不同条件储存制备对新鲜冰冻血浆凝血因子Ⅷ活性的影响

目的探讨不同条件储存制备新鲜冰冻血浆(FFP)的凝血因子Ⅷ(FⅧ)活性的变化。方法随机选取捐献全血的无偿献血者102名,将采集的全血在不同条件下储存制备新鲜冰冻血浆,分为A组(储存温度为20~24℃)、B组(储存温度为2~6℃后复温至37℃)、C组(储存温度为2~6℃血袋垂直)、D组(储存温度为2~6℃),分别于储存8 h、12 h和24 h各检测一次FⅧ活性。结果新鲜冰冻血浆的FⅧ活性随着制备时间的延长而呈下降趋势,其中以A组的FⅧ检测水平最高,其次为B组>C组>D组;A组全血在储存24 h后制备FFP的FⅧ含量合格率最高,为100.00%,明显高于B、C、D三组;上述结果差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论不同条件下储存制备新鲜冰冻血浆的凝血因子Ⅷ活性会产生明显变化,以20~24℃室温条件下全血储存24 h内制备FFP的合格率最高。

不同温度下3种血液制剂中FⅧ活性分析

目的了解新鲜冰冻血浆、亚甲蓝病毒灭活新鲜冰冻血浆和冷沉淀融化后在不同环境温度中FⅧ活性变化情况。方法随机选取储存于-20℃以下1年内的新鲜冰冻血浆、病毒灭活血浆和冷沉淀置于融浆机中融化后,分别于0、2、4、8和24 h检测3种血液制剂中FⅧ活性[检测标本分别置于(4±2)℃冰箱和20℃恒温水浴箱中保存]。结果融化后(0 h)3种血液制剂的FⅧ的活性分别为(125.8±5.6)、(75.4±3.5)和(58.4±4.2),其中新鲜冰冻血浆中FⅧ活性明显高于亚甲蓝病毒灭活新鲜冰冻血浆和冷沉淀(P<0.001);保存于(4±2)℃和20℃中的3种血液制剂FⅧ活性在24 h后分别为(76.3±5.1)、(39.1±2.9)、(35.1±3.7)和(60.3±4.1)、(35.2±3.0)、(31.7±4.6),其活性均明显下降(P<0.001)。结论 3种血液制剂中新鲜冰冻血浆中的FⅧ活性较高,且均随保存时间的延长而活性下降。建议在(4±2)℃保存融化后的血浆制剂,并尽快输注(最好在8 h内输注)。

新鲜血浆中凝血因子Ⅴ和Ⅷ活性测定分析

自1998年全国实施无偿献血以来,临床用血已全部来自无偿献血者。血浆中含有多种凝血因子等蛋白质成分,已成为临床重要的成分血之一。因血浆中的凝血因子Ⅴ(FⅤ)和凝血因子Ⅷ(FⅧ)为不稳定凝血因子而备受关注。无偿献血者血浆中FⅤ活性(FⅤ:C)和FⅧ活性(FⅧ:C)的有关问题尚未见报道。为了解不同血型无偿献血者血浆中FⅤ:C和FⅧ:C浓度,为确保新鲜冰冻血浆和原料血浆的质量提供科学依据,本文应用国际通用的一期法检测了血浆FⅤ:C和FⅧ:C。现报道如下。

全血采集次日分离前摇匀对血浆中凝血因子Ⅷ活性的影响

凝血因子是止血的重要成分，其中Ⅷ因子是一种重要的凝血因子．而且是一种不稳定的凝血因子．在止血过程中具有极其重要的作用，据文献报道该因子在4℃保存24h后．凝血因子Ⅷ活性会下降50％，而近年来国外有文献报道认为．凝血因子Ⅷ在4℃保存1～3d后活性并不是下降50％，而是由于4℃时凝血因子Ⅷ被沉淀在红细胞当中。所以离心后检测上清血浆．不能将部分凝血因子Ⅴ、Ⅷ检出，所以误认为活性降低50％。

