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不同维持剂量聚乙二醇修饰的FGF-21在Ⅰ型糖尿病小鼠中降糖作用的研究 被引量:5
1
作者 李德山 姜兴昊 +4 位作者 徐鹏飞 郑琦 贺奇 王耀群 任桂萍 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期69-75,共7页
成纤维细胞生长因子21(FGF-21)是一种具有调节血糖功能的蛋白,且FGF-21聚乙二醇化可增加其半衰期、降低其免疫原性,有望成为临床治疗糖尿病新药。为推进聚乙二醇化FGF-21(pFGF-21)临床应用,在I型糖尿病小鼠模型上探索使用剂量。研究以1 ... 成纤维细胞生长因子21(FGF-21)是一种具有调节血糖功能的蛋白,且FGF-21聚乙二醇化可增加其半衰期、降低其免疫原性,有望成为临床治疗糖尿病新药。为推进聚乙二醇化FGF-21(pFGF-21)临床应用,在I型糖尿病小鼠模型上探索使用剂量。研究以1 mg·kg^(-1)pFGF-21作为启动剂量治疗小鼠15 d;后降低治疗剂量,分别以0.25、0.5 mg·kg^(-1)pFGF-21作为维持剂量持续治疗30 d。试验期间检测小鼠血糖、口服葡萄糖耐受量(OGTT)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血清功能及肝脏糖代谢相关基因mRNA表达水平。结果发现,试验方法对Ⅰ型糖尿病治疗效果显著;此外,通过生化指标对比显示经pFGF-21治疗后,可显著改善肝脏功能和脂代谢紊乱(P<0.01)。结果证明,1 mg·kg^(-1)pFGF-21启动后,以0.25和0.5 mg·kg^(-1)作为维持剂量,即高剂量启动,低剂量维持,治疗效果良好,对pFGF-21临床应用具有重要意义。 展开更多
关键词 聚乙二醇修饰的成纤维细胞生长因子-21 Ⅰ型糖尿病 启动剂量 维持剂量
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SUMO融合系统高效表达可溶性鼠源FGF-21及其活性的研究 被引量:7
2
作者 任桂萍 姜媛媛 +3 位作者 刘铭瑶 孙国鹏 叶贤龙 李德山 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期62-67,共6页
利用SUMO表达载体在大肠杆菌中高效可溶性表达鼠源成纤维细胞生长因子(FGF-21)成熟蛋白,并研究其调节血糖的功能。将鼠源FGF-21成熟蛋白基因亚克隆至SUMO表达载体上,在大肠杆菌Rosetta(DE3)中诱导表达,并用镍离子螯合柱(Ni-NTA)纯化重... 利用SUMO表达载体在大肠杆菌中高效可溶性表达鼠源成纤维细胞生长因子(FGF-21)成熟蛋白,并研究其调节血糖的功能。将鼠源FGF-21成熟蛋白基因亚克隆至SUMO表达载体上,在大肠杆菌Rosetta(DE3)中诱导表达,并用镍离子螯合柱(Ni-NTA)纯化重组蛋白,透析后利用SUMO蛋白酶I切割融合蛋白,获得纯度较高的成熟蛋白。将3T3-L1成纤维细胞分化成脂肪细胞,经微量化的GOD-POD法检测培养基中葡萄糖含量,统计学分析葡萄糖消耗率。结果表明,在SUMO表达体系中鼠源FGF-21成熟蛋白基因以可溶形式表达,且可被SUMO蛋白酶I有效地切割,获得纯度较高的成熟蛋白。与未经处理的脂肪细胞对照组相比,经鼠源FGF-21成熟蛋白处理后脂肪细胞对葡萄糖的摄取利用显著增加,残存在培养基中的葡萄糖含量明显减少;两样本比较的t检验,P<0.001,差异极显著。 展开更多
关键词 SUMO SUMO蛋白酶I 分子伴侣 鼠源FGF-21 葡萄糖吸收
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mIL-21基因转染的Sp2/0瘤苗细胞的抗肿瘤机制探讨 被引量:5
3
作者 褚莉莉 窦骏 +4 位作者 赵枫姝 唐权 张爱凤 王永仿 顾宁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期507-510,共4页
目的:探讨小鼠IL-21瘤苗-Sp2/0-mIL-21抗肿瘤效应的机制。方法:用流式细胞术检测Sp2/0-mIL-2瘤苗细胞表面MHC-Ⅰ类分子及CD80分子的表达。以瘤苗细胞接种BALB/c小鼠,以CFSE,7-AAD标记,用流式细胞术检测NK细胞、CTL的细胞毒活性。观察肿... 目的:探讨小鼠IL-21瘤苗-Sp2/0-mIL-21抗肿瘤效应的机制。方法:用流式细胞术检测Sp2/0-mIL-2瘤苗细胞表面MHC-Ⅰ类分子及CD80分子的表达。以瘤苗细胞接种BALB/c小鼠,以CFSE,7-AAD标记,用流式细胞术检测NK细胞、CTL的细胞毒活性。观察肿瘤组织中淋巴细胞的浸润。用RT-PCR检测肿瘤组织中CXC家族趋化因子I-TAC的表达。结果:与对照组相比,瘤苗细胞膜表面MHC-Ⅰ类分子的表达明显上调。瘤苗接种组小鼠NK细胞、CTL的细胞毒活性明显增强。病理分析发现,肿瘤组织中有较多的淋巴细胞浸润并检测到干扰素诱导的T细胞α趋化因子(I-TAC)的表达上调。结论:肿瘤细胞瘤苗Sp2/0-mIL21可增强小鼠的细胞免疫作用,其抗肿瘤机制可能与T细胞的增殖、活化,促进NK细胞的分化成熟,淋巴细胞向肿瘤组织浸润,以及增强NK细胞和CTL的细胞毒活性有关。 展开更多
