丁香茄挥发油成分GC-MS分析

目的分析丁香茄中挥发油的化学成分。方法采用水蒸气蒸馏法提取丁香茄中挥发油,用GC-MS法测定和分析其化学组分。结果共鉴定了19个成分,占总峰面积的96%,按相对峰面积计,其中含亚油酸为62.8%,总脂肪酸和其他酯约占72%。结论丁香茄挥发油的主要成分为脂肪酸,为开发利用丁香茄资源提供了实验依据。

丁香茄生物碱对人非小细胞肺癌体外作用及其机制研究

目的研究丁香茄生物碱对人非小细胞肺癌A549抗肿瘤转移作用及其机制。方法采用MTT法检测丁香茄生物碱对非小细胞肺癌A549细胞毒活性;划痕实验和Transwell细胞侵袭实验检测药物对肿瘤细胞体外迁移和侵袭作用的影响;ELISA法检测药物对细胞金属基质蛋白酶2(MMP-2)、金属基质蛋白酶9(MMP-9)表达的变化。结果丁香茄生物碱可显著抑制肿瘤细胞的增殖(P<0.05);抑制A549细胞的迁移和侵袭,高剂量抑制率为63.4%;与对照组比较,丁香茄生物碱组MMP-2、MMP-9蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论丁香茄生物碱可对人非小细胞肺癌A549增殖,抑制肿瘤细胞侵袭,其作用机制可能与抑制MMP-2、MMP-9蛋白表达有关。

丁香茄叶乙酸乙酯部位化学成分及抗炎活性研究

基于脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞(RAW 264.7)生物模型研究丁香茄Calonyction muricatum叶乙酸乙酯部位的抗炎活性成分。在体外活性追踪下,采用硅胶、MCI、ODS、HW-40C柱色谱及半制备液相等方法对乙酸乙酯活性部位进行分离纯化,根据理化性质结合现代波谱技术鉴定化合物结构。从丁香茄叶乙酸乙酯部位分离得到15个化合物,分别为:12-oxo-phytodienoic acid(1)、(9 Z,12 Z,14 E,16 R)-16-hydroxyoctadeca-9,12,14-trienoic acid(2)、(9 Z,12 S,13 E,15 Z)-12-hydroxyoctadeca-9,13,15-trienoic acid methyl ester(3)、(9 Z,11 E,13 R,15 Z)-13-hydroxyoctadeca-9,11,15-trienoic acid(4)、(9 R,10 E,12 Z)-9-hydroxyoctadeca-10,12-dienoic acid(5)、(9 S,10 E,12 Z)-9-hydroxyoctadeca-10,12-dienoic acid(6)、1-十二烷醇(7)、山柰酚-3-O-半乳糖苷(8)、6-methoxykaempferol-3-O-galactoside(9)、紫云英苷(10)、6-methoxykaempferol-3-O-glucoside(11)、(6 S,9 R)-长寿花糖苷(12)、咖啡酸乙酯(13)、麦芽酚(14)、hydroxydihydrobovolide(15)。化合物1~12、14、15为首次从月光花属植物中分离得到。单体化合物抗炎活性筛选结果表明,化合物1、3、4、5均具有一定的抗炎活性,其中1和5的抑制NO作用显著,IC_(50)值分别为1.17±0.51、0.97±0.89μM。

