万古霉素耐药的屎肠球菌感染一例

肠球菌属于人体正常菌群,当抵抗力低下时可侵入机体,引起泌尿系感染、菌血症、腹腔感染及感染性心内膜等多部位感染,是临床常见的条件性致病菌。近年来,由于广谱抗菌药物广泛使用,肠球菌对抗菌药物的耐药现象日趋严重,多重耐药的肠球菌感染不断增加,给临床控制感染带来了很大困难。

1例耐万古霉素屎肠球菌血流感染患者的药学监护

1例67岁老年患者,主因“持续心前区不适伴寒战高热1 d”入院,初始予头孢哌酮钠舒巴坦钠抗感染治疗,效果欠佳,因第一次血培养提示屎肠球菌生长,万古霉素敏感,换用万古霉素。使用万古霉素3 d后,患者仍有高热,第二次血培养+药敏试验结果提示万古霉素耐药屎肠球菌生长,对利奈唑胺敏感,医师拟换用利奈唑胺抗感染治疗。临床药师考虑患者为血流感染,且长期血小板低下,建议给予达托霉素(0.5 g,qd,ivgtt)抗感染治疗,医师接受建议。换用达托霉素2 d后,患者未再出现寒战、发热,症状明显好转。达托霉素治疗4 d后,再次进行血培养,结果提示无细菌生长。达托霉素治疗10 d后,患者好转出院。

万古霉素耐药屎肠球菌致术后颅内感染1例

1病例摘要 患者，男，24岁，7个月前无明显诱因出现复视、视力下降，向右视物时明显。5个月前出现饮水呛咳，间歇性头痛，右侧肢体无力，

耐万古霉素屎肠球菌的流行病学及耐药性分析

目的探讨本中心耐万古霉素屎肠球菌的流行病学及耐药性,为临床合理用药及感控防治提供科学依据。方法回顾性分析中山大学附属第一医院2017年1月—2023年6月临床分离的104株非重复的耐万古霉素屎肠球菌(vancomycin-resisitant Enterococcus faecium,VRE-fm),分析患者的基本资料、标本类型分布及对不同抗生素的耐药率、菌株携带的耐药基因及毒力基因。结果共分离104株非重复的VRE-fm菌株,≥60岁患者占63.4%(66/104);VRE-fm菌株主要分离自尿液54.8%、引流液14.4%和血液7.7%;微量肉汤稀释法药敏试验结果显示,104株VRE-fm对利奈唑胺全部敏感,替加环素的敏感率为98.1%,对其他抗菌药物敏感性较差;本中心47株VRE-fm菌株进行全基因组测序结果显示,均携带vanA耐药基因,未检出vanB和vanM耐药基因;47株VRE-fm菌株全部携带acm毒力基因,仅有1株VRE-fm菌携带esp毒力基因,其余毒力基因均为阴性。结论目前VRE-fm菌株的耐药性严峻,VRE-fm菌株通常同时携带耐药基因和毒力基因,临床可用于治疗VRE-fm感染的药物非常有限。因此,应当加强对万古霉素等糖肽类抗菌药物的使用管理,努力开发和实施感染控制方法,以有效地防止VRE-fm的进一步发生和蔓延。

利奈唑胺耐药而万古霉素敏感的屎肠球菌1例

患者,男,32岁,既往体健。因车祸致左小腿毁损伤、右侧胫腓骨骨折、失血性休克、肺挫伤、成人呼吸窘迫综合征（ARDS）而于2008年5月25日急诊收住。予抗休克综合急救措施并急诊行左小腿截肢及双下肢清创缝合术等处理后转入ICU监护加强治疗。入科后，生化及血气检查结果显示患者存在心、肝、肾功能损害及ARDS、凝血功能障碍而一直予机械通气辅助通气，

耐万古霉素屎肠球菌感染1例

肠球菌广泛分布于自然界，是人类正常菌群的一部分，同时也是医院感染的重要病原菌。肠球菌主要引起泌尿道感染，也可导致盆腔、腹腔感染以及菌血症等。现今随着抗菌药物的广泛应用，肠球菌耐药现象日趋严重，尤其是携带耐万古霉素基因的肠球菌，更是引起临床难治性感染。本院2014年4月从1例肾功能异常并发尿路感染的患者尿液中分离出1株耐万古霉素的屎肠球菌，且为首次分离，现报道如下。