关键词 白细胞介素-21 瘤苗 羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE) 7-氨基放线菌素D(7-AAD) 干扰素诱导的T细胞α趋化因子(I-TAC) 抗肿瘤机制
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MicroRNA-21对食管鳞状上皮癌细胞TE-1生物学特性的影响
4
作者 黄珊 陈鑫 +4 位作者 马红兵 惠蓓娜 张丽 马海琳 张晓智 《现代肿瘤医学》 CAS 2015年第3期294-298,共5页
目的:食管鳞状上皮癌TE-1细胞中microRNA-21(miR-21)高表达,本研究探讨miR-21对TE-1细胞生物学特性的影响。方法:转染miRZip-21慢病毒,持久抑制TE-1细胞中高表达的miR-21,将由此获得的稳定细胞系命名为anti-miR-21细胞系,实时定量PCR方... 目的:食管鳞状上皮癌TE-1细胞中microRNA-21(miR-21)高表达,本研究探讨miR-21对TE-1细胞生物学特性的影响。方法:转染miRZip-21慢病毒,持久抑制TE-1细胞中高表达的miR-21,将由此获得的稳定细胞系命名为anti-miR-21细胞系,实时定量PCR方法验证,以TE-1细胞作为对照。细胞增殖实验检测anti-miR-21细胞增殖能力,Transwell侵袭实验观察细胞侵袭能力,Transwell迁移实验及划痕实验观察细胞迁移能力,克隆形成实验及细胞毒性实验分别观察放射线及药物敏感性变化。结果:Anti-miR-21细胞的相对增殖率较对照组TE-1细胞低,差异具有统计学意义(P<0.05)。Transwell侵袭实验及迁移实验显示穿过小室的anti-miR-21细胞较TE-1细胞分别减少51.97%及64.31%,差异具有统计学意义(P<0.05)。划痕实验显示anti-miR-21细胞较TE-1细胞的迁移率降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。克隆形成实验分析显示anti-miR-21细胞的D0值(2.73Gy vs 3.60Gy)和Dq值(1.25Gy vs 2.75Gy)均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。细胞毒性实验显示anti-miR-21细胞在顺铂及氟尿嘧啶各个梯度浓度下细胞存活率均降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:MiR-21影响食管鳞状上皮癌TE-1细胞的生物学特性。抑制miR-21表达后,降低了TE-1细胞的增殖、侵袭及迁移能力,同时增加了其对放射及化学药物的敏感性。MiR-21可能成为食管鳞癌治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 食管鳞癌 TE-1细胞 MICRORNA-21 生物学特性
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miR-21通过下调ADAMTS-1表达促进大鼠肺纤维化 被引量:8
5
作者 刘理静 尹辉明 +4 位作者 黄民江 贺兼斌 易高众 王在岩 钱红 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1636-1640,1645,共6页
