HPLC法同时测定一清颗粒中黄芩苷等8种有效成分的含量

目的建立RP-HPLC法同时测定一清颗粒中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、黄芩苷、汉黄芩素和盐酸小檗碱8种有效成分的含量。方法采用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm5,μm),以乙腈-体积分数0.1%磷酸水(三乙胺调pH值至3.0)为流动相,梯度洗脱;检测波长为254 nm,流速1.0 mL.min-1,柱温30℃。结果芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、黄芩苷、汉黄芩素和盐酸小檗碱质量浓度分别在1.800～36.20、14.25～285.1、4.500～90.01、.780～35.60、4.300～85.0、48.20～963、1.700～34.00、28.60～572.5 mg.L-1内与峰面积呈良好的线性关系(r≥0.999 1),平均回收率(n=9)分别为96.0%、98.0%、96.6%、97.0%9、7.7%9、7.0%9、7.2%9、8.0%。结论该方法快速简便、灵敏、重现性好,可为一清颗粒的质量控制提供依据。

毛细管电泳法测定一清颗粒中七种成分的含量

建立了毛细管电泳法测定一清颗粒中的7种有效成分——盐酸小檗碱、汉黄芩苷、汉黄芩素、大黄素、芦荟大黄素、大黄酚和大黄素甲醚。采用未涂层弹性融硅石英毛细管柱,盐酸小檗碱的测定:以盐酸雷尼替丁为内标,运行缓冲液为0.2mol/L磷酸二氢钠溶液-无水乙醇(1:1,pH5.5),分离电压21kV,重力进样10s(高度15cm),检测波长265nm。其他6组分的测定:以对乙酰氨基酚为内标,运行缓冲液为8%甲醇(pH9.42,含25mmol/L硼砂、25mmol/LSDS和4mmol/L磺丁基-β-环糊精),分离电压14kV,重力进样5s(高度15cm),检测波长254nm。7种成分分别在2.6～13、2～20、1～10、1.6～16、1.2～12、7.2～72和1～10μg/ml浓度范围内线性关系良好,回收率分别为100.3%、102.7%、101.8%、102.0%、99.0%、100.0%、98.2%,RSD均小于3.09%。

高效液相色谱法测定一清颗粒中黄芩苷的含量

目的 :用高效液相色谱法测定一清颗粒中黄芩苷的含量。方法 :色谱柱为ODSC18(3.9mm× 15 0mm ,5 μm) ,流动相为甲醇 水 磷酸 (4 7∶5 2∶0 .2 ) ,检测波长为 :2 78nm。结果 :黄芩苷在 0 .1μg～1.0 μg范围内进样量与峰面积呈现良好的线形关系 (γ =0 .9997) ;平均加样回收率为 98.2 % ,RSD =2 .3% (n =5 )。结论 :本方法测定结果准确 ,重现性好。

HPLC法同时测定一清颗粒中盐酸小檗碱、盐酸药根碱和盐酸巴马汀的含量

目的:采用HPLC法同时测定一清颗粒中3种有效成分(盐酸小檗碱、盐酸药根碱和盐酸巴马汀)的含量。方法:色谱柱为Agilent C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-25 mmoL/L庚烷磺酸钠和50 mmoL/L磷酸二氢钾溶液(含0.14%三乙胺、以磷酸调pH 3.0)(30∶70),检测波长为348 nm,柱温为30℃,流速为1.0 mL/min。结果:盐酸小檗碱、盐酸药根碱和盐酸巴马汀3种成分分离度>1.5。3批样品中盐酸小檗碱、盐酸药根碱和盐酸巴马汀的含量分别为:盐酸小檗碱(3.68、3.67、3.65 mg/g)、盐酸药根碱(0.31、0.30、0.30 mg/g)、盐酸巴马汀(0.67、0.66、0.66 mg/g)。结论:利用高效液相色谱法,在同一波长下能同时准确测定一清颗粒中盐酸小檗碱、盐酸药根碱和盐酸巴马汀的含量。

