植物表达载体在三分三发根中的高效表达

目的建立基于发根培养的三分三Anisodus acutangulus遗传转化体系及在三分三发根中表达外源基因的方法。方法由种子直接萌发得到无菌苗,建立了三分三的无菌苗培养系统。将植物高效表达载体pCAMBI-A1304+导入经过“disarmed”改造的根癌农杆菌C58C1(携带pRiA4质粒),获得了携带外源基因表达载体的重组C58C1工程菌。取生长良好的幼嫩真叶作为外植体,在乙酰丁香酮的诱导下用重组C58C1进行感染,诱导发根。选取在无激素培养基上生长迅速,分支多的发根单克隆进行继代培养。经过3次继代培养,PCR(polymerase chain reaction,聚合酶链式反应)检测用于验证发根型质粒pRiA4和表达型质粒pCAMBIA1304+是否整合到三分三发根基因组内。结果建立了基于发根培养的三分三遗传转化体系,发根诱导频率达到100%,PCR检测表明pRiA4和pCAMBIA1304+质粒共转化率达到32%。结论该方法可以用于在三分三发根中高效表达外源基因,为实现基于发根的三分三产托品烷类生物碱的代谢工程奠定了基础。

三分三种子萌发影响因素分析

以三分三(Anisodus acutangulus C.Y.Wu et C.Chen)成熟种子为试验材料,研究温度、光照、浸种时间、层积及赤霉素处理对其萌发的影响。结果表明,三分三种子萌发的最适宜温度为25℃,种子发芽率达(57.6±1.53)%;25℃恒温浸种24 h能提高三分三种子的发芽率;三分三种子萌发需光,光照条件下种子发芽率显著高于黑暗条件;湿沙层积后用赤霉素处理能显著提高三分三种子的发芽率,种子发芽率高达(97.7±0.58)%。

PMT和H6H双基因共转化提高三分三托品烷类生物碱质量分数

三分三是我国特有的托品烷类生物碱药源植物.采用基于发根的外源基因表达技术,农杆菌介导遗传转化三分三,获得转烟草PMT和莨菪H6 H基因的发根、基因组PCR鉴定转基因发根、液体摇床培养后,HPLC检测发根中莨菪碱和东莨菪碱质量分数.结果发现:在三分三转基因发根中,能够同时检测到1 177bp的莨菪H6 H基因片段和451bp的烟草PMT基因片段,而非转基因发根没有检测到这2个基因,表明外源PMT和H6 H这2个基因整合进了三分三基因组.转基因发根系T11中东莨菪碱质量分数最高,比非转基因发根系高出近6倍,比自然根高出近25倍;转基因发根系T25中莨菪碱质量分数最高,比非转基因发根系高出近8倍,比自然根高出近75倍;转基因T25中东莨菪碱和莨菪碱总量最高,比非转基因发根系高出近7倍,比自然根高出近44倍.

城乡统筹进程中的农村集体产权改革——以温州“三分三改”为蓝本

农村集体资产的产权改革是对我国在长期不协调发展情况下形成的制度化的城乡二元结构的突破,这不仅符合社会主义市场经济的发展要求,也能够通过改革维护和实现农民合法权益、保障农村集体顺利进入市场经济活动实现保值增值,而且还从根本上推动了社会治理方式变革,并且为实现城乡协调发展、推动社会公平正义奠定了制度基础。温州的"三分三改"立足于农村集体资产的产权改革,并且为农村资本有效进入市场、农民平等转化为市民起到了十分重要的促进和保障作用,也为全国其他地区的农村集体产权改革提供了可资借鉴的经验。

发根农杆菌A4菌株诱导三分三毛状根的研究

利用发根农杆菌A4菌株侵染三分三组培苗叶片诱导毛状根,并对其毛状根进行继代增殖培养;采用PCR技术检测毛状根。结果表明:发根农杆菌A4菌株Ri质粒的rolB基因已整合到三分三叶肉细胞的基因组中,进而成功地从叶片诱导出毛状根,诱导率可达77%以上;毛状根除菌后,能在无激素的MS固体培养基上快速生长。三分三遗传转化体系的建立为实现基于毛状根的三分三产托品烷类生物碱的代谢工程奠定基础。