丁香茄乙酸乙酯部位防治酒精性胃溃疡的药效评价

目的:探究丁香茄乙酸乙酯部位(IM-EA)防治酒精性胃溃疡(GU)的可行性,并采用网络药理学结合动物实验探究其发挥疗效的作用机制。方法:将40只SD大鼠适应性喂养7 d后随机分为空白组、模型组、雷尼替丁组(2.7 mg·kg^(-1))、IM-EA低(DL,30 mg·kg^(-1))和高(DH,60 mg·kg^(-1))剂量组。预防性给药1周后,采用盐酸无水乙醇(150 mmol·L^(-1))复制酒精性GU大鼠模型,采用苏木素-伊红(HE)染色、高碘酸-希夫染色(PAS)初步评估IM-EA防治GU的疗效。根据ADMET属性筛选IM-EA先导化合物,采用Swiss Target平台获取IM-EA先导化合物的潜在作用靶标;通过Dis Ge NET、OMIM和Gene Cards数据库收集GU疾病相关靶标,与IM-EA潜在作用靶标相映射获取IM-EA防治GU潜在作用靶标。采用STRING数据库构建靶标蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络以筛选枢纽靶标,采用DAVID平台对交集靶标进行生物功能注释以探讨IM-EA防治GU的潜在作用机制,采用Autodock Vina软件进行计算机模拟初步验证。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量和胃组织中前列腺素E2(PGE2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测胃组织中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的枢纽蛋白:Jun、细胞外调节蛋白激酶(ERK)和p38的相对表达量。结果:动物实验结果表明,与空白组比较,模型组大鼠胃组织损伤明显,胃黏液分泌显著减少。与模型组比较,各给药组大鼠胃组织溃疡面积均显著减小(P<0.01),胃组织病理学状态和胃黏液分泌得到改善,IM-EA防治GU确有疗效。经ADMET性质筛选获得16个IM-EA先导化合物,映射257个IM-EA防治GU潜在作用靶标,肿瘤坏死因子(TNF)、蛋白激酶B1(Akt1)、细胞肿瘤抗原p53(TP53)、表皮生长因子受体(EGFR)和ERK等靶标为PPI网络的枢纽节点。生物功能注释和分子对接结果提示MAPK信号通路可能在IM-EA防治GU的过程中起关键作用,与VEGF信号通路、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/Akt信号通路和NF-κB信号通路在抗炎、抗氧化和损伤修复等方面协同生效。药理实验进一步验证发现,与空白组比较,模型组大鼠血清中IL-6含量极显著升高(P<0.01),TNF-α具升高趋势;模型组大鼠胃组织中MMP-9含量极显著升高(P<0.01),SOD含量明显降低(P<0.05)。与模型组比较,IM-EA各给药组血清中TNF-α、IL-6含量、胃组织中MMP-9、PGE2含量均极显著降低(P<0.01),胃组织中SOD含量极显著升高(P<0.01)。与空白组比较,模型组大鼠胃组织中磷酸化(p)-p38、p-Jun、p-ERK显著上调(P<0.01),p38、Jun显著上调(P<0.01);与模型组比较,IM-EA给药组胃组织中p-p38、p-Jun、p-ERK、p38则显著下调(P<0.01),Jun、ERK相对表达量明显上调(P<0.05)。结论:丁香茄乙酸乙酯部位有较好的防治酒精性胃损伤的功效,可能通过MAPK通路介导抗炎、抗氧化和损伤修复等机制发挥作用。

丁香茄叶挥发油成分GC-MS分析

优化丁香茄叶挥发油的提取条件,并分析丁香叶所含挥发油的化学成分及相对含量。本实验主要采用水蒸气蒸馏法提取丁香茄叶粉末中的挥发油,以料液比、浸泡时间、提取时间为主要考察因素,进行单因素试验;在单因素试验基础上,以丁香茄叶的得油率为评价指标,进行正交试验,从而确定丁香茄叶挥发油最佳提取工艺;采用气相色谱—质谱法(GC-MS)对丁香茄叶所含的挥发油进行成分分析和含量测定。实验结果表明,丁香茄叶挥发油提取的最佳工艺为浸泡时间1h、提取时间3h、料液比为1∶20(m/V);GC-MS共分离鉴定出十余种化合物,以脂肪酸、萜类化合物等为主,占挥发油总量的93.49%。本试验明确了水蒸气蒸馏法提取丁香茄叶挥发油的优化工艺和挥发油的成分,可为丁香茄叶挥发油的工艺研究、标准制定和规模化生产提供理论依据。