应用HPLC对复方一清颗粒中黄芩苷含量测定方法的改进

目的:建立简便、快速、适合教学的高效液相色谱法来测定中药及制剂中有效组分含量的学生实验方法。方法:以70%乙醇作为提取溶剂,采用Hypersil ODS柱,检测波长280 nm,以甲醇-1%冰醋酸水溶液为流动相测定复方一清颗粒中黄芩苷的含量。结果:70%乙醇作为黄芩苷的提取溶剂,提取效率高,杂质少,符合中药制剂分析的要求。此外,采用甲醇-1%冰醋酸水溶液作为流动相测定复方一清颗粒中黄芩苷的含量,与药典方法相比较,含量测定符合标准,且分析用时短,后处理方便。结论:建立的方法经济、简便、快速、准确,适合实验教学使用。

毛细管电泳法测定一清颗粒中盐酸巴马汀和盐酸药根碱的含量

目的建立一清颗粒中盐酸巴马汀、盐酸药根碱的含量测定方法。方法内标物为盐酸雷尼替丁;色谱柱为未涂层弹性融硅石英毛细管柱;运行缓冲液为0.2 mol.L-1NaH2PO4溶液-无水乙醇（体积比1∶1）,调节pH值为5.5;分离电压为18 kV,重力进样10 s（高度15 cm）;检测波长为265 nm。结果盐酸巴马汀、盐酸药根碱的线性范围分别为2.37-11.84μg.mL-1（r=0.999 1）、0.45-2.24μg.mL-1（r=0.998 5）;平均回收率分别为102.1%、98.5%,RSD均小于3.00%。结论该法简便、快速、准确可靠,可用于一清颗粒的质量控制。

一清颗粒中五种生物碱类药效组分分析

目的:分析市售一清颗粒中5种生物碱类药效组分盐酸药根碱-盐酸表小檗碱-盐酸黄连碱-盐酸巴马汀-盐酸小檗碱的含量,为建立与临床疗效相对应的质量标准提供依据。方法:采用高效液相色谱法。结果:7个厂家的一清颗粒中生物碱类药效组分含量分别为:厂家1:0.0738-0.1795-0.2517-0.2801-1.0109 mg·g-1;厂家2:0.1273-0.2527-0.3114-0.3890-1.7094 mg·g-1;厂家3:0.0570-0.2210-0.2501-0.2143-0.8732 mg·g-1;厂家4:0.0334-0.1164-0.1333-0.1256-0.4674 mg·g-1;厂家5:0.0201-0.0397-0.0545-0.0765-0.2403 mg·g-1;厂家6:0.0764-0.1387-0.2513-0.2648-0.9727 mg·g-1;厂家7:0.1408-0.1448-0.3089-0.2974-1.0175 mg·g-1。结论:本方法准确、简便、快速,为全面控制一清颗粒质量提供科学依据。7个厂家一清颗粒中5种生物碱药效组分含量差别较大,厂家2各组分含量较高,厂家4、5含量相对较低。

一清颗粒中黄芩薄层色谱法的改进

一清颗粒中黄芩薄层色谱的改进,展开剂;醋酸乙酯-丙酮-甲酸-水(26:7:1.5:3),分离效果好,斑点清晰,重复性好。

一清滴丸与一清颗粒及一清胶囊的体外溶出度比较研究

目的对一清滴丸与一清颗粒及一清胶囊中主要有效成分大黄素、大黄酚、黄芩苷的溶出曲线、溶出度进行比较,找出三者在胃肠道中溶出吸收的差异。方法应用溶出度测定法,以水200mL为溶剂,转速为55r/min,依法操作,测定一清滴丸与一清颗粒、一清胶囊的溶出度并绘制曲线。结果三者中,一清滴丸体外溶出速率较快,且能达到的最大溶出百分率。结论3种制剂中一清滴丸在体内起效迅速,生物利用度最高,临床疗效更加突出。

高效液相色谱法测定不同工艺一清颗粒中黄芩苷的含量

目的建立高效液相色谱法测定不同工艺的一清颗粒中黄芩苷含量的方法。方法采用ODS-C18分析柱(4.6nm×250mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸(42∶58),检测波长为275 nm,流速为1 mL/min。结果黄芩苷在0.15μg-3.0μg范围内进样量与峰面积呈现良好的线性关系(r=0.9995),平均回收率为99.81%,RSD=0.20%(n=5)。结论本方法测定结果准确,重现性好,可用于该制剂的质量控制。

