反复热性惊厥过程中气体信号分子硫化氢对一氧化氮/一氧化氮合酶体系的影响

目的:探讨硫化氢(H2S)对热性惊厥(FS)大鼠一氧化氮(NO)/一氧化氮合酶(NOS)体系表达的影响。方法:大鼠随机分为对照组、FS组、FS+NaHS组、FS+HA(hydroxylam ine)组。采用热水浴诱导大鼠FS,隔日诱导1次,共10次。采用分光光度计法测定大鼠血浆中H2S和NO含量;用原位杂交观察nNOS mRNA表达情况;用免疫组化方法观察NOS蛋白表达情况。结果:FS+NaHS组NO含量低于FS组,同时NOS表达也低于FS组;而FS+HA组NO含量高于FS组,同时NOS表达也强于FS组。结论:用H2S外源性供体NaHS和胱硫醚-β-合成酶抑制剂HA的干预研究表明,反复热性惊厥过程中,H2S的改变可影响NO/NOS体系的表达。

掺氮石油焦基活性炭常温催化氧化硫化氢研究

以石油焦为碳源,以三聚氰胺生产中的固体废弃物为氮源,成功制备了一种新型氮掺杂多孔碳,并在室温下表现出优异的H2S催化氧化能力,穿透硫容可达398.4mg/g.制备过程中活化剂用量、氮掺杂温度、氮源用量三个工艺参数分别改变了催化剂的比表面、N构型、N含量.通过优化工艺条件,可使最高的反应活性中心——吡啶N的含量达2.88at.%.与传统材料制备的催化剂相比,实现了废物利用和绿色制备.本文结果可为制备低成本、高突破硫容量的多孔碳材料提供一种新的方法.

气体信号分子硫化氢与一氧化氮在高血压患者中的变化探讨

目的：探讨气体信号分子硫化氢（H2S）及一氧化氮（NO）在高血压中的作用。方法：选择高血压患者262例，男性135例、女性127例，年龄25～70岁（57．81±12．66）岁。其中初发高血压患者67例（初发高血压组），经治高血压患者195例（经治高血压组）。经治高血压患者中，血压控制良好的患者38例、1级高血压水平68例，2级高血压水平64例、3级高血压水平25例。对上述患者中同时怀疑冠心病者进行冠状动脉造影术，病变冠状动脉≥1支并有70％以上狭窄的患者确定血压合并冠心病32例；并根据中国糖尿病诊断标准判断高血压合并糖尿病38例。同时选取正常对照组52例，男性31例、女性21例，年龄（55．52±14．23）岁。检测入选者的血浆H2S及NO浓度。结果：①血浆H2S在经治高血压组中明显低于正常对照组（P〈0．05）。②高血压合并冠心病及糖尿病患者的血浆H2S浓度均明显低于单纯高血压患者（P〈0．05）。③在经治高血压患者中，随着血压水平的增加，NO及H：S水平均逐渐降低。3级高血压水平患者的H2S及NO浓度均明显低于血压控制良好者（P〈0．05），而1级和2级高血压水平患者血浆NO、H2S与血压控制良好者比较均无显著性（P〉0．05）。结论：作为气体信号分子，H2S和NO在高血压的发生和发展中均具有重要作用。

