分枝杆菌Ⅶ型分泌系统的结构、底物与功能

细菌分泌系统对于细菌的发育、种内和种间竞争、营养获取、毒力、生理、遗传、生态都非常重要。细菌利用分泌系统将蛋白质分泌到细胞外,也是细菌适应生境所必需的。分枝杆菌Ⅶ型分泌系统及其底物与结核分枝杆菌致病密切相关,笔者将对Ⅶ型分泌系统的组成、结构、底物和功能进行介绍,尤其是与宿主相互作用中的功能,以期为研发结核病新的控制措施提供基础。

金黄色葡萄球菌Ⅶ型分泌系统研究进展

细菌分泌系统是细菌依赖分泌通路进行蛋白质的跨胞浆膜转运系统,该分泌系统中存在的蛋白或蛋白性质的毒力因子与细菌的生存、繁殖和扩散紧密相关。已发现的几种分泌系统中,Ⅶ型分泌系统主要存在于革兰氏阳性菌中,其不仅与细菌的生长和致病性密切相关,而且可能在细菌毒力分泌方面发挥关键作用。本文将对金黄色葡萄球菌Ⅶ型分泌系统类型、分泌底物结构、对金黄色葡萄球菌的毒力调控机制等方面进行论述。

细菌Ⅶ型分泌系统的研究进展

细菌分泌系统参与细菌物质转运,是细菌蛋白或DNA胞外分泌的重要途径,与细菌的生长和致病性密切相关。迄今为止,已发现了Ⅰ-Ⅶ型分泌系统。Ⅰ-Ⅵ型分泌系统存在于革兰阴性菌中,其中Ⅳ型也存在于革兰阳性菌中;Ⅶ型则存在于革兰阳性菌中。Ⅶ型分泌系统是近年来发现的一种特殊分泌系统,能介导病原微生物毒力蛋白分泌,与宿主相互作用,并参与细菌体内锌铁平衡等,在革兰阳性菌的生长代谢及致病过程中发挥重要作用。本文综述细菌Ⅶ型分泌系统的类型、功能及表达调控,以增进对这一新型细菌蛋白分泌机制的认识。

分枝杆菌分泌系统

分泌系统对于具有特殊细胞被膜结构的分枝杆菌,尤其是致病性分枝杆菌的存活和毒力非常重要.不少重要的致病因子或存活因子都通过特定的分泌系统进入环境,包括宿主体内.本文从分泌系统的基因、结构组成、分泌底物、转运机制及其与致病菌毒力的关系等几个方面介绍了分枝杆菌(mycobacteria)通用型分泌系统(general secretion pathway,SecA1)、替代型分泌系统(accessory Sec system,SecA2)、双精氨酸分泌系统(twin-arginine translocation,Tat)和Ⅶ型分泌系统(typeⅦsecretion systems,T7S system or ESX)4种分泌系统,并重点分析了Tat分泌系统.这些知识有利于从分泌系统及其底物的角度揭示结核分枝杆菌等胞内致病菌存活和逃避宿主免疫的机理,将为研发新的结核病控制措施提供依据.

分枝杆菌Ⅶ型分泌系统的研究进展

Ⅶ型分泌系统是近年来新发现的一种新型、特殊的分泌系统,最先在结核分枝杆菌中发现.Ⅶ型分泌系统负责分枝杆菌的毒力蛋白分泌,介导分枝杆菌与宿主间发生相互作用,并参与分枝杆菌体内锌铁平衡等,在分枝杆菌的生长代谢及致病过程中发挥重要作用.本文从Ⅶ型分泌系统的基因组成与类型、分泌底物、转运机制及其与菌株致病性的关系等方面,对分枝杆菌Ⅶ型分泌系统的研究进展进行简要综述,为发展用于疾病诊断、治疗和预防的新策略提供依据.

细菌的Ⅶ型分泌系统研究进展

细菌分泌的蛋白是决定细菌致病性的重要因素之一。这些蛋白由细菌合成并分泌之后,或者存在于细菌表面,或者释放到细菌的外环境中,或者进入到宿主细胞内。含有典型信号序列的分泌蛋白由经典的Sec途径介导分泌,

罗非鱼无乳链球菌EsxA基因克隆与原核表达

Ⅶ型分泌系统(T7SS)是近年来发现的分泌系统,分泌两种胞外蛋白,EsxA基因编码的ESAT6蛋白和EsxB基因编码的CFP-10蛋白。分泌蛋白具有良好的免疫原性,促进细菌从巨噬细胞吞噬体逃逸、影响巨噬细胞凋亡及裂解细胞等生物学功能,与致病性密切相关。以罗非鱼源无乳链球菌为模板,克隆到294bp的EsxA基因,将目的序列克隆到pMD18-T载体,经测序,目的序列与无乳链球菌EsxA基因同源率在99%以上。EsxA基因克隆到pET32a载体中,重组载体在28℃、0.5mmol/L IPTG诱导条件下表达量最大,可溶性表达。将纯化的ESAT6蛋白免疫Balb/c鼠,成功制备ESAT6蛋白鼠多克隆抗体,经Western blot,ESAT6蛋白具有良好的反应原性。研究结果为进一步进行无乳链球菌ESAT6蛋白的免疫学功能研究奠定了基础。

罗非鱼无乳链球菌ΔessA、ΔessB、ΔessC敲除菌株的构建及其特性分析

Ⅶ型分泌系统存在于无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)中,其组成膜蛋白对底物蛋白的分泌转运至关重要。为此利用热敏型自杀质粒,构建了含氯霉素筛选标签的膜蛋白重组敲除载体pSET4s-ΔessA、pSET4s-ΔessB、pSET4s-ΔessC,经同源重组后,利用PCR技术筛选到了其缺失突变株-无乳链球菌ΔessA、ΔessB、ΔessC。通过菌株生长曲线分析,ΔessA、ΔessB、ΔessC敲除株均较野生株(WT)生长过程变慢,其中ΔessA、ΔessB敲除株在生长早期有显著性差异(P<0.01)。对ESAT6蛋白分泌影响分析显示,与WT株相比,ΔessA、ΔessB、ΔessC敲除株ESAT6的表达量均显著下调(P<0.01)。结果显示,ΔessA、ΔessB、ΔessC敲除株均较WT株毒力显著降低(P<0.01)。研究表明,essA、essB、essC为无乳链球菌Ⅶ型分泌系统重要的膜蛋白,其基因缺失造成了分泌蛋白ESAT6 mRNA表达水平下降,影响了菌株毒力。