一清颗粒薄层鉴别的改进

目的:对一清颗粒薄层鉴别方法的改进。方法:对提取方法、展开剂进行改进。结果:提取方法简单,简化了操作过程,薄层鉴别结果斑点清晰。结论:实验结果为一清颗粒薄层鉴别方法提供了一定的理论依据。

HPLC法测定不同工艺的一清颗粒中盐酸小檗碱的含量

目的建立高效液相色谱法测定不同工艺的一清颗粒中盐酸小檗碱含量的方法。方法采用HPLC法,固定相为Inertsil C18柱,流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液(含0.2%三乙胺)(40∶60),测定波长为352nm,柱温为30℃,流速为1.0mL/min。结果盐酸小檗碱在0.096-0.96μg范围内线性关系良好,r=0.9998,样品平均回收率为98.18%,RSD=1.25%(n=5)。不同工艺条件下一清颗粒中盐酸小檗碱的含量均不同。结论该法简便、准确、可靠,可用于该制剂的质量控制。

高效液相色谱法测定一清颗粒中盐酸小檗碱的含量

目的建立一清颗粒中盐酸小檗碱的含量测定方法。方法使用Waters C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);以乙腈-0.033mol/L磷酸二氢钾溶液(40:60)为流动相;检测波长265nm;流速1.0ml/min。结果盐酸小檗碱的线性范围为:0.2048～1.024μg,r=0.9998,平均回收率为100.09%,RSD=0.39%(n=5)。结论HPLC法测定一清颗粒中盐酸小檗碱含量,操作简单,结果准确,方法重现性好。

温度对HPLC法测定一清颗粒中黄芩苷的影响研究

利用温度控制系统,改变HPLC分离柱的温度,进行测定一清颗粒中黄芩苷含量,结果表明,在完全相同流动相比例下,20~60℃范围内,HPLC系统压力、黄芩苷标准品以及一清颗粒样品中黄芩苷的保留时间、峰面积、有效塔板数、分离度等参数都发生了变化,在20~60℃之间一清颗粒样品中黄芩苷含量的测定值在45℃时最大,出峰数最多,有效塔板数和分离度均最大,图谱最优,黄芩苷峰较窄且对称性好。

市售一清颗粒中蒽醌含量的比较及聚类分析

目的：建立同时测定市售不同厂家生产的一清颗粒中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的游离蒽醌和结合蒽醌含量,并进行聚类分析。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为Eclipse plus C18,流动相为甲醇-0.1%磷酸（梯度洗脱）,流速为0.8 ml/min,检测波长为254 nm,柱温为25℃,进样量为20μl。结果：芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的检测进样量线性范围分别为0.001 6-0.128 0、0.003 4-0.273 6、0.003 7-0.299 2、0.006 7-0.536 0、0.001 7-0.134 4μg（r均为0.999 9）;精密度、稳定性、重复性试验的RSD〈3%;加样回收率分别为97.77%-101.47%、98.09%-100.26%、96.42%-100.38%、96.63%-102.50%、97.10%-103.70%,RSD分别为1.30%、0.76%、1.58%、2.17%、2.47%（n=6）;总蒽醌的含量范围分别为0.042-0.218、0.029-0.448、0.022-0.167、0.032-0.284、0.006-0.060 mg/g,结合蒽醌的含量范围分别为0.010-0.111、0.013-0.092、0.011-0.097、0.030-0.246、0.001-0.034 mg/g,游离蒽醌的含量范围分别为0.022 3-0.143、0.015-0.356、0.008-0.071、0.006-0.075、0.003-0.032 mg/g。对5种成分中的总蒽醌进行聚类分析发现,有4批属于第1类、2批属于第2类、4批属于第3类;结合蒽醌中有4批属于第1类、2批属于第2类、4批属于第3类;游离蒽醌中有6批属于第1类、4批属于第2类。结论：该方法操作简便、结果准确,可为提高一清颗粒的质量和控制其泻下药效提供参考;不同厂家产品中大黄结合蒽醌含量差异较大。