气体信号分子硫化氢和一氧化氮在代谢综合征大鼠心脏保护中的相互作用

目的研究硫化氢(H2S)/胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)体系和一氧化氮(NO)/一氧化氮合酶(NOS)体系在代谢综合征(MS)大鼠心脏功能损伤中的作用及相互关系。方法 41只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、模型+H2S供体组、模型+CSE抑制剂组、模型+NOS抑制剂组、模型+NO供体组。对照组普通饲料喂养16周,其余5组高脂饲料喂养16周复制MS动物模型,随后4周对照组和模型组注射生理盐水、其余4组分别注射硫氢化钠(56μmol/kg)、炔丙基甘氨酸(37.5 mg/kg)、N-硝基-L-精氨酸甲酯(18 mg/kg)、L-精氨酸(500 mg/kg)进行干预后,测定肥胖指标、血糖、血脂;采用生物信号采集系统检测心功能;比色法检测血浆、心肌H2S及NO含量,心肌CSE、结构型NOS(cNOS)及诱导型NOS(iNOS)活性;RT-PCR方法检测心肌CSE及内皮型NOS(eNOS)表达的变化。结果与对照组相比,模型组各时间点血糖、血脂及肥胖指数升高,心功能降低(P<0.05);血浆和心肌H2S、NO含量,心肌CSE、cNOS活性,CSE、eNOS表达降低,心肌iNOS活性升高(P<0.05)。与模型组相比,模型+CSE抑制剂组血浆、心肌NO含量,心肌cNOS、iNOS活性增加,eNOS表达增强(P<0.05);模型+H2S供体组心肌cNOS、iNOS活性和eNOS表达均降低(P<0.01),心功能改善(P<0.05);模型+NOS抑制剂组血浆、心肌H2S含量,心肌CSE表达均升高(P<0.05);模型+NO供体组心肌CSE活性、CSE表达降低(P<0.05),心功能改善(P<0.05)。结论 H2S/CSE和NO/NOS体系在MS大鼠心脏中呈相互负性调节作用。外源性补充H2S和NO对MS大鼠心脏功能有一定保护作用。

硫化氢及一氧化氮气体信号分子在高原高血压发病中的作用

目的 探讨气体信号分子硫化氢（H2S）及一氧化氮（NO）在高原高血压的病理生理意义。方法 平原体检正常者进入海拔5000m高原（1～3）月期间，在高原暴露时间、劳动强度及生活条件相同的施工群体中随机抽样127人。依血压变化将其分为高原高血压（Ⅰ～Ⅲ级）组78人（进一步分为收缩期高原高血压组与舒张期高原高血压组），高原正常血压组49人，采取肘静脉血，采用敏感硫电极法测定其H2S浓度，Griess法测定血清NO含量。结果 高原高血压组、收缩期高原高血压组、舒张期高原高血压组的血清H2S与NO平均含量均显著增加，分别比正常血压组高34．5％，36．9％，31.7％（均P〈0．001）与28．4％，33．1％，39．7％，（均P〈0．05），尤以H2S更为突出；随着血压分级程度的升高H2S与NO血清含量相应增高，也以H2S更显著（R^2=0．918）；H2S与NO、舒张压间均有密切正相关关系及良好的拟和优度、与氧饱和度呈显著的负相关与拟和优度（R^2=0．374，P=0．001）。结论 H2S与NO的代谢失常可能参与了高原高血压发病过程。

一氧化氮、二氧化氮电化学检测气体报警器校准

建立一氧化氮、二氧化氮电化学检测气体报警器的校准方法,评定了校准结果不确定度。介绍了一氧化氮、二氧化氮电化学检测气体报警器的测试原理和应用,分析了该类仪器检定规程和校准规范缺失的问题现状。利用一氧化氮、二氧化氮气体标准物质进行试验,选择仪器的示值误差、测量重复性、响应时间作为主要校准项目。通过试验和参考其他技术规范给出了参考技术指标:绝对误差为±2μmol/mol,或者相对示值误差不大于±10%,满足其中之一即可;重复性不大于3%;响应时间不大于120 s。利用校准案例对校准方法进行验证,结果表明该校准方法切实可行,给出的参考技术指标较为合理。

