基于网络药理学和大鼠体内验证的藏药红景天改善脑微循环障碍作用机制研究

目的基于文献研究、网络药理学、分子对接与实验验证的方法,探究藏药红景天改善脑微循环障碍的核心靶点、关键成分和作用机制。方法通过文献和数据库收集红景天化学成分,利用反向药效团匹配预测红景天的潜在靶点;获取脑微循环障碍靶点,并与红景天靶点映射,构建交集靶点蛋白互作网络,获取核心靶点;构建“中药-成分-核心靶点-疾病”调控网络并获取关键成分;进行GO和KEGG富集分析,构建“核心靶点-信号通路-生物过程”网络;进行分子对接验证;采用RT-qPCR和Western blot进行动物实验验证,进一步证实网络药理学分析结果。结果从红景天中筛选出76个活性成分和285个靶点,获取脑微循环障碍靶点1074个,交集靶点97个,核心靶点6个,关键成分6个。分子对接结果表明,有3个关键成分与核心靶点的结合性大于核心靶点蛋白与其原始配体结合性。RT-qPCR结果显示红景天能下调核心靶点CASP3、AKT1 mRNA水平,Western blot检测结果显示藏药红景天能降低CASP3、AKT1蛋白表达(P<0.05)。结论藏药红景天可通过多成分、多靶点、多通路协同改善脑微循环障碍,该研究为临床应用藏药红景天治疗脑微循环障碍提供实验依据。

四逆散对代谢相关脂肪性肝病微循环障碍的影响及机制研究

目的:探讨四逆散对代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)微循环障碍的影响及作用机制。方法:将40只SD大鼠分为正常对照组10只和模型组30只,采用蛋氨酸和胆碱缺乏(MCD)饮食建立MAFLD模型。在造模成功之后,将模型组大鼠按照随机原则分为三组,分别为模型组、四逆散治疗组和水飞蓟素阳性药组,之后对正常对照组和模型组给予等体积0.9%氯化钠溶液灌胃,对四逆散治疗组和水飞蓟素阳性药组进行对应药物干预,连续灌胃4周后取材。分别对谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)等肝功能指标、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)等肝脏指标、内皮素1(ET-1)、一氧化氮(NO)等血清指标进行检测,HE染色和Masson染色观察大鼠肝脏组织病理学表现,超声造影观测肝脏微血管血液流速和状态,检测肠系膜微循环指标(微血流速度、微动静脉管径测量)和血液流变学指标(全血黏度、血浆黏度值变化、红细胞压积、红细胞流变学变化)。Westernblot法检测肝脏组织细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管内皮细胞黏附分子-1(VCAM-1)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达。结果:与正常对照组相比,模型组大鼠血清中ALT、AST、ET-1、SOD水平显著提高,NO水平有所下降,MDA水平明显降低(P<0.05),造影剂到达肝动脉时间(HAAT)、造影剂到达肝静脉时间(HVAT)均有不同程度缩短(P<0.01),达峰时间(TP)提前,灌注参数峰值强度(PI)表现减弱,蛋白表达增加(均P<0.01)。与模型组比较,四逆散治疗组大鼠血清ALT、AST、ET-1水平有所下降(P<0.01),NO、SOD、MDA水平接近正常对照组(P<0.01),HAAT、HVAT有上升趋势(P<0.01),TP出现时间延长,PI表现增强(均P<0.01),蛋白表达水平降低。结论:四逆散可在一定程度上改善MAFLD的微循环障碍,其机制可能与抑制VCAM-1、ICAM-1和VEGF蛋白表达以降低血液黏稠度,从而改善血液淤滞情况有关。

微循环障碍引起内毒素休克发病机制的研究进展

微循环障碍是内毒素休克(ES)重要的病理生理变化,其相关机制研究涉及血管内皮细胞损伤、信号通路异常激活、黏附分子异常表达等方面。在微循环病变发展过程中,脂多糖起着重要的诱导作用,可以激活白细胞等炎症细胞,引发炎症级联反应,导致组织细胞损伤和器官功能障碍。早期或晚期ES均与循环和血流动力学密切相关。本文就近年来微循环障碍引起ES发病机制的研究进展作一综述,以期为ES的临床治疗提供新思路。