新鲜血浆溶血程度对凝血因子Ⅷ活性的影响

目的探讨溶血程度对Ⅷ因子活性的影响,确定新浆制备过程能否混入少量红细胞。方法用2U新鲜血浆稀释1%浓度血红蛋白标准品,制备血红蛋白终浓度为0.1%、0.2%、0.3%、0.4%的新浆各50ml,静置20分钟,用血凝仪检测稀释前后新浆内Ⅷ因子活性。结果0～0.4%Hb区间Ⅷ因子活性无显著性差异。结论轻微溶血不会影响Ⅷ因子活性,不需去除新浆内少量红细胞。但由于红细胞混入量难以确定,为保证新浆质量,建议新浆都要二次离心去除红细胞。

健康人血清在37℃水浴中FⅧ活性与时问的关系

目的探讨健康人血清在37℃水浴中FⅧ活性与时间的关系,准确掌握FⅧ活性完全消耗的时间,以确保手工法检测凝血因子缺乏的准确性。方法采健康人静脉血3 ml,置37℃水浴中,凝固后分离血清,再置37℃水浴中并于不同的时间内用全自动血凝仪测定FⅧ活性。结果健康人血清在37℃水浴中FⅧ活性在4 h完全消耗。结论在手工法检测凝血因子缺乏时,健康人血清需在37℃水浴中放置4 h,方能用于凝血活酶生成纠正试验。

小儿原发性肾病综合征患者血浆蛋白Z、凝血因子Ⅷ活性的检验分析

目的探讨小儿原发性肾病综合征患者血浆蛋白Z水平及凝血因子Ⅷ的活性变化。方法选取该院原发性肾病综合征患儿94例作为观察组,另选取健康体检儿童63例作为对照组。入组研究对象均抽取外周静脉血分离血浆,采用酶联免疫吸附法测定血浆蛋白Z和凝血因子Ⅷ水平。比较两组血浆蛋白Z和凝血因子Ⅷ水平变化,急性期和恢复期血浆蛋白Z和凝血因子Ⅷ水平变化,及血浆蛋白Z与凝血因子Ⅷ的相关性。结果观察组血浆蛋白Z水平低于对照组,凝血因子Ⅷ水平高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05);急性期血浆蛋白Z水平低于恢复期,而凝血因子Ⅷ水平高于恢复期,差异均有统计学意义(P<0.05);血浆蛋白Z与凝血因子Ⅷ呈负相关。结论小儿原发性肾病综合征患者血浆蛋白Z水平明显降低,凝血因子Ⅷ活性明显增加,检测血浆蛋白Z和凝血因子Ⅷ水平能够预测小儿原发性肾病综合征。

重型血友病A患儿关节出血与血FⅧ活性及TEG指标的关系研究

目的探讨重型血友病A患儿关节出血与血FⅧ活性(FⅧ:C)及血栓弹力图(TEG)指标的关系。方法回顾性选取2019年1月至2022年1月在郑州大学附属儿童医院收治的76例重型血友病A患儿作为研究对象,根据是否伴有关节出血分组为出血组(N=22)与未出血组(N=54)。收集患儿一般临床资料,比较出血组与未出血组活化部分凝血酶原时间(APTT)、血友病关节健康评分(HJHS)、FⅧ:C和TEG检测指标,Pearson相关性分析APTT、HJHS与FⅧ:C的关系,APTT、HJHS评分与TEG检测指标的关系。结果出血组重型血友病A患儿APTT、HJHS低于未出血组,差异有统计学意义(P<0.05),凝血反应时间(R)、血凝块形成时间(K)、到达最大速度需要时间(TMRTG)水平均高于未出血组,差异有统计学意义(P<0.05)。重型血友病A患儿APTT与R、K、TMRTG均呈正相关,差异有统计学意义(r=0.412、0.435和0.434,P<0.05),HJHS评分与R、K、TMRTG均呈正相关,差异有统计学意义(r=0.426、0.441和0.410,P<0.05),APTT与a角、MRTG均呈负相关,差异有统计学意义(r=-0.314和-0.379,P<0.05),HJHS评分与a角、MRTG均呈负相关,差异有统计学意义(r=-0.337和-0.368,P<0.05)。结论重型血友病A患儿关节出血与FⅧ:C水平呈负相关,与TEG中R、K、TMRTG均呈正相关,与a角、MRTG均呈负相关,临床可通过FⅧ:C和TEG指标检测提供一定参考和帮助。

