基于人工免疫原理的未知病毒检测方法

提出了一种基于人工免疫原理的未知病毒检测方法。通过对进程行为的检测来提呈抗原,进而定义了自体,并给出了一个基于免疫细胞机制的检测算法来检测未知病毒。实验结果表明这是一种有效地检测未知病毒的方法。

利用免疫磁珠分离鉴定miRNA靶基因的方法研究

目的:利用免疫磁珠分离鉴定miRNA靶基因,建立一种经济、有效、快捷的miRNA靶基因鉴定方法。方法:直接提取细胞总RNA后加入生物素标记的miRNA分子共孵育,而后利用免疫磁珠分离与miRNA结合的mRNA,或将生物素标记的miRNA分子瞬时转染HeLa或HepG2细胞,48h后裂解细胞并在离心后应用链霉亲和素磁珠分离与miRNA特异性结合的mRNA。将分离获得的mRNA反转录获得cD-NA,并以其为模板,以特异性引物和Oligo(dT)进行PCR扩增,而后经过克隆测序,通过生物信息学方法比对测序结果,鉴定miRNA的靶基因。结果:利用已知的let-7靶基因证实了上述方法的有效性,并通过该方法鉴定出let-7的一个新的靶基因。结论:建立了免疫磁珠分离鉴定miRNA靶基因方法,为miRNA靶基因的研究提供新的实验学方法。

基因的分子进化:原理与方法

Dobzansky说:“不从进化的观点看问题,生物学的一切将不可理解”。分子进化研究不仅是一种特定的学科方法,而且是一种可以广泛应用的科学理论。人类基因组计划的实施为分子进化研究赋予了重要使命,也提供了新的机遇。本文综述了分子进化的基本原理、方法和最新发现,包括同源性分析、进化速率估计、系统发育树、分子种和基因及基因家族起源等方面,并提出了展望。

基于免疫原理的网络不良信息识别方法

本文主要研究网络不良信息识别方法,提出了一种基于免疫原理的不良信息识别方法,其中应用了多层防护、抗原识别、阴性选择、克隆选择、协同刺激及免疫应答等免疫原理,并对检测规则生成方法进行了改进。通过实验验证了该方法在识别率、误判率与漏判率方面都优于传统的不良信息识别方法,并具有良好的适用性和扩展性。

一种基于组合原理和PCR的方法构建超大容量基因文库

近年来，生物传感器的研制成为分析检测的一个重要的方面。其中，针对靶标物质建立新的分子识别开关是生物传感器研究的核心内容之一。已有的定向进化方法只能依赖现有的基因进行改造和筛选，难以开拓新的序列空间，对于在自然界中不存在的筛选目标，如对于新出现的病毒或者非自然物质的检测则很难通过原有基因的改造来实现。

苹果坏死花叶病毒CP基因原核表达及其抗血清制备

苹果坏死花叶病毒(Apple necrotic mosaic virus,ApNMV)是近年新发现的病原物,并且是与我国苹果花叶病症状高度相关的重要病毒,进行ApNMV外壳蛋白(coat protein,CP)基因原核表达、制备多克隆抗血清,以建立快速、灵敏、准确的ApNMV常规检测方法尤为必要.通过设计特异性引物,以RT-PCR方法成功获得ApNMV CP基因序列,插入到原核表达载体pET-28a(+)中构建重组质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3),利用IPTG进行重组蛋白(含His-tag)诱导表达.SDS-PAGE和Western blot分析结果表明,CP基因在大肠杆菌中获得了高效表达,用Ni Sepharose 6 Fast Flow进行蛋白纯化,回收共得到重组蛋白2.4 mg.在屏障环境下免疫2只SPF级新西兰兔,制备出多克隆抗血清,稀释400倍后仍能与ApNMV阳性苹果叶片样品发生免疫反应.由此证明,本研究建立的ApNMV间接ELISA检测方法具有较好的灵敏性,检测效率高,能够用于田间大量样品ApNMV的诊断.

用免疫组织化学方法研究NOV原癌基因在大鼠中枢神经系统中的表达

用免疫组织化学方法研究ＮＯＶ原癌基因在大鼠中枢神经系统中的表达张成岗蔡文琴苏炳银Ｂ．Ｐｅｒｂａｌ＊（第三军医大学组胚教研室＊ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｅＰａｒｉｓＶＩ，Ｐａｒｉｓ，Ｆｒａｎｃｅ）肾母细胞瘤过度表达基因（ＮｅｐｈｒｏｂｌａｓｔｏｍａＯｖｅｒｅｘ...