基于泰勒课程理论的高职英语“三分三合”教学模式研究

本文通过对泰勒课程理论中有关课程目标来源的分析,结合职业教育课程目标具有职业定向性的特性和山东交通职业学院教学实际,提出了高职英语"三分三合"教学模式,并对该模式教学原理及具体实施进行了阐述和说明。

川西北高原山莨菪生境调查分析

2022年8月—2023年9月,采用样地法对川西北高原山莨菪群居的植物群落结构特征进行调查,同时采集样地内土壤样品进行理化性质检测。结果显示:山莨菪分布区域内土壤理化性质较好,适宜植物生长;调查数据表明,山莨菪生境地群落的物种共有50种,隶属于18科45属。依据伴生植物生活型划分,灌木4种,占8%;草本46种,占92%;共有两个草地类型,分别是高寒草甸和山地草甸;群落中高山嵩草(Carex parvula)重要值排第一,达20.54,山莨菪(Anisodus tanguticus)重要值为13.48,排在第二;9号样地的Shannon-Wiener指数、Margalef指数和Simpson优势度指数最高,分别为1.55、3.70和0.73,Pielou均匀度指数最高的是16号样地,达0.63;2号样地的Shannon-Wiener指数、Pielou均匀度指数和Simpson优势度指数最低,分别为0.73、0.28和0.36。土壤中的有机碳和P元素含量在很大程度上决定了山莨菪叶片对N元素的吸收。山莨菪的生长适合较疏松的土壤类型,同时对水分和土壤养分有较高的依赖性。土壤pH值对山莨菪群落生物多样性影响较大,山莨菪群落适合偏碱性土壤。调查显示,山莨菪所处的群落环境复杂多样,伴生植物种类十分丰富。研究结果将为山莨菪的区域性保护和开发利用提供理论依据。

基于需求分析的高职英语“三分三合”教学模式与应用研究

本文通过对需求分析理论应用于外语教学领域的相关研究进行学习分析,结合高职英语实用性的特性和山东交通职业学院高职英语教学实际情况,提出了高职英语"三分三合"教学模式,并对该模式教学原理及其具体应用进行了分析与研究,是高职院校英语教学改革中值得参考的一种做法。

三分三的化学成分研究

对三分三（Augsodus acutangulus C..r.Wuet C.. Chen）非生物碱成分进行研究。利用生物碱的酸碱性采用多次萃取的方法除去生物碱成分，运用柱层析等分离纯化方法从三分三的非生物碱成分中，分离并鉴定出5个化合物，分别是东莨菪素（1），东茛菪苷（2），皮契荔枝苷（3），伊谷甾醇（4），胡萝卜苷（5），5个化合物均为首次从该植物中分离得到。

三分三浸膏片治疗脾胃虚寒证胃脘痛36例

目的观察三分三浸膏片对消化性溃疡胃脘痛(脾胃虚寒证)的临床疗效。方法将54例消化性溃疡中医辨证属胃脘痛(脾胃虚寒证)的病人随机分为试验组和对照组,其中试验组三分三浸膏片36例,对照组斯达舒胶囊18例,4d为1个疗程。结果①胃脘痛疗效:试验组总有效率为88.89%,对照组总有效率为83.33%,2组总有效率相比差异无统计学意义(P>0.05);②中医证候疗效:试验组总有效率为94.44%,对照组总有效率为77.78%,2组总有效率相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论三分三浸膏片治疗消化性溃疡中医证属胃脘痛脾胃虚寒证具有较好疗效,值得临床推广。