目的探讨微小RNA21(miR-21)对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的影响及相关机制。方法收集特发性肺纤维化(IPF)患者及正常人的外周血各20份,采用荧光实时定量PCR检测miR-21表达。将45只SD大鼠随机分为对照组、miR-21激动剂(miR-21agomir)和m... 目的探讨微小RNA21(miR-21)对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的影响及相关机制。方法收集特发性肺纤维化(IPF)患者及正常人的外周血各20份,采用荧光实时定量PCR检测miR-21表达。将45只SD大鼠随机分为对照组、miR-21激动剂(miR-21agomir)和miR-21拮抗剂(miR-21antagomir)组,每组15只。经气管内注入博莱霉素A5建立肺纤维化模型后,分别给予生理盐水、miR21 agomir、miR21 antagomir尾静脉注射,第28天处死所有大鼠。取出肺组织,行HE和Masson染色,通过荧光实时定量PCR和Western blot法分别检测含1型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)、1型胶原蛋白(Col1)、Col3 mRNA与蛋白表达,分离血清,ELISA检测血清1型前胶原蛋白羧基端前肽(P1CP)和3型前胶原蛋白氨基端前肽(P3NP)的含量。结果 IPF患者外周血miR-21表达水平明显高于正常人。miR-21 agomir组大鼠肺泡炎和肺纤维化程度明显重于对照组,而miR-21 antagomir组大鼠肺泡炎和肺纤维化程度显著轻于对照组。与对照组相比,miR-21 agomir组ADAMTS-1mRNA与蛋白表达水平降低,Col1、Col3的mRNA与蛋白表达水平及血清P1CP、P3NP水平均增加。但miR-21 antagomir组ADAMTS-1 mRNA与蛋白表达水平较对照组升高,Col1、Col3的mRNA与蛋白表达水平及血清P1CP、P3NP含量较对照组减少。结论 miR-21促进博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化进展,其机制可能与下调ADAMTS-1表达及随后增加肺组织Col1、Col3含量有关。 展开更多
关键词 微小RNA21(miR-21) 肺纤维化 含1型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1) 1型胶原蛋白(Col1) 3型胶原蛋白(Col3)
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sMICA、CYFRA21-1、MMP9在食管鳞状细胞癌中的表达及与化疗疗效的关系 被引量:7
6
作者 王丽华 郭君兰 +1 位作者 胡彦伟 焦智民 《癌症进展》 2019年第19期2280-2283,共4页
目的探讨可溶型主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关蛋白A(sMICA)、细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、基质金属蛋白酶9(MMP9)在食管鳞状细胞癌中的表达情况及与化疗疗效的关系。方法选取经病理确诊的95例食管鳞状细胞癌患者的食管鳞... 目的探讨可溶型主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关蛋白A(sMICA)、细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、基质金属蛋白酶9(MMP9)在食管鳞状细胞癌中的表达情况及与化疗疗效的关系。方法选取经病理确诊的95例食管鳞状细胞癌患者的食管鳞状细胞癌组织,采用免疫组化SP连接法检测sMICA、CYFRA21-1、MMP9表达情况。化疗后评估疗效,分析sMICA、CYFRA21-1、MMP9的表达与化疗疗效的关系。结果95例食管鳞状细胞癌患者中,sMICA阳性表达59例(62.11%),CYFRA21-1阳性表达62例(65.26%),MMP9阳性表达75例(78.95%)。不同TNM分期、分化程度的食管鳞状细胞癌患者的食管鳞状细胞癌组织中sMICA、CYFRA21-1、MMP9阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。95例患者化疗后,总有效率为58.95%,sMICA、CYFRA21-1、MMP9阴性表达的患者疗效优于阳性表达的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。多元Cox回归分析结果显示,TNM分期、分化程度、sMICA、CYFRA21-1、MMP9表达均是食管鳞状细胞癌患者化疗疗效的独立影响因素(P﹤0.01)。结论肿瘤标志性分子sMICA、CYFRA21-1、MMP9在食管鳞状细胞癌中阳性表达率高,与患者TNM分期、分化程度及化疗疗效密切相关。 展开更多
关键词 可溶型主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关蛋白A 细胞角质蛋白19片段抗原21-1 基质金属蛋白酶9 食管鳞状细胞癌 化疗