利奈唑胺治疗耐万古霉素屎肠球菌致颅内感染1例报告

患者男，68岁。因蛛网膜下腔出血、昏迷入院。入院后行侧脑室穿刺外引流术，住院期间继发肺炎，出现发热及血象偏高。术后第12天，脑脊液常规：色微浊，白细胞300×10^6／L，多个核细胞占70％；脑脊液生化检查：葡萄糖1．35g／L，蛋白质1．75g/L。

广东省2019—2023年耐万古霉素屎肠球菌检出率升高的时空变迀研究

目的分析近年广东省耐万古霉素屎肠球菌(VR-Efm)临床分离株的时空分布,探寻VR-Efm检出率上升的原因。方法回顾性分析2019—2023年广东省4个区域(珠三角、粤东、粤西、粤北)的38所医疗机构上报至广东省细菌耐药监测系统中VR-Efm检出情况、患者人口学特征及科室和标本分布等资料,同步分析世界卫生组织重点关注的ESKAPE中其他5种细菌的检出情况。结果广东省VR-Efm检出率从2019年1.4%(63/4543)上升至2023年21.3%(1351/6345),呈明显上升趋势,2023年44.7%(17所)的医疗机构VR-Efm检出率>20%;广东省4个区域VR-Efm检出率普遍上升,以珠三角地区为中心向周围辐射增长。ESKAPE整体由2019年10.1%升至2023年10.8%,其余5种病原体中,耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌检出率从2019年8.0%上升至2023年15.0%,耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌和耐碳青霉烯类肠杆菌属检出率分别从2019年的61.6%、34.4%、21.2%、7.9%下降至2023年的58.2%、31.9%、21.0%、7.6%,皆有不同程度下降。ICU VR-Efm检出率(12.2%)高于门急诊(9.4%)、内科(9.2%)和外科(7.0%)等非ICU科室(均P<0.05)。VR-Efm检出率较高标本分别为尿(9.8%)、血(9.1%),其余标本检出率介于6.9%~9.6%。青少年患者VR-Efm检出率(4.4%)低于中老年患者(>9.4%,P<0.05)。结论近5年广东省VR-Efm检出率明显上升,可能与社区和医院获得的优势克隆传播有关。有条件的医疗机构应对入院患者开展VR-Efm的筛查,并对检出VR-Efm的患者采取有效防控措施,以遏制VR-Efm检出率在该区域的上升。

利奈唑胺对万古霉素敏感及耐药屎肠球菌的抗菌活性

目的评价利奈唑胺对临床分离万古霉素敏感及耐药屎肠球菌的体外抗菌活性。方法多重PCR法鉴定屎肠球菌万古霉素耐药基因类型，平皿二倍稀释法测定利奈唑胺等11种抗菌药物MIC值。结果75株临床分离万古霉索耐药屎肠球菌均携带vanA基因。万古霉素敏感及耐药屎肠球菌对利奈唑胺均敏感，MIC范围1-2mg／L。与红霉素、氨苄西林、左氧氟沙星和利福平相比，万古霉素敏感及耐药屎肠球菌的耐药率均在80％以上。万古霉素敏感屎肠球菌对高浓度庆大霉素、高浓度链霉素、四环素和氯霉素的耐药率分别为80．2％、13．9％、38．6％和37．6％；万古霉素耐药屎肠球菌对上述4种药物的耐药率分别为64．5％、8．0％、18．5％和5．3％。结论利奈唑胺对我国临床分离万古霉素敏感和耐药屎肠球菌均具有很好的体外抗菌活性。