细胞黏附分子在危重病微循环障碍中的作用

严重失血、失液、创伤、感染以及急性胰腺炎等致病因素引起的全身炎症反应综合症（Systemic Inflammatory Response Syndrome,SIRS）、多器官功能障碍综合征（Multiple Organ Dysfunction Syndrome,MODS）甚至多器官衰竭（Multiple Organ Failure,MOF）是导致患者死亡的重要因素[1]。在这一过程中,由于微循环障碍引起的组织低灌注,进而引起氧代谢异常和能量代谢障碍是危重患者发生MOF的关键环节[2]。因此,改善重症患者的微循环灌注状态成为抢救重症患者的重要措施[3]。致病因素作用于机体后引起细胞黏附分子（Cell Adhesion Molecules,CAMs）过表达并释放,介导白细胞与内皮细胞、血小板与内皮细胞黏附,成为除致病因素直接导致微循环障碍的又一关键靶点。干预CAMs表达成为改善微循环灌注状态的关键措施[4]。目前,在CAMs的众多家族中,与微循环障碍相关的 CAMs主要集中在选择素家族、免疫球蛋白超家族、整合素家族[5]。本文重点综述 CAMs 在失血性休克、内毒素休克以及急性胰腺炎等危重病引起微循环障碍中的作用。

夏至草醇提物对大鼠急性微循环障碍的影响

目的观察夏至草醇提物对高分子右旋糖酐(Dextran 500)致急性微循环障碍(AMD)大鼠肠系膜血液及淋巴微循环的影响。方法20只雄性Wistar大鼠被随机分为夏至草组和模型组,每组10只。左颈静脉注射Dextran 500(10 ml/kg)复制AMD模型。6 min后夏至草组自颈静脉缓慢推注夏至草醇提物(6 g/kg),模型组给予等量生理盐水。应用活体显微电视录像系统观察大鼠肠系膜血液及淋巴微循环的变化。结果与实验前比较,模型组大鼠表现为肠系膜微血管口径缩窄、微血流流速变慢,伴有红细胞聚集,微血流流态积分值显著增高;肠系膜微淋巴管(ML)自主收缩频率、收缩活性指数(Index)、总收缩活性指数(Index)、淋巴动力学指数(LD-Index)均显著降低(P均<0.05)。注入夏至草醇提物后,大鼠肠系膜微血管口径较模型组扩张,血流加速,微血流流态积分明显降低,ML自主收缩频率、Index、Index、LD-Index显著升高(P均<0.05)。结论夏至草醇提物能明显减轻Dextran 500所致AMD大鼠肠系膜血液及淋巴微循环障碍。

蒺藜总皂苷改善小鼠微循环障碍的作用

目的观察蒺藜总皂苷改善小鼠微循环障碍的作用。方法采用静脉注射高分子右旋糖苷致小鼠微循环障碍模型,小鼠ig蒺藜总皂苷,观察其改善作用。结果蒺藜总皂苷1202、40、480mg.kg-13个剂量组和盐酸地尔硫卓艹(50mg.kg-1)组各时相的血液流态权分值不同程度显著减小(P<0.01,P<0.05),表示血液流速显著加快。蒺藜总皂苷480mg.kg-1时,红细胞聚集性显著减小(P<0.05)。结论蒺藜总皂苷具有改善高分子右旋糖苷引起小鼠微循环障碍的作用。

