补肺养阴方联合利奈唑胺对复治肺结核患者呼吸功能、炎性因子及B、T淋巴细胞衰减子的影响

目的分析利奈唑胺联合补肺养阴汤用于治疗复治肺结核对改善患者呼吸功能、血清炎性因子和肺组织中B、T淋巴细胞衰减子表达的作用。方法选择进行肺结核再次治疗的86例患者,采取随机数字排列表法将86例患者分成常规组及观察组,每组43例,常规组予以利奈唑胺治疗,观察组予以利奈唑胺联合补肺养阴汤治疗。比较治疗前后两组氧分压、二氧化碳分压、第1秒用力呼气量(FEV1)、用力肺活量(FVC)以及FEV1/FVC水平;白细胞介素(IL)-6、IL-8以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;CD4^+、CD8^+水平以及CD4^+/CD8+比值。对比每组治疗效果以及不良反应发生情况。结果常规组与观察组治疗前氧分压、二氧化碳分压、FEV1、FVC以及FEV1/FVC指标方面比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后观察组氧分压指标高于常规组;二氧化碳分压指标低于常规组;FEV1、FVC以及FEV1/FVC指标均高于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。常规组与观察组治疗前在IL-6、IL-8以及TNF-α方面水平比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后观察组在IL-6、IL-8以及TNF-α方面水平均低于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。常规组与观察组治疗前在CD4^+、CD8^+水平以及CD4^+/CD8^+比值方面比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后观察组在CD4^+以及CD4^+/CD8^+比值方面均高于常规组,CD8^+水平低于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组与常规组总有效率分别是97.67%、81.40%,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组与常规组不良反应总出现率分别是9.30%、11.63%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论复治肺结核病患采用利奈唑胺以及补肺养阴方治疗可有效提升患者呼吸功能,改善机体炎症水平,提升机体免疫功能,促进患者生活质量提高。

原发性肝癌患者外周血淋巴细胞及其亚群B、T淋巴细胞衰减子表达的研究

目的探讨原发性肝癌患者外周血淋巴细胞及其亚群B、T淋巴细胞衰减子（BTLA）的表达情况。方法应用流式细胞术（FCM）检测原发性肝癌组（45例）及健康体检对照组（28例）及乙肝后肝硬化组（20例）外周血CD4^＋、CD8^＋及CD19^＋淋巴细胞BTLA的表达，比较其差异。结果3组对象CD19^＋细胞BTLA均呈高表达；肝癌组患者外周血中CD8^＋,CD4^＋细胞BTLA的表达均明显高于对照组（均P〈0.05），肝硬化组患者外周血中CD4^＋细胞BTLA的表达明显高于对照组（P〈0．05）。结论BTLA这一负性共信号分子的异常表达可能在肿瘤逃逸免疫应答中起一定的调节作用。

克拉维酸钾配伍阿莫西林治疗对老年肺结核外周血自然杀伤细胞表面受体及肺组织中B、T淋巴细胞衰减子表达的影响

目的探究克拉维酸钾联合阿莫西林治疗老年肺结核患者外周血自然杀伤细胞(NK)细胞表面受体和肺组织中B、T淋巴细胞衰减子(BTLA)表达的影响。方法选取老年肺结核患者120例,随机分成研究组和对照组,各60例,对照组采用左氧氟沙星治疗,研究组采用克拉维酸钾配伍阿莫西林并结合左氧氟沙星进行治疗,比较治疗前与治疗后3个月、6个月两组痰菌阴转率、肺部病灶吸收、空洞闭合率情况;并对两组治疗前与治疗后3个月、6个月NK细胞表面受体表达率、肺组织中BTLA表达情况及不良反应发生率进行比较。结果治疗前,两组各指标比较无统计学差异(P>0.05);治疗后3个月,研究组痰菌阴转率、肺部病灶吸收有效率显著高于对照组(P<0.05),治疗后6个月两组痰菌阴转率、肺部病灶吸收有效率比较差异无统计学意义(P>0.05);两组治疗后3个月和6个月空洞闭合率、NK细胞表面受体表达率、肺组织中BTLA表达情况均较治疗前显著降低(P<0.05),且研究组相比于对照组更低(P<0.05);治疗期间两组不良反应发生情况比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论应用克拉维酸钾配伍阿莫西林治疗对老年肺结核疗效确切,不良反应发生较少,对于老年肺结核外周血NK细胞表面受体及肺组织中BTLA表达有显著调节作用。