替加环素、米诺环素对VanM型万古霉素耐药屎肠球菌体外抗菌活性

目的了解替加环素及米诺环素对Van M型万古霉素耐药屎肠球菌临床分离株的体外抗菌活性。方法收集2006—2014年上海地区临床分离Van M型万古霉素耐药屎肠球菌45株;采用PCR扩增及测序确认菌种和万古霉素耐药基因型;测定替加环素及米诺环素等10种抗菌药物对Van M型万古霉素耐药屎肠球菌的MIC。结果 45株临床分离株均确认为Van M型万古霉素耐药屎肠球菌;所有菌株对万古霉素高度耐药（MIC 128-〉256 mg/L）,对替考拉宁耐药率为71.1%。几乎所有菌株对左氧氟沙星（100%）和氨苄西林（97.8%）耐药,对米诺环素、庆大霉素和利福平的耐药率分别为15.6%、64.4%和82.2%,未检出替加环素和利奈唑胺耐药株。结论替加环素和米诺环素对Van M型万古霉素耐药屎肠球菌有良好的体外抗菌活性。

万古霉素耐药肠球菌对院内肠球菌肺部感染预后的影响

目的 探讨万古霉素耐药肠球菌对医院内肺部感染预后的影响。方法 应用回顾性调查的方法对 1993年 1月～ 2 0 0 1年 12月 96例医院内肺部肠球菌感染病人进行分析。结果 96例院内肺部肠球菌感染以粪肠球菌为多 ( 73 % ) ,屎肠球菌次之 ( 2 2 % )。肠球菌对临床常用抗生素的耐药率高 ,对万古霉素的耐药率为 12 5 % ,屎肠球菌的耐药率明显高于粪肠球菌。 96例肺部肠球菌感染患者 ,病死率 40 % ( 3 8/ 96)。感染的肠球菌对万古霉素耐药的病人病死率最高 ,达 92 % ,明显高于万古霉素敏感肠球菌肺感染的病死率 ( 2 6% ) (P <0 0 5 )。结论 万古霉素耐药肠球菌肺感染发病率呈上升趋势 ,病死率高 ,需引起临床的高度重视。

耐万古霉素肠球菌感染的药物治疗

肠球菌是革兰阳性菌,为人体肠道正常菌群的一部分,虽不是临床上主要的致病菌,但可引起心内膜炎,而不产生内毒素.肠球菌的感染通常包括尿路感染、腹腔感染和菌血症,也可引起新生儿感染、脑膜炎和其他感染.

尿液分离万古霉素耐药屎肠球菌耐药机制及毒力基因分析

目的探讨尿液分离万古霉素耐药屎肠球菌(VREfm)耐药机制及毒力基因携带情况。方法收集临床中段尿分离屎肠球菌共88株,其中万古霉素耐药和敏感菌株分别为37株和51株。采用Vitek 2 Compact及配套GP67卡进行常规药物敏感性检测;采用E-test法复核万古霉素、替考拉宁的药敏结果。采用PCR及Sanger测序法检测万古霉素耐药vanA、vanB、vanD及vanM基因;采用PCR法检测肠球菌6种毒力基因cylA、esp、asa1、hyl、gelE和agg携带情况;统计分析万古霉素耐药菌株与敏感菌株之间毒力基因携带差异。结果37株VREfm对万古霉素的最低抑菌浓度(MIC)≥256μg/mL,对替考拉宁耐药率为73.0%(27/37),其中有35株检出vanA基因,其余2株检出vanM基因,均未检出vanB、vanD基因。37株VREfm以esp基因检出率最高(89.2%,33/37),其次为hyl(8.1%,3/37),其中携带esp-hyl双基因2株,携带asa1-gelE双基因1株。51株敏感菌株中esp基因检出率最高(74.5%,38/51),其次为hyl基因(29.4%,15/51),未检出其余4种毒力基因。万古霉素耐药菌株中hyl基因检出率低于敏感菌株,差异有统计学意义(P<0.05)。esp基因携带率在万古霉素敏感和耐药株间差异无统计学意义(P>0.05)。结论尿液分离万古霉素耐药屎肠球菌主要由vanA介导耐药,主要携带的毒力基因为esp和hyl,hyl毒力基因携带率低于万古霉素敏感菌株。