三分三浸膏片对高尿酸血症小鼠血清尿酸含量的影响

目的观察三分三浸膏片对高尿酸血症小鼠血清尿酸(UA)含量的影响。方法将50只小鼠随机分成对照组、模型组、三分三浸膏片高、中、低剂量组,每组10只。采用腹腔注射250mg/kg尿酸混悬液建立高尿酸血症小鼠的动物模型。注射尿酸前0.5h,三分三浸膏片组小鼠分别罐胃给予不同剂量(0.125mg/kg、0.25mg/kg、0.5mg/kg)的三分三浸膏片;腹腔注射尿酸1h后断头取血,检测每组小鼠血清尿酸含量。结果模型组小鼠血清尿酸含量明显高于对照组(P<0.01);不同剂量的三分三浸膏片组小鼠血清尿酸含量明显低于模型组(P<0.05或P<0.01)。结论腹腔注射尿酸可建立高尿酸血症小鼠的动物模型。三分三浸膏片具有降低高尿酸血症小鼠血清尿酸含量的作用。

三分三合原则在中医学术现代转化中的意义

针对中医学术在现代转化过程中遇到的问题 ,从方法学层面进行了系统反思 ,认为在中医学理论与实践中应贯彻“三分三合”原则 ,三分即本体与方法相分、基础研究与临床实践相分、医与药相分 ;三合即还原与整体统一、结构与信息统一。

植物生长调节剂对药用植物三分三种子萌发的影响

以药用植物三分三(Anisodus acutangulus C.Y.Wu et C.Chen ex C.Chen et C.L.Chen)成熟种子为材料,采用L9(34)正交试验研究赤霉素(GA3)、吲哚乙酸(IAA)、6-苄基腺嘌呤(6-BA)及浸种时间对三分三种子萌发的影响。结果表明,三分三种子萌发的最佳处理是A2B3C1D2,即赤霉素200 mg/L+6-苄基腺嘌呤20 mg/L+吲哚乙酸0 mg/L+浸种时间24 h,该处理的种子发芽率高达97.8%以上,并且种子开始发芽时间、发芽持续时间较短,种子发芽势、发芽指数最高,是比较理想的种子萌发处理方法。对发芽率进行极差分析以及验证试验的结果显示,影响三分三种子发芽率的最佳处理是A3B2C3D1,即赤霉素800 mg/L+6-苄基腺嘌呤10 mg/L+吲哚乙酸10 mg/L+浸种时间12 h;4种因素中以浸种时间对三分三种子发芽率的影响最大,其次是6-苄基腺嘌呤、吲哚乙酸,影响最小的是赤霉素,说明浸种时间过长反而对发芽不利。

反义托品酮还原酶Ⅱ基因对三分三的遗传转化及生物碱含量测定

[目的]通过反义托品酮还原酶Ⅱ基因提高托品酮还原酶I(TRI)的表达水平,从而增加莨菪碱在三分三中的含量,为大规模开发生产托品烷生物碱提供理论基础。[方法]将携带反义托品酮还原酶Ⅱ基因的重组工程菌C58C1-p1304+-antTRⅡ采用叶盘法对三分三进行遗传转化。潮霉素筛选转基因发根,PCR检测转基因发根基因组中是否同时含有rolB、rolC和Hygr抗性基因。PCR阳性转基因发根扩大培养后,提取生物碱,并采用高效液相色谱法进行生物碱含量测定。[结果]共有9个转基因发根的基因组同时检测到rolB、rolC和Hygr抗性基因,且这9个转基因发根中的莨菪碱含量较对照有不同程度的提高。[结论]反义托品酮还原酶II基因对托品烷生物碱代谢途径起到一定程度的正调控作用。

三分三浸膏片与消旋山莨菪碱片的药效对比实验研究

目的对三分三浸膏片与消旋山莨菪碱片进行药效对比实验研究,观察三分三浸膏片与消旋山莨菪碱片的药效差异,为三分三浸膏片的临床应用提供实验依据。方法通过镇痛、抗感染、抗溃疡、镇咳实验,观察三分三浸膏片与消旋山莨菪碱片的镇痛、抗感染、抗溃疡及止咳作用。结果三分三浸膏片两个剂量组及消旋山莨菪碱片两个剂量组能明显抑制小鼠的痛反应,能明显抑制小鼠的炎症反应,能明显抑制无水乙醇引发的胃溃疡,能明显抑制氨水引发的咳嗽,与空白组相比,有显著性差异(P<0.01或P<0.05)。结论三分三浸膏片与消旋山莨菪碱片具有明显的镇痛、抗感染、抗溃疡及镇咳作用;其中,三分三浸膏片的药效优于等剂量的消旋山莨菪碱片。

