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题名正、反义β1,4半乳糖基转移酶-V表达质粒的构建
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作者
严美娟
程纯
邵晓轶
李爱红
张冬梅
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机构
南通大学基础医学院微生物学与免疫学教研室
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出处
《中国交通医学杂志》
2005年第1期5-7,共3页
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基金
江苏省高校高新技术产业发展项目(JH02-117)
江苏省高校自然科学研究项目(04KJB320114)
江苏省社会发展科技指导性计划项目(BS2004526)
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文摘
目的 :探讨不同 β1,4半乳糖基转移酶 -V (β -1,4-GalTV)表达水平的生物学意义 ,构建正、反义 β -1,4-GalTV表达质粒。方法 :设计 β -1,4-GalTV全长引物 ;提取小鼠脑总RNA ,通过RT -PCR方法 ,得到全长 β -1,4-GalTV基因片段 ,将其克隆到 pGEM -T载体。再通过多克隆酶切位点 ,将 β -1,4-GalTV全长序列克隆到 pcD NA 3 .1表达载体中。设计反义引物 ,以pGEM -β -1,4-GalTV质粒为模板 ,将PCR产物克隆到 pcDNA 3 .1表达载体中。通过酶切和测序鉴定构建的质粒。结果 :通过酶切和测序证实 ,得到了正、反义 β -1,4-GalTV表达质粒。 结论 :正、反义 β -1,4-GalTV表达质粒的构建 ,为进一步研究不同 β -1,4-GalTV表达水平的生物学意义奠定基础。
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关键词
β1
4半乳糖基转移酶-V
逆转录-聚合酶链反应
正
、反义表达质粒
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Keywords
galactosyltransferase V RT-PCR Sense、antisense expression plasmid
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分类号
Q555
[生物学—生物化学]
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