鲜蛋表面屎肠球菌耐药性及万古霉素vanA基因检测

为了研究新鲜鸡蛋表面屎肠球菌耐药性和万古霉素A(vanA)基因的携带情况,试验在养鸡场收集新鲜鸡蛋,分离蛋壳表面的屎肠球菌,用16S rDNA通用引物对分离的屎肠球菌进行种属鉴定,K-B纸片琼脂扩散法进行耐药性分析,并检测耐万古霉素屎肠球菌携带vanA基因的情况。结果表明:革兰氏染色镜检可见革兰氏阳性单个、成对或短链状排列的圆形菌体,符合屎肠球菌的染色和形态特征;从200枚鸡蛋样品中分离到38株屎肠球菌,分离率为19%;分离到的屎肠球菌对14种抗生素表现出不同程度的耐药性,耐药谱广,最多发现8重耐药菌;在5株耐万古霉素的菌株中检测到了vanA基因。说明新鲜鸡蛋蛋壳表面的屎肠球菌对抗生素耐受性较高,对屎肠球菌特别是耐万古霉素屎肠球菌的监测具有公共健康意义,需要进一步调查以评估食源性传播给人类带来的风险。

37株耐万古霉素屎肠球菌基因型及同源性分析

目的检测37株耐万古霉素屎肠球菌（VREFm）的基因型以利于临床治疗选药，重复基因外回文序列-聚合酶链反应（REP-PCR）同源性分析为分子流行病学提供依据。方法依据2006年美国临床实验室标准化研究所（CLSI）推荐的纸片扩散法和琼脂稀释法对VREFm进行药敏试验；PCR方法检测万古霉素的耐药基因；用REP-PCR进行同源性分析。结果37株屎肠球菌对万古霉素、替考拉宁、红霉素和氨苄西林均100．0％耐药，万古霉素MIC〉512μg／ml，基因型均为vanA；耐药率左氧氟沙星为89．2％、庆大霉素为86．5％、环丙沙星为91．9％、呋喃妥因为59．5％、氯霉素为5．4％；37株VREFm扩增出3～14条带，大小在100～2000bp之间，分为6个型。结论37株VREFm表型与基因型一致；VREFm对多种抗菌药物耐药；REP-PCR方法简便、快速、花费低，可用于肠球菌属同源性检测。

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术快速鉴定耐万古霉素屎肠球菌

目的:利用全自动生物质谱检测系统即基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)快速鉴别耐万古霉素屎肠球菌(vancomycin resistant Enterococcus faecium,VRE)和万古霉素敏感屎肠球菌(vancomycin susceptible Enterococcus faecium,VSE)。方法:收集临床分离的屎肠球菌,用仪器法和纸片扩散法(Kirby-Bauer,K-B)进行万古霉素耐药性确认。用MALDI-TOF MS对菌株进行再鉴定,采集图谱。用Clin Pro Tools 3.0软件对质谱峰图进行分析:随机选取25株VRE和50株VSE的质谱峰图用于模型的建立,用建立的模型验证剩余的15株VRE和35株VSE。结果:用Clin Pro Tools 3.0软件建立了遗传算法(GA)、快速分类算法(QC)、监督式神经网络算法(SNN),3种模型的交叉验证和识别能力分别为95.65%、100%,87.62%、94.98%,62.54%、100%。质荷比为2 194.94、3 022.15、3 167.47和4 058.08的质谱峰是用于区分VRE和VSE的最为明显的特征性峰,即两类菌株间存在的差异蛋白质谱峰(分别是峰6、峰27、峰32、峰52)。受试者工作特征曲线显示,这4个特征性峰的曲线下面积(AUC)均约为0.9。用3种模型分别进行的外部验证显示,GA算法、QC算法、SNN算法对VRE的敏感性和特异性分别为86.7%、82.8%,73.3%、85.7%,66.7%、80.0%。结论:在严格控制实验条件的情况下,MALDI-TOF MS可以在鉴定屎肠球菌的同时大致区分VRE和VSE,具有耗时短,敏感性、特异性相对较高的优势。