基于磷酸化组蛋白H2AX的酶联免疫检测方法评价卷烟烟气基因毒性

基于酶联免疫原理,建立了定量测定细胞中磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)含量的新方法,并用于评价卷烟烟气的基因毒性。采用不同剂量的烟气气相物与烟气粒相物暴露于中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞),通过测定不同染毒时间下细胞中γH2AX含量水平变化,考察烟气染毒与细胞DNA损伤的剂量效应关系,以及不同烟气组分基因毒性的差异。此外,通过定量监测细胞中活性氧的变化,探讨卷烟烟气暴露诱发细胞DNA双链断裂损伤的作用机理。结果表明,随烟气暴露时间的增加,细胞中γH2AX的含量在几小时内达到峰值,然后逐渐下降;染毒浓度越高,细胞中γH2AX含量达到峰值的时间越长;随着烟气粒相物或气相物染毒浓度的增高,细胞中γH2AX含量水平呈上升趋势;烟气粒相物染毒相比烟气气相物对细胞中γH2AX含量的影响更为显著;此外,烟气成分直接染毒会引起细胞内活性氧的含量增加。细胞内活性氧的含量变化与细胞DNA双链断裂标志物γH2AX的含量变化有较强相关性,卷烟烟气中自由基成分可能是诱发细胞DNA双链断裂的原因之一。

基于免疫原理的模型预测控制方法及其在过热汽温控制中的应用

提出了基于免疫原理的模型预测控制方法,将免疫遗传算法作为优化技术用于模型预测控制的设计,并应用在电站锅炉过热汽温的控制系统中,仿真研究表明了该算法的可行性和有效性。

基因编辑技术的方法、原理及应用

基因编辑技术的飞速发展为基因功能研究工作提供了更多有力的工具。近十年来相继出现的锌指核酸酶(ZFN)、转录激活子样效应因子核酸酶(TALEN)以及规律性间隔的短回文序列重复簇(CRISPR)已经可以让研究人员很方便的对特定的目的基因进行突变、修复或替换等操作,从而为生物学研究及医学治疗领域带来革命性的变化。本文就有代表性的基因编辑技术的种类、原理及其研究进展进行了综述,并对它们各自的特点及应用前景和值得进一步研究的问题进行了探讨。

酶联免疫吸附试验的原理、操作方法及注意事项

酶联免疫吸附（ELISA）试验具有灵敏性、特异性高，且重复性好，检测速度快的特点，尤其适合于大批量血清样品的检测，是国际认可的标准化诊断方法。我国目前广泛应用该方法进行疫病流行病学调查和免疫抗体监测，评价疫苗免疫效力。

基于免疫原理的PID控制参数整定方法(英文)

PID控制系统的技术性能取决于系统控制器的控制参数。针对控制参数整定过程中各个技术指标之间的要求难以兼容的难题,提出了一种基于免疫原理的PID控制器参数整定方法。讨论了协调各技术指标关系的目标函数,描述了人体免疫系统与控制系统的对应关系,构建了基于免疫原理的控制参数整定模型,研究了具体的免疫控制算法。以二阶大滞后过程为控制对象,采用不同整定方法的仿真实验响应对比研究显示,基于免疫方法整定的控制参数,其系统响应时间快,系统调节时间短,系统超调量小,技术指标之间兼容性能比较好。研究结果表明,所提出方法是一种优化的PID控制参数整定算法。

蛋白检测磁免疫系统方法的优缺点及前景

作为现代医疗诊断应用频率高,检测结果精准的蛋白检测磁免疫系统检测技术,蛋白检测磁免疫系统具有其他技术不可比拟的优势所在。随着科学技术水平的不断提高,科学技术的创新发展,越来越多的研究人员尝试运用新的技术取代传统蛋白检测方法,磁性探针免疫层析试纸条检测技术其中较为典型的应用。虽然蛋白检测磁免疫系统方法具有不可多的优势,但是在应用过程中受到多种因素的影响,也不可避免的存在一定的缺点。本文主要是对比蛋白检测不同方法的优缺点的基础上,来探讨蛋白检测磁免疫系统方法的优缺点及前景的分析研究,首先对磁性探针免疫层析试纸条检测原理进行分析,然后对蛋白检测免疫系统方法的优缺点加以论述,最后对该种系统检测方法的前景进行论述,旨在更好的满足日益多元化的检测需求。

甘精胰岛素生物学活性定量免疫荧光测定法和胰岛素生物测定法的等效性研究

目的建立甘精胰岛素基于转基因细胞CHO-INSRB 1284的定量免疫荧光生物学活性测定法(In-Cell Western,ICW),并将其与《中国药典》胰岛素生物测定法进行等效性研究。方法CHO-INSRB 1284细胞以1.5×10^(8) L^(-1)细胞密度铺板,1500μmol·L^(-1)甘精胰岛素稀释25倍后再进行3倍系列梯度稀释,在微孔板刺激细胞20 min,经固定、透化及抗体孵育步骤,利用odyssey双色红外荧光成像系统,进行定量免疫荧光生物学活性检测。结果ICW中甘精胰岛素的浓度与相对效价具有良好的量效关系;方法专属性好,相对准确度、中间精密度及线性均符合要求;7批甘精胰岛素样品采用两种方法测定的生物学活性结果相对偏差低于10%,用SPSS软件和SAS软件分析,表明方法具有相关性及等效性。结论建立的甘精胰岛素生物学活性定量免疫荧光测定法,方法专属性好,准确度及精密度高,与体内胰岛素生物测定法具有相关性和等效性,可用于甘精胰岛素的体外药效评价和质量控制。