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猪链球菌三价灭活苗的制备及对小鼠免疫效果的评价
被引量:
3
1
作者
崔丽荣
王嘉珍
+6 位作者
李亮
何长生
邢刚
刘雪兰
孙裴
魏建忠
李郁
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第2期169-178,共10页
为制备猪链球菌(SS)三价灭活苗并评价其对小鼠的免疫效果,本研究利用筛选出的3株SS菌株(代号/血清型分别为HF2/SS2、BB15-4/SS3、HBgu18-4/SS4)作为疫苗株,甲醛为灭活剂、ISA 201VG矿物油为佐剂制备灭活前分别为1.0×10^(9)cfu/mL、...
为制备猪链球菌(SS)三价灭活苗并评价其对小鼠的免疫效果,本研究利用筛选出的3株SS菌株(代号/血清型分别为HF2/SS2、BB15-4/SS3、HBgu18-4/SS4)作为疫苗株,甲醛为灭活剂、ISA 201VG矿物油为佐剂制备灭活前分别为1.0×10^(9)cfu/mL、2.0×10^(9)cfu/mL、4.0×10^(9)cfu/mL 3种活菌浓度的SS三价灭活苗,分别命名为V-a、V-b和V-c。以昆明鼠为实验动物模型,将V-a、V-b、V-c、商用疫苗均以0.2 mL/只的剂量采取颈背部皮下多点注射的方式依次免疫A~D组小鼠后进行以下免疫效果评价:采集首免后14 d与二免后7 d的小鼠血清,每组3只,通过间接ELISA方法检测各组小鼠血清中IgG抗体效价;以血清杀菌试验检测血清中功能性抗体水平。血清中IgG抗体检测结果显示,在各个免疫阶段,A~D组小鼠的IgG抗体含量始终保持相同水平且均显著高于阴性对照组(P<0.05),二免后7 d,A~D组小鼠的IgG抗体水平显著上升,抗体效价均为1:12800;血清杀菌试验结果显示,二免后7 d,A~D组均能诱导小鼠血清中功能性抗体水平持续升高且无显著差异(P>0.05),具有高度杀菌活性。利用噻唑蓝溴化四唑溶液(MTT)测定小鼠脾淋巴细胞增殖指数(SI);采用双抗夹心ELISA方法检测小鼠血清相关细胞因子含量(IL-4、IL-10、IFN-γ、TNF-β、MCP-1);利用流式细胞术测定CD4^(+)与CD8^(+)外周血T淋巴细胞亚群的百分比。结果显示,二免后7 d,A~D组均能刺激小鼠血清中相关细胞因子水平、SI及CD4^(+)与CD8^(+)外周血T细胞亚群百分比持续上升且均显著高于阴性对照组(P<0.05)。二免7 d后,均以BZ1、BB15-4和HBgu18-4菌株攻毒各免疫组和攻毒对照组小鼠,阴性对照组接种等体积灭菌生理盐水,每组15只,观察7 d,计算小鼠死亡率;在小鼠攻毒3 d、7 d后,采用平板计数法测定攻毒菌株在小鼠体内的定植情况;并于攻毒7 d后取各组小鼠的肺、肝、脾、肾脏制作组织病理切片,观察各组织病理变化。结果显示,腹腔攻毒后7 d,A~D组及攻毒对照组小鼠免疫保护率依次为86.67%、100%、100%、80%和0;A~C免疫组小鼠各脏器的细菌定植量均显著降低且低于免疫组D(P<0.05);与D组相比,A~C组小鼠各器官病理变化均较为轻微。本研究结果表明,V-a、V-b和V-c免疫小鼠后均能产生良好的体液免疫和细胞免疫反应,其中V-b和V-c的免疫效力最优,均可有效抵抗SS2、SS3、SS4强毒株的攻击,可作为SS三价(血清2、3、4型)灭活苗的候选疫苗。本研究首次制备了新型SS三价灭活苗,并初步进行了免疫效果评价,为SS疫苗研发提供技术储备。
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关键词
猪链球菌
三
价
灭
活
苗
(
血清
2、
3、
4
型
)
免疫效果
昆明鼠
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职称材料
题名
猪链球菌三价灭活苗的制备及对小鼠免疫效果的评价
被引量:
3
1
作者
崔丽荣
王嘉珍
李亮
何长生
邢刚
刘雪兰
孙裴
魏建忠
李郁
机构
安徽农业大学动物科技学院
安徽动物疫病预防与控制中心