N-乙酰半胱氨酸联合利奈唑胺对肺结核患者呼吸功能、肺组织中B、T淋巴细胞衰减子表达的影响

目的分析N-乙酰半胱氨酸联合利奈唑胺对肺结核患者呼吸功能、肺组织中B、T淋巴细胞衰减子表达的影响。方法选择2016年8月至2019年8月在我院诊治的63例肺结核患者为对象,分为观察组33例和对照组30例,对照组采用利奈唑胺治疗,观察组采用N-乙酰半胱氨酸联合利奈唑胺治疗。对比两组治疗效果,治疗前后呼吸功能,血清谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、超氧化物岐化酶(SOD)、血浆丙二醛(MDA)水平,血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)及肿瘤坏死因子(TNF-α)水平,CD4细胞(CD4^(+))、CD8细胞(CD8^(+))及CD4^(+)/CD8^(+),治疗后不良反应发生率。结果观察组总有效率显著高于对照组[95.24%(40/42)vs.76.32%(29/38)](P<0.05);与对照组相比,观察组FVC、FEV1、FEV1/FVC水平更高[(1.99±0.35)L vs.(1.56±0.34)L,(65.09±7.60)%vs.(59.01±6.23)%,(71.02±7.65)vs.(60.36±6.32)](P<0.05);与对照组相比,观察组GPX、SOD水平更高[(147.92±18.65)L vs.(138.85±17.32)L,(154.15±6.89)U/ml vs.(100.21±4.32)U/ml](P<0.05);与对照组相比,观察组IL-6、IL-8及TNF-α水平更低[(152.87±3.21)pg/ml vs.(178.65±4.36)pg/ml,(305.12±12.62)pg/ml vs.(421.61±15.38)pg/ml,(42.68±9.32)pg/ml vs.(60.32±10.37)pg/ml](P<0.05);与对照组相比,观察组CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平更高[(0.52±0.08)%vs.(0.42±0.07)%,(1.70±0.25)vs.(1.41±0.20)](P<0.05);CD8^(+)水平更低[(0.20±0.03)%vs.(0.28±0.04)%](P<0.05)。结论N-乙酰半胱氨酸联合利奈唑胺治疗肺结核具有显著的效果,可提高肺结核患者呼吸功能和免疫功能,改善患者临床症状,抑制炎症介质释放,维护氧化/抗氧化平衡。

转染人BTLA基因细胞株的建立及其生物学功能的初步研究

目的:构建B、T淋巴细胞衰减子(BTLA)基因转染的细胞作为免疫原,并探讨该基因转染细胞在体外的生物学功能。方法:通过RT-PCR法从经PHA活化的人外周血T细胞中克隆出人BTLA编码区全长基因,经EcoR I和BamHI双酶切后插入逆转录病毒载体pEGZ-Term中构建成重组载体pEGZ-Term/BTLA。用脂质体法以重组逆转录病毒载体转染293T细胞,并用Zeocin抗生素进行长期筛选;流式细胞术分析BTLA在基因转染细胞膜上的表达;通过MTT法和流式细胞术探讨基因转染细胞在体外对T淋巴细胞增殖与活化的影响。结果:流式细胞术检测表明BTLA基因转染的293T细胞膜上能稳定地高表达人BTLA蛋白。BTLA基因转染的293T细胞和T细胞体外共培养显示,与未转染的293T细胞相比,该基因转染的细胞能部分地抑制抗人CD3单克隆抗体(mAb)刺激的T细胞增殖;流式细胞术和ELISA法分析揭示,该基因转染的细胞能够下调T细胞表面活化标志CD25的表达并降低IFN-γ和IL-10的分泌。结论:获得稳定高表达人BTLA基因转染的细胞株。该细胞株在体外对抗人CD3 mAb刺激的T细胞的增殖与活化具有部分地抑制作用。

负性共刺激分子免疫球蛋白BTLA的特点及其在肺结核病灶组织中的表达

目的探讨不同年龄段肺结核患者病灶组织中负性共刺激分子BTLA的表达情况。方法设立老年肺结核组(15例)、青年肺结核组(13例)、对照组(10例),分别利用免疫组织化学染色检测各组肺组织中BTLA表达,同时常规进行血清炎症指标PCT、IL-6检测、结核抗体检测及γ-干扰素释放实验。结果 13例青年肺结核患者中有7例检测出血清结核抗体,阳性率为54%;15例老年肺结核患者中有5例检测出血清结核抗体,阳性率为33%;对照组中有1例检测出血清结核抗体,阳性率为10%。两个年龄组肺结核患者炎症指标PCT、IL-6水平较对照组增高(P<0.05),而两年龄组肺结核患者之间炎症指标PCT水平无明显差异(P>0.05)。两个年龄组肺结核患者肺组织中BTLA表达较对照组明显增高(P<0.05),并且青年肺结核患者肺组织中BTLA表达量高于老年肺结核患者(P<0.05)。13例青年肺结核患者中有12例γ-干扰素释放实验阳性,阳性率为92%;15例老年肺结核患者中有10例γ-干扰素释放实验阳性,阳性率为67%;对照组中有2例γ-干扰素释放实验阳性,阳性率为20%。结论负性共刺激分子BTLA可能参与了不同年龄段肺结核的免疫调节,其可能成为肺结核研究的新靶点。

人BTLA-Fc融合蛋白的制备及其生物学活性的研究

为建立CHO/BTLA-Fc基因转染细胞株,使之能稳定分泌BTLA-Fc融合蛋白,采用PCR法从本单位构建的pEGZ-Term/B7-H1-Fc重组质粒中扩增人IgG1(Fc)恒定区,Xho I、BamH I双酶切后与真核表达载体pIRES2-EGFP连接为重组质粒pIRES2-EGFP-Fc,同时PCR法从pEGZ-Term/BTLA重组质粒中获得人BTLA胞外段基因片段,用Nhe I、Xho I双酶切插入上述pIRES2-EGFP-Fc构建重组载体pIRES2-EGFP/BTLA-Fc。脂质体法以该重组载体转染鼠CHO细胞,G418筛选并亚克隆化。Protein G亲和层析柱对上清中的融合蛋白进行纯化,Western blot作定性分析。CCK-8检测BTLA-Fc融合蛋白对抗人CD3单抗激发的T淋巴细胞增殖的影响。结果表明,基因转染CHO细胞培养上清中表达的BTLA-Fc融合蛋白能与L929/HVEM细胞有效结合,纯化的融合蛋白经Western blot鉴定有清晰的目的条带,而且BTLA-Fc融合蛋白对T细胞的体外增殖具有抑制作用。