NOS1AP基因非编码区位点多态性与精神分裂症的关联研究

目的·明确一氧化氮合成酶1接头蛋白(nitric oxide synthase 1 adaptor protein,NOS1AP)基因与中国汉族人群精神分裂症患者的相关性,并对NOS1AP基因阳性多态性位点变异引起的RNA和蛋白质的二级结构改变进行预测。方法·选择2012年10月至2015年12月期间上海交通大学医学院附属精神卫生中心收治的333例早发性精神分裂症(early onset schizophrenia,EOS)患者和491例非早发性精神分裂症(non-early onset schizophrenia,non-EOS)患者,通过招募方式在上海交通大学医学院附属精神卫生中心的职工和复旦大学附属中山医院青浦分院体检中心的受检人群中筛选901名健康对照(health control,HC),用TaqMan探针检测3组人群NOS1AP基因rs12742393、rs4145621和rs1415263位点多态性。使用SHEsis在线软件进行各位点Hardy-Weinberg(H-W)平衡检验,分析等位基因和基因型频率的分布。通过SNPstats在线网站进行最优遗传模型的分析。利用RNAfold软件和DNAstar软件对阳性多态性位点变异引起的RNA和蛋白质的二级结构改变进行预测。结果·3个多态性位点基因型频率在各组中均符合H-W遗传平衡(P>0.05)。经Bonferroni校正后,EOS组与HC组相比,NOS1AP基因rs12742393位点等位基因和基因型频率分布差异均具有统计学意义(P=0.012,P=0.039)。遗传模型分析发现rs12742393位点最优基因型分布符合显性遗传模式(P=0.004)。软件预测发现,rs12742393位点A等位基因变异成C等位基因后,NOS1AP基因编码RNA和蛋白质的二级结构发生重要改变,导致空间稳定性下降。结论·NOS1AP基因非编码区rs12742393位点对EOS易感性存在重要影响。

干扰NOS1表达对增强宫颈癌干细胞化疗敏感性的研究

目的:探讨干扰NOS1表达对宫颈癌干细胞顺铂治疗敏感性的影响。方法:收集CASKI肿瘤干细胞与非干细胞,分为干细胞组(R组)与非干细胞组(S组),检测NOS1在两组干细胞之间的表达差异;收集干扰NOS1表达的CASKI干细胞(si-NOS1组)及转染siRNA对照序列的CASKI干细胞(si-NC组),使用MTT法检测两组干细胞对顺铂的敏感性差异;收集对数生长期的CASKI干细胞,使用顺铂、NOS特异性抑制剂以及NO供体分别进行处理,分为对照组、顺铂组、NOS1抑制剂组、NO供体组,使用流式细胞仪检测各组干细胞凋亡率以及细胞死亡率。结果:NOS1在宫颈癌CASKI干细胞中的表达水平高于非干细胞组(t=1.172,P=0.024);顺铂作用48 h后,si-NC组干细胞的半数抑制率(17.109±1.127)与si-NOS1组干细胞(14.420±0.255)比较,差异有统计学意义(t=4.03,P<0.05);对照组、顺铂组、NOS1抑制剂组、NO供体组之间的细胞凋亡率比较,差异有统计学意义(χ^2=20.054,P<0.01),且两两比较显示,DDP+NOS1抑制剂组>顺铂组>NO供体组+DDP>对照组;对照组、顺铂组、NOS1抑制剂组、NO供体组之间的细胞非凋亡性死亡率比较,差异有统计学意义(χ^2=17.657,P<0.01),且两两比较显示,DDP+NOS1抑制剂组>顺铂组>NO供体组+DDP>对照组。结论:干扰NOS1的表达可增加宫颈癌干细胞对顺铂的敏感性。