内源性一氧化氮对低氧大鼠肺动脉硫化氢胱硫醚γ-裂解酶体系的影响

目的 探讨内源性一氧化氮 (NO)对低氧性肺动脉高压 (PH)大鼠肺动脉硫化氢 (H2 S) /胱硫醚γ 裂解酶 (CSE)体系的调节作用。方法 将 19只大鼠随机分为 3组 :低氧组 ( 7只 )、低氧 +L NAME组 (予NOS抑制剂Nω 硝基 L 精氨酸甲酯处理低氧组 ) ( 6只 )和对照组 ( 6只 )。低氧 2 1d后 ,分别测定肺动脉平均压 ,检测右心室 /左心室 +室间隔 (RV/LV +SP)比值 ,测定肺组织匀浆NO含量、血浆H2 S含量及肺组织匀浆CSE活性变化。结果 低氧 2 1d大鼠肺动脉平均压力和RV/LV +SP明显增高 ,同时肺组织中NO和血浆H2 S含量及肺组织CSE活性亦明显下降 (P均 <0 .0 1) ;而低氧 +L NAME组 ,伴随NO含量的下降 ,肺动脉平均压亦显著上升 (P <0 .0 5 ) ,同时血浆H2 S含量及肺组织CSE活性较低氧组显著上升 (P均 <0 .0 5 )。结论 内源性NO对肺动脉H2 S/CSE系统在低氧性PH大鼠中呈抑制作用 ,这一过程参与低氧性PH形成的调控机制。

氮中二氧化硫气体标准物质的研制

简述了采用称量法制备并计算定值,研制氮中二氧化硫气体标准物质。采用自主研制的气瓶自动清洗系统、配气系统和优化的配气工艺流程保证了研制水平。对气体标准物质进行了制备方法学研究、均匀性与稳定性检验,结果表明研制的氮中二氧化硫气体标准物质中二氧化硫的相对扩展不确定度为U=2%,k=2。

过敏性紫癜患儿血浆硫化氢、一氧化氮变化的意义

目的本研究旨在探讨气体信号分子硫化氢(H2S)和一氧化氮(NO)在过敏性紫癜(HSP)患儿发病中的变化及意义。方法选择2007年1-6月在本院就诊的首次确诊为HSP的住院患儿25例,北京大学第一医院儿科体检健康者19例为健康对照组,分别应用敏感硫电极法及硝酸还原酶法测定其血浆中H2S、NO水平及一氧化氮合酶(NOS)活性,比较HSP患儿与对照组之间的差异及HSP患儿各型之间的差异。结果HSP患儿血浆H2S水平较健康对照组明显升高[(70.93±14.63)μmol/L vs (58.17±7.40)μmol/LP<0.01];HSP患者NO水平及NOS活性与健康对照组比较明显升高[(78.32±8.68)μmol/L vs (47.28±6.72)μmol/L,(36140±5300)U/L vs (25640±3030)U/LPa<0.01]。HSP单纯型组血浆H2S、NO水平及NOS活性均较混合型组明显升高,有统计学差异[(74.29±8.52)μmol/L vs (62.93±9.14)μmol/L,(81.16±9.25)μmol/L vs (62.33±11.89)μmol/L,(52270±8140)U/L vs (31970±5990)U/LPa<0.05]。HSP组中心脏受累组与非心脏受累组比较,血浆NO、H2S水平及NOS活性比较无统计学差异[(67.81±7.09)μmol/L vs (64.19±8.77)μmol/L,(69.24±8.68)μmol/L vs (63.20±11.04)μmol/L,(40420±5950)U/L vs (36550±5510)U/LPa>0.05]。结论气体信号分子H2S、NO水平在HSP发病早期显著升高,且在单纯型患儿升高明显。提示气体信号分子H2S、NO可能在HSP发病中发挥重要的保护作用。

内源性一氧化氮与硫化氢在大鼠低氧性肺动脉高压中的相互作用

目的 :研究一氧化氮 (nitricoxide ,NO) /一氧化氮合酶 (nitricoxygnase ,NOS)体系和硫化氢 (hydrogensul fide,H2 S) /胱硫醚γ 裂解酶 (cystathionine γ lyase,CSE)体系在低氧性肺动脉高压发生机制中的作用及其相互关系。方法 :将 2 5只大鼠随机分为 4组 :低氧组 (7只 )、低氧 +L NAME组 (给与NOS抑制剂Nω 硝基 L 精氨酸甲酯处理的低氧组 ,6只 )、低氧 +PPG组 (给与CSE抑制剂炔丙基甘氨酸处理的低氧组 ,6只 )和对照组 (6只 )。低氧 2 1d后 ,测定肺动脉平均压、血浆NO及H2 S含量 ,分别测定低氧组、低氧 +L NAME组及对照组CSE活性 ,应用免疫组织化学的方法检测低氧组、低氧 +PPG组及对照组的肺动脉内皮细胞eNOS表达。结果 :低氧 2 1d大鼠肺动脉平均压力明显增高 ,同时血浆中NO和H2 S含量、肺动脉内皮细胞eNOS表达及肺组织CSE活性亦明显下降 ;而低氧 +L NAME组 ,伴随着NO含量的下降 ,肺动脉平均压显著上升 ,同时 ,血浆中的H2 S含量及肺组织CSE活性较低氧组显著上升 ;在低氧 +PPG组 ,伴随血浆H2 S含量的降低 ,肺动脉压力显著升高 ,同时血浆中的NO含量及肺血管内皮细胞eNOS表达也较低氧组显著上升。结论 :内源性NO/NOS体系与H2 S/CSE体系在低氧性肺动脉高压中呈现相互的负性调节作用。

