全乙酰化烯糖合成方法的研究

烯糖是合成O-苷、C-苷、S-苷、N-苷、氨基糖以及2-脱氧糖等多种天然糖类的重要中间体。在传统的合成烯糖的三步反应中,全乙酰化溴代糖还原生成烯糖是最关键一步。文章探讨了4种以Zn粉为还原剂还原全乙酰化溴代糖合成乙酰化烯糖的方法,筛选出Zn-NaH_(2)PO_(4)/H_(2)SO_(4)体系为最佳反应条件,并采用该最佳反应条件,从全乙酰溴代-D-半乳糖等5种溴代糖出发合成了其余4种糖的烯糖。同时,还探讨了一锅法合成三乙酰葡萄烯糖的方法,研究结果表明该方法虽然减少了中间的纯化过程,产率也比较高,但是纯化困难,反应时间也较长,并不是合成乙酰化烯糖的最佳方法。

3-O-烯丙基-6-O-乙酰基-2,4-二-O-苯甲酰基-α-D-葡萄吡喃糖基三氯乙酰亚氨酯的合成

以3-O烯丙基葡萄糖1为原料,设计合成了尚未见报道的3-O烯丙基6-O乙酰基2,4二O苯甲酰基αD葡萄糖三氯乙酰亚氨酯7.其组成和结构已由元素分析、IR、1HNMR和13CNMR表征.

2-乙酰氨基-D-葡萄糖-3,4,6-三乙酸酯的合成

以盐酸氨基葡萄糖、乙酸酐和三乙胺为原料,合成了2 乙酰氨基 D 葡萄糖 1,3,4,6 四乙酸酯。n(C6H13NO5·HCl)∶n〔(CH3CO)2O〕∶n〔(C2H5)3N〕=1∶10∶10,反应温度为60℃,反应时间为3h,收率为85 2%。冰水浴条件下,在2 乙酰氨基 D 葡萄糖 1,3,4,6 四乙酸酯的乙腈溶液中通入氨气达饱和,室温反应28h,得到2 乙酰氨基 D 葡萄糖 3,4,6 三乙酸酯,收率为58 6%,通过元素分析及核磁波谱验证了产品的结构。

相转移催化法合成1-O-(2,4-二硝基苯)-2-乙酰氨基-β-D-葡萄糖苷

This paper reports that in the presence of cetyltrimethyl ammonium bromide as phase transfer catalyst,D-glucosamine hydrochloride reacts with 2,4-dinitrophenol to synthesize 1-O-(2’,4’-dinitrophenyl)-2-acetamido-β-D-glucoside.Chemical structure of the new compound was confirmed by elemental analysis,IR and UV.

鱼腥藻N-乙酰-D-葡萄糖胺2-差向异构酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的高效表达

目的从鱼腥藻7120(Anabaenasp.PCC 7120)中克隆N-乙酰-D-葡萄糖胺2-差向异构酶(N-acyl--Dglucosamine 2-epimerase,AGE)基因,并在大肠杆菌中表达。方法利用PCR技术从鱼腥藻染色体组扩增AGE基因,通过基因工程方法构建表达质粒pLY-11,在大肠杆菌中表达,并利用Ni-NTA柱分离纯化。利用柱前衍生化的方法,通过HPLC检测表达产物转化N-乙酰-D-甘露糖胺(N-acyl-D-mannosamine,ManNAc)的活性,并联合N-乙酰神经氨酸裂合酶(N-acetylneuraminatelyases,NAL),进行双酶转化生成N-乙酰神经氨酸(N-acetylneuraminic acid,Neu5Ac)实验。结果AGE基因在大肠杆菌中表达,可溶性产物蛋白占总可溶性蛋白质量的18%,经纯化后得到1.6 g.L-1产物蛋白。双酶转化实验中,转化终产物Neu5Ac质量浓度为14.8 g.L-1。结论鱼腥藻7120 AGE基因在大肠杆菌中的表达产物具有活性,为双酶转化制备Neu5Ac进行了初步的探索。

