采用电活性标记物N-(2-乙基-二茂铁)马来酰亚胺检测与表面固定的一致性双链DNA特异性作用的p53蛋白质

建立了电化学检测表面固定捕获的野生型p53蛋白质的方法.首先在金电极表面形成巯基化的单链DNA探针/己硫醇(HT)混合自组装膜,随后巯基化的单链DNA探针与溶液中序列匹配的靶点DNA杂交,所形成的一致性双链DNA捕获溶液中的野生型p53蛋白质.p53分子表面的半胱氨酸残基采用巯基特异性试剂N-(2-乙基-二茂铁)马来酰亚胺(Fc-Mi)进行衍生.通过检测二茂铁的电化学信号来指示p53与一致性双链DNA之间的特异性相互作用.p53蛋白质与双链DNA的键合程度取决于双链DNA的序列.该方法可检测的p53最低浓度为1.33nmol·L-1.