凝血因子Ⅷ和凝血因子Ⅸ活性检测影响因素的分析

目的 验证离心力对凝血因子FⅧ(FⅧ)活性和凝血因子FⅨ(FⅨ)活性检测的影响。方法 用全自动血凝分析仪测定室温700 g、1500 g、396 g和4℃1000 g、1500 g离心15 min以及4℃2700 g离心10 min,不同离心力条件下即刻和冷冻后48 h FⅧ和FⅨ的活性并进行数据统计分析。结果 6种不同离心方法得到的血浆,不管是立即检测还是冻存后检测,FⅧ和FⅨ的活性水平在不同离心力条件下没有显著性差异(P>0.05),同一离心力条件下冷冻后FⅧ活性水平跟即刻检测结果有统计学差异(P<0.05),同一离心条件下FⅨ活性在即刻和冷冻后检测结果无统计学差异(P>0.05)。结论 从离心机类型、离心力转速到离心时间和离心温度多方面分析,在一定离心力范围内不同离心力对FⅧ活性和FⅨ活性检测的影响不大,冻融会影响凝血因子Ⅷ活性水平检测,凝血因子Ⅸ活性检测不受冻融影响。

不同条件储存制备对新鲜冰冻血浆的凝血因子Ⅷ活性的影响

分析在不同条件存储制备对新鲜冰冻血浆的凝血因子Ⅷ活性的影响;方法 选取前来我血站无偿献血的80名献血者作为对象,将从他们采集到的全血分成甲、乙、丙、丁四组,分别在8h、12h、18h三个存储时间制备新鲜冰冻血浆,同时对不同条件下的凝血因子Ⅷ活性进行检测;结果 当存储时间相同时,甲组的新鲜冰冻血浆的凝血因子Ⅷ水平>乙组>丙组>丁组,4组新鲜冰冻血浆含有的凝血因子Ⅷ活性水平均跟时间呈负相关关系,其中甲组储存条件下新鲜冰冻血浆含有的凝血因子Ⅷ含量在三个不同存储时间下的合格率均为100%,乙组只有当存储时间8h、18h时新鲜冰冻血浆的凝血因子Ⅷ含量合格率均为100%,在储存时间为18h时合格率为75%;丙组在储存时间为8h、12h时的其新鲜冰冻血浆含有凝血因子Ⅷ含量合格率均为100%,但是在储存时间为18h时合格率为80%;丁组当储存时间为8h、12h时新鲜冰冻血浆中的凝血因子Ⅷ含量合格率均为100%,当储存时间为18h时新鲜冰冻血浆中的凝血因子Ⅷ含量合格率为65%;结论 新鲜冰冻血浆的凝血因子Ⅷ活性会伴随着存储时间的不断延长而不断降低,其中当存储的时间为18h时,新鲜冰冻血浆中含有的凝血因子Ⅷ合格率室温条件(即温度为20~24℃)优于2~6℃这一低温条件。

病毒灭活血浆制备时间对FⅧ活性的影响

目的:为在制备病毒灭活血浆过程中,寻找最佳工艺,尽量减少不耐热FⅧ活性的下降,制定病毒灭活血浆企业标准。方法:比对采血当天制备的病毒灭活血浆和采血第2天制备的病毒灭活血浆,检测其FⅧ因子活性。结果:采血第2天制备的病毒灭活血浆与采血当天制备的病毒灭活血浆,其FⅧ活性均值下降12.5%,合格率下降15%。结论:病毒灭活血浆制备时间对血浆中FⅧ活性的影响很大,为减少FⅧ活性的损耗,应优化制备工艺,缩短制备时间。病毒灭活血浆一方面降低了输注后病毒感染的风险,同时导致不耐热凝血因子活性的下降。

凝血因子Ⅷ活性检测现状及发展趋势

凝血因子Ⅷ(FⅧ)活性检测在血友病A、获得性血友病A及血管性血友病的诊断、分型、疗效监测和抑制物滴度检测等各方面中起着至关重要的作用。然而由于检测系统多样化、试剂组分的差异及干扰物质的存在等影响因素,国内实验室的FⅧ活性检测仍有改进空间。