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稳定表达鸡ST3GALⅠ基因BHK-21细胞株的建立
7
作者 陈欢 李明义 高轩 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第3期10-15,共6页
筛选稳定表达鸡ST3GalⅠ基因的BHK-21细胞株,为进一步研究禽流感病毒大规模细胞培养生产疫苗奠定基础。克隆鸡ST3GalⅠ基因并将其插入真核表达质粒pcDNA3.1-EGFP中构建重组质粒pcDNA3.1-EGFP-ST3GaⅠ,鉴定正确的真核表达载体转染BHK-21... 筛选稳定表达鸡ST3GalⅠ基因的BHK-21细胞株,为进一步研究禽流感病毒大规模细胞培养生产疫苗奠定基础。克隆鸡ST3GalⅠ基因并将其插入真核表达质粒pcDNA3.1-EGFP中构建重组质粒pcDNA3.1-EGFP-ST3GaⅠ,鉴定正确的真核表达载体转染BHK-21细胞后,ST3GalⅠ基因在细胞中稳定表达,经G418抗性和RT-PCR筛选鉴定表达阳性的单克隆细胞株。将H9亚型禽流感病毒和H5N1Re-5禽流感病毒按不同比例接种BHK-21-ST3GalⅠ细胞和空白BHK-21细胞,同时设普通胰酶和TPCK-胰酶对照组以检测BHK-21-ST3GalⅠ细胞对H9亚型禽流感病毒和H5N1Re-5禽流感病毒的增殖效果。接毒72h后收获细胞液,常规方法测定血凝素(HA)滴度。通过在BHK-21细胞中稳定表达ST3GalⅠ基因,提高BHK-21细胞表面SAα-2,3Gal受体丰度连续传6代后仍然能检测到其表达,荧光显微镜下能看到绿色荧光,RT-PCR可检出1 029bp的目的条带。结果显示,BHK-21-ST3GalⅠ细胞在接毒量为2%时HA滴度达到1∶256,显著高于空白BHK-21细胞组,表明其更适于流感病毒的增殖,具备生产流感病毒疫苗的潜力。 展开更多
关键词 ST3GALⅠ基因 重组质粒 稳定表达 BHK-21细胞
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Recurrent isochromosome 21 and multiple abnormalities in a patient suspected of having acute myeloid leukemia with eosinophilic differentiation—a rare case from South India
8
作者 Sangeetha Vijay Santhi Sarojam +4 位作者 Sureshkumar Raveendran Vani Syamala Sreeja Leelakumari Geetha Narayanan Sreedharan Hariharan 《Chinese Journal of Cancer》 SCIE CAS CSCD 2012年第1期45-50,共6页
Acute myeloid leukemia (AML) is a phenotypically heterogeneous disorder. The M4 subtype of AML is frequently associated with the cytogenetic marker inversion 16 and/or the presence of eosinophilia. Blast crisis is the... Acute myeloid leukemia (AML) is a phenotypically heterogeneous disorder. The M4 subtype of AML is frequently associated with the cytogenetic marker inversion 16 and/or the presence of eosinophilia. Blast crisis is the aggressive phase of the triphasic chronic myeloid leukemia (CML), which is a disease with Philadelphia (Ph) chromosome as the major abnormality. In the present study, we report a 76-year-old patient suspected of having AML with eosinophilic differentiation (AML-M4), which in clinical tests resembles CML blast crisis with multiple chromosomal