夏至草醇提物对急性微循环障碍大鼠自由基损伤的影响

目的观察夏至草醇提物对高分子右旋糖苷(Dextran 500)致急性微循环障碍大鼠器官自由基损伤的影响。方法Wistar雄性大鼠20只,随机分为夏至草组(n=8)、模型组(n=6)和对照组(n=6)。静注10%Dextran 500(10 ml/kg.bw)复制急性微循环障碍模型(对照组以等量生理盐水代替)。6 min后,夏至草组自颈静脉缓慢推注夏至草醇提物(5 g/ml,6 g/kg.bw),其它两组以等量生理盐水代替。40 min后,制备肝、肾、心肌、肺组织匀浆,观察组织匀浆自由基指标的变化。结果与对照组相比,模型组肝、肾、心肌、肺组织匀浆MDA含量显著升高,SOD活性降低;夏至草组各器官组织匀浆MDA含量显著低于模型组,SOD活性升高,除心肌组织匀浆SOD活性低于对照组外,其它各指标与对照组均无统计学意义。结论夏至草醇提物能明显减轻Dextran 500致急性微循环障碍大鼠的自由基损伤。

夏至草醇提物对急性微循环障碍大鼠一氧化氮及其合酶的影响

目的:观察夏至草醇提物对高分子右旋糖苷(Dextran 500)致急性微循环障碍大鼠一氧化氮(NO)及其合酶(NOS)的影响。方法:Wistar雄性大鼠20只,随机分为夏至草组(n=8)、模型组(n=6)和对照组(n=6)。静注10%Dextran500(10ml/kg.bw)复制急性微循环障碍模型(对照组以等量生理盐水代替)。6min后,夏至草组自颈静脉缓慢推注夏至草醇提物(5g/ml,6g/kg.bw),其它两组以等量生理盐水代替。40min后,制备肝、肾、心肌、肺组织匀浆,观察组织匀浆NO含量及NOS活性的变化。结果:模型组肝、肾、心肌、肺组织匀浆NO含量及NOS活性均显著高于对照组(P<0.01);夏至草组各器官组织匀浆NO含量及NOS活性显著低于模型组(P<0.01),除肝匀浆NO含量及心肌匀浆NOS活性高于对照组外,其它各指标与对照组均无统计学差异。结论:夏至草醇提物减轻Dextran 500致急性微循环障碍大鼠器官损伤的机制与降低NO的生成与释放有关。

夏至草醇提物对急性微循环障碍大鼠器官损伤的干预作用

目的:观察夏至草醇提物对高分子右旋糖苷(Dextran500)致急性微循环障碍大鼠器官损伤的影响。方法:Wistar雄性大鼠20只,随机分为夏至草组(n=8)、模型组(n=6)和对照组(n=6)。前二组静注10%Dextran500(10ml/kg体重)复制急性微循环障碍模型(对照组以等量生理盐水代替)。6min后,夏至草组自颈静脉缓慢推注夏至草醇提物(5g/ml,6g/kg体重),其它两组以等量生理盐水代替,监测平均动脉血压(MAP)。40min后,制备血清,进行血液生化指标检测;制备病理切片,观察肺、肝、肾、心肌形态学变化。结果:与对照组相比,模型组血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cre)、乳酸脱氢酶-1(LDH-1)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平显著升高,MAP下降;与模型组相比,夏至草组血清AST、ALT、BUN、Cre、LDH-1、CK-MB水平显著降低,MAP升高。组织形态学显示,对照组肝、肾、肺、心肌结构正常,模型组各器官病变较重,多见红细胞瘀滞、血栓形成及坏死,夏至草组病变较轻,未见坏死。结论:夏至草醇提物能明显减轻Dextran500致急性微循环障碍大鼠各器官功能障碍与组织学损伤。

老年高血压中医证候分型的粘附分子表达与血微循环的关系

目的探讨老年高血压中医证候分型细胞间黏附分子(ICAM-1)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)表达水平和全血粘度与血微循环相关性。方法对156例老年高血压患者进行中医证候分型,采用双抗体夹心ELISA法检测技术测定ICAM-1、MCP-1水平;以全自动血流变仪锥板稳态测量技术检测全血粘度、红细胞变形性,从微循环角度观察血液流变学、ICAM-1表达与中医证候各型关系。结果三组ICAM-1、MCP-1明显高表达(P<0.01),全血粘度依次为正常对照组<肝火亢盛组<痰湿壅盛组<阴虚阳亢组。红细胞变形指数与正常人比较差异显著(P<0.05)。结论老年高血压中医不同证候型与血微循环之间存在一定关系,ICAM-1、MCP-1水平高表达、血液流变异常可作为高血压早期血微循环障碍时检测指标。