硫化氢下调大鼠主动脉L-精氨酸/一氧化氮合酶/一氧化氮通路

目的 观察H2S对血管L-精氨酸/一氧化氮（L-Arg/NO）通路的影响以探讨H2S和NO这两种气体信号分子间的相互作用。方法 离体孵育大鼠主动脉薄片, 加入H2S供体NaHS（10^-7～10^-4 mol·L^-1）孵育4 h,及50 μmol·L^-1NaHS分别孵育2、4和6 h.采用Greiss法测定血管亚硝酸盐含量；同位素示踪法检测血管组织一氧化氮合酶（NOS）活性及L-Arg转运, RT-PCR检测eNOS、CAT1基因表达。结果 一次性给予50 μmol·L^-1NaHS,孵育2 h,孵育液中NO2-含量比对照组低62%,血管NOS活性下降48%,L-Arg转运减少50%（P〈0.01）;孵育6 h,NO2-含量比对照组低19%（P〈0.05）,而NOS活性和L-Arg转运已基本恢复（P〉0.05）.NaHS（10^-7～10^-4 mol·L^-1）,呈浓度依赖的抑制了L-Arg/NOS/NO通路,IC50分别为0.499、3.198及3.927 μmol·L-1（P〈0.01）；而给予50 μmol·L^-1NaHS后，eNOS和CAT-1A的mRNA表达分别减少34.3%和55.1%（P〈0.01）。结论 H2S通过抑制血管组织L-Arg转运和NOS活性和基因表达,下调L-Arg/NOS/NO通路,从而减少血管NO生成。

硫化氢下调大鼠血小板L-精氨酸/一氧化氮合酶/一氧化氮通路

目的观察硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对血小板L-精氨酸/一氧化氮合酶/一氧化氮(L-Arg/NOS/NO)通路的影响以探讨H2S和NO这两种气体信号分子间的相互作用。方法离体孵育大鼠血小板,加入H2S气体溶液(10-6～10-3mol/L)孵育2h,采用Greiss法测定血小板孵育液亚硝酸盐(NO2-)含量;同位素示踪法检测血小板NOS活性及L-Arg转运。结果一次性给予H2S(10-6～10-3mol/L)孵育2h,呈浓度依赖的抑制了L-Arg/NO通路,血小板孵育液中NO2-含量比对照组分别降低6%、11%(均P>0.05)、24%、36%和52%(均P<0.01);NOS活性分别下降1%、14%(P>0.05)、25%、37%和42%(P<0.01);L-Arg转运分别减少12%(P>0.05)到72%(P<0.01);IC50分别为53.02、41.63及21.53μmol/L(P<0.01)。结论H2S通过抑制血小板L-Arg转运和NOS活性,下调L-Arg/NOS/NO通路,从而减少血小板NO生成。