一清颗粒联合环磷酰胺对三阴性乳腺癌荷瘤小鼠移植瘤的影响

目的研究一清颗粒联合环磷酰胺对三阴性乳腺癌荷瘤小鼠移植瘤的影响。方法建立小鼠乳腺癌移植瘤模型,并随机分为阴性对照组、阳性对照组、实验组和联合组,每组8只。阳性对照组腹腔注射30 mg·kg^(-1)·d^(-1)环磷酰胺,实验组灌胃20 g·kg^(-1)·d^(-1)一清颗粒,联用组腹腔注射30 mg·kg^(-1)·d^(-1)环磷酰胺+灌胃20 g·kg^(-1)·d^(-1)一清颗粒。阴性对照组灌胃等体积0.9%NaCl+腹腔注射等体积0.9%NaCl,每天1次,连续干预17天。检测各组小鼠肿瘤生长情况;检测各组小鼠抑瘤率、脾指数和胸腺指数;检测各组中性粒细胞、外周血淋巴细胞和单核细胞的比例;检测肿瘤组织中CD4^(+)T和CD8^(+)T细胞比例;检测肿瘤组织中IL-6和TNF-αmRNA表达水平;检测各组小鼠体质量增加率。结果联合组移植瘤生长速度最慢;阳性对照组、实验组和联合组抑瘤率分别为60.34%,24.71%和76.46%;阴性对照组、阳性对照组、实验组和联合组的胸腺指数分别为(0.50±0.28)、(0.06±0.04)、(0.54±0.39)和(0.23±0.04);阴性对照组、阳性对照组、实验组和联合组的外周血淋巴细胞比例分别为(33.77±2.29)%、(16.20±4.52)%、(31.33±10.01)%和(21.07±4.37)%;阴性对照组、阳性对照组、实验组和联合组的CD4^(+)T细胞比例分别为(36.43±2.67)%、(33.57±1.69)%、(45.96±3.54)%和(62.8±3.63)%;阴性对照组、阳性对照组、实验组和联合组的CD8^(+)T细胞比例分别为(30.02±1.97)%、(25.79±2.32)%、(34.95±1.93)%和(42.16±2.57)%;阴性对照组、阳性对照组、实验组和联合组的IL-6 mRNA表达水平分别为1.00±0.04、0.67±0.02、0.61±0.04和0.49±0.05;阴性对照组、阳性对照组、实验组和联合组的TNF-αmRNA表达水平分别为1.00±0.03、0.73±0.01、0.69±0.02和0.66±0.03。阴性对照组、阳性对照组、实验组和联合组的体质量增加率分别为(12.50±1.84)%,(5.00±1.63)%,(8.30±0.54)%和(8.10±0.41)%。与阳性对照组相比,联合组抑瘤率、胸腺指数、外周血淋巴细胞比例、CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞比例以及体质量增加率都显著增加,而IL-6的表达水平显著降低(P<0.05)。结论一清颗粒联合环磷酰胺可显著抑制乳腺癌荷瘤小鼠移植瘤生长,一清颗粒可以减少环磷酰胺致小鼠免疫功能减退的毒性反应,改善生存质量。

HPLC测定一清颗粒中大黄素和大黄酚的含量

目的:建立一清颗粒中大黄素和大黄酚的含量测定方法。方法:采用HPLC法进行测定,色谱柱为Dikma C_(18)(250 mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-0.1%磷酸(85:15);检测波长为254nm:柱温:25℃。结果:一清颗粒中大黄素和大黄酚的的线性范围分别为3.28～32.80μg·ml^(-1),7.12～71.20μg·ml^(-1),r=0.9999。大黄素平均回收率为96.47%,RSD 1.4%;大黄酚平均回收率为98.26%,RSD 0.87%。结论:该方法简便,结果准确,重现性好,可作为一清颗粒的质量控制方法。

HPLC法测定一清颗粒中黄芩苷的含量

目的:建立高效液相色谱法测定一清颗粒中黄芩苷的含量。方法:采用Hypersil C_(18)(250×4.6mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.2mol/L磷酸二氢钠缓冲液(用磷酸调节pH值至2.7)(42:58)为流动相;流速为1.000mL/moL,检测波长275nm,柱温29℃。结果:黄芩苷在0.0916～0.7608μg范围内成良好的线性。(r=0.9945),平均回收率98.9%,RSD=0.31%。结论:方法简便、快速、适用性好,可用于该制剂的质量控制。