血液储存时间温度对FⅧ:C活性的影响

目的:观察血液储存时间、温度对FⅧ:C活性的影响,为制备FⅧ:C活性符合质量标准的新鲜冰冻血浆及冷沉淀提供参考依据。方法:采用生物梅里埃公司生产的COAG-A-MATE MTX全自动血凝仪测定30份血液分别于不同温度,不同时间制备的FFP的FⅧ:C活性水平。结果:血液采集后不同储存温度,不同储存时间所制备的FFP中FⅧ:C活性水平有显著性差异(P<0.05)。结论:FFP中FⅧ:C活性水平与储存温度、时间相关,全血采集后4℃冰箱保存,于6h内分离、-50℃速冻而成的FFP其FⅧ:C活性水平符合新鲜冰冻血浆质量要求。

系统性红斑狼疮继发获得性血友病A 1例并文献复习

系统性红斑狼疮(SLE)是累及多器官、多系统的自身免疫性疾病,活动期常可累及血液系统,但导致凝血因子功能异常而继发获得性血友病A(AHA)相对罕见,易被误诊或漏诊。本文报道1例SLE继发AHA的青年女性患者,以头痛起病,活化部分凝血活酶时间明显延长,凝血因子Ⅷ活性明显下降,并逐渐出现面部蝶形红斑,血常规三系减少,最终诊断为SLE继发AHA。予糖皮质激素及免疫抑制剂治疗后病情缓解,凝血因子Ⅷ活性恢复正常。AHA主要临床表现多为近期自发性的急性出血,甚至危及生命。本文复习相关文献并进行总结,以期提高风湿科免疫科医生对AHA的认识。

22例获得性血友病A患者的临床特点及预后

目的探讨获得性血友病A(AHA)患者的临床特点及治疗结局。方法AHA患者22例为研究对象,收集一般临床资料(人口统计学数据、基础疾病、出血部位及发病至确诊时间等);抽取AHA患者空腹静脉全血,采用凝血分析仪检测凝血功能指标[凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)及国际标准化比值(INR)],采用Bethesda法检测血浆凝血因子抗体并确定高低抗体滴度、凝血分析仪检测凝血因子Ⅷ活性(FⅧ:C)及判断减低程度;所有患者行人重组活化凝血因子Ⅶ(rFⅦa)、凝血酶原复合物(PCC)及1-去氨基-8-d-精氨酸血管加压素(DDAVP)等一般止血治疗及相关的清除抗体治疗[糖皮质激素(GC)单用或联合环磷酰胺(CTX),利妥昔单抗(RTX)单用或联合GC或其他免疫抑制剂如环孢素(CsA)、他克莫司(FK506)等]治疗并随访收集患者治疗、生存情况、出血情况、血常规、FⅧ抗体滴度变化、抗体清除时间、治疗相关不良事件及死因等。结果22例AHA患者男女比例为1∶2.14,起病中位年龄59.95岁;有出血表现19例,严重出血13例;诊断时FⅧ∶C中位数1.37%、FⅧ抗体平均滴度6.9×10^(-3) BU/L,高滴度FⅧ抗体组和低滴度FⅧ抗体组AHA患者出血严重程度比较、差异有统计学意义(P<0.05);rFⅦa治疗11例,低滴度抗体者加大剂量FⅧ治疗4例;使用免疫抑制清除抗体治疗15例,抗体清除患者10例,平均抗体转阴时间(47.3±14.4)d,死亡4例;GC组、GC+CTX组及GC+其他药物组AHA患者的抗体清除时间比较,差异有统计学意义(P<0.05);AHA患者出现3级以上骨髓抑制8例,感染5例,库欣综合征1例。结论AHA以育龄期女性为主,出血是其主要临床表现;高滴度抗体患者及FⅧ活性重度减低患者更容易出现严重出血;止血首选rFⅦa或PCC旁路替代治疗,清除抗体可使用GC或者GC+免疫抑制剂治疗。

获得性凝血因子Ⅷ抑制物异常3例

例1 患者男性，17岁，因“突发意识不清7h”入院。既往有血友病A（HA）史，常有皮下血肿，多未予特殊处理。5月前因腹剧痛诊断为“肠套叠”，需手术治疗，当时查凝血指标：血浆凝血酶原时间（PT）14．30s，部分凝血活酶时间（APTT）121．40s，血浆纤维蛋白原（Fib）3．25g／l，凝血因子Ⅷ活性（FⅧ：C）〈1％；而予输注FⅧ治疗：首剂予800IU，4h后予600IU，3次／d[相当于40IU／（kg·d）1，至治疗开始10h后复查，APTT55．20s，