硫化氢供体对实验性门静脉高压及内源性一氧化氮/一氧化氮合酶体系的影响

目的探讨硫化氢供体—硫氢化钠(sodium hydrosulfide,NaHS)对大鼠门静脉高压及内源性一氧化氮(nitric monoxide,NO)/一氧化氮合酶(nitricoxide synthase,NOS)体系的影响。方法将30只健康成年雄性SD大鼠随机分为4组:部分门静脉结扎(partly portal vein ligation,PPVL)组(10只)、PPVL+NaHS组(10只)、假手术组(5只)和正常组(5只)。PPVL组和PPVL+NaHS组行部分门静脉结扎术建立门静脉高压的动物模型。模型制作14天后,分别测定各组大鼠的门静脉压力(PVP)和平均动脉压力(MAP);采用免疫组织化学检测大鼠肝细胞中一氧化氮合酶(NOS2、NOSS)的蛋白水平表达情况,RT-PCR方法检测大鼠肝组织中NOS2和NOS3的mRNA水平的表达情况。结果术后14 d,假手术组和正常组比较,各项检测指标无显著差异,NOS2蛋白及mR-NA水平未见明显表达;NOS3蛋白及mRNA表达水平无显著差异。PPVL组与假手术组比较,PVP明显升高(P<0.05),MAP则下降(P<0.05),PPVL+NaHS组与PPVL组相比较,PVP进一步升高(P<0.05),MAP则进一步降低(P<0.05)。PPVL组和PPVL+NaHS组NOS2在蛋白及mRNA水平均有表达,且后者NOS2蛋白及mRNA表达水平减少(P<0.05)。4组之间NOS3的蛋白及mRNA表达水平则无显著差异。结论H2S参与了门静脉高压的形成与发展,NaHS可以加重门静脉高压,其作用可能与NO/NOS2体系有关。

肝康Ⅱ号对乙型肝炎肝硬化患者血浆硫化氢和一氧化氮水平的影响

目的观察肝康Ⅱ号对乙型肝炎肝硬化患者血浆硫化氢(H2S)和一氧化氮(NO)的影响。方法 32例乙型肝炎肝硬化患者在常规药物治疗的基础上加用肝康Ⅱ号治疗,疗程4周,与另32例对照患者观察比较。结果治疗组治疗后H2S(22.12±3.12μmmol/L)和NO(44.78±5.12μmmol/L)与对照组(H2S为19.01±2.98μmmol/L,NO为49.23±3.97μmmol/L)比,有显著性差异(P<0.01);治疗后治疗组TBiL、ALT、ALB和PTA变化与对照组比,有显著性差异(P<0.01)。结论肝康Ⅱ号通过影响H2S和NO浓度变化而具有治疗肝硬化的作用。

一氧化氮对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞硫化氢/胱硫醚-γ-裂解酶的调节作用

目的研究一氧化氮(NO)对自发性高血压大鼠(SHR)血管平滑肌细胞硫化氢(H2S)/胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)的调节作用。方法大鼠主动脉平滑肌细胞分为硝普钠(SNP)实验组和对照组,硫电极法测定培养上清中H2S含量,竞争性RT-PCR法检测细胞中CSE mRNA水平。结果SNP实验组较对照组培养上清H2S含量显著升高[(16.16±3.71)μmol/Lvs(22.71±4.84)μmol/L],但CSE mRNA的水平在SNP组较对照组明显降低[(0.16±0.06)vs(0.12±0.04)]。结论SNP对SHR血管平滑肌细胞中H2S/CSE体系发挥复杂的调节作用。

脱氮硫杆菌氧化硫化氢过程中的生物氧化和化学氧化

在好氧反应器中研究了不同条件下H2S生物氧化和化学氧化之间的关系.结果表明,在pH为6～8、温度为25～35℃和溶解氧浓度为10.5mg·L-1时,当硫化氢进气摩尔流速稳定在2.1mmol·L-1·h-1时,脱氮硫杆菌(Thiobacillusdenitrificans)氧化硫化氢的生物氧化速率可达到1.9mmol·L-1·h-1以上,此时硫化物在液相的累积摩尔速率和H2S出口摩尔流速均很低;化学氧化速率随pH、温度和溶解氧浓度的增加而增大,可达到0.33mmol·L-1·h-1～0.45mmol·L-1·h-1;化学氧化速率在最佳菌体生长条件范围内占总氧化速率的比值较小,为8.6～19.1%,而随着pH值、温度的降低这一比值上升至29%～43.7%.

