姜黄素类物的提取、分离及精制

[目的]探索姜黄素类物的提取、分离及精制方法。[方法]姜黄药材经乙醇渗漉得到总姜黄素醇提物,经水洗、石油醚洗之后得到脱脂浸膏。利用干法柱层析分离得到双脱甲氧基姜黄素粗品及姜黄素、脱甲氧基姜黄素混合物。再经湿法柱层析洗脱得到二脱甲氧基姜黄素,通过制备薄层色谱法分离得到姜黄素和一脱甲氧基姜黄素粗品,经丙酮-水重结晶后分别得到姜黄素,一脱甲氧基姜黄素。[结果]测得姜黄素、一脱甲氧基姜黄素和二脱甲氧基姜黄素的熔点分别为182～184℃,168～170℃和226～228℃,三者的高效液相色谱(HPLC)谱图3倍保留时间内峰面积归一化法测得的纯度超过96%。[结论]实验确立的方法可有效分离姜黄素、一脱甲氧基姜黄素和二脱甲氧基姜黄素,分离周期短,节省溶剂。

天然姜黄素类化合物的合成

目的以化学合成法制备天然姜黄素类化合物。方法以对羟基苯甲醛或香草醛和乙酰丙酮为原料经硼络合保护,分别合成姜黄素、一脱甲氧基姜黄素和二脱甲氧基姜黄素,测定熔点,并以氢谱进行结构解析。结果姜黄素、一脱甲氧基姜黄素和二脱甲氧基姜黄素合成品分别为亮黄色、橙黄色和橙红色粉末,氢谱所确证的结构与已知结构一致。结论本合成法操作简单,条件温和,可在短时间内制备大量天然姜黄素类化合物,效率较传统的提取分离法大大提高。

3种姜黄色素干预ox-LDL促平滑肌细胞增殖与影响LDL-R表达的研究

目的:研究3种不同结构的姜黄色素单体对牛主动脉平滑肌细胞(VSMC)增殖及牛VSMC低密度脂蛋白受体(LDL-R)表达的影响,解析构效关系。方法:用MTT比色法和流式细胞仪观察3种不同结构的姜黄色素单体对ox-LDL促牛VSMC增殖及对VSMC LDL-R表达的影响。结果:ox-LDL在2.5,5,10 mg.L-1时,对VSMC有明显的促增殖作用,P<0.05。姜黄素16.5,33,66μmol.L-1,一脱甲氧基姜黄素(简称一脱)33,66μmol.L-1和二脱甲氧基姜黄素(简称二脱)66μmol.L-1对10 mg.L-1ox-LDL培养的VSMC有明显的抑制作用,P<0.05。3种姜黄色素的抑制率为姜黄素>一脱>二脱。3种姜黄色素在66,33,16.5μmol.L-1时对VSMC LDL-R的表达均有明显的上调作用,其中姜黄素16.5μmol.L-1组与正常组比较,P<0.05,其他组与正常组比较P<0.01,上调作用二脱>一脱>姜黄素,经组间方差分析,P<0.01,与姜黄色素抑制牛VSMC增殖作用相反。结论:3种不同结构姜黄色素单体能明显抑制ox-LDL促牛VSMC增殖作用,上调牛VSMC LDL-R表达,从而有可能延缓动脉粥样硬化的发生发展过程。

姜黄醇提取物中不同组分对血管平滑肌细胞增殖的影响研究

目的:比较姜黄醇提取物中不同组分对常规培养血管平滑肌细胞(Vascular Smooth Muscle CellsVSMC)增殖的影响和对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)条件培养的平滑肌细胞增殖作用的影响。方法:姜黄醇提取物经制备型薄层色谱分离,纯化,含量测定后配制成不同浓度的药物溶液,分别与常规培养的VSMC和浓度为2μmol/L的AngⅡ条件培养VSMC中共孵育48h,MTT法测定细胞的增殖情况。结果:姜黄素、一脱甲氧基姜黄素和二脱甲氧基姜黄素在剂量为(1.35×10-5mol/L)时,对常规条件培养和浓度为2×10-6mol/L的AngⅡ条件培养的VSMC均有明显的抑制增殖作用,P<0.001-0.05;在剂量为(5.4×10-7mol/L)时三者均无明显差异,存在剂量依赖性。抑制作用姜黄素>一脱甲氧基姜黄素>二脱甲氧基姜黄素;对.AngⅡ条件培养的抑制率>常规条件培养。色谱的原点物质给予高剂量姜黄素组相同剂量,无抑制作用。

HPLC法测定姜黄提取物中有效成分含量

目的：建立高效液相色谱法同时测定姜黄提取物中姜黄素、一脱甲氧基姜黄素、二脱甲氧基姜黄素的含量.方法：采用C18色谱柱（150 mm×6 mm,5μm）,流动相为乙腈-水-冰乙酸（39∶57∶4）,流速为1.4 ml· min-1;检测波长：428 nm;柱温：35℃;进样量：20μl.结果：同时测定了姜黄素、一脱甲氧基姜黄素、二脱甲氧基姜黄素的含量,三者的线性范围分别为81.31～650.50 μg ·ml-1,26.93 ～215.42μg· ml-1,16.32～130.54 μg ·ml-1.平均回收率分别为100.9％,100.9％,100.6％,RSD分别为1.7％,1.2％,1.5％（n=9）.结论：该方法简便、准确、重复性好,可用于姜黄提取物中有效成分的测定.