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术早期筛查耐万古霉素屎肠球菌

目的探讨基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)快速筛查耐万古霉素屎肠球菌(vancomycin resistant enterococcus faecium,VRE)。方法收集2009至2012年临床分离的150株屎肠球菌为研究对象。其中实验组为60株万古霉素耐药屎肠球菌,对照组为90株万古霉素敏感屎肠球菌(vancomycin susceptible enterococcusfaecium,VSE)。通过PCR方法对所有菌株进行万古霉素耐药基因检测。应用MALDITOF MS检测2组菌株,随机选取实验组30株VRE和对照组30株VSE的质谱峰,应用ClinPro Tools软件统计分析两组之间差异质谱峰的受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线。用筛选的差异质谱峰来鉴别余下的实验组30株VRE及对照组60株VSE。结果 MALDI-TOF MS鉴定所有菌株均为屎肠球菌,60株VRE均携带vanA基因,90株VSE不携带任何万古霉素耐药基因,两组菌株之间存在2个差异蛋白质谱峰,相对分子质量分别为3 516.14和3 644.12,其曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.782、0.767。同时采用这2个质谱峰时,MALDI-TOF MS检测VRE的敏感度为80%,特异度为90%,假阳性率为10%,假阴性率为10%,阳性预测值为80%,阴性预测值为90%。结论 MALDI-TOF MS能够在药敏结果报告前,菌株鉴定同时快速筛查VRE,据此建立新型报告流程即时指导临床合理使用抗生素。

MALDI-TOF MS快速鉴定耐万古霉素屎肠球菌及其流行病学分型性能分析

目的利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)快速鉴别van A型万古霉素耐药屎肠球菌(VREfm)和万古霉素敏感屎肠球菌(VSEfm),并对VREfm进行流行病学相关性分析。方法收集139株屎肠球菌临床分离株,其中VREfm66株、VSEfm73株。采用聚合酶链反应(PCR)确定66株VREfm的万古霉素耐药基因。采用MALDI-TOFMS鉴定屎肠球菌。随机选取45株VREfm和50株VSEfm,采用ClinProTools 3.0软件对质谱峰进行分析并建立模型,用最佳模型验证另外的21株VREfm和23株VSEfm。随机选取21株VREfm进行多位点序列分型(MLST)分析,并采用MALDI-TOF MS对其进行层次聚类分析。结果MALDI-TOF MS鉴定出所有菌株均为屎肠球菌,鉴定分值为2.321~2.602。66株VREfm均为vanA基因型。采用ClinProTools 3.0软件建立的最佳模型进行外部验证时,敏感性和特异性分别为95.2%和95.7%。21株VREfm共有7种序列分型(ST)型别,以ST78最常见。MALDI-TOF MS将21株VREfm分为4个集群,绝大多数ST78菌株被归于同一集群,与ST78高度相关的其他ST型别也被归于此集群。结论在严格控制实验条件的前提下,MALDI-TOF MS可快速区分vanA型VREfm和VSEfm,但无法区分与VREfm高度相关的ST型别。

新型肠球菌万古霉素耐药基因簇——vanM基因簇

目的从屎肠球菌临床分离株中克隆一种介导屎肠球菌对万古霉素耐药的新基因簇。方法采用16S rRNA测序对临床株Efm-HS0661进行菌种确认,并行多位点序列分型(MLST);通过药敏试验及接合试验,了解菌株耐药性及其可转移性;通过PCR扩增、步移法测序、限制性内切酶片段克隆获取万古霉素耐药基因及其周边序列,并将获得序列与已知万古霉素耐药基因簇进行比对。结果临床株经16S rRNA测序确认为屎肠球菌,MLST分型属ST78型;该菌株对万古霉素及替考拉宁耐药,且可通过接合试验发生转移;测序获得一6 592bp核苷酸序列,为含6个万古霉素耐药相关基因的基因簇,其基因结构与已知耐药基因簇不同,命名为vanM型基因簇。其中vanM全长1 032bp,其编码蛋白VanM与VanA、VanB、VanD、VanF基因氨基酸序列同源性分别为79.7%、69.7%、66.0%和78.5%。结论从万古霉素耐药屎肠球菌临床株中发现了一种新型万古霉素耐药基因簇———vanM型基因簇。