马鞍山史记动物健康管理有限公司
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第2期169-178,共10页
基金
国家星火计划重点项目(2014GA710002)
安徽省自然科学基金(1508085MC44)
+2 种基金
安徽省重点研究与开发计划面上攻关项目(201904a06020013)
安徽省长三角联合科技攻关项目(1101c0603065)
安徽省生猪产业体系基金(皖农科[2016]84号)。
文摘
为制备猪链球菌(SS)三价灭活苗并评价其对小鼠的免疫效果,本研究利用筛选出的3株SS菌株(代号/血清型分别为HF2/SS2、BB15-4/SS3、HBgu18-4/SS4)作为疫苗株,甲醛为灭活剂、ISA 201VG矿物油为佐剂制备灭活前分别为1.0×10^(9)cfu/mL、2.0×10^(9)cfu/mL、4.0×10^(9)cfu/mL 3种活菌浓度的SS三价灭活苗,分别命名为V-a、V-b和V-c。以昆明鼠为实验动物模型,将V-a、V-b、V-c、商用疫苗均以0.2 mL/只的剂量采取颈背部皮下多点注射的方式依次免疫A~D组小鼠后进行以下免疫效果评价:采集首免后14 d与二免后7 d的小鼠血清,每组3只,通过间接ELISA方法检测各组小鼠血清中IgG抗体效价;以血清杀菌试验检测血清中功能性抗体水平。血清中IgG抗体检测结果显示,在各个免疫阶段,A~D组小鼠的IgG抗体含量始终保持相同水平且均显著高于阴性对照组(P<0.05),二免后7 d,A~D组小鼠的IgG抗体水平显著上升,抗体效价均为1:12800;血清杀菌试验结果显示,二免后7 d,A~D组均能诱导小鼠血清中功能性抗体水平持续升高且无显著差异(P>0.05),具有高度杀菌活性。利用噻唑蓝溴化四唑溶液(MTT)测定小鼠脾淋巴细胞增殖指数(SI);采用双抗夹心ELISA方法检测小鼠血清相关细胞因子含量(IL-4、IL-10、IFN-γ、TNF-β、MCP-1);利用流式细胞术测定CD4^(+)与CD8^(+)外周血T淋巴细胞亚群的百分比。结果显示,二免后7 d,A~D组均能刺激小鼠血清中相关细胞因子水平、SI及CD4^(+)与CD8^(+)外周血T细胞亚群百分比持续上升且均显著高于阴性对照组(P<0.05)。二免7 d后,均以BZ1、BB15-4和HBgu18-4菌株攻毒各免疫组和攻毒对照组小鼠,阴性对照组接种等体积灭菌生理盐水,每组15只,观察7 d,计算小鼠死亡率;在小鼠攻毒3 d、7 d后,采用平板计数法测定攻毒菌株在小鼠体内的定植情况;并于攻毒7 d后取各组小鼠的肺、肝、脾、肾脏制作组织病理切片,观察各组织病理变化。结果显示,腹腔攻毒后7 d,A~D组及攻毒对照组小鼠免疫保护率依次为86.67%、100%、100%、80%和0;A~C免疫组小鼠各脏器的细菌定植量均显著降低且低于免疫组D(P<0.05);与D组相比,A~C组小鼠各器官病理变化均较为轻微。本研究结果表明,V-a、V-b和V-c免疫小鼠后均能产生良好的体液免疫和细胞免疫反应,其中V-b和V-c的免疫效力最优,均可有效抵抗SS2、SS3、SS4强毒株的攻击,可作为SS三价(血清2、3、4型)灭活苗的候选疫苗。本研究首次制备了新型SS三价灭活苗,并初步进行了免疫效果评价,为SS疫苗研发提供技术储备。
关键词
猪链球菌
三
价
灭
活
苗
(
血清
2、
3、
4
型
)
免疫效果
昆明鼠
Keywords
Streptococcus suis
trivalent inactivated vaccine(serotype
2
,
3
,and
4
)
immune efficacy
Kunming mouse
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪链球菌三价灭活苗的制备及对小鼠免疫效果的评价
崔丽荣
王嘉珍
李亮
何长生
邢刚
刘雪兰
孙裴
魏建忠
李郁
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
3
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