abnormalities. Isochromosome 21 [i(21)(q10)] was the most recurrent feature noted in metaphases with 46 chromosomes. Ring chromosome, tetraploid endoreduplication, recurrent aneuploid clones with loss of X chromosome, monosomy 17, monosomy 7, and structural variation translocation (9;14) were also observed in this patient. Fluorescent in situ hybridization (FISH) confirmed the absence of Ph chromosome. This report shows how cytogenetic analyses revealed atypical structural aberrations in the M4 subtype of AML. 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病 嗜酸性粒细胞 等臂染色体 染色体异常 髓细胞 急性 细胞遗传学分析 复发
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蓝舌病病毒感染对BHK-21细胞中Ⅰ型干扰素应答的影响
9
作者 罗世美 陈韵伊 +15 位作者 李其沙 周艳梅 王怡斐 廖芯玉 胡雪柔 魏远健 李梦琴 朱萌 张迅 陈贝蕊 马鲜平 谢佳芮 寇美玲 苗海生 李芳 易华山 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1639-1644,1690,共7页
蓝舌病病毒(bluetongue virus,BTV)是一种严重危害绵羊等反刍动物的一种虫媒病毒,为研究蓝舌病病毒感染与宿主细胞干扰素抗病毒免疫应答的分子机制。研究以感染复数(MOI)为1的BTV诱导18、24、36 h的BHK-21细胞通过实时荧光定量PCR分析... 蓝舌病病毒(bluetongue virus,BTV)是一种严重危害绵羊等反刍动物的一种虫媒病毒,为研究蓝舌病病毒感染与宿主细胞干扰素抗病毒免疫应答的分子机制。研究以感染复数(MOI)为1的BTV诱导18、24、36 h的BHK-21细胞通过实时荧光定量PCR分析干扰素通路基因mRNA表达特征,以及Western blot分析MDA5、TRAF3、RIG-Ⅰ和TBK1蛋白表达。结果表明,在诱导24 h时,干扰素信号通路基因表达的变化最为明显,IFN-α、IFN-β、RIG-Ⅰ、TBK1、MDA5、VISA、TRAF3基因的mRNA表达水平呈上调表达,而IKKε、TRAF6基因的mRNA表达水平呈下调表达,在蛋白水平上MDA5、TBK1蛋白上调表达而RIG-Ⅰ、TRAF3蛋白下调表达,表明BTV感染诱导BHK-21细胞中Ⅰ型干扰素免疫应答,为进一步探究IFN-Ⅰ信号通路调控基因在BTV感染的宿主细胞抗病毒免疫机制研究奠定基础。 展开更多
关键词 蓝舌病病毒 天然免疫 Ⅰ型干扰素 BHK-21
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美国在中日“二十一条”交涉中态度的历史考察 被引量:3
10
作者 黄文治 《安徽广播电视大学学报》 2006年第4期112-116,共5页
美国在“二十一条”交涉中的态度,学术界专文论述的很少。而在当时,北京政府又有意联美制日,因此尚未参加一战的美国,对中日“二十一条”交涉的态度就显得非常重要。本文从美国对中日“二十一条”交涉中态度变化情况、原因及对中日两国... 美国在“二十一条”交涉中的态度,学术界专文论述的很少。而在当时,北京政府又有意联美制日,因此尚未参加一战的美国,对中日“二十一条”交涉的态度就显得非常重要。本文从美国对中日“二十一条”交涉中态度变化情况、原因及对中日两国的影响三个方面,作一个历史考察。 展开更多
关键词 美国 一战 二十一条
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通光藤甙F,G ,H和I结构(英文) 被引量:27
11
作者 陈纪军 张壮鑫 周俊 《云南植物研究》 CSCD 1999年第3期369-377,共9页