糖耐量减低患者尿中白蛋白、转铁蛋白、N—乙酰—β—D葡萄糖苷酶和β2—微球蛋白的分析

目的：通过对尿中蛋白成分的分析，评价糖耐量减低与肾损伤的关系。方法：免疫比浊法测尿微量白蛋白，OLYM-PUS全自动生化分析仪终点法测N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酸，放射免疫分析法测β2-微球蛋白和转铁蛋白。结果：糖耐量减低患者、糖尿病患者的尿中蛋白成分与正常人比较，糖尿病患者多种蛋白成分均有升高。糖耐量减低患者白蛋白、N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶轻微升高，β2-微球蛋白和转铁蛋白升高明显。通过对各种蛋白成分的比较，转铁蛋白和β2-微球蛋白能更灵敏反映肾小球和肾小管损伤。糖耐量减低患者单纯的肾小球性和肾小管性蛋白尿的发生率都比 糖尿病组高，但混合性蛋白尿的发生率却低于糖尿病患者。说明糖耐量减低并出现混合性蛋白尿的病人很容易发展成糖尿病性肾病。结论：糖耐量减低患者尿中已经有蛋白成分增加，对糖耐量减低及肾损伤的关系应多加注意，尤其是多种蛋白成分的综合分析更为重要。

保护的3,6位支化葡萄三糖选择性合成

以2,3,4,6-四-O-苯甲酰-α-D-吡喃葡萄糖三氯乙酰亚胺酸酯为糖基供体,与不保护的烯丙基-α-D-吡喃葡萄糖苷为糖基受体进行一锅糖苷化法反应制得标题化合物。同时,对反应溶剂及配比进行了考察,目标产物及重要中间体的结构经MS、1HNMR、13CNMR及1H-1H COSY表征。

猕猴桃果实后熟软化过程中己糖激酶基因的表达分析

为解决猕猴桃果实采后快速软化问题,本研究以‘红阳’猕猴桃果实为材料,探究10 mmol/L N-乙酰-D-葡萄糖胺(N-acetyl-D-glucosamine,NAG)对猕猴桃后熟软化过程中基本生理变化、己糖激酶(hexokinase,HXK)活性和AcHXKs基因表达的影响。结果表明,与对照组(CK组)相比,外源NAG处理可有效降低猕猴桃的呼吸速率和乙烯释放量,延缓其硬度和总酸含量的下降以及果胶和淀粉的水解,维持较低的可溶性固形物含量。与CK组相比,NAG能够同时抑制HXK活性和AcHXK3表达水平,进而影响糖代谢和呼吸代谢过程。此外,AcHXK7~AcHXK9基因被NAG诱导上调表达,且表达量与硬度显著正相关,其可能作为糖信号分子介导猕猴桃后熟软化进程。综上,AcHXK3、AcHXK7~AcHXK9受NAG诱导差异表达,进而发挥催化和调节功能,延缓猕猴桃后熟软化。本实验结果可为猕猴桃后熟软化机制提供理论依据,也为猕猴桃保鲜技术的研发提供新思路。

保护的β-2-脱氧-2-氨基葡三糖的合成

以茴香醛保护氨基方法得到的β-构型的四乙酰基氨基葡萄糖盐酸盐(1)为原料,采用三氯乙酰基(TCA)、三氯乙酰亚胺酯基(TCI)和乙硫基(SEt)保护体系,经五步反应以产率40.5%得到完全β-构型保护的β-(1→3)-2-脱氧-2-氨基葡二糖7,又经两步合成得到保护的β-(1→3)-2-脱氧-2-氨基葡二糖受体8,共八步合成了保护的β-(1→3)-2-脱氧-2-氨基葡三糖10,总产率为27%.以上化合物均为未知.同时,还得到了用以合成β-(1→4)-保护的氨基葡四糖的受体6.采用该保护体系可以高选择性地、较高产率地合成氨基寡糖.

氨基甲酸乙酯与3,4,6-三苄氧基-D-葡萄烯糖的反应及其分析应用

以氨基甲酸乙酯(EC)为亲核试剂,在Lewis酸三氟甲烷磺酸钐(Sm(OTf)_3)的催化作用下,与3,4,6-三苄氧基-D-葡萄烯糖进行Ferrier(Ⅰ)重排反应制得2,3-不饱和糖苷。通过荧光分光光度法测定反应产物2,3-不饱和糖苷的荧光强度来间接测定EC的含量。实验发现,2,3-不饱和糖苷的荧光强度与EC的浓度在5.0×10^(-8)~1.0×10^(-5)mol/L范围呈良好的线性关系,检出限为1.07×10^(-8)mol/L(S/N=3)。EC的衍生化也使采用HPLC来测定EC浓度成为可能。2,3-不饱和糖苷HPLC的峰面积值与EC的浓度在2.0×10^(-5)~2.0×10^(-4)mol/L(1.7~17μg/m L)范围内呈良好的线性关系,检出限达到1.6×10^(-6)mol/L(0.59μg/m L)(S/N=3)。