城乡统筹背景下推进“三分三改”的现状与对策

通过对温州统筹城乡综合改革"三分三改"(政经分开、资地分开、户产分开和股改、地改、户改)工作现状的调研,针对"三分三改"中出现的土地流转、集体资产保值增值、"三资"管理、特殊群体权益保障等主要问题,提出相关对策。

淮滨县人武部组织民兵军事训练突出“三分三定”

为进一提高现代条件下民兵快速动员和参战支前的能力,河南省淮滨县人武部紧紧围绕未来高技术局部战争民兵可能担负的任务,注重从当前本地民兵训练的实际出发,突出抓好民兵军事训练中“三分三定”,民兵训练质量有很大提高。“三分”:分专业,抓重点。就是针对现代战争对民兵参战支前需求的多样性和复杂性的特点,

“三分三集”教学法实施班内物理分层教学

实施"分层教学",即是教师充分考虑到同班级学生的客观存在的差异性,区别对待地设计和进行教学,促使每一个学生都得到最优发展,使学生逐步由学会变成会学,培养学生独立获取知识并应用知识的能力.我们构建的以学生为主体、以教师为主导的新型课堂教学法--"三分三集"教学法,根据学生差异和个性发展需要,分层安排教学内容,分类引导学生学习,现简介如下.

延伸课堂教学开发学生能力——“三分三合”教学法在《市场营销》教学中的运用

《市场营销学》是研究面向市场的一切个人和组织如何根据市场需求来构想和出售自己的产品及价值的学问。为适应社会主义市场经济建设的发展要求，培养应用型营销专门人才成为职业教育责元旁贷的重要任务。这就要求《市场营销学》的教学要立足于提高学生的整体素质，进行课堂教学的改革创新。本人通过教学实践。总结探讨了一种切实可行的《市场营销学》教学方法——“三分三舍”教学法，希望能起到抛砖引玉的作用。

山莨菪水提液对4种植物的化感作用

研究山莨菪药材水提液对4种受试植物的种子萌发、胚根和幼苗生长的化感作用影响.结果显示,随着山莨菪药材水提液浓度由0.01 g/mL升高至0.04 g/mL,各植物种子的萌发率都表现为逐渐降低,其中浓度为0.04 g/mL水提液对川荞2号种子萌发的抑制作用最强,IR值为-53.85%.对4种受试植物胚根生长影响具体表现为,当山莨菪药材水提液浓度为0.01 g/mL时,对西荞2号胚根生长有较强的促进作用,IR值为31.25%,而对川荞2号表现为明显抑制作用,IR值为-25.93%;当山莨菪药材水提液浓度升高至0.04 g/mL时,表现为对4种植物胚根生长都是抑制作用,其中对川荞1号、川荞2号和山莨菪的胚根生长的抑制作用都很强,而对西荞2号的抑制作用相对较弱.对4种受试植物幼苗生长的影响具体表现为,当山莨菪药材水提液浓度为0.01 g/mL时,对川荞1号和西荞2号的幼苗生长是促进作用,其中对川荞1号的促进作用最明显,IR值为96.84%;当山莨菪药材水提液浓度升高至0.02 g/mL时,对川荞1号的促进作用明显减弱,IR值降低至11.81%,而对川荞2号、西荞2号和山莨菪的幼苗生长均表现为抑制作用;当山莨菪药材水提液浓度进一步升高至0.04 g/mL时,4种植物幼苗生长均表现为明显的抑制,其中以川荞2号幼苗生长受到的抑制作用最强.