三七茎叶总皂苷抑制七氟醚诱导的海马神经元凋亡机制研究

目的探讨三七茎叶总皂苷(PNSLS)调节七氟醚诱导海马神经元凋亡的作用机制。方法以不同剂量七氟醚(0,4.1%,8%)干预小鼠海马神经元细胞系HT22,使用不同质量浓度的PNSLS(1.5,3.0,6.0,12.0μg/mL)预处理神经元。将HT22细胞分为对照组、暴露于4.1%七氟醚的细胞组(4.1%Sev组)、使用6μg/mL PNSLS对细胞进行预处理1 h后将细胞暴露于4.1%七氟醚组(4.1%Sev+PNSLS组)、在PNSLS处理前1 h加入丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)激活剂anisomycin(An)再暴露于七氟醚和PNSLS的共培养组(4.1%Sev+PNSLS+An组)。通过CCK-8法检测神经元活力,流式细胞术及免疫印迹(Western blot)法检测海马神经元凋亡,比色活性测定试剂盒测定胱天蛋白酶-3(caspase-3)活性,Western blot法测定内质网应激相关蛋白及p38 MAPK/核转录因子-κB p65(p38 MAPK/NF-κB p65)信号通路相关蛋白的表达水平。结果4.1%七氟醚显著抑制海马神经元活力(P<0.05),6μg/mL PNSLS显著升高神经元活力并抑制海马神经元凋亡(P<0.05)。与Sev组比较,Sev+PNSLS组细胞中凋亡蛋白Bax表达水平显著降低(P<0.05),B细胞淋巴瘤2家族蛋白(Bcl-2)表达水平显著升高(P<0.05),caspase-3活性显著降低(P<0.05);Sev+PNSLS组内质网应激诱导的凋亡信号通路相关蛋白78000葡糖调节蛋白(GRP78)、内质网应激相关蛋白(CHOP)表达水平均显著降低(P<0.01),p38和IκBα的磷酸化水平均显著降低(P<0.01),细胞质中NF-κB p65水平显著升高(P<0.01),细胞核中NF-κB p65水平显著降低(P<0.01)。与Sev+PNSLS组比较,Sev+PNSLS+An组p38和IκBα的磷酸化水平均显著升高(P<0.01),细胞质中NF-κB p65水平显著降低(P<0.01),细胞核中NF-κB p65水平显著升高(P<0.01),海马神经元活力显著降低(P<0.01),凋亡率显著升高(P<0.01)。结论PNSLS通过激活p38 MAPK/NF-κB p65信号通路抑制七氟醚诱导的神经元凋亡。

三七茎叶总皂苷酶转化产物和C-K的抗肿瘤作用

目的:研究三七茎叶总皂苷酶转化产物和人参皂苷化合物K(C-K)的抗肿瘤作用。方法:利用β-葡聚糖苷酶转化三七茎叶总皂苷,转化产物经大孔吸附树脂富集和纯化,硅胶柱层析及制备薄层层析分离纯化后得到C-K。观察酶转化产物和C-K对S180肿瘤细胞生长的抑制作用及对艾氏腹水癌小鼠生存期的影响。结果:三七茎叶总皂苷酶转化产物和C-K的抑瘤率分别为41.8%和44.7%;对艾氏腹水癌小鼠延长存活期分别为3.9d和4.6d。结论:三七茎叶总皂苷酶转化产物和C-K具有较强的抗肿瘤作用。

HPLC-MS/MS法检测三七茎叶总皂苷中人参皂苷Rb_1的含量

利用HPLC-MS/MS法,建立测定三七茎叶总皂苷中人参皂苷Rb1含量的分析方法。方法：色谱柱为BDSHYPERSUL C18（150 mm×2.1 mm,5μm）柱;流动相：乙腈-水（梯度洗脱）;柱温：30℃;质谱条件：采用负离子多反应监测方法（MRM）测试;用于定量分析的对照品离子对为：人参皂苷Rb1m/z1107.9→783.7,内标物紫杉醇m/z852.5→525.3。结果：人参皂苷Rb1标准曲线的线性范围为0.159~16.0μg/mL,精密度和准确度等均符合样品分析的要求。结论：该法准确、灵敏、特异性强,适用于三七茎叶总皂苷及其制剂中人参皂苷Rb1浓度的检测。