黄芪注射液对内毒素诱导大鼠肠系膜微循环障碍改善作用的实验研究

目的探讨静脉给予黄芪注射液对内毒素血症肠系膜微循环障碍的改善作用。方法 Wistar大鼠30只为对照组、模型组、治疗组,每组10只。采用静脉注入脂多糖(LPS)(5mg·kg-1·h-1)复制内毒素血症模型,治疗组给予静脉注射黄芪注射液(5ml·kg-1·h-1),用微循环观察系统每20分钟动态观察细静脉粘附白细胞,细静脉血管壁过氧化物的动态变化。在100min观察结束后,计数肠系膜间质内肥大细胞脱颗粒率。取外周血,用流式细胞仪测定粒细胞粘附分子CD11b和CD18的表达。结果模型组在LPS滴注20min后,黏附于大鼠肠系膜细静脉壁上的白细胞数和管壁过氧化物依存的DHR的荧光强度显著增加,100min时计数肠系膜间质内肥大细胞脱颗粒率显著地增加(P<0.05)。流式细胞仪测定外周血粒细胞黏附分子CD11b和CD18的表达明显增加(P<0.05)。治疗组白细胞与肠系膜细静脉的血管壁黏附;细静脉壁过氧化物依存的DHR荧光强度的增加,肠系膜间质内肥大细胞脱颗粒率,外周血粒细胞黏附分子CD11b和CD18的表达明显受到抑制(P<0.01)。结论黄芪注射液对内毒素血症肠系膜微循环障碍有改善作用。可能其抑制粒细胞黏附分子CD11b和CD18表达及肥大细胞脱颗粒相关。

益气复脉粉针对内毒素诱导大鼠肠系膜微循环障碍的作用研究

目的探讨静脉给予益气复脉粉针对内毒素血症大鼠肠系膜微循环障碍的改善作用。方法将30只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、治疗组，每组10只。静脉注入脂多糖（LPS）10mg·kg-1·h-1复制内毒素血症微循环障碍模型，20min后治疗组连续静脉注射益气复脉粉针（80mg·kg-1·h-1），对照组和模型组给予等量生理盐水。每20min动态观察大鼠肠系膜细静脉壁黏附白细胞数、细静脉壁过氧化物以及白蛋白渗出的变化，直至100min结束观察。检测肠系膜间质内肥大细胞脱颗粒率，用流式细胞仪测定外周血粒细胞黏附分子CD11b和CD18的表达，用免疫组化法检测肺组织细胞间黏附分子-1（ICAM-1）及核转录因子-KB（NF—kB）p65的表达。结果20min起模型组大鼠肠系膜细静脉壁黏附白细胞数、管壁过氧化物依存的二氢罗达明（DHR）荧光强度和白蛋白渗出均明显增加（均P〈0．05）；100min后肠系膜间质内肥大细胞脱颗粒率亦显著增加，外周血粒细胞黏附分子CD11b和CD18的表达明显增加，肺组织ICAM-1、NF—kBp65积分吸光度（A）值明显升高（均P〈0．05）。与模型组相比，治疗组40min后细静脉壁黏附自细胞数明显减少，细静脉壁过氧化物依存的DHR荧光强度增加明显受抑制，白蛋白渗出明显减少（均P〈0．05）；100min后肠系膜间质内肥大细胞脱颗粒率明显减少，外周血粒细胞黏附分子CD11b和CD18表达明显下降，肺组织ICAM-1、NF—kBp65积分A值明显降低（均P〈0．05）。结论益气复脉粉针对LPS诱导的肠系膜微循环障碍有改善作用，机制可能与其能解离白细胞与血管内皮黏附的作用有关，而该作用又可能与减少粒细胞黏附分子CD11b和CD18、血管内皮ICAM-1及NF—kBp65表达有关。