从通光藤(Marsdeniatenacissima)的茎中分离得到4个新的C21甾体甙———通光藤甙F(3),G(4),H(5)和I(6),以及2个已知化合物通光藤甙A(1)和B(2)。根据光谱数据和化学方法推定了其结构。同时,通过COLOC谱和二维核磁共振谱指定了这些化合物... 从通光藤(Marsdeniatenacissima)的茎中分离得到4个新的C21甾体甙———通光藤甙F(3),G(4),H(5)和I(6),以及2个已知化合物通光藤甙A(1)和B(2)。根据光谱数据和化学方法推定了其结构。同时,通过COLOC谱和二维核磁共振谱指定了这些化合物中甙元上11和12位的酯基确切连接位置。 展开更多
关键词 萝MO科 通光藤 C21甾体甙
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LED灯具中光源寿命的预测方法 被引量:1
12
作者 陈国义 《演艺科技》 2012年第12期6-10,共5页
LED灯具中光源具有很长的寿命,如何用相对较短时间的测试结果预测很长的寿命,长期缺少权威的依据。本文参照IESTM-21的标准介绍可能用于预估LED灯具光源流明维持寿命的一种方法,供业界参考。
关键词 LED灯具 流明维持率 光源寿命 行业标准 预测方法 IESTM-21
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M-I型纳米颗粒膜逾渗阈值的测量及验证
13
作者 胡松青 杨渭 《石油大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2003年第1期116-118,125,共4页
采用磁控溅射法 ,在玻璃基片上制备了一系列不同Ni79Fe2 1含量的 (Ni79Fe2 1) x(Al2 O3 ) 1-xM I型纳米颗粒膜。测量并分析了电阻率与体积分数的关系 ,得出该颗粒膜的体积分数逾渗阈值大约为 0 .5 1。分别用 4种方法验证了M I型纳米颗... 采用磁控溅射法 ,在玻璃基片上制备了一系列不同Ni79Fe2 1含量的 (Ni79Fe2 1) x(Al2 O3 ) 1-xM I型纳米颗粒膜。测量并分析了电阻率与体积分数的关系 ,得出该颗粒膜的体积分数逾渗阈值大约为 0 .5 1。分别用 4种方法验证了M I型纳米颗粒膜的逾渗阈值。 展开更多
关键词 磁控溅射法 (Ni79Fe21)x(Al2O3)1-x M-I型纳米颗粒膜 逾渗阈值
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ADC量化对于中性氢观测影响的研究分析
14
作者 张华山 金乘进 岳友岭 《微型机与应用》 2015年第7期52-54,59,共4页
随着数字技术的日益发展,应用在天文观测领域的数字信号处理技术也越来越成熟。本文针对ADC量化对于中性氢(HI)观测的影响进行研究分析。首先对HI观测进行了介绍性描述;在此基础上,对于使用实验室4.5 m天线进行HI观测时的信号接收处理... 随着数字技术的日益发展,应用在天文观测领域的数字信号处理技术也越来越成熟。本文针对ADC量化对于中性氢(HI)观测的影响进行研究分析。首先对HI观测进行了介绍性描述;在此基础上,对于使用实验室4.5 m天线进行HI观测时的信号接收处理系统进行了描述;重点对ADC量化以及射电望远镜灵敏度的相关公式进行推导,并结合4.5 m天线实际观测的数据处理结果进行对比说明,指出并证实了ADC量化位数不足带来的对于观测效果的影响可以通过提高积分时间得到补偿。 展开更多
关键词 ADC 量化 中性氢谱线 灵敏度
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人源FGF-21的高效可溶性表达及其调节血糖功能的初步研究 被引量:4
15
作者 任桂萍 侯玉婷 +4 位作者 姜媛媛 李晋南 张薇 刘娣 李德山 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期548-552,共5页
将人源FGF-21基因亚克隆至pSUMO表达载体上,在大肠杆菌Rosetta(DE3)中诱导表达,在pSUMO表达体系中的重组人源FGF-21以可溶形式表达,重组蛋白经镍离子螯合柱(Ni-NTA)纯化,透析后利用SUMO蛋白酶I切割融合蛋白,获得纯度较高的重组人源FGF-2... 将人源FGF-21基因亚克隆至pSUMO表达载体上,在大肠杆菌Rosetta(DE3)中诱导表达,在pSUMO表达体系中的重组人源FGF-21以可溶形式表达,重组蛋白经镍离子螯合柱(Ni-NTA)纯化,透析后利用SUMO蛋白酶I切割融合蛋白,获得纯度较高的重组人源FGF-21。将3T3-L1成纤维细胞分化成脂肪细胞,经微量化的GOD-POD法检测培养基中葡萄糖含量,统计学分析葡萄糖消耗率。与未经处理的脂肪细胞对照组相比,经重组人源FGF-21处理后脂肪细胞对葡萄糖的摄取利用显著增加,残存在培养基中的葡萄糖含量明显减少(P<0.05,P<0.001)。 展开更多