酶转化三七茎叶总皂苷制备稀有人参皂苷C-K

为了提高三七茎叶总皂苷的利用率和C-K酶转化得率,采用Aspergillus niger sp.G8菌所产酶与Aspergillus niger sp.G4菌所产酶的等体积混合酶(以下简称G8-G4混合酶),研究了酶转化三七茎叶总皂苷进而制备C-K的方法。结果表明,市销的三七茎叶总皂苷中,主要成分是人参二醇类皂苷,其中含量最多的皂苷是Rb3、C-Mx1、Rc和Fc,质量分数分别为26.38%、14.28%、12.73%、10.25%。G8-G4混合酶的最佳反应条件为45℃、p H 5.0、底物质量浓度25 g/L、反应24 h。三七茎叶总皂苷经G8-G4混合酶转化后得到4种产物为C-K、C-Mx、Fc、R7,其中C-K的转化得率为32.7%。

三七茎叶总皂苷对心肌缺血再灌注损伤保护作用研究

目的:研究三七茎叶总皂苷(PNSSL)对缺血再灌注损伤大鼠心肌的保护作用,为PNSSL的开发利用提供基础。方法:将SD大鼠随机分为6组,即假手术组、模型组40,80,160 mg·kg-1组、地奥心血康组,连续给药七天,末次给药后通过结扎冠状动脉左前降支的方法建立大鼠缺血再灌注损伤模型。观察缺血再灌注大鼠II导联心电图ST段的变化情况,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测心肌梗死面积,测定大鼠血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性以及心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量,通过苏木精-伊红(HE)染色法观察缺血再灌心肌的病理形态。结果:与模型组相比,PNSSL各剂量组对于大鼠心电图ST段升高均具有降低作用,能够减少心肌梗死范围,其中PNSSL80,160 mg·kg-1组降低显著(P<0.05);PNSSL160 mg·kg-1剂量能够明显降低血清中心肌酶活性(P<0.05),PNSSL80 mg·kg-1显著升高心肌组织中SOD和GSH-Px的活性(P<0.05)。病理染色中,PNSSL组心肌组织间质水肿明显减轻,纤维排列整齐,心肌组织损伤降低。结论:三七茎叶总皂苷能够改善由缺血再灌注引起的心肌组织损伤,改善心电图变化,提高细胞膜稳定性,清除氧自由基,减少炎性浸润,具有心肌保护作用。

三七皂苷治疗神经系统疾病的临床应用

三七为传统常用中药,临床主用其根,用于各种内、外出血,胸腹刺痛,跌扑肿痛等,现代研究发现它具有广泛的药理作用,三七茎叶功效与根相似。三七根及茎叶含大量皂苷成分,对神经系统疾病有明显的治疗作用。从临床应用的角度出发,笔者对三七根及茎叶有效成分在治疗神经系统疾病方面的研究进行了全面阐述,对其在临床上更科学、合理的使用及进一步研究开发具有一定的意义。

七叶神安滴丸对中枢神经系统的药效学研究

目的 :探讨七叶神安滴丸中枢神经的药理作用。方法 :采用小鼠扭体试验、光电法小鼠自法活动及戊巴比妥钠小鼠睡眠时间测定试验 ,观察七叶神安滴丸的镇痛、镇静、催眠作用。结果 :七叶神安滴丸不同剂量均可抑制小鼠的扭体痛反应、明显减少小鼠的自法活动、延长小鼠的睡眠时间。结论 :七叶神安滴丸具有镇痛、镇静。

20(R)-原人参二醇酸水解条件的工艺研究

目的:优化三七茎叶总皂苷的盐酸水解工艺,提高水解产物20(R)-原人参二醇[20(R)-protopanaxadiol,20(R)-PPD]的产率。方法:采用正交试验设计,考察料液比、盐酸浓度、水解时间、水解温度对三七茎叶总皂苷水解过程的影响。结果:影响水解的主次因素依次是盐酸浓度>料液比>水解温度>水解时间,优选的最佳工艺为料液比1∶1;盐酸浓度17.1mol·L-1,水解时间90min,水解温度50℃。结论:采用优化后的水解条件能够提高PPD的转化率,适合工业化生产。