低相对分子质量肝素改善急性胰腺炎微循环的研究

重症急性胰腺炎（SAP）是一种常见的外科急症,它是由胰酶自我消化引起的全身炎症反应综合征（systemic inflam-matory response syndrome,SIRS）,严重者会发展为多器官功能衰竭（multiple organ dysfunction syndrome,MOF）。其中微循环障碍是SAP的启动因子和持续损害因子．炎症因子的过度释放会加重SAP微循环的障碍[1]，血管活性物质在微循环中也发挥着重要作用[2]。

外源正常淋巴液对急性微循环障碍大鼠多器官及凝血功能的影响

目的观察外源性正常淋巴液对高分子右旋糖苷(Dextran 500)致急性微循环障碍(AMD)大鼠肝、肾、心肌及凝血功能的影响。方法Wistar雄性大鼠30只,随机分为淋巴液组、模型组和对照组,静注10%Dextran 500(10ml/kg.bw)复制AMD模型(对照组以等量生理盐水代替)。6min后,淋巴液组自颈静脉缓慢注射小量正常无细胞淋巴液(全血量的1/15),其它两组以等量生理盐水代替。40min后,留取动脉血检测反映肝、肾、心功能的生化指标以及凝血功能指标,同时观察肠道渗血情况。结果模型组血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cre)、乳酸脱氢酶-1(LDH-1)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)均显著高于对照组;淋巴液组所有指标均低于模型组,仅Cre高于对照组;淋巴液组和模型组PT、PTR、APTT、TT等凝血指标均显著长于对照组,Fib含量低于对照组,且淋巴液组PT、PTR、APTT长于模型组;模型组大鼠肠道渗血明显,淋巴组与对照组无明显渗血。结论外源正常淋巴液能改善Dextran 500致AMD大鼠的多器官功能障碍和凝血功能紊乱。

临床微循环“综合定量评价”理论基础的再认识

临床微循环“综合定量评价”理论基础的再认识ＲｅｓｔｕｄｙｏｆＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＢａｓｉｓｏｆＭｕｌｔｉ－ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＥｖａｌｕａｔｉｏｎｉｎＣｌｉｎｉｃａｌＭｉｃｒｏｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ￥／／文／田牛，姜澜客观、准确、全面评价微循环状...

巴夫地尔(Buflomedil)对兔急性微循环障碍防治的实验研究

用高分子右旋糖酐(MW 260,000)静脉注射,复制兔的急性微循环障碍模型。从微循环动态图象分析、血液流变学及光、电镜下的组织结构变化,综合观察巴夫地尔(Buflomedil)对急性微循环障碍的防治作用,为该药的临床应用提供依据。

麝香保心丸对心肌梗死小鼠微循环障碍的作用研究

目的观察麝香保心丸改善心肌梗死小鼠外周微循环障碍的作用及机制。方法选取30只雄性C57小鼠,10只为正常对照组,其余20只心肌梗死造模后1周,予腹腔注射脂多糖30 min后,随机分为空白对照组及麝香保心丸干预组,各10只。观察各组间小鼠提睾肌微循环差异(流速及白细胞黏附);流式分析中性粒细胞黏附分子CD11b的表达。结果与空白对照组比较,麝香保心丸干预组可显著改善微循环障碍,并能降低白细胞黏附至微循环内皮表面,差异有统计学意义(P<0.05);进一步分析发现,药物干预组小鼠外周血中性粒细胞表面黏附分子CD11b表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论麝香保心丸可显著改善小鼠心肌梗死后微循环障碍,这可能与其抑制中性粒细胞表面黏附分子CD11b表达而减少白细胞的黏附密切相关。