以及DDP组,每组各35例患者,三组患者在给予调强放疗的基础上分别给予PF、TP和DDP同期化疗方案。结果：三组都顺利完成治疗计划,随访5-37个月,平均（26±2）个月,三组在无瘤生存率以及总生存率方面比较差异具有统计学意义（P〈0.05）;三组患者Ⅲ-Ⅳ度粒细胞减少、Ⅲ-Ⅳ度胃肠道反应发生率比较差异具有统计学意义（P〈0.05）,Ⅲ-Ⅳ度口腔黏膜炎发生率比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：短期内从Ⅲ、Ⅳa期鼻咽癌的调强放疗联合PF、TP、DDP三种方案同期化疗的临床疗效和副反应来看,调强放疗联合DDP治疗方案临床疗效最好,PF方案疗效次之,对于此方案的长期临床疗效还需要观察比较再做定论。

粘多糖贮积症ⅣA的分子遗传学研究进展

粘多糖贮积症ⅣＡ 型（ＭＰＳⅣＡ）是由于溶酶体内Ｎ乙酰半乳糖胺６硫酸酯酶（ＧＡＬＮＳ）缺乏而引起的一种常染色体隐性遗传病（ＡＲ）。对ＭＰＳⅣＡ 的研究近年来取得了重大进展。本文就ＭＰＳⅣＡ 的发病机理、ＧＡＬＮＳ基因结构、基因变异类型以及基因诊断的最新进展作一综述。

Ⅳa型先天性胆管扩张症10例临床分析

比较分析 10例Ⅳa型先天性胆管扩张症与同期收治的Ⅰ型先天性胆管扩张症的临床症状、生化检查和胆汁淀粉酶、术后疗效等。对Ⅳa型先天性胆管扩张症的临床表现、可能的病因及手术方式等进行讨论。认为Ⅳa型先天性胆管扩张症也是此病的常见类型 ,其临床表现与Ⅰ型相同 ,无特殊性 ,其病因与胰胆管连接异常等先天性因素有关 。