先天性心脏病并肺动脉高压患儿血浆一氧化氮和硫化氢的变化

目的研究先天性心脏病(CHD)并肺动脉高压(PH)患者血浆一氧化氮(NO)和硫化氢(H2S)的变化及其与PH相关性,探论PH的形成机制,为临床有效治疗PH提供新的思路和理论依据。方法对全部研究对象行彩色超声心动图检查,明确CHD类型并测定肺动脉收缩压。按彩色超声心动图结果分为4组。正常儿童25例,CHD 75例,其中无PH 25例,轻度PH 25例,中、重度肺PH 25例。取CHD组术前静脉血4 mL,迅速分离血浆,采用分光光度法测定血浆NO水平,采用敏感硫电极法测定H2S水平。结果CHD患儿血浆NO水平明显高于对照组,但血浆NO水平增加到一定程度后不再随肺动脉收缩压增加而增加,肺动脉收缩压与血浆NO水平无相关性。CHD并中重度PH组血浆H2S水平明显低于CHD并轻度CHD组,CHD并轻度PH组血浆H2S水平明显低于对照组,肺动脉收缩压与血浆H2S水平呈负相关。结论CHD致PH形成时NO水平升高,代偿性内源性NO上调可能对缓解PH起一定作用。CHD致PH形成时H2S明显降低,内源性H2S下调可能在PH形成中起重要的作用。

硫化氢抑制大鼠主动脉一氧化氮释放(四)

目的观察H2S对血管一氧化氮(NO)释放的影响,以探讨H2S和NO这两种气体信号分子间的相互作用。方法大鼠腹腔注射NaHS(14μmol/kg/d,分3次),3d后取血液测定血浆亚硝酸盐含量。离体孵育大鼠主动脉薄片,加入NaHS(10-7￣10-4mol/L)孵育4h;及50μmol/LNaHS分别孵育2、4、6h。采用Greiss法测定血管孵育液亚硝酸盐含量。结果NaHS腹腔注射组大鼠血浆NO2-含量较对照组减少21%(P<0.01)。大鼠主动脉薄片离体孵育,NaHS(10-7￣-10-4mol/L),呈浓度依赖的抑制了血管一氧化氮释放,NO2-含量分别较对照组低10%(P<0.05)、30%、38%和42%(P<0.01),IC50为0.499μmol/L;而一次性给予50μmol/LNaHS,孵育2h、4h和6h,孵育液中NO2-含量比对照组降低62%、40%(P<0.01)和19%(P<0.05)。结论H2S减少血管NO生成。

硫化氢对1型糖尿病大鼠肾诱导型一氧化氮合酶的影响

目的:观察硫化氢(hydrogen sulfide,H_2S)对1型糖尿病大鼠肾诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的影响。方法:将32只雄性SD大鼠随机分为4组(n=8):正常对照(NC)组、糖尿病(DM)组、糖尿病治疗(NaHS+DM)组和NaHS对照(NaHS)组。采用腹腔注射55 mg/kg链脲佐菌素复制1型糖尿病大鼠模型。造模成功后,NaHS+DM组和NaHS组大鼠腹腔注射56μmol/kg NaHS溶液进行干预治疗。8周后,分别测定各组大鼠血清和肾组织中总一氧化氮合酶(total nitric oxide synthase,T-NOS)、iNOS活性和一氧化氮(NO)水平;测定肾组织中谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性;采用透射电镜观察肾皮质超微结构变化;Western印迹检测肾组织iNOS蛋白表达。结果:与NC组相比,NaHS组各项指标间差异均无统计学意义(P>0.05),而DM组大鼠血清和肾组织中T-NOS,iNOS活性和NO水平均显著增高(P<0.01);肾组织GSH-Px活性明显下降(P<0.01)。电镜观察显示DM组大鼠肾小球基底膜增厚、系膜基质增多,足突融合;iNOS蛋白表达明显升高。与DM组相比,NaHS+DM组血清和肾T-NOS,iNOS活性和NO水平明显下降(P<0.01),GSH-Px活性明显升高(P<0.01),肾超微结构损伤明显减轻,iNOS蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:H2S对1型糖尿病大鼠肾损伤具有保护作用,其机制可能与下调iNOS活性和蛋白表达,降低肾NO生成相关。