含O-,S-,N-和C-2,3-不饱和糖苷的合成

以3,4,6-三-O-乙酰基-D-葡萄烯糖为原料,（NH4）_2S_2O_8为催化剂,利用Ferrier重排反应制得一系列含O-,S-,N-和C-2,3-不饱和糖苷,其结构经1H NMR,IR和MS（ESI）确证。考察了催化剂及其用量,溶剂和温度对产率的影响。结果表明：在最优条件[反应温度80℃,乙腈为溶剂,（NH_4）_2S_2O_8为催化剂（1 eq.）]下,3a产率高达83%。

糖肾宁汤治疗临床期糖尿病肾病的临床观察

目的观察糖肾宁汤(以下简称糖肾宁)对临床糖尿病肾病的疗效,探讨其作用机制和临床适应证。方法将78例患者随机分为糖肾宁、糖肾宁+洛汀新及洛汀新对照组。观察24h尿蛋白定量、尿白蛋白排泄率(UAE)、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、血肌酐(Scr)、内生肌酐清除率(Ccr)、凝血酶原时间(PT)、血纤维蛋白原(FIB)、胆固醇(CH)、甘油三酯(TG)等指标变化。结果糖肾宁组总有效率(70.00%)虽较对照组(68.18%)高,但无统计学差异;糖肾宁+洛汀新组总有效率为86.11%,其疗效不仅优于对照组,而且优于单纯糖肾宁组(P<0.05)。对照组尿蛋白及UAE明显减少,Scr明显下降,但Ccr无显著改善,对血PT、FIB、CH与TG均无明显影响;糖肾宁组不仅尿蛋白、UAE显著下降,并较对照组有统计学差异(P<0.05),且除Scr显著下降外,Ccr亦显著上升;糖肾宁+洛汀新组尿蛋白、UAE下降较糖肾宁组更为明显,而且Ccr升高与对照组比较有统计学差异(P<0.05)。同时,糖肾宁和糖肾宁+洛汀新组治疗后PT明显延长,FIB、CH及TG明显下降,其中PT、CH、TG三者的变化与对照组比较有统计学差异(P<0.05)。结论糖肾宁对本病可能通过抗凝、抗炎、抗增殖、抗肾小球硬化和纠正脂质代谢紊乱等多途径发挥治疗作用,与洛汀新联合应用疗效更好。

小花鬼针草中的苯丙苷类成分及抑制组胺释放活性

目的研究小花鬼针草Bidens parviflora全株的化学成分，并通过组胺抑制实验寻找活性成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20和ODS柱色谱分离化合物，运用1D NMR、2D NMR波谱学方法鉴定了化合物的结构，通过组胺抑制实验测定化合物抗过敏活性。结果分离鉴定了4个苯丙苷类及1个苯甲醇苷成分：4-羟基-3-甲氧基苯丙三醇8-O-β-D-葡萄糖苷（guaiacyl glycerol 8-O—β—D—glucoside Ⅰ）、丁香酚苷（syringin，Ⅱ）、4-烯丙基-2-甲氧基苯酚-O-（6-O-β-D-芹糖基）-β-D-葡萄糖苷[4-allyl-2-methoxyphenol-O-（6-O—β—D—apiofuranosyl）-β-D-glucoside，Ⅲ]、5，7-二羟基色原酮-7-O—β—D-葡萄糖苷（5，7-dihydroxy chromone 7-O-β-D—glucoside，Ⅳ）、苄醇-O-β-D-葡萄糖苷（benzyl alcohol—O—β—D—glucoside，Ⅴ）。化合物Ⅰ～Ⅴ抑制组胺释放，IC50分别为70、61、〉100、52、〉100μg／mL。结论化合物Ⅰ～Ⅴ首次从本植物中分得，Ⅲ为未见文献报道的新化合物，命名为鬼针草酚葡萄糖苷（bidenphenol glucoside）。化合物Ⅰ～Ⅴ具有抑制组胺释放的活性。

糖对长白猪精液NAGaseⅡ的抑制机理

以长白猪精液为材料,采用经典的纯化方法获得N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC 3.3.1.52,NAGase)的2种同工酶,命名为:NAGaseⅠ和NAGaseⅡ。其中NAGaseⅡ的比活力为358.21U/mg,纯化倍数为6.37倍。以海藻糖、D-甘露糖、蔗糖、葡萄糖为效应物,研究其对该酶活性的影响。结果表明:在特定浓度范围内,海藻糖对酶活力基本没有影响;D-甘露糖、蔗糖、葡萄糖对该酶均有一定的抑制作用;D-甘露糖对酶的抑制作用表现为非竞争型,抑制常数KI为11.94mmo/L;蔗糖对酶的抑制作用表现为竞争型,抑制常数KI为0.56mmol/L;葡萄糖对酶的抑制作用表现为混合型,抑制常数KI和KIS分别为0.35mol/L和64.29mmol/L。