关键词 人源FGF-21 SUMO SUMO蛋白酶I 分子伴侣 表达
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美坝白语的名物化标记
16
作者 李煊 《民族语文》 CSSCI 北大核心 2024年第4期62-74,共13页
美坝白语中没有小句名物化,相对来说,词汇名物化手段比较丰富,主要通过n■^(44)、■i^(21)、tsh■^(31)来表达词汇名物化。n■^(44)的名物化标记功能是在属性标记和关系化标记的功能上发展而来,因此和词汇的搭配以及所表达的语义都与上... 美坝白语中没有小句名物化,相对来说,词汇名物化手段比较丰富,主要通过n■^(44)、■i^(21)、tsh■^(31)来表达词汇名物化。n■^(44)的名物化标记功能是在属性标记和关系化标记的功能上发展而来,因此和词汇的搭配以及所表达的语义都与上述功能密切相关。■i^(21)的名物化功能直接从量词发展而来,同样用于修饰人的量词t■^(21)、pa^(35)、xu■33也有名物化标记的功能,但不如■i^(21)常用。■i^(21)和n■^(44)都能用于名物化动作的论元,但■i^(21)只用于名物化由人充当的施事论元,n■^(44)可以名物化动作的不同论元。■i^(21)和n■^(44)都用于名物化由人充当的施事论元时,二者所指对象的有定性不同。tsh■^(31)的词汇义是“处”,用作名物化标记时,加在动词或动词短语后表示动作发生的时间,加在形容词后表示性质或状态本身,在语义上和n■^(44)、■i^(21)互补。美坝白语的材料体现了汉藏语系语言名物化手段的多样性及其内部系统性。 展开更多
关键词 美坝白语 名物化 n■^(44) ■i^(21) tsh■^(31)
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非小细胞肺癌组织miRNA-21表达及预后相关性研究 被引量:9
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作者 刘风林 王新锋 +1 位作者 王兴武 宋宝 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2012年第18期1397-1399,共3页
目的:探讨miRNA-21在Ⅰ期非小细胞肺癌组织中的表达及其与复发转移和预后的关系。方法:回顾性分析2002-2006年间本院48例Ⅰ期肺癌手术患者的临床资料,采用定量RT-PCR方法检测上述病例肺癌组织标本中miR-NA-21的表达水平,根据miRNA-21相... 目的:探讨miRNA-21在Ⅰ期非小细胞肺癌组织中的表达及其与复发转移和预后的关系。方法:回顾性分析2002-2006年间本院48例Ⅰ期肺癌手术患者的临床资料,采用定量RT-PCR方法检测上述病例肺癌组织标本中miR-NA-21的表达水平,根据miRNA-21相对表达量进行实验分组。应用χ2检验分析miRNA-21表达与肺癌患者复发转移的关系,应用Kaplan-Meier方法分析miR-21表达与生存的关系。结果:肺癌组织中miRNA-21的表达显著高于正常肺组织。以肿瘤组织与正常组织miR-21表达量比值为2作为分界值,将肺癌患者分为miRNA-21分为高表达组和低表达组。miRNA-21高表达组中,肺癌复发转移率为52.4%(11/21),miRNA-21低表达组中,复发转移率为11.1%(3/27),两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。生存分析显示miRNA-21高表达组较之miRNA-21低表达组患者生存期明显降低。结论:miRNA-21高表达与肺癌复发转移具有密切的关系,miRNA-21表达增高提示肺癌患者预后不良。 展开更多
关键词 非小细胞肺 MIRNA-21 复发转移 预后 肿瘤分期 Ⅰ期
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稳定表达鸡ST3GalⅠ的BHK-21细胞株的构建及禽流感病毒的增殖 被引量:1
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作者 陈欢 李明义 高轩 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1527-1532,共6页
