丁酰苷菌素生物合成酶基因的分子克隆Ⅰ.重组质粒No.2和No.11的构建及其性质

环状芽孢杆菌B.circulans NRRL-B 3312是丁酰苷菌素的产生菌。用鸟枪法克隆其抗生素生物合成关键酶——α-羟基-γ-氨丁酰酰化酶基因。用EcoR Ⅰ分别酶切其染色体DNA和pUB110质粒,经T4-DNA连接酶连接,转化至枯草芽孢杆菌B.subtilis 168的感受态细胞,以卡那霉素抗性标记挑选转化子。其中,No.2和No.11重组质粒对卡那霉素和新霉素的抗性较pUB110有所提高.构建了这两种重组质粒的限制性内切酶图谱。分子杂交实验确证,两个重组质粒DNA中均有B.circulans NRRL-B 3312的同源DNA序列。

采用DNA重组技术研制丁胺卡那霉素

丁胺卡那霉素是一种新型半合成抗生素,是卡那霉素A-α脱氧链霉胺部分碳,位置氨基被α-羟基-r-氨丁酸(HABA)酰化的产物,其抗菌效果与卡那霉素相当,但对耐卡那霉素和庆大霉素的菌有效,抗绿脓杆菌且耳毒性较低。在国外已广泛使用。国内采用半合成方法已经研制成功,由于成本高,价格贵,难以广泛使用。丁酰苷菌素是由环状芽孢杆菌产生的一种氨基糖苷类抗生素,其结构具有HABA侧链。