磺达肝癸钠二糖中间体的合成工艺研究

目的设计并合成磺达肝癸钠的二糖中间体。方法以β-1,2,3,4,6-五乙酰基葡萄糖为起始原料,经硫化、苄基化、TEMPO氧化、溴化等反应得到葡萄糖醛酸供体E;以3,4,6-三乙酰-D-葡萄糖烯为起始原料,经碘化、叠氮化等反应得到内醚糖受体F;单糖供体E与受体F经偶联反应得到全保护二糖EF。结果合成了目标化合物,并利用1H-NMR和MS确证了结构;HPLC归一化法测得质量分数为99.01%,目标化合物的总收率为11.1%。结论磺达肝癸钠二糖中间体的合成可以为磺达肝癸钠和其他多糖的合成提供重要的中间体原料。

糖肾葆颗粒联合依那普利片对早期糖尿病肾病肾功能的保护作用

目的：观察糖肾葆颗粒联合依那普利片对早期糖尿病肾病（DN）的临床疗效及机制作用。方法：80例DN患者采用分层区组随机分为对照组和联合组各40例。两组严格控制血糖,采用氨氯地平片,5~10 mg/次,1次/d,口服,控制血压。对照组服用依那普利片,10 mg/次,1次/d。联合组在对照组治疗的基础上采用糖肾葆颗粒（配方颗粒）,1剂/d,分2次口服。两组疗程均为12周。检测尿微量白蛋白与肌酐比值（m ALB/Ucr）、尿白蛋白排泄率（UAER）、空腹血糖（FPG）、糖化血红蛋白（Hb Alc）、血清胱抑素（Cys-C）、血β2微球蛋白（β2-MG）、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）和肾损伤分子-1（KIM-1）。治疗前后各检测1次。结果：治疗后联合组m ALB,UAER和m ALB/Ucr均低于对照组（P〈0.01）;治疗后两组FPG和Hb Alc水平均比治疗前下降（P〈0.01）,治疗后联合组Hb Alc水平低于对照组（P〈0.05）;治疗后联合组Cys-C,β2-MG,NAG,KIM-1水平均比治疗前下降,并低于对照组（P〈0.01）;经Ridit分析,联合组临床疗效优于对照组（P〈0.05）。结论：糖肾葆颗粒联合依那普利片对早期糖尿病肾病肾功能有较好的保护作用,其疗效优于单纯用依那普利治疗。

油茶根中1个新的三萜皂苷

目的 研究油茶Camellia oleifera根的化学成分。方法 利用硅胶、ODS、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱色谱、高效制备液相色谱等色谱方法进行分离纯化,根据理化常数测定及谱学数据分析鉴定化合物结构。结果 从油茶根中分离得到3个化合物,分别鉴定为3-O-β-D-半乳糖基-(1→2)-[β-D-木糖基-(1→2)-α-L-阿拉伯糖基-(1→3)]-β-D-葡萄糖醛酸基-3β,15α,16α,21β,22α,28-六羟基-21-O-乙酰氧基-22-O-当归酰氧基齐墩果醇-12-烯(1)、大头茶苷J(2)、山茶皂苷B1(3)。结论 化合物1为新化合物,命名为山茶皂苷Ac,化合物2和3为首次从油茶中分离得到。

泽漆化学成分研究

目的研究泽漆Euphorbia helioscopia的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱及制备液相色谱等方法进行分离纯化,并经理化性质与光谱数据鉴定化合物结构。结果从泽漆70%乙醇提取物中分离得到23个化合物,依次鉴定为β-谷甾醇(1)、euphoscopin B(2)、对羟基苯乙酮(3)、euphoscopin F(4)、euphoscopin C(5)、nepehinol(6)、4-羟基-3,5-二甲氧基苯甲醛(7)、antiquorin(8)、1H-吲哚-3-甲醛(9)、7-羟基-6-甲氧基香豆素(10)、泽漆内酯A(11)、euphoheliosnoid A(12)、松脂素(13)、(+)-去氢催吐萝芙木醇(14)、loliolide(15)、1-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-3-羟基丙-1-酮(16)、3-羟基乙酰吲哚(17)、橙皮酰胺(18)、rayalinol(19)、3-O-β-D-吡喃葡萄糖基泽漆内酯A(20)、柚皮素(21)、4′,5,7-三羟基异黄酮(22)、槲皮素(23)。结论化合物10、17、19、20、22为首次从大戟属植物中分离得到,化合物3、7~9、14~16、18为首次从该植物中分离得到。