克隆鸡ST3GalⅠ基因并将其插入真核表达载体pcDNA3.1-EGFP中构建真核表达质粒,转染BHK-21细胞后,通过G418抗性和绿色荧光蛋白标记双重筛选,鉴定1株表达ST3GalⅠ阳性的单克隆细胞株,绿色荧光丰富。经流式细胞仪检测,BHK-21-ST3GalⅠ细胞... 克隆鸡ST3GalⅠ基因并将其插入真核表达载体pcDNA3.1-EGFP中构建真核表达质粒,转染BHK-21细胞后,通过G418抗性和绿色荧光蛋白标记双重筛选,鉴定1株表达ST3GalⅠ阳性的单克隆细胞株,绿色荧光丰富。经流式细胞仪检测,BHK-21-ST3GalⅠ细胞株中α-2,3连接型受体丰度较亲代BHK-21细胞显著提高。连续传5代10代后仍能检测到其表达,表明ST3GalⅠ基因在细胞中稳定表达。为了检测BHK-21-ST3GalⅠ细胞对H9亚型流感病毒和H5N1Re-5病毒的增殖效果,将H9亚型流感病毒和H5N1Re-5病毒接种BHK-21-ST3GalⅠ细胞和BHK-21细胞,同时设普通胰酶和TPCK-胰酶对照组。接毒72h后收获细胞液,常规方法测定血凝素(HA)滴度。试验结果表明,BHK-21-ST3GalⅠ细胞中禽流感病毒的HA滴度达到1∶256,显著高于BHK-21细胞组,表明其更适于流感病毒的增殖,具备生产流感病毒疫苗的潜力。 展开更多
关键词 ST3GalⅠ重组质粒pcDNA3 1-EGFP—ST3GalⅠ 转染 稳定表达 BHK-21-ST3GalⅠ细胞
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血清microRNA-21、sMICA水平检测在食管鳞状细胞癌诊断中的应用价值
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作者 卢辉 高明 +1 位作者 孙亚琼 张倩 《中国实用医刊》 2021年第11期10-13,共4页
目的分析血清microRNA-21、可溶性人类主要组织相容性复合体Ⅰ类相关链A(sMICA)水平检测在食管鳞状细胞癌诊断中的应用价值。方法抽取2018年6月至2019年6月郑州市第一人民医院收治的50例食管鳞状细胞癌患者,以荧光定量聚合酶链式反应检... 目的分析血清microRNA-21、可溶性人类主要组织相容性复合体Ⅰ类相关链A(sMICA)水平检测在食管鳞状细胞癌诊断中的应用价值。方法抽取2018年6月至2019年6月郑州市第一人民医院收治的50例食管鳞状细胞癌患者,以荧光定量聚合酶链式反应检测microRNA-21,以酶联免疫吸附法检测sMICA。比较不同分化程度、TNM分期患者血清microRNA-21、sMICA水平。比较有无淋巴结转移患者血清microRNA-21、sMICA水平。随访1年,比较存活患者与死亡患者血清microRNA-21、sMICA水平。结果低分化患者血清microRNA-21、sMICA水平高于中分化患者,中分化患者上述指标水平高于高分化患者(P<0.05)。IV期患者血清microRNA-21、sMICA水平高于Ⅲ期患者,Ⅲ期患者上述指标水平高于Ⅱ期患者,Ⅱ期患者上述指标水平高于Ⅰ期患者(P<0.05)。淋巴结转移患者血清microRNA-21、sMICA水平高于无淋巴结转移患者(P<0.05)。随访1年,50例患者中死亡18例(36.00%),存活32例(64.00%)。死亡患者血清microRNA-21、sMICA水平高于存活患者(P<0.05)。结论食管鳞状细胞癌患者机体血清microRNA-21、sMICA水平普遍呈高表达状态,分期晚、分化差、生存期短的患者表达水平更高。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 MICRORNA-21 可溶性人类主要组织相容性复合体Ⅰ类相关链A 生物学行为 预后
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基于启发式教学的学习者信息需求调查与分析研究
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作者 吴彦文 陈克艳 曹芬荣 《图书馆学研究(应用版)》 CSSCI 2011年第3期64-68,共5页
为了使启发式教学更有效地开展,研究启发式教学中学习者的信息需求是必不可少的环节。笔者在对《教学设计原理与方法》课程连续三年启发式教学实践的研究过程中,收集、整理并统计分析《启发式教学中学习者信息需求的调查问卷》。针对分... 为了使启发式教学更有效地开展,研究启发式教学中学习者的信息需求是必不可少的环节。笔者在对《教学设计原理与方法》课程连续三年启发式教学实践的研究过程中,收集、整理并统计分析《启发式教学中学习者信息需求的调查问卷》。针对分析结果,提出学习者的信息需求层次模型,基于此模型给出启发式教学中对学习者进行知识与信息引导的策略,并辅以个性化的学习支持服务,以达到提升教学效果的目的。 展开更多
关键词 启发式教学 信息需求 系统